03藥物分析方法的設計和驗證

1、第三章第三章 藥物分析方法的設計和驗證藥物分析方法的設計和驗證第一節(jié)第一節(jié) 藥物分析方法的分類和設計藥物分析方法的分類和設計一、分類一、分類按按取樣量分取樣量分常量分析（常量分析（0.11g或或10100mL）微量分析微量分析半微量半微量 (10100mg或或110mL)微量微量 (0.110mg或或10uL1mL)超微量超微量(0.1mg或或10uL)重量分析法重量分析法滴定或滴定或容量分析法容量分析法化學分析法化學分析法（mC+nRCmRn）儀儀器器分分析析法法光光譜譜分分析析色譜分析色譜分析電化學分析電化學分析熱分析熱分析吸收吸收(UV，IR，AA，NMR)發(fā)射發(fā)射(熒光熒光,火焰火焰)

2、質(zhì)譜質(zhì)譜旋光旋光折光折光-LC，GC，TLC，CE-電位、電流電位、電流-TGA，DTA，DSC按測定原理與操作方法按測定原理與操作方法分分（一）應（一）應與被測組分的與被測組分的含量相適應含量相適應二、分析方法選擇原則二、分析方法選擇原則常量組分常量組分容量法容量法重量法重量法原料藥含原料藥含量測定量測定干燥失重、干燥失重、灼熾殘渣灼熾殘渣檢查檢查Rd千分之幾千分之幾微量組分微量組分儀器分析法儀器分析法制劑含量制劑含量溶出度或均勻溶出度或均勻度檢查度檢查Rd百分之幾百分之幾實例實例:配位滴定法測定復方氫氧化鋁片中鋁、鎂配位滴定法測定復方氫氧化鋁片中鋁、鎂問題：問題：還可選用哪種方法？還可選用

3、哪種方法？（二）應考慮被測組分性質(zhì)（二）應考慮被測組分性質(zhì)被測組分性質(zhì)被測組分性質(zhì)測定方法測定方法常用原則：常用原則：純度高樣品純度高樣品-容量分析法容量分析法酸或堿性酸或堿性-酸堿滴定法酸堿滴定法氧化性或還原性氧化性或還原性-氧化還原滴定法氧化還原滴定法金屬陽離子金屬陽離子-配位滴定法配位滴定法鹵素陰離子鹵素陰離子-銀量法銀量法復雜樣品復雜樣品-色譜法色譜法有一定揮發(fā)性有一定揮發(fā)性-GC非揮發(fā)性非揮發(fā)性-LC，TLC1、非水酸量法、非水酸量法-弱酸性藥物弱酸性藥物2、紫外分光光度法、紫外分光光度法-藥物結(jié)構(gòu)中有共軛體系且吸光系數(shù)大藥物結(jié)構(gòu)中有共軛體系且吸光系數(shù)大3、三氯化鐵比色法、三氯化鐵比

4、色法-藥物結(jié)構(gòu)中有酚羥基結(jié)構(gòu)藥物結(jié)構(gòu)中有酚羥基結(jié)構(gòu)4、HPLC-UV-成分較多且相互影響且紫外吸收的藥物成分較多且相互影響且紫外吸收的藥物5、TLC-藥物中雜質(zhì)限度檢查藥物中雜質(zhì)限度檢查苯溴馬隆苯溴馬隆實例分析實例分析小結(jié)：小結(jié)：最佳方法最佳方法-測定的目的與對象測定的目的與對象原料藥含量測定原料藥含量測定-非水酸量法非水酸量法制劑含量或溶出度檢查制劑含量或溶出度檢查-UV雜質(zhì)檢查或鑒別雜質(zhì)檢查或鑒別-TLC賦形劑干擾賦形劑干擾-LC（三）應與測定的具體要求相適應（三）應與測定的具體要求相適應1、成品分析或仲裁分析、成品分析或仲裁分析-準確度要求高準確度要求高2、中間體分析或環(huán)境分析、中間體分

5、析或環(huán)境分析-快速簡便快速簡便3、微量分析或痕量分析、微量分析或痕量分析-靈敏度要求高靈敏度要求高（四）應考慮干擾物質(zhì)的影響（四）應考慮干擾物質(zhì)的影響干擾物存在干擾物存在-選擇分離方法（選擇分離方法（TLC、HPLC）結(jié)論結(jié)論結(jié)構(gòu)性質(zhì)結(jié)構(gòu)性質(zhì)含量含量干擾物干擾物現(xiàn)有設備現(xiàn)有設備測定技術測定技術測定要求測定要求（準確度、專屬性、靈敏度、時效準確度、專屬性、靈敏度、時效）測定成本測定成本合適測定方法合適測定方法方法選擇考慮因素方法選擇考慮因素第二節(jié)第二節(jié) 藥物分析方法的驗證藥物分析方法的驗證準確度準確度(accuracy)精密度精密度(precision)（重復性、中間精密度、重現(xiàn)性）（重復性、中

6、間精密度、重現(xiàn)性）專屬性專屬性(specificity)檢測限檢測限(limit of detection,LOD)定量限定量限(limit of quantitation,LOQ)線性線性(linearity)范圍范圍(quantitation range)耐用性耐用性(ruggedness)驗證內(nèi)容驗證內(nèi)容一、誤差及其分類一、誤差及其分類（一）絕對誤差和相對誤差（一）絕對誤差和相對誤差（二）系統(tǒng)誤差和隨機誤差（二）系統(tǒng)誤差和隨機誤差1、系統(tǒng)誤、系統(tǒng)誤差差（1）方法誤差）方法誤差（2）儀器和試劑誤差）儀器和試劑誤差（3）操作誤差）操作誤差2、隨機誤差、隨機誤差-多次平行測定多次平行測定解決方

7、法解決方法對照或空白試驗對照或空白試驗校正儀器校正儀器3、測量結(jié)果檢驗、測量結(jié)果檢驗-方差分析方差分析 （t檢驗、檢驗、G檢驗、檢驗、F檢驗）檢驗）（一）準確度（一）準確度（Accuracy)1、定義定義 表示分析結(jié)果與真實值的接近程度。表示分析結(jié)果與真實值的接近程度。 用絕對誤差或相對誤差表示用絕對誤差或相對誤差表示.2、評價方法、評價方法 加樣回收率（相對誤差）衡量加樣回收率（相對誤差）衡量%100)(加樣值測定值回收值R一、準確度和精密度一、準確度和精密度（二）精密度（二）精密度（precision)1、定義：、定義：平行測量的各次測量值（實驗值）之間互平行測量的各次測量值（實驗值）之間

8、互相接近程度。相接近程度。2、評價方法、評價方法（1）偏差（）偏差（deviation)xxdi（2）平均偏差）平均偏差nxxniid1（5）相對標準偏差）相對標準偏差（RSD or CV）%100 xSRSD%100 xddR（3）相對平均偏差）相對平均偏差（Relative average deviation)12nxxSi（4）標準偏差）標準偏差（standard deviation)（三）重復性、中間精密度、重現(xiàn)性（三）重復性、中間精密度、重現(xiàn)性（1）重復性重復性 同室同人同儀器對同樣品的某物理量同室同人同儀器對同樣品的某物理量重復重復測定的測定的結(jié)果相互接近程度。結(jié)果相互接近程度。（

9、2）中間精密度）中間精密度 同室不同人、不同設備、不同時間對同一樣品的某同室不同人、不同設備、不同時間對同一樣品的某一物理量重復測定結(jié)果的精密度。一物理量重復測定結(jié)果的精密度。（3）重現(xiàn)性）重現(xiàn)性 不同人不同室不同儀器對同樣品的某物理量測定不同人不同室不同儀器對同樣品的某物理量測定結(jié)果的精密度。結(jié)果的精密度。三、準確度和精確度的關系三、準確度和精確度的關系 精密度是準確度的保證。測量值的準確度表示測量結(jié)精密度是準確度的保證。測量值的準確度表示測量結(jié)果的正確性；測量值的精密度表示測量結(jié)果的重現(xiàn)性、果的正確性；測量值的精密度表示測量結(jié)果的重現(xiàn)性、重復性。重復性。第三節(jié)第三節(jié) 藥物分析中的有效數(shù)字藥

10、物分析中的有效數(shù)字一、有效數(shù)字一、有效數(shù)字（一）定義：一）定義：分析中，實際能測量到的數(shù)字。分析中，實際能測量到的數(shù)字。 根據(jù)測定方法和使用儀器的準確程度來確定，只有最根據(jù)測定方法和使用儀器的準確程度來確定，只有最后一位欠準，欠準度為后一位欠準，欠準度為1。2、有效位數(shù)確定、有效位數(shù)確定（1）0在數(shù)據(jù)中位置不同，作用不同。在數(shù)據(jù)中位置不同，作用不同。例：例：1.002-4位，位，0.0980-3位，位，2.0103-2位位例例: 電子分析天平讀數(shù)電子分析天平讀數(shù)0.3526 滴定管體積讀數(shù)滴定管體積讀數(shù)22.25例：例：9.48-4位位（4）若數(shù)值的首位大于）若數(shù)值的首位大于8，有效位數(shù)可多取

11、，有效位數(shù)可多取一位一位。（3）pH、logK等數(shù)值的有效位數(shù)取決于小數(shù)部分等數(shù)值的有效位數(shù)取決于小數(shù)部分數(shù)字的位數(shù)。數(shù)字的位數(shù)。例例 2.533 +11.352 2 -3和和2（2）數(shù)據(jù)中的倍數(shù)或分數(shù)，可視為無限多位有效數(shù)）數(shù)據(jù)中的倍數(shù)或分數(shù)，可視為無限多位有效數(shù)字字例例 pH=3.02-2位位二、運算規(guī)則二、運算規(guī)則（一）加減法一）加減法以以小數(shù)點后位數(shù)最少小數(shù)點后位數(shù)最少的數(shù)據(jù)為準（的數(shù)據(jù)為準（誤差最大誤差最大）。）。8 .513 . 04 . 11 .50281. 045. 11 .50（二）乘除法二）乘除法 以以有效數(shù)字最少有效數(shù)字最少的那個測量值為準的那個測量值為準（相對誤差最大相對誤差最大）。）。例：例：0.231 20.243.2=14.9618 15三、藥物含量測定結(jié)果的表達法三、藥物含量測定