獸醫(yī)臨床診斷學(xué)實驗教學(xué)大綱

1、獸醫(yī)臨床診斷學(xué)實驗教學(xué)大綱1. 課程屬性：必修2. 實驗屬性：非獨立設(shè)課3. 學(xué)時：總學(xué)時40,理論學(xué)時20，實驗學(xué)時20。4. 實驗應(yīng)開學(xué)期：第 6學(xué)期5. 先修課程：家畜解剖與組織胚胎學(xué)、家畜生理學(xué)、家畜病理學(xué)、動物生物化學(xué)等、課程的性質(zhì)與任務(wù)獸醫(yī)臨床診斷學(xué)實驗課是在學(xué)習(xí)臨床診斷理論課的基礎(chǔ)上進行的一個實踐性環(huán)節(jié)，本課程的教學(xué) 任務(wù)是讓學(xué)生運用已學(xué)過的理論知識進行驗證性的實驗，加深對臨床診斷理論課程中基本理論知識的 理解，實地訓(xùn)練學(xué)生理論知識的運用能力、實驗操作技能、診斷儀器的使用能力、實驗資料或數(shù)據(jù)的 處理和分析能力。、實驗?zāi)康呐c基本要求本實驗課配合理論教學(xué)，通過實驗從實踐中進一步學(xué)習(xí)，

2、掌握和運用學(xué)過的臨床檢查方法及癥狀鑒 別診斷知識，初步具備對畜禽的群發(fā)病和多發(fā)病進行診斷、采取綜合措施的能力。學(xué)生必須完成的基本要求：實驗準(zhǔn)備；能利用各種檢查方法熟練對動物各系統(tǒng)進行檢查；能熟練對血、糞及尿進行常規(guī)檢查； 能利用各種治療方法對動物進行治療；整理及分析實驗資料或數(shù)據(jù);寫出實驗報告。三、實驗考核方式及方法考核方式：考查；實驗成績評分辦法或標(biāo)準(zhǔn)：出勤、課堂紀(jì)律、動手能力和實驗報告等。四、實驗項目一覽表獸醫(yī)臨床診斷學(xué)實驗項目一覽表序號實驗項目名稱實驗類型實驗要求適用專業(yè)學(xué)時1臨床常見的幾種診療器械驗證性必做動物醫(yī)學(xué)22超聲診斷（一）驗證性必做動物醫(yī)學(xué)23超聲診斷（二）驗證性必做動物醫(yī)學(xué)

3、24糞便的檢驗（一）驗證性必做動物醫(yī)學(xué)25糞便的檢驗（二）驗證性必做動物醫(yī)學(xué)26血液檢查（一）驗證性必做動物醫(yī)學(xué)27血液檢查（二）驗證性必做動物醫(yī)學(xué)28血液檢查（三）驗證性必做動物醫(yī)學(xué)29尿液的檢驗（一）驗證性必做動物醫(yī)學(xué)210尿液的檢驗（二）驗證性必做動物醫(yī)學(xué)2五、實驗項目的具體內(nèi)容實習(xí)一臨床常見的幾種診療器械認識幾種診療器械并了解其在臨床上的用途；掌握操作中的注意事項;2、實驗內(nèi)容或原理乳導(dǎo)管、穿刺針、三棱針、三用套管針、聽診器、叩診器、陰道擴張器及電池式照明器、胃導(dǎo)管、連續(xù)注射器、血球分類記數(shù)儀及漏斗、灌藥瓶、耳夾子、金屬注射器（拆卸、消毒與安裝）3、需用的儀器和試劑4、實驗步驟5、教學(xué)

4、方式講授及示范為主6、考核要求以出勤、聽課表現(xiàn)、動手能力、實驗報告等為主要考核內(nèi)容。7、實驗報告要求寫實驗報告。實驗二超聲診斷儀的使用（一）1、本次實驗的目的和要求了解B型超聲診斷儀的簡單結(jié)構(gòu)、檢查原理、動物體的聲學(xué)特性、操作要領(lǐng)及探測掃描方法、注 意事項。2、實驗內(nèi)容或原理簡要結(jié)構(gòu)：儀器主體及各功能按鈕、探頭、附屬裝置。超聲檢查的原理：當(dāng)探頭的聲源晶片振動發(fā)生超聲波時，聲波在介質(zhì)中以直線的方式傳播，如遇 到聲阻抗不同的界面時就出現(xiàn)反射，反射的回聲可被接受返回探頭而在示波屏顯示。動物體的聲學(xué)特性：液性暗區(qū)，如液體組織；全反射（強回聲），如含氣組織、骨骼、結(jié)石；實質(zhì)性暗區(qū)，如實質(zhì)性臟器、腫瘤。3

5、、實驗動物、器材及試劑實驗動物：犬實驗器材：B型超聲診斷儀，毛剪、醫(yī)用耦合劑。4、實驗步驟：連接電源7連接探頭7檢查各功能旋鈕7動物準(zhǔn)備7涂耦合劑7探測掃描5、教學(xué)方式教師講授并示范，然后學(xué)生自己實踐。6、考核要求以出勤、動手能力、實驗報告等為主要考核內(nèi)容。7、實驗報告要求應(yīng)包括：實驗原理、操作步驟、檢查器官的回聲圖象及分析、注意事項等。實驗三超聲診斷儀的使用（二）1、本次實驗的目的和要求了解超聲波多普勒胎音儀的簡單結(jié)構(gòu)、檢查原理、操作要領(lǐng)、用途及注意事項。2、實驗內(nèi)容或原理簡要結(jié)構(gòu)：儀器面板及各功能按鈕、探頭。超聲檢查的原理：多普勒效應(yīng)原理用途：探測胎心音、孕畜母體子宮血音。5、實驗動物、器

6、材及試劑實驗動物：犬實驗器材：超聲多普勒胎音儀、毛剪、醫(yī)用耦合劑。6、實驗步驟：接通電源7用手指輕輕摩擦探頭，揚聲器即發(fā)出沙沙聲，表示儀器正常，同時調(diào)節(jié)音量 大小7動物準(zhǔn)備7涂耦合劑7探測掃描5、教學(xué)方式教師講授并示范，然后學(xué)生自己實踐。6、考核要求以出勤、動手能力、實驗報告等為主要考核內(nèi)容。7、實驗報告要求應(yīng)包括：實驗原理、操作步驟、檢查器官的回聲圖象及分析、注意事項等。實習(xí)四糞便檢驗（一）1、本次實驗的目的和要求:1、本次實驗的目的和要求:掌握糞便中食物殘渣檢查的方法、臨床診斷意義。2、實驗內(nèi)容及原理:正常糞便中的食物殘渣呈無定形細小顆粒，消化不良時可見食物殘渣。 且易被染液著色而容易辨認

7、。3、實驗儀器及試劑稀碘液、70%勺乙醇飽和蘇丹川染液、10%乙酸、載玻片等4、實驗步驟淀粉顆粒的檢查：用竹鑷子在糞便的不同部分，選取綠豆大小的糞塊，置潔凈的載玻片上涂片， 滴1-2滴稀碘液，加蓋玻片后鏡檢。脂肪滴的檢查：用竹鑷子在糞便的不同部分，選取綠豆大小的糞塊，置潔凈的載玻片上涂片，滴 1-2滴70%勺乙醇飽和蘇丹川染液，加蓋玻片后鏡檢。肌肉纖維的檢查：用竹鑷子在糞便的不同部分，選取綠豆大小的糞塊，置潔凈的載玻片上涂片， 滴1-2滴10%乙酸，加蓋玻片后鏡檢。5、教學(xué)方式學(xué)生為主，教師輔助6、考核要求以出勤、動手能力、實驗數(shù)據(jù)及分析報告等為主要考核內(nèi)容。7、實驗報告要求應(yīng)包括：實驗原理、

8、步驟、測定結(jié)果與分析、注意事項等。實習(xí)五糞便檢驗（二）掌握糞便潛血、糞膽素原檢查的方法、臨床診斷意義。2、實驗內(nèi)容及原理（1）糞便潛血檢驗：糞便中的血紅蛋白或紅細胞被酸破壞所產(chǎn)生的血紅蛋白，有過氧化氫酶的作用（但并非為酶，因為被煮沸后仍有觸媒作用） ，它可以分解過氧化氫而產(chǎn)生新生態(tài)氧，使聯(lián)苯胺氧化為 藍色的聯(lián)苯胺藍。（2）糞膽素原的檢查：糞便中的糞膽素原與汞發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，形成紅色化合物。3、實驗儀器及試劑（ 1）糞便潛血檢驗：聯(lián)苯胺冰醋酸液、30%過氧化氫溶液、載玻片、鑷子、酒精燈等（ 2）糞膽素的檢查：飽和氯化高汞溶液、白瓷皿、電爐等4、實驗步驟（1）糞便潛血檢驗： 用竹鑷子在糞便的不同部分

9、，選取綠豆大小的糞塊，置潔凈的載玻片上涂片； 將玻片在酒精燈上緩緩?fù)ㄟ^數(shù)次，以破壞糞中的過氧化氫酶；冷后，滴加聯(lián)苯胺冰醋酸液 1020滴及新鮮30%過氧化氫溶液1020滴，用火柴棒攪動混合，將玻片置于白色背景上觀察； 根據(jù)顏色深淺及出現(xiàn)的時間用“±”或 1 3個“十”符號表示結(jié)果。（ 2）糞膽素原的檢查：取白瓷皿用竹簽挑取一塊黃豆大小的糞便。加飽和氯化高汞溶液4ml 放人白瓷皿中，與糞便調(diào)勻。煮沸3min,立即觀察顏色反應(yīng)，若試驗結(jié)果為紅色，即表明糞便中有糞膽素。5、教學(xué)方式學(xué)生為主，教師輔助6、考核要求以出勤、動手能力、實驗數(shù)據(jù)及分析報告等為主要考核內(nèi)容。7、實驗報告要求應(yīng)包括：實

10、驗原理、步驟、測定結(jié)果與分析、注意事項等。實驗六 血液檢驗（一）1、本次實驗的目的和要求：micro-300 半自動生要求基本掌握血清中總鈣的測定方法、步驟及其臨床意義；掌握 化儀的使用方法。2、實驗內(nèi)容或原理 乙二胺四乙酸二鈉滴定法：血清鈣離子在堿性溶液中與鈣紅指示劑結(jié)合,成為可溶性的復(fù)合物,使溶液呈淡紅色。乙二胺四乙酸二鈉（EDTANa2對鈣離子有更大的親和力，能與復(fù)合物中的鈣離子絡(luò)合, 使鈣紅指示劑重新游離至堿性溶液中，使溶液變成蘭色。從EDTANa2滴定用量可以計算出血清鈣的含量。鄰甲酚酞絡(luò)合酮比色法：在堿性條件下，樣品中鈣離子與鄰甲酚酞絡(luò)合酮生成紅色絡(luò)合物。3、實驗器材及試劑乙二胺四

11、乙酸二鈉滴定法：滴定管及滴定架；鈣標(biāo)準(zhǔn)液（2.5mmol L） ；鈣紅指示劑； 0.25mol L氫氧化鉀溶； EDTANa2 溶液。鄰甲酚酞絡(luò)合酮比色法： micro-300 半自動生化儀， 恒溫水浴鍋， 小塑料試管，可調(diào)微量移液器及嘴頭；鈣試劑盒。4、實驗步驟乙二胺四乙酸二鈉滴定法：（1）取試管2支，寫明測定管和標(biāo)準(zhǔn)管，于測定管中加入血清0.2ml，標(biāo)準(zhǔn)管中加鈣標(biāo)準(zhǔn)液0.2ml 。（2）各管加入0.25mol /L氫氧化鉀溶液2ml，鈣紅指示劑（3）迅速以EDTANa2滴定至溶液呈淡藍色為終點，記錄各管（4）計算血清鈣（mmo/L）=測定管EDTANa2肖耗量（ml）2滴，混勻，溶液呈淡紅

12、色EDTANa狎量。十標(biāo)準(zhǔn)管 EDTANa2消耗量（ml）X 2.5血清鈣（mg/ d1）=血清鈣（mmol/L）十0.25鄰甲酚酞絡(luò)合酮比色法：空白管標(biāo)準(zhǔn)管樣品管工作液1.0ml1.0ml1.0ml蒸餾水0.02ml標(biāo)準(zhǔn)0.02ml樣品0.02ml（1）配制工作液，并保溫至測試溫度。（2）按下表進行操作（3）分別混合均勻，在測定溫度保溫5min,用micro-300半自動生化儀分別測定并讀數(shù)。5、教學(xué)方式學(xué)生為主，教師輔助6、考核要求以出勤、動手能力、實驗數(shù)據(jù)及分析報告等為主要考核內(nèi)容。7、實驗報告要求應(yīng)包括：實驗原理、步驟、測定結(jié)果與分析、注意事項等。實驗七血液檢驗（二）1、本次實驗的目的

13、和要求：初步掌握血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）測定的實驗條件、方法和步驟；了解本次所測定血清酶的臨床意義；掌握 micro-300半自動生化儀的使用方法。2、實驗內(nèi)容或原理ALT : L 丙氨酸+ a酮戊二酸丙酮酸+ NADH + H+ 竺TALT-?AST : L 天門冬氨酸+ a酮戊二酸草酰乙酸+ NADI+ H+ mdht丙酮酸+ L 谷氨酸L 乳酸+ NAD+ + H 2O 一斗 草酰乙酸+ L 谷氨酸L蘋果酸+ NAD + H2 O3、實驗器材和試劑動力法或速率法：micro-300半自動生化儀，小塑料試管，可調(diào)微量移液器及嘴頭，丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶試劑盒

14、，天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶試劑盒;4、實驗步驟：（1）配制工作液，并預(yù)先保溫至測試溫度。（2）按下表操作空白管樣品管工作液1 .00ml1.00 ml蒸餾水0.10 ml樣品0.10 ml混合均勻，分別測定并讀數(shù)。5、教學(xué)方式學(xué)生為主，教師輔助6、考核要求以出勤、動手能力、實驗數(shù)據(jù)及分析報告等為主要考核內(nèi)容。7、實驗報告要求應(yīng)包括：實驗原理、步驟、測定結(jié)果與分析、注意事項等。實習(xí)八血液常規(guī)檢驗（三）1、本次實驗的目的要求掌握血涂片的制作方法、染色技術(shù)、白細胞分類計數(shù)法。要求能制出合格的血涂片并能夠認識各 類白細胞。2、實驗內(nèi)容或原理白細胞分類記數(shù)法是將血液制成分布均勻的薄膜涂片，用復(fù)合染料染色，根

15、據(jù)各類白細胞著色特征予以分類記數(shù)，得出相對比值（百分率），以觀察數(shù)量、形態(tài)和質(zhì)量的變化，對疾病有輔助診斷意義。3、實驗動物、儀器及試劑實驗動物：馬、牛、豬、羊，犬（任選用一種）實驗器材： 采血針、酒精棉、載玻片、染色盆及支架、染色缸、洗瓶、顯微鏡、鏡油、白細胞分類計數(shù)器、吸水紙等.實驗試劑：抗凝劑、瑞氏染液、姬姆薩氏染報、瑞一嫄氏圮合諫液、二甲苯4、實驗步驟采血，涂片，染色，分類計數(shù)。5、教學(xué)方式學(xué)生為主，教師輔助6、考核要求以出勤、動手能力、實驗報告等為主要考核內(nèi)容。7、實驗報告要求劃出各種白細胞的形態(tài)特征，記數(shù)各種白細胞的百分比，并結(jié)合該動物的正常值對所得實驗數(shù)據(jù) 進行分析討論。實驗九尿液

16、檢驗（一）1、本次實驗的目的和要求掌握尿液中葡萄糖檢驗的方法及其臨床診斷意義。2、實驗內(nèi)容或原理尿中葡萄糖的檢驗：葡萄糖含有醛基，在熱堿性溶液中，能將硫酸銅還原成黃色的氧化銅或黃紅 色的氧化亞銅。3、實驗儀器及試劑班（Benedict ）氏試劑（先將173.0g枸櫞酸鈉及100.0g無水碳酸鈉溶解于 700ml蒸餾水中，可 加熱促其溶解。另將17.3g硫酸銅溶解于100ml蒸餾水中，然后將硫酸銅液慢慢傾入已冷卻的上液內(nèi)， 并加蒸餾水至1000ml，過濾保存于棕色瓶內(nèi)備用）。4、實驗步驟取班氏試劑5ml置于試管中，加尿液 0.5ml （約10滴）充分混合，加熱煮沸12min,靜置5min后觀察結(jié)果。判斷：管底出現(xiàn)黃色或黃紅色沉淀者為陽性反應(yīng)。黃色或黃紅色的沉淀愈多，表示尿中 葡萄糖含量愈高。5、教學(xué)方式學(xué)生為主，教師輔助6、考核要求以出勤、動手能力、實驗數(shù)據(jù)及分析報告等為主要考核內(nèi)容。7、實驗報告要求應(yīng)包括：實驗原理、步驟、實驗結(jié)果與分析、注意事項等。實驗十尿液檢驗（二）1、本次實驗的目的和要求掌握尿液中酮體檢驗的方法及其臨床診斷意義。2、實驗內(nèi)容或原理尿中酮體的檢驗：酮體在堿性溶液中與亞硝基鐵氰化鈉作用可產(chǎn)生紫紅色的亞鐵五氰化鐵，這種 產(chǎn)物在醋酸溶液內(nèi)不但不褪色，反而顏色會加深。3、實驗儀器及試