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1、紅細(xì)胞和白細(xì)胞計(jì)數(shù)紅細(xì)胞和白細(xì)胞計(jì)數(shù)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)系一、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)一、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)l目的目的 掌握顯微鏡手工計(jì)數(shù)的方法。掌握顯微鏡手工計(jì)數(shù)的方法。l原理原理 用等滲稀釋液將血液稀釋一定倍數(shù),用等滲稀釋液將血液稀釋一定倍數(shù),沖入計(jì)數(shù)池后,在顯微鏡下計(jì)數(shù)一定體沖入計(jì)數(shù)池后,在顯微鏡下計(jì)數(shù)一定體積內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)量,經(jīng)換算求出每升血積內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)量,經(jīng)換算求出每升血液中的紅細(xì)胞數(shù)。液中的紅細(xì)胞數(shù)。一、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)一、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)l器材器材 顯微鏡、改良計(jì)數(shù)板、試管、微量顯微鏡、改良計(jì)數(shù)板、試管、微量吸管、移液管、洗耳球吸管、移液管、洗耳球l試劑試劑 生理鹽水生理鹽水l標(biāo)本標(biāo)本 EDTA抗凝血抗凝血6操作操作l1 加
2、稀釋液 取小試管1支,加紅細(xì)胞稀釋液2ml。l2 加血 用清潔枯燥微量吸管汲取抗凝血10l,擦去管外余血,悄然加至紅細(xì)胞稀釋液底部,再輕吸上清液清洗吸管23次,立刻混勻。l3 充池 混勻后用微量吸管將紅細(xì)胞懸液沖入計(jì)數(shù)池,室溫下平放35分鐘,待細(xì)胞下沉后于顯微鏡下計(jì)數(shù)。l4 計(jì)數(shù) 用高倍鏡依次計(jì)數(shù)中央大方格內(nèi)4角和正中5個(gè)中方格內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)。l 5計(jì)算 紅細(xì)胞/L=N25/510106200=N1010l =N/1001012本卷須知本卷須知 1. 將紅細(xì)胞稀釋液充入計(jì)數(shù)池時(shí)要一次完成,不能產(chǎn)生滿溢、氣泡或充池缺乏的景象。 2. 紅細(xì)胞在計(jì)數(shù)池中假設(shè)分布不均,每個(gè)中方格之間相差超越20個(gè)以上時(shí)
3、要重新充池計(jì)數(shù)。正常數(shù)值范圍內(nèi),2次紅細(xì)胞計(jì)數(shù)相差不得超越5%。二、白細(xì)胞計(jì)數(shù)二、白細(xì)胞計(jì)數(shù)l目的 掌握顯微鏡白細(xì)胞計(jì)數(shù)的方法。l原理 用白細(xì)胞稀釋液將血液稀釋一定倍數(shù),同時(shí)破壞溶解紅細(xì)胞。將稀釋的血液沖入計(jì)數(shù)池后,在顯微鏡下計(jì)數(shù)一定體積內(nèi)的白細(xì)胞數(shù),經(jīng)換算求出每升血液中的白細(xì)胞數(shù)。l器材 顯微鏡、改良計(jì)數(shù)板、試管、微量吸管、移液管、洗耳球l試劑 白細(xì)胞稀釋液l標(biāo)本 EDTA抗凝血二、白細(xì)胞計(jì)數(shù)二、白細(xì)胞計(jì)數(shù)l1.加稀釋液 用吸管汲取白細(xì)胞稀釋液0.38ml于小試管中。l2.加血 用清潔枯燥微量吸管汲取抗凝血20l,擦去管外余血,悄然加至白細(xì)胞稀釋液底部,再輕吸上清液清洗吸管23次,混勻。l3
4、.充池 混勻后用微量吸管將完全變?yōu)樽睾稚募?xì)胞懸液沖入計(jì)數(shù)池,室溫下平放35分鐘,待細(xì)胞下沉后于顯微鏡下計(jì)數(shù)。l 4. 計(jì)數(shù) 用低倍鏡依次計(jì)數(shù)4個(gè)大方格內(nèi)的白細(xì)胞數(shù)。l 5.計(jì)算 紅細(xì)胞/L=N/41010620=N/20109/L 操作操作 1.在充池時(shí)要一次完成,不能產(chǎn)生滿溢、氣泡或充池缺乏及充液后玻片挪動(dòng)的景象。 2.白細(xì)胞在計(jì)數(shù)池中假設(shè)分布不均,大方格間細(xì)胞計(jì)數(shù)相差普通不超越10%。 3.白細(xì)胞數(shù)量過多時(shí),可采取加大稀釋倍數(shù)的方法。 4.白細(xì)胞稀釋液不能破壞有核紅細(xì)胞,它可使白細(xì)胞計(jì)數(shù)偏高,此時(shí)應(yīng)計(jì)算白細(xì)胞校正值。本卷須知本卷須知l作業(yè)作業(yè) l1.本次實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)是什么本次實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)是什么?l2. 假定某次白細(xì)胞計(jì)數(shù)為假定某次白細(xì)胞計(jì)數(shù)為6109/L,其,其中分類中分類10
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