四君子湯對脾虛鼠脾細胞DNA合成的影響

1、    四君子湯對脾虛鼠脾細胞DNA合成的影響        關鍵詞:四君子湯脾虛鼠脾細胞DNA四君子湯出自宋太平惠民和劑局方，由人參、白術、茯苓、甘草等組成，現(xiàn)代藥理研究證實它具有多方面的作用。本文旨在研究四君子湯對脾虛鼠脾細胞DNA合成的影響。1材料和方法1.1動物模型建立，將36只BALB/C小鼠隨機分為3組，每組12只，正常組(Controls)皮下注射生理鹽水0.2ml/只/日，同時灌服蒸餾水0?25ml/只/日；脾虛組(MMSA)皮下注射利血平0.3mg/kg/日

2、，并灌服蒸餾水0.25ml/只/日；四君子湯治療組(MTS)：皮下注射利血平0.3mg/kg/日，并灌服四君子湯煎液0.25mg/只/日，含生藥1g。于第6日始，脾虛組小鼠出現(xiàn)稀便、食量減少、少動、毛色無光等癥狀。于第12日，脾虛小鼠稀便、少動、體重減輕等脾虛諸癥加重，而治療組和正常組均無此表現(xiàn)。1.2H3TdR摻入小鼠脾細胞DNA試驗分別于給藥第7日和第13日處死小鼠，無菌取脾，按常規(guī)取脾細胞，計數(shù)后按2×106/ml培養(yǎng)基、H3TdR的培養(yǎng)液中37培養(yǎng)6h，取出后置4冰箱終止反應。采取多頭細胞器收集細胞，于液閃儀測放射性計數(shù)cpm值。1.3四君子湯對小鼠脾細胞DNA合成作用的體外

3、實驗按上法常規(guī)制備脾虛鼠淋巴細胞懸液，計數(shù)活細胞數(shù)>95，調(diào)細胞濃度為2×106/ml，取100l懸于完全培養(yǎng)液中淋巴細胞懸液加入96孔培養(yǎng)板各孔中，并分別加入四君子湯煎液(經(jīng)煎煮后離心3000r/min×20min，過濾除菌)，終濃度分別為25mg/ml,50mg/ml,100mg/ml,200mg/ml，并設不加藥液的陰性對照孔，于48h后，對各濃度培養(yǎng)孔淋巴細胞進行活力檢測，計數(shù)活細胞大于95，表明藥物無細胞毒作用，于各孔中加入濃度為100ci/mlH3TdR50ml，再培養(yǎng)6h后收集細胞，于液閃儀測放射性計數(shù)CPM值。2結(jié)果Tab1 Effect of SiJ

4、unZi decotum on the spleen DNA in MMSA(X± SD) GroupnCPM7d13dNormals12920±1681068±131MMSA12673±212354±126MISD12889±1571324±208P<0.05p<0.01 compared with the normals P<0.01 compred with the MTSDTab2 Effect of sijunzi decoctum on the spleen DNA in MMSA in vit

5、ro(X±SD) SiJunZi decoctum(mg/ml)nExperimented group(cpm)081708±4762582346±5215083062±48310084537±67920084628±712 P<0.01 Compared with the blank control group3討論3.1本實驗結(jié)果表明，四君子湯對小鼠體內(nèi)脾細胞DNA合成具有促進作用。第7天時，脾虛組脾細胞DNA合成少于正常組和四君子湯治療組P<0.05，四君子湯治療組雖cpm數(shù)值小于正常組，但P>0.05，無顯著

6、差別。第13天時，脾虛組脾細胞DNA合成明顯低于正常組和四君子湯治療組，P<0.01，而四君子湯通過其益氣健脾作用，不僅可改善脾細胞DNA合成的減少，還可極大地提高其脾細胞合成DNA的能力，表現(xiàn)為極其活躍的功能態(tài)。3.2四君子湯對脾虛模型脾細胞DNA合成的體外作用表明，表中各濃度組(25mg/ml、50mg/ml、100mg/ml、200mg/ml)對脾細胞DNA合成有明顯的增強作用，隨著濃度的增加，其作用越大，當濃度為100mg/ml時，作用強度最大，100mg/ml和200mg/ml兩濃度的作用強度間無明顯差異。表明在體外四君子湯可促進脾細胞DNA的合成。3.3中醫(yī)重視整體觀念，人體是有機的整體，結(jié)構上不可分割功能上互相協(xié)調(diào)，病理上互相影響。四君子湯以人參為主藥，健脾益氣，白術、茯苓為輔藥，有健脾利濕之功，甘草為使，健脾兼調(diào)和諸藥。脾虛時存在脾細胞合成DNA減少，促進脾細胞合成DNA是四君子湯健脾益氣的機制之一。無論在體內(nèi)或體外皆可促進脾細胞DNA的合成，從而發(fā)揮其健脾益氣作用，改善小鼠的脾虛狀態(tài)為正常狀態(tài)。國家自然科學基金資助項目No:39270864章梅（第四軍醫(yī)大學西京醫(yī)院陜西西安710032）夏天（第四軍醫(yī)大學西京醫(yī)院陜西西安710032）吳少華（第四軍醫(yī)大學西京醫(yī)院陜西西安710032）張仲海