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1、免疫學(xué)檢驗(yàn)教學(xué)大綱課程編碼:10272042課程名稱:免疫學(xué)檢驗(yàn)英文名稱:Immunological detection technique開課學(xué)期:7 學(xué)時(shí)學(xué)分:40/2.5課程類型:專業(yè)課開課專業(yè):預(yù)防醫(yī)學(xué)專業(yè)選用教材:免疫學(xué)檢驗(yàn) 人民衛(wèi)生出版社 2006年8月第一版主要參考書:1. 免疫學(xué)檢驗(yàn) 呂世靜主編 人民衛(wèi)生出版社 2003年2月第2版 2. 臨床免疫學(xué)和免疫檢驗(yàn) 王蘭蘭主編 2004年1月第3版 3. 簡明免疫學(xué)技術(shù) 朱正美主編 科學(xué)出版社 2002年7月第1版 4. 免疫學(xué)常用實(shí)驗(yàn)技術(shù)柳忠輝主編 科學(xué)出版社執(zhí)筆人:黎明蘭一、 課程性質(zhì)、目的與任務(wù)免疫學(xué)檢驗(yàn)是研究免疫學(xué)技術(shù)在醫(yī)學(xué)
2、領(lǐng)域中應(yīng)用的一門學(xué)科,是預(yù)防醫(yī)學(xué)專業(yè)(衛(wèi)生檢驗(yàn)方向)一門重要的專業(yè)課。免疫學(xué)檢測技術(shù)因其特異性強(qiáng)、敏感性高、穩(wěn)定、簡便和快速的優(yōu)勢,現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于生物學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、預(yù)防醫(yī)學(xué)及其他有關(guān)領(lǐng)域。通過對該課程的學(xué)習(xí),掌握各類免疫學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)的原理、類型、技術(shù)要點(diǎn)、實(shí)際應(yīng)用及方法學(xué)評價(jià),更好的為防病治病服務(wù)。二、 教學(xué)基本要求1. 掌握免疫學(xué)檢驗(yàn)常用技術(shù)的原理、技術(shù)要點(diǎn)、應(yīng)用及方法學(xué)評價(jià)。2. 掌握免疫學(xué)檢驗(yàn)常用技術(shù)的測定方法。3. 掌握免疫學(xué)技術(shù)在免疫預(yù)防計(jì)劃免疫、動植物檢疫、健康相關(guān)產(chǎn)品免疫功能評價(jià)中的應(yīng)用。4. 了解免疫學(xué)技術(shù)的最新進(jìn)展及與其他學(xué)科的關(guān)系。三、 各章節(jié)內(nèi)容及學(xué)時(shí)分配第一章 抗原抗體的
3、純化(2學(xué)時(shí))教學(xué)目的與要求掌握抗原和抗體純化方法的基本原理、方法評價(jià)和應(yīng)用。了解抗原抗體各種純化方法的程序及分離物的選擇。教學(xué)內(nèi)容第一節(jié) 鹽析法一、 原理二、 常用中性鹽三、 操作步驟四、 影響因素五、 方法評價(jià)與應(yīng)用第二節(jié) 凝膠層析法一、 原理二、 常用凝膠的種類和性質(zhì)三、 操作步驟四、 方法評價(jià)與應(yīng)用第三節(jié) 離子交換層析一、 原理二、 常用離子交換劑的種類和性質(zhì)三、 離子交換層析的程序四、 方法評價(jià)與應(yīng)用第四節(jié) 親和層析法一、 原理二、 親和層析載體與配基的選擇三、 層析條件的選擇四、 方法評價(jià)與應(yīng)用考核要求:了解 蛋白質(zhì)提純方法的程序及條件掌握 蛋白質(zhì)提純方法的原理 第二章 免疫原與特
4、異性抗體的制備(2學(xué)時(shí))教學(xué)目的及要求: 掌握人工免疫原的制備方法,免疫血清的制備方法,雜交瘤技術(shù)的原理及技術(shù)要點(diǎn)。了解可溶性抗原的制備方法及單克隆抗體制備流程及應(yīng)用。教學(xué)內(nèi)容:第一節(jié) 免疫原的制備一、 顆粒性抗原的制備二、 可溶性抗原的制備三、 人工免疫原的制備及佐劑第二節(jié) 免疫血清的制備一、 免疫動物的選擇二、 確定免疫方案三、 動物采血法四、 免疫血清的分離與保存第三節(jié) 單克隆抗體的制備一、 雜交瘤技術(shù)的基本原理二、 單克隆抗體的制備要求三、 單克隆抗體的應(yīng)用考核要求:了解:1.顆粒性抗原、可溶性抗原的制備方法 2.單克隆抗體的制備流程掌握:1.人工免疫原的制備 2.免疫血清的制備方法
5、第三章 沉淀反應(yīng)與凝集反應(yīng)(2學(xué)時(shí))教學(xué)目的及要求:掌握常用沉淀反應(yīng)和凝集反應(yīng)的原理及應(yīng)用。了解其他凝集技術(shù)類型、原理和應(yīng)用。教學(xué)內(nèi)容:第一節(jié) 沉淀反應(yīng)一、 免疫濃度測定二、 雙向瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)三、 免疫電泳技術(shù)第二節(jié) 凝集反應(yīng)一、 直接凝集反應(yīng)二、 間接凝集反應(yīng)三、 其他凝集技術(shù)考核要求:了解:免疫濃度測定,其他凝集技術(shù)的原理及應(yīng)用。掌握:雙向瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)、雙 免疫電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳、間接血凝試驗(yàn)的原理及應(yīng)用。 第四章 溶血反應(yīng)和補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)教學(xué)目的與要求:掌握溶血反應(yīng)體系及檢測方法。了解補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)的原理、類型、方法和評價(jià)。教學(xué)內(nèi)容:第一節(jié) 溶血反應(yīng)一、 溶血反應(yīng)的檢測試驗(yàn)二、 血清總
6、補(bǔ)體溶血(CH50)測定。第二節(jié) 補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)一、 類型與原理二、 試驗(yàn)方法及影響因素三、 方法的評價(jià)和應(yīng)用考核要求:了解: 補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)的類型、原理、方法評價(jià)及應(yīng)用。掌握:血清總補(bǔ)體溶血(CH50)測定。第五章 酶免疫技術(shù)(2學(xué)時(shí))教學(xué)目的及要求:掌握固相酶免疫測定的方法類型及原理,ELISA技術(shù)要點(diǎn),了解其他酶免疫技術(shù)及應(yīng)用。教學(xué)內(nèi)容:第一節(jié) 酶免疫技術(shù)的分類第二節(jié) 固相酶免疫測定一、 基本原理二、 方法類型和操作步驟第三節(jié) ELISA技術(shù)要點(diǎn)一、 試劑準(zhǔn)備二、 酶標(biāo)記方法三、 酶標(biāo)記物的純化與鑒定四、 最適工作濃度的選擇第四節(jié) 其他酶免疫技術(shù)一、 斑點(diǎn)-酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)二、 斑點(diǎn)酶免疫滲
7、濾試驗(yàn)三、 免疫印記法考核要求:了解:其他酶免疫技術(shù)的原理及應(yīng)用掌握:1.雙抗體夾心法和間接法的原理 2.ELISA法的技術(shù)要點(diǎn)第六章 熒光免疫技術(shù)(1學(xué)時(shí))教學(xué)目的及要求:掌握熒光抗體技術(shù)的原理、技術(shù)方法及應(yīng)用。了解熒光抗體的制備方法及熒光免疫顯微技術(shù)。教學(xué)內(nèi)容:第一節(jié) 熒光現(xiàn)象第二節(jié) 熒光抗體技術(shù)一、 基本原理二、 熒光抗體技術(shù)方法三、 熒光抗體的制備四、 熒光免疫顯微技術(shù)五、 應(yīng)用考核要求:了解:熒光抗體的制備及熒光免疫顯微技術(shù)掌握:熒光抗體技術(shù)的基本原理及技術(shù)方法。第七章 放射免疫技術(shù)(1學(xué)時(shí))教學(xué)目的與要求: 掌握放射免疫測定的原理、方法、評價(jià)及應(yīng)用。了解免疫放射測定試驗(yàn)。教學(xué)內(nèi)容:
8、第一節(jié) 放射免疫測定一、 原理二、 測定方法三、 方法評價(jià)四、 應(yīng)用第二節(jié) 免疫放射測定一、 原理二、 技術(shù)類型三、 技術(shù)要點(diǎn)考核要點(diǎn):了解:免疫放射測定的原理、技術(shù)類型及技術(shù)要點(diǎn)。掌握:放射免疫測定的原理、測定方法及應(yīng)用。第八章 金免疫技術(shù)(2學(xué)時(shí))教學(xué)目的及要求:掌握金免疫測定技術(shù)的原理、技術(shù)類型及應(yīng)用。了解膠體金和免疫金的特性與制備。了解金免疫組化技術(shù)的方法。教學(xué)內(nèi)容:第一節(jié) 膠體金與免疫金的制備一、 膠體金的特性及其制備二、 免疫金的特性及其制備第二節(jié) 金免疫測定技術(shù)一、 斑點(diǎn)金免疫滲濾試驗(yàn)二、 斑點(diǎn)金免疫層析試驗(yàn)第三節(jié) 金免疫組織化學(xué)技術(shù)一、 免疫金光鏡染色技術(shù)二、 免疫金電鏡染色技
9、術(shù)考核要求:了解:1.膠體金、免疫金的特性及制備方法。 2.免疫金(銀)光鏡染色技術(shù)的原理及方法。掌握:斑點(diǎn)金免疫滲濾試驗(yàn)與斑點(diǎn)金免疫層析試驗(yàn)的原理、技術(shù)類型及方法。 第九章 免疫細(xì)胞檢測技術(shù)(3學(xué)時(shí))教學(xué)目的與要求:掌握免疫細(xì)胞分離純化技術(shù)及評價(jià)免疫功能的相關(guān)試驗(yàn)原理、方法、結(jié)果判定。教學(xué)內(nèi)容:第一節(jié) 免疫細(xì)胞的分離與純化一、 血液標(biāo)本的采集二、 外周血液中白細(xì)胞的分離三、 外周血液中單個核細(xì)胞的分離四、 淋巴細(xì)胞及其亞群的分離純化五、 吞噬細(xì)胞的分離六、 淋巴細(xì)胞的保存及活力測定。第二節(jié) T淋巴細(xì)胞的檢測一、 T淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志的檢測二、 T淋巴細(xì)胞受體的檢測三、 T淋巴細(xì)胞功能的檢測第三
10、節(jié) B淋巴細(xì)胞的檢測一、 B淋巴細(xì)胞表面抗原的檢測二、 B淋巴細(xì)胞表面受體的檢測三、 B淋巴細(xì)胞功能的體外檢測第四節(jié) 自然殺傷細(xì)胞的檢測一、 概述二、 NK細(xì)胞活性檢測三、 測定NK細(xì)胞活性的衛(wèi)生學(xué)意義第五節(jié) 吞噬細(xì)胞功能的檢測一、 巨噬細(xì)胞吞噬功能的檢測二、 巨噬細(xì)胞吞噬功能檢測的衛(wèi)生學(xué)意義考核要求:了解:1.了解T淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志的檢測方法及衛(wèi)生學(xué)意義的評價(jià)。2.了解T淋巴細(xì)胞E受體和IL-2受體的檢測方法。3.了解B淋巴細(xì)胞Sm2g受體及Fc受體的檢測方法。掌握:1.外周血液中單個核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞及亞群分離純化方法,淋巴細(xì)胞保存及活力測定方法。 2.T淋巴細(xì)胞功能檢測方法。 3.B淋巴細(xì)
11、胞功能檢測的體外實(shí)驗(yàn) 。4. NK細(xì)胞活性檢測方法及衛(wèi)生學(xué)意義。5. 噬細(xì)胞功能的檢測方法及衛(wèi)生學(xué)意義。第十章 免疫球蛋白測定(1學(xué)時(shí))教學(xué)目的及要求:掌握免疫球蛋白定量測定的方法參考值及應(yīng)用評價(jià)。了解免疫球蛋白定量的醫(yī)學(xué)意義。教學(xué)內(nèi)容:第一節(jié) 免疫球蛋白定量的檢測方法一、 常用檢測方法。二、 參考值第二節(jié) 免疫球蛋白定量檢測方法學(xué)評價(jià)及應(yīng)用第三節(jié) 免疫球蛋白定量臨床意義一、 血清Ig定量臨床意義。二、 尿微量Ig定量臨床意義。三、 腦脊液Ig定量臨床意義??己艘螅毫私猓貉錓g、尿微量Ig、腦脊液Ig定量檢測的臨床意義。掌握:免疫球蛋白定量檢測方法及參考值,方法評價(jià)及應(yīng)用。 第十一章 動植
12、物病原體的免疫學(xué)檢驗(yàn)(2學(xué)時(shí))教學(xué)目的與要求:掌握常見動植物疫病的免疫學(xué)檢測方法。了解進(jìn)出口商品檢疫的新進(jìn)展。教學(xué)內(nèi)容:第一節(jié) 動物病原體的免疫學(xué)檢驗(yàn)一、 炭疽的免疫學(xué)檢驗(yàn)二、 鼻疽的免疫學(xué)檢驗(yàn)三、 口蹄疫的免疫學(xué)檢驗(yàn)四、 布魯氏病的免疫學(xué)檢驗(yàn)五、 狂犬病的免疫學(xué)檢驗(yàn)六、 瘋牛病的免疫學(xué)檢驗(yàn)七、 禽流感的免疫學(xué)檢驗(yàn)第三節(jié) 植物病原體的免疫學(xué)檢驗(yàn)一、 植物細(xì)菌的免疫學(xué)檢驗(yàn)二、 植物真菌的免疫學(xué)檢驗(yàn)三、 植物病毒的免疫學(xué)檢驗(yàn)考核要求:了解:植物病原體的免疫學(xué)檢驗(yàn)方法。掌握:動物病原體的免疫學(xué)檢驗(yàn)方法。 第十二章 健康相關(guān)產(chǎn)品的免疫學(xué)檢驗(yàn)(2學(xué)時(shí))教學(xué)目的與要求:掌握保健食品免疫學(xué)檢驗(yàn)方法和評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)
13、及化妝品的免疫學(xué)檢驗(yàn)方法。了解健康相關(guān)產(chǎn)品中有毒有害物質(zhì)免疫學(xué)檢驗(yàn)方法及新進(jìn)展。教學(xué)內(nèi)容:第一節(jié) 有毒有害物質(zhì)的免疫學(xué)檢驗(yàn)一、 有毒有害物質(zhì)免疫學(xué)檢驗(yàn)的技術(shù)要點(diǎn)。二、 有毒有害物質(zhì)免疫學(xué)檢測方法。三、 有毒有害物質(zhì)免疫學(xué)檢測方法的應(yīng)用。第二節(jié) 化妝品的免疫學(xué)檢驗(yàn)第三節(jié) 保健食品免疫學(xué)檢驗(yàn)和評價(jià)一、 免疫學(xué)檢驗(yàn)項(xiàng)目二、 免疫學(xué)檢驗(yàn)方法三、 增強(qiáng)免疫功能結(jié)果判定與評價(jià)。考核要求:了解:有毒有害物質(zhì)的免疫學(xué)檢驗(yàn)的技術(shù)要點(diǎn)、方法和應(yīng)用。掌握:保健食品免疫學(xué)檢驗(yàn)項(xiàng)目、檢驗(yàn)方法、結(jié)果判定及標(biāo)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)。 免疫學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)課教學(xué)大綱一、 實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c任務(wù)免疫學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)課的教學(xué)目的是使學(xué)生掌握諸項(xiàng)試驗(yàn)的原理、基本要求
14、、操作步驟,正確分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果、了解各種影響因素以及在衛(wèi)生檢驗(yàn)工作中的應(yīng)用。通過實(shí)驗(yàn)課教學(xué),培養(yǎng)學(xué)生認(rèn)真、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ鲬B(tài)度和實(shí)際動手操作能力,以適應(yīng)檢驗(yàn)工作的需要。二、 實(shí)驗(yàn)教學(xué)基本要求1. 掌握免疫學(xué)檢驗(yàn)諸項(xiàng)試驗(yàn)的原理2. 掌握諸試驗(yàn)各種液體的配制方法3. 掌握必做實(shí)驗(yàn)的操作步驟、結(jié)果判定及影響因素。4. 了解諸項(xiàng)試驗(yàn)所需的儀器設(shè)備。三、 實(shí)驗(yàn)教材或指導(dǎo)書 免疫學(xué)檢驗(yàn)實(shí)習(xí)指導(dǎo) 人民衛(wèi)生出版社 2006年8月第一版五、 實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目一覽表序號實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目內(nèi)容提要實(shí)驗(yàn)類型學(xué)時(shí)分配主要儀器設(shè) 備實(shí)驗(yàn)地點(diǎn)備注1免疫球蛋白的分離純化鹽析法血清中的免疫球蛋白粗提綜合性10一組(每學(xué)期選取3個實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目)2免疫球蛋白的分離純化凝膠過濾層析法(分離不同分子量大小的抗原)層析柱3雙向瓊脂擴(kuò)散鑒定抗原和抗體純度的定性分析4聚丙烯酰胺凝膠電泳分離、鑒定血清中各類蛋白質(zhì)電泳儀、圓盤電泳槽5酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)雙抗體夾心法檢驗(yàn)未知抗原酶標(biāo)儀、微量加樣器、酶標(biāo)測定板6免疫金(銀)染色實(shí)驗(yàn)免疫金標(biāo)記抗體及檢測抗原超速離心機(jī)、顯微鏡、溫箱、分光光度
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