蜜蜂用殺螨劑藥效評價試驗(yàn)指導(dǎo)原則

1、蜜蜂用殺螨劑藥效評價試驗(yàn)指導(dǎo)原則一、概述（一）定義與目的蜜蜂用殺螨劑是指用于殺滅蜜蜂寄生螨的專用藥物。蜜蜂用殺螨劑藥效評價試驗(yàn)是評價蜜蜂用殺螨劑的劑量確定試驗(yàn)，也稱期臨床試驗(yàn)，目的是了解不同劑量的受試藥物對蜂群寄生螨的殺滅效果，確定受試藥物的治療作用及劑量。（二）適用范圍本指導(dǎo)原則適用于申報殺滅蜜蜂寄生螨的所有殺螨劑，包括我國未批準(zhǔn)在蜜蜂用的化合物的殺螨劑及制劑，均應(yīng)進(jìn)行藥效評價試驗(yàn)。按每種適應(yīng)癥進(jìn)行試驗(yàn)，采用人工誘發(fā)感染（接種），條件不具備時也可選擇自然感染病例。二、試驗(yàn)設(shè)計(jì)（一）試驗(yàn)蜂群1.蜂種：應(yīng)與藥物申報應(yīng)用的蜂種相一致。2.來源：應(yīng)為來源清楚、飼養(yǎng)規(guī)范的蜂群。3.群勢要求：各蜂群的群

2、勢應(yīng)基本一致，平均為6足框以上。在試驗(yàn)前定群，分別記錄卵、幼蟲、蜂蓋子、成年蜂的數(shù)量。4.試驗(yàn)組蜂群數(shù)：每個試驗(yàn)組蜂群數(shù)不低于（含）5群。每個適應(yīng)癥的蜂群數(shù)不得低于30群。5.自然感染病例的選擇：試驗(yàn)前制定試驗(yàn)蜂群的選擇標(biāo)準(zhǔn)，注明其品種。受試蜂群應(yīng)保證蜜粉飼料充足，無孢子蟲病、細(xì)菌性幼蟲病、白堊病等其它主要病蟲害。選用的自然感染病例應(yīng)癥狀明顯、典型，并從蜂群中檢查到寄生螨。受試蜂群的螨寄生率要求應(yīng)不低于10%。狄斯瓦螨（大蜂螨）可用于計(jì)算蜂體或封蓋房螨寄生率，亮熱厲螨（小蜂螨）可用于計(jì)算封蓋房螨寄生率。蜂螨檢查和計(jì)算方法如下：（1）蜂體寄生螨：從蜂群中隨機(jī)抓取蜜蜂100200只，統(tǒng)計(jì)蜜蜂體上有

3、寄生螨的蜜蜂數(shù)。（2）封蓋房寄生螨：隨機(jī)用鑷子挑開100200個已封蓋的蜜蜂幼蟲房，夾出封蓋房中的蜜蜂幼蟲或蛹，檢查蟲體及封蓋房內(nèi)是否有寄生螨，統(tǒng)計(jì)有寄生螨的封蓋房數(shù)目。6.病例淘汰：試驗(yàn)期間，試驗(yàn)蜂群若發(fā)生嚴(yán)重的盜蜂、逃群、分蜂，以及其他蜜蜂疾病發(fā)生、敵害襲擾等，導(dǎo)致無法評價藥效，應(yīng)予以淘汰。（二）試驗(yàn)藥物1.受試藥物及來源：受試藥物應(yīng)與擬上市的制劑完全一致、同一劑型，有完整的產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，有合乎規(guī)定格式的說明書。受試藥物應(yīng)來源于同一批號，由申報單位自行研制并在GMP驗(yàn)收合格的車間生產(chǎn)的樣品，并提供產(chǎn)品檢驗(yàn)合格報告。2.對照藥物及來源：對照藥物應(yīng)當(dāng)是已經(jīng)在我國批準(zhǔn)上市，與受試藥物作用相似、適

4、應(yīng)癥相同的藥物。來源可以從市場購買或者由申報單位提供，并提供產(chǎn)品檢驗(yàn)合格報告。（三）試驗(yàn)器材采用朗氏標(biāo)準(zhǔn)蜂箱，底部為可拆卸式巢門板，以方便從底部插入落螨板。試驗(yàn)前取一張寬度略小于巢箱底部、長度略長于蜂箱底長度的硬紙板或塑料板，朝上的一面均勻涂抹一層凡士林，將此板置于蜂箱底部，作為落螨板，用于黏著收集落于其上的螨。（四）給藥方案按照試驗(yàn)方案進(jìn)行給藥，包括給藥的時間、給藥的劑量、多次給藥的給藥間隔時間、總給藥次數(shù)。對照藥物應(yīng)嚴(yán)格按照批準(zhǔn)的說明書給藥。（五）試驗(yàn)周期試驗(yàn)周期為整個給藥療程（治療期）加上停止給藥后的21天時間。（六）試驗(yàn)分組1.選用人工誘發(fā)感染，單方制劑試驗(yàn)要求分成以下六組：（1）空白

5、對照（不感染不給藥）組；（2）感染不給藥組（陰性對照組）；（3）受試藥物推薦劑量加倍組；（4）受試藥物推薦劑量減半組；（5）受試藥物推薦劑量組；（6）藥物對照組（陽性對照組）。2.選用自然感染病例，單方制劑試驗(yàn)要求分成以下五組：（1）空白對照（不給藥）組；（2）受試藥物推薦劑量加倍組；（3）受試藥物推薦劑量減半組；（4）受試藥物推薦劑量組；（5）藥物對照組（陽性對照組）。3.如為復(fù)方制劑還應(yīng)增設(shè)單個藥物的推薦劑量組。（七）觀察指標(biāo)詳細(xì)觀察記錄試驗(yàn)開始后、給藥前、給藥后和停藥后各試驗(yàn)組蜂群的群勢變化情況，記錄每天的落螨數(shù)量并計(jì)算落螨率。1.統(tǒng)計(jì)每天落螨數(shù)量：給藥后每天觀察一次落螨板，收集并統(tǒng)計(jì)落

6、螨數(shù)量（a），統(tǒng)計(jì)試驗(yàn)結(jié)束時的總落螨數(shù)（a）。2.統(tǒng)計(jì)最后落螨數(shù)量：試驗(yàn)結(jié)束時，各試驗(yàn)組蜂群分別用過量的雙甲脒噴脾，分別統(tǒng)計(jì)最后落螨數(shù)量（b）。將此數(shù)量（b）加各蜂群總落螨數(shù)（a），作為蜂群總螨數(shù)，分別計(jì)算各試驗(yàn)組蜂群的落螨率。（八）統(tǒng)計(jì)分析選擇合適的統(tǒng)計(jì)分析程序，對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。將受試藥物組與對照組（包括空白對照組、感染不給藥組和藥物對照組）的落螨率進(jìn)行x2檢驗(yàn)，確定受試藥物的治療效果及其劑量。 （九）結(jié)果評價臨床藥效試驗(yàn)結(jié)果按下列標(biāo)準(zhǔn)評價：1.高效：疾病完全被控制，蜂體無螨，落螨率95。2.中效：病情明顯好轉(zhuǎn)，蜂體螨數(shù)減少，落螨率80。3.有效：病情有所好轉(zhuǎn)，落螨率60。4.無效：用藥后病情無明顯好轉(zhuǎn)，落螨率<60。三、試驗(yàn)報告為公正、科學(xué)地評價藥物療效，對試驗(yàn)報告內(nèi)容做如下要求：1.試驗(yàn)?zāi)康摹?.試驗(yàn)蜂群應(yīng)注明品種。3.受試藥物需注明蜂藥名稱、生產(chǎn)廠家、規(guī)格、生產(chǎn)批號及用法與用量。4.試驗(yàn)時間與地點(diǎn)。5.試驗(yàn)設(shè)計(jì)者、負(fù)責(zé)人、