第二章 天然藥物化學(xué)成分提取分離和鑒定的方法與技術(shù)

1、第二章 天然藥物化學(xué)成分提取分離和鑒定的方法與技術(shù)本章內(nèi)容本章內(nèi)容第一節(jié) 提取的方法與技術(shù)第二節(jié) 分離精制和鑒定的方法與技術(shù)3 32727章目錄章目錄一、溶劑提取法一、溶劑提取法 1. 概念概念 溶劑提取法是指根據(jù)天然藥物中各種化學(xué)成分的溶解溶劑提取法是指根據(jù)天然藥物中各種化學(xué)成分的溶解性能，選擇對有效成分溶解度大而對其他成分溶解度小的性能，選擇對有效成分溶解度大而對其他成分溶解度小的溶劑，用適當(dāng)?shù)姆椒▽⑺杌瘜W(xué)成分盡可能完全地從藥材溶劑，用適當(dāng)?shù)姆椒▽⑺杌瘜W(xué)成分盡可能完全地從藥材組織中溶解提出的方法。組織中溶解提出的方法。 章目錄章目錄一、溶劑提取法一、溶劑提取法 2基本原理基本原理 溶劑

2、提取法是在滲透、擴散作用下，溶劑滲入藥材組溶劑提取法是在滲透、擴散作用下，溶劑滲入藥材組織細胞內(nèi)部，溶解可溶性物質(zhì)，造成細胞內(nèi)外溶質(zhì)的濃度織細胞內(nèi)部，溶解可溶性物質(zhì)，造成細胞內(nèi)外溶質(zhì)的濃度差，從而帶動溶質(zhì)作不斷往返的運動，直至細胞內(nèi)外溶液差，從而帶動溶質(zhì)作不斷往返的運動，直至細胞內(nèi)外溶液中被溶解的化學(xué)成分的濃度達到平衡，提出所需化學(xué)成分中被溶解的化學(xué)成分的濃度達到平衡，提出所需化學(xué)成分。章目錄章目錄 選擇合適的溶劑是溶劑提取法的關(guān)鍵。選擇合適的溶劑是溶劑提取法的關(guān)鍵。 常用溶劑的極性大小順序排列如下：常用溶劑的極性大小順序排列如下：石油醚石油醚 苯苯 無水乙醚無水乙醚 三氯甲烷三氯甲烷 乙酸乙

3、酯乙酸乙酯 正丁醇正丁醇 丙酮丙酮 乙醇乙醇 甲醇甲醇 水水親脂性有機溶劑親脂性有機溶劑親水性有機溶劑親水性有機溶劑 良好溶劑的選擇應(yīng)遵循良好溶劑的選擇應(yīng)遵循“相似相溶相似相溶”的規(guī)律，根據(jù)溶的規(guī)律，根據(jù)溶劑的極性，被提取成分及共存的其他成分的性質(zhì)來決定，劑的極性，被提取成分及共存的其他成分的性質(zhì)來決定，同時兼顧考慮溶劑是否使用安全、易得、價廉、濃縮方便同時兼顧考慮溶劑是否使用安全、易得、價廉、濃縮方便等問題。等問題。 一、溶劑提取法一、溶劑提取法章目錄章目錄方法與技術(shù)方法與技術(shù) （一）浸漬法（一）浸漬法 （二）滲漉法（二）滲漉法 （三）煎煮法（三）煎煮法 （四）回流提取（四）回流提取法法 （

4、五）連續(xù)回流提取法（五）連續(xù)回流提取法 （六）超聲提取法（六）超聲提取法一、溶劑提取法一、溶劑提取法章目錄章目錄 （一）浸漬法（一）浸漬法 是將藥材用適當(dāng)?shù)娜軇┰诔鼗驕責(zé)岬臈l件下浸泡一是將藥材用適當(dāng)?shù)娜軇┰诔鼗驕責(zé)岬臈l件下浸泡一定時間，浸出有效成分的一種方法。定時間，浸出有效成分的一種方法。 操作技術(shù)：操作技術(shù)： 一、溶劑提取法一、溶劑提取法 冷浸法冷浸法溫浸法溫浸法章目錄章目錄 （二）滲漉法（二）滲漉法 是將藥材粗粉置滲漉裝置中，連續(xù)添加溶劑使?jié)B過藥是將藥材粗粉置滲漉裝置中，連續(xù)添加溶劑使?jié)B過藥粉，自上而下流動，浸出有效成分的一種動態(tài)浸提方法。粉，自上而下流動，浸出有效成分的一種動態(tài)浸提

5、方法。 操作技術(shù)：操作技術(shù)：粉碎粉碎 浸潤浸潤 裝筒裝筒 排氣排氣 浸漬浸漬 滲漉滲漉 收集滲漉液收集滲漉液一、溶劑提取法一、溶劑提取法章目錄章目錄 （三）煎煮法（三）煎煮法 是將藥材加水加熱煮沸，濾過去渣后取煎煮液的一種是將藥材加水加熱煮沸，濾過去渣后取煎煮液的一種傳統(tǒng)提取方法。傳統(tǒng)提取方法。 操作技術(shù)：操作技術(shù)： 取藥材飲片或粗粉，置適當(dāng)煎器（勿使用鐵器）中，取藥材飲片或粗粉，置適當(dāng)煎器（勿使用鐵器）中，加水浸沒藥材，加熱煮沸，保持微沸，煎煮一定時間后，加水浸沒藥材，加熱煮沸，保持微沸，煎煮一定時間后，分離煎煮液，藥渣可繼續(xù)依法煎煮數(shù)次，合并各次煎煮液，分離煎煮液，藥渣可繼續(xù)依法煎煮數(shù)次，

6、合并各次煎煮液，濃縮即得。濃縮即得。一、溶劑提取法一、溶劑提取法章目錄章目錄 （四）回流提取法（四）回流提取法 使用低沸點有機溶劑如乙醇、三氯甲烷等加熱提取天使用低沸點有機溶劑如乙醇、三氯甲烷等加熱提取天然藥物中有效成分時，為減少溶劑的揮發(fā)損失，保持溶劑然藥物中有效成分時，為減少溶劑的揮發(fā)損失，保持溶劑與藥材持久的接觸，通過加熱浸出液，使溶劑受熱蒸發(fā)，與藥材持久的接觸，通過加熱浸出液，使溶劑受熱蒸發(fā)，經(jīng)冷凝后變?yōu)橐后w流回浸出器，如此反復(fù)至浸出完全的一經(jīng)冷凝后變?yōu)橐后w流回浸出器，如此反復(fù)至浸出完全的一種熱提取方法。種熱提取方法。一、溶劑提取法一、溶劑提取法章目錄章目錄 （四）回流提取法（四）回流

7、提取法 操作技術(shù)：操作技術(shù)： 將藥材粗粉裝入圓底燒瓶將藥材粗粉裝入圓底燒瓶內(nèi)，添加溶劑至蓋過藥面（一內(nèi)，添加溶劑至蓋過藥面（一般至燒瓶容積般至燒瓶容積1/21/22/32/3處），處），接上冷凝管，通入冷卻水，于接上冷凝管，通入冷卻水，于水浴中加熱回流一定時間，濾水浴中加熱回流一定時間，濾出提取液，藥渣再添加新溶劑出提取液，藥渣再添加新溶劑回流回流2 23 3次，合并濾液，回收次，合并濾液，回收有機溶劑后得濃縮提取液。有機溶劑后得濃縮提取液。一、溶劑提取法一、溶劑提取法章目錄章目錄 （五）連續(xù)回流提取法（五）連續(xù)回流提取法 是在回流提取法的基礎(chǔ)上改進的，能用少量溶劑進行是在回流提取法的基礎(chǔ)上改

8、進的，能用少量溶劑進行連續(xù)循環(huán)回流提取，充分將有效成分浸出完全的方法。連續(xù)循環(huán)回流提取，充分將有效成分浸出完全的方法。 一、溶劑提取法一、溶劑提取法章目錄章目錄 操作技術(shù)操作技術(shù) 先在圓底燒瓶內(nèi)放入幾粒沸先在圓底燒瓶內(nèi)放入幾粒沸石，然后將裝好藥材粉末的濾紙石，然后將裝好藥材粉末的濾紙袋或筒放入提取器中，藥粉高度袋或筒放入提取器中，藥粉高度應(yīng)低于虹吸管頂部，自冷凝管加應(yīng)低于虹吸管頂部，自冷凝管加溶劑入燒瓶內(nèi)，水浴加熱。至有溶劑入燒瓶內(nèi)，水浴加熱。至有效成分充分被浸出，提取液回收效成分充分被浸出，提取液回收有機溶劑即得。有機溶劑即得。 （五）連續(xù)回流提取法（五）連續(xù)回流提取法 一、溶劑提取法一、溶

9、劑提取法章目錄章目錄 （六）超聲提取法（六）超聲提取法 是一種利用超聲波浸提有效成分的方法。是一種利用超聲波浸提有效成分的方法。 其基本原理是利用超聲波的空化作用，破壞植物藥材其基本原理是利用超聲波的空化作用，破壞植物藥材的細胞，使溶劑易于滲入細胞內(nèi)，同時超聲波的強烈振動的細胞，使溶劑易于滲入細胞內(nèi)，同時超聲波的強烈振動能傳遞巨大能量給浸提的藥材和溶劑，使它們作高速運動，能傳遞巨大能量給浸提的藥材和溶劑，使它們作高速運動，加強了胞內(nèi)物質(zhì)的釋放、擴散和溶解，加速有效成分的浸加強了胞內(nèi)物質(zhì)的釋放、擴散和溶解，加速有效成分的浸出，極大地提高提取效率。出，極大地提高提取效率。 一、溶劑提取法一、溶劑提

10、取法章目錄章目錄 （六）超聲提取法（六）超聲提取法 操作技術(shù)：操作技術(shù)： 將藥材粉末置適宜容器內(nèi)，加入定量溶劑，密閉后置將藥材粉末置適宜容器內(nèi)，加入定量溶劑，密閉后置超聲提取器內(nèi)，選擇適當(dāng)超聲頻率提取一段時間（一般只超聲提取器內(nèi)，選擇適當(dāng)超聲頻率提取一段時間（一般只需要數(shù)十分鐘）后即得。需要數(shù)十分鐘）后即得。 一、溶劑提取法一、溶劑提取法章目錄章目錄二、其他提取方法二、其他提取方法 （一）水蒸氣蒸餾法（一）水蒸氣蒸餾法 是一種利用某些揮發(fā)性成分與水或水蒸氣共同是一種利用某些揮發(fā)性成分與水或水蒸氣共同加熱，能隨水蒸氣一并蒸餾出，經(jīng)冷凝后分取獲得加熱，能隨水蒸氣一并蒸餾出，經(jīng)冷凝后分取獲得的性質(zhì)，

11、使之從天然藥物中提出的方法。的性質(zhì)，使之從天然藥物中提出的方法。 章目錄章目錄 （一）水蒸氣蒸餾法（一）水蒸氣蒸餾法 操作技術(shù)：操作技術(shù)： 將藥材粗粉裝入蒸餾瓶將藥材粗粉裝入蒸餾瓶內(nèi)，加入水使藥材充分浸潤，內(nèi)，加入水使藥材充分浸潤，體積不超過蒸餾瓶容積的體積不超過蒸餾瓶容積的1/31/3，然后加熱水蒸氣發(fā)生，然后加熱水蒸氣發(fā)生器使水沸騰，產(chǎn)生水蒸氣通器使水沸騰，產(chǎn)生水蒸氣通入蒸餾瓶，藥材中揮發(fā)性成入蒸餾瓶，藥材中揮發(fā)性成分隨水蒸氣蒸餾被帶出，經(jīng)分隨水蒸氣蒸餾被帶出，經(jīng)冷凝后，收集于接受瓶中，冷凝后，收集于接受瓶中，若餾出液由渾濁變澄清透明，若餾出液由渾濁變澄清透明，表示蒸餾基本完成。表示蒸餾基

12、本完成。二、其他提取方法二、其他提取方法章目錄章目錄 （二）升華法（二）升華法 是利用某些固體物質(zhì)具有在低于其熔點的溫度是利用某些固體物質(zhì)具有在低于其熔點的溫度下受熱后，不經(jīng)熔融就直接轉(zhuǎn)化為蒸氣，遇冷后又下受熱后，不經(jīng)熔融就直接轉(zhuǎn)化為蒸氣，遇冷后又凝固為原來的固體的性質(zhì)，使之從天然藥物中提出凝固為原來的固體的性質(zhì)，使之從天然藥物中提出的方法。的方法。 二、其他提取方法二、其他提取方法章目錄章目錄 （二）升華法（二）升華法 操作技術(shù)：操作技術(shù)： 預(yù)先粉碎待升華的天預(yù)先粉碎待升華的天然藥物，將粉末置于升華然藥物，將粉末置于升華器皿中，鋪均勻，上面放器皿中，鋪均勻，上面放一冷凝器，加熱升華器皿一冷凝

13、器，加熱升華器皿到一定溫度，使被提取物到一定溫度，使被提取物質(zhì)升華，升華物質(zhì)冷凝于質(zhì)升華，升華物質(zhì)冷凝于冷凝器表面即得。冷凝器表面即得。 二、其他提取方法二、其他提取方法章目錄章目錄 （三）超臨界流體萃取技術(shù)（三）超臨界流體萃取技術(shù) 超臨界流體萃?。ǔR界流體萃取（supercritical fluid extraction，SFE）是一種利用某物質(zhì)在超臨界區(qū)域形成的流體，）是一種利用某物質(zhì)在超臨界區(qū)域形成的流體，對天然藥物中有效成分進行萃取分離的新型技術(shù)，對天然藥物中有效成分進行萃取分離的新型技術(shù)，集提取和分離于一體。集提取和分離于一體。二、其他提取方法二、其他提取方法章目錄章目錄 （三）超

14、臨界流體萃取技術(shù)（三）超臨界流體萃取技術(shù) 操作技術(shù)：操作技術(shù)： 超臨界流體萃取工藝程序：將藥材原料投入萃取超臨界流體萃取工藝程序：將藥材原料投入萃取器器6 6中，對萃取器中，對萃取器6 6和分離器和分離器7 7分別進行加熱或冷卻，分別進行加熱或冷卻，當(dāng)達到所選定的溫度時，開啟當(dāng)達到所選定的溫度時，開啟COCO2 2氣瓶閥門及閥門氣瓶閥門及閥門1212進進氣，啟動高壓閥氣，啟動高壓閥4 4對系統(tǒng)加壓，當(dāng)達到預(yù)定壓力時，對系統(tǒng)加壓，當(dāng)達到預(yù)定壓力時，調(diào)節(jié)減壓閥調(diào)節(jié)減壓閥9 9，使分離器，使分離器7 7內(nèi)壓力達到設(shè)定值，打開放內(nèi)壓力達到設(shè)定值，打開放空閥空閥1010調(diào)節(jié)流量。通過各閥門的調(diào)節(jié)，使萃取

15、過程中調(diào)節(jié)流量。通過各閥門的調(diào)節(jié)，使萃取過程中通過的流量及萃取器內(nèi)壓力、分離器內(nèi)壓力都穩(wěn)定在通過的流量及萃取器內(nèi)壓力、分離器內(nèi)壓力都穩(wěn)定在設(shè)定的操作條件后，關(guān)閉閥門設(shè)定的操作條件后，關(guān)閉閥門1010，打開閥門，打開閥門1111，開始，開始進行循環(huán)萃取，萃取過程中達到一定時間后，從閥門進行循環(huán)萃取，萃取過程中達到一定時間后，從閥門8 8取出萃取物。取出萃取物。 二、其他提取方法二、其他提取方法章目錄章目錄 （三）超臨界流體萃取技術(shù)（三）超臨界流體萃取技術(shù) 超臨界流體萃取工藝程序：超臨界流體萃取工藝程序： 1 CO1 CO2 2氣瓶氣瓶 2 2 純化器純化器 3 3 冷凝器冷凝器 4 4 高壓泵高

16、壓泵 5 5 加熱器加熱器 6 6 萃取器萃取器 7 7 分離器分離器 8 8 放油器放油器 9 9 減壓閥減壓閥 10.11.12 10.11.12 閥門閥門二、其他提取方法二、其他提取方法章目錄章目錄課堂活動課堂活動 如何根據(jù)實際工作的需要選擇適當(dāng)?shù)奶崛∪绾胃鶕?jù)實際工作的需要選擇適當(dāng)?shù)奶崛》椒ǎ吭囉眠B線一一對應(yīng)連接。并敘述各法選方法？試用連線一一對應(yīng)連接。并敘述各法選用的儀器、操作步驟、注意事項和適用范圍。用的儀器、操作步驟、注意事項和適用范圍。 章目錄章目錄浸漬法浸漬法 提取受熱易破壞的成分，能保持良好濃度提取受熱易破壞的成分，能保持良好濃度 差的一種動態(tài)浸提方法差的一種動態(tài)浸提方法滲漉

17、法滲漉法 以水為溶劑加熱提取以水為溶劑加熱提取煎煮法煎煮法 使用索氏提取器進行提取使用索氏提取器進行提取 回流提取法回流提取法 提取受熱易破壞的成分及含多糖物質(zhì)較多提取受熱易破壞的成分及含多糖物質(zhì)較多 的天然藥物的天然藥物連續(xù)回流提取法連續(xù)回流提取法 用有機溶劑自天然藥物中提取脂溶性成分用有機溶劑自天然藥物中提取脂溶性成分水蒸氣蒸餾法水蒸氣蒸餾法 提取有升華性的成分提取有升華性的成分升華法升華法 提取能隨水蒸氣蒸餾且不溶于水的成分提取能隨水蒸氣蒸餾且不溶于水的成分課堂活動課堂活動章目錄章目錄點滴積累點滴積累l 1. 天然藥物化學(xué)成分的提取方法有溶劑提取法、水蒸氣蒸天然藥物化學(xué)成分的提取方法有溶

18、劑提取法、水蒸氣蒸餾法、升華法、超臨界流體萃取技術(shù)等。溶劑提取法是目餾法、升華法、超臨界流體萃取技術(shù)等。溶劑提取法是目前提取有效成分最常用的方法，具體的操作技術(shù)有浸漬法前提取有效成分最常用的方法，具體的操作技術(shù)有浸漬法、滲漉法、煎煮法、回流提取法、連續(xù)回流提取法、超聲、滲漉法、煎煮法、回流提取法、連續(xù)回流提取法、超聲提取法等。提取法等。l 2. 研究天然藥物化學(xué)成分需首先從提取工作開始。對各種研究天然藥物化學(xué)成分需首先從提取工作開始。對各種方法所用的溶劑種類、儀器、特點及適用范圍進行比較區(qū)方法所用的溶劑種類、儀器、特點及適用范圍進行比較區(qū)別，合理設(shè)計提取方法和正確的提取操作將為下一步分離別，合

19、理設(shè)計提取方法和正確的提取操作將為下一步分離工作的順利進行打下堅實的基礎(chǔ)。工作的順利進行打下堅實的基礎(chǔ)。章目錄章目錄章目錄章目錄一、系統(tǒng)溶劑分離法一、系統(tǒng)溶劑分離法 是一種按極性由小到大的順序選用不同極性的溶劑組成溶是一種按極性由小到大的順序選用不同極性的溶劑組成溶劑系統(tǒng)，依次提取分離提取液中各種不同成分，使各溶解劑系統(tǒng)，依次提取分離提取液中各種不同成分，使各溶解度有差異的成分得到分離的方法。度有差異的成分得到分離的方法。 此法是早年研究天然產(chǎn)物有效成分的一種最主要的方法，此法是早年研究天然產(chǎn)物有效成分的一種最主要的方法，目前仍是研究不明成分最為常用的方法。目前仍是研究不明成分最為常用的方法。

20、 章目錄章目錄 操作技術(shù)：操作技術(shù)： 適當(dāng)濃縮總提取液，或拌入適量惰性吸附劑如：粗硅適當(dāng)濃縮總提取液，或拌入適量惰性吸附劑如：粗硅膠、纖維粉及硅藻土等，低溫或自然干燥后粉碎，然后依膠、纖維粉及硅藻土等，低溫或自然干燥后粉碎，然后依次用石油醚（或苯）、乙醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮次用石油醚（或苯）、乙醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮、乙醇和水分步進行抽提，使溶解度不同的各種成分得到、乙醇和水分步進行抽提，使溶解度不同的各種成分得到分段分離。也可以選擇其中三、四種不同極性的溶劑組成分段分離。也可以選擇其中三、四種不同極性的溶劑組成溶劑系統(tǒng)，如石油醚溶劑系統(tǒng)，如石油醚苯苯乙醚乙醚三氯甲烷三氯甲烷乙酸乙

21、酯乙酸乙酯正丁醇或戊醇，由低極性到高極性分步進行抽提，分成若正丁醇或戊醇，由低極性到高極性分步進行抽提，分成若干部位。干部位。 一、系統(tǒng)溶劑分離法一、系統(tǒng)溶劑分離法章目錄章目錄一、系統(tǒng)溶劑分離法一、系統(tǒng)溶劑分離法章目錄章目錄二、兩相溶劑萃取法二、兩相溶劑萃取法 是指往提取液中加入一種與其互不相溶的溶劑配成兩是指往提取液中加入一種與其互不相溶的溶劑配成兩相溶劑系統(tǒng)，利用混合物中各種成分分配系數(shù)的差異相溶劑系統(tǒng)，利用混合物中各種成分分配系數(shù)的差異而將所需成分萃取出來的分離方法。而將所需成分萃取出來的分離方法。 章目錄章目錄 基本原理：利用混合物中各種成分在兩相互不相溶的溶劑基本原理：利用混合物中各

22、種成分在兩相互不相溶的溶劑中中分配系數(shù)分配系數(shù)的差異而達到分離的目的。混合物中各種成分的差異而達到分離的目的?；旌衔镏懈鞣N成分在同一兩相溶劑系統(tǒng)中分別有各自不同的分配系數(shù)，若在同一兩相溶劑系統(tǒng)中分別有各自不同的分配系數(shù)，若各各種成分的分配系數(shù)差異越大，則分離效果越好。種成分的分配系數(shù)差異越大，則分離效果越好。 K=Cu/CLK K 表示分配系數(shù)表示分配系數(shù)；C Cu u 表示溶質(zhì)在上相溶劑中的濃度；表示溶質(zhì)在上相溶劑中的濃度；C CL L 表示溶質(zhì)在下相溶劑中的濃度。表示溶質(zhì)在下相溶劑中的濃度。二、兩相溶劑萃取法二、兩相溶劑萃取法章目錄章目錄（一）簡單萃取法（一）簡單萃取法 二、兩相溶劑萃取法

23、二、兩相溶劑萃取法待萃取物和溶劑裝入分液漏斗待萃取物和溶劑裝入分液漏斗振搖，重復(fù)數(shù)次振搖，重復(fù)數(shù)次靜置，使兩液分層靜置，使兩液分層開啟活塞使下層液放出開啟活塞使下層液放出從分液漏斗的上端倒出上層液從分液漏斗的上端倒出上層液操作技術(shù)：操作技術(shù)： 這是一種這是一種常用的簡便萃常用的簡便萃取技術(shù)，小量取技術(shù)，小量萃取一般在分萃取一般在分液漏斗中進行。液漏斗中進行。章目錄章目錄（二）逆流連續(xù)萃取法（二）逆流連續(xù)萃取法 是利用兩相互不相溶的溶是利用兩相互不相溶的溶劑相對密度的不同，使相對密劑相對密度的不同，使相對密度小的相液作為移動相（或分度小的相液作為移動相（或分散相），逆流連續(xù)穿過相對密散相），逆流

24、連續(xù)穿過相對密度大的作為固定相（或連續(xù)相度大的作為固定相（或連續(xù)相）的相液，借以交換溶質(zhì)而達）的相液，借以交換溶質(zhì)而達到分離的一種連續(xù)萃取技術(shù)。到分離的一種連續(xù)萃取技術(shù)。 二、兩相溶劑萃取法二、兩相溶劑萃取法章目錄章目錄（三）逆流分溶法（三）逆流分溶法 逆流分溶法（逆流分溶法（counter current distribution，CCD）是一種高效、多次、連續(xù)的兩相溶劑萃取分離方法，亦稱為是一種高效、多次、連續(xù)的兩相溶劑萃取分離方法，亦稱為逆流分配法、逆流分布法或反流分布法。逆流分配法、逆流分布法或反流分布法。二、兩相溶劑萃取法二、兩相溶劑萃取法章目錄章目錄（四）液滴逆流分配法（四）液滴逆

25、流分配法 液滴逆流分配法液滴逆流分配法（droplet counter current chromatography，DCCC），），利用混合物中各成分在兩液相間的分配系數(shù)的差異，使移動相形成利用混合物中各成分在兩液相間的分配系數(shù)的差異，使移動相形成液滴，通過作為固定相的液柱實現(xiàn)逆流分配，從而達到分離目的。液滴，通過作為固定相的液柱實現(xiàn)逆流分配，從而達到分離目的。二、兩相溶劑萃取法二、兩相溶劑萃取法章目錄章目錄三、沉淀法三、沉淀法是指在天然藥物的提取液中加入某些試劑是指在天然藥物的提取液中加入某些試劑,使使產(chǎn)生成沉淀或降低溶解性而從溶液中析出，從產(chǎn)生成沉淀或降低溶解性而從溶液中析出，從而獲得有

26、效成分或去除雜質(zhì)的方法。而獲得有效成分或去除雜質(zhì)的方法。 章目錄章目錄l（一）酸堿沉淀法（一）酸堿沉淀法 是一種利用某些成分能在酸（或堿）中溶解，繼而又在是一種利用某些成分能在酸（或堿）中溶解，繼而又在堿（或酸）中生成沉淀的性質(zhì)達到分離的方法。堿（或酸）中生成沉淀的性質(zhì)達到分離的方法。 操作技術(shù)：操作技術(shù)： 往提取液中加入適量酸水（或堿水），將欲分離成分處往提取液中加入適量酸水（或堿水），將欲分離成分處理成鹽溶解于酸水（或堿水）中，然后再加入適量堿水（或理成鹽溶解于酸水（或堿水）中，然后再加入適量堿水（或酸水），使欲分離成分恢復(fù)原來的結(jié)構(gòu)，形成沉淀析出，最酸水），使欲分離成分恢復(fù)原來的結(jié)構(gòu)，形

27、成沉淀析出，最后可以離心或利用與水不相混溶的有機溶劑把這些化學(xué)成分后可以離心或利用與水不相混溶的有機溶劑把這些化學(xué)成分萃取分離獲得。萃取分離獲得。 三、沉淀法三、沉淀法章目錄章目錄l（二）試劑沉淀法（二）試劑沉淀法 是一種利用一些成分能與某些試劑產(chǎn)生沉淀的性質(zhì)，或是一種利用一些成分能與某些試劑產(chǎn)生沉淀的性質(zhì)，或利用某些成分在不同溶劑中溶解度的差異，通過加入特定試利用某些成分在不同溶劑中溶解度的差異，通過加入特定試劑或溶劑，使生成沉淀，與其他成分分離的方法。劑或溶劑，使生成沉淀，與其他成分分離的方法。 操作技術(shù)：操作技術(shù)： 向提取液中加入某些特定試劑或溶劑，使欲分離成分與向提取液中加入某些特定試

28、劑或溶劑，使欲分離成分與試劑生成沉淀或因溶解度降低而沉淀析出，待完全沉淀后，試劑生成沉淀或因溶解度降低而沉淀析出，待完全沉淀后，濾過即得。濾過即得。 三、沉淀法三、沉淀法章目錄章目錄四、結(jié)晶與重結(jié)晶法四、結(jié)晶與重結(jié)晶法是利用混合物中各種成分在溶劑中溶解度的差是利用混合物中各種成分在溶劑中溶解度的差別，使所需成分以結(jié)晶狀態(tài)析出，再進一步純別，使所需成分以結(jié)晶狀態(tài)析出，再進一步純化處理，以達到分離精制目的的分離方法。化處理，以達到分離精制目的的分離方法。 章目錄章目錄 選擇合適的溶劑是結(jié)晶法的關(guān)鍵。選擇合適的溶劑是結(jié)晶法的關(guān)鍵。 理想的溶劑必須具備以下條件：理想的溶劑必須具備以下條件：u 不與結(jié)晶

29、物質(zhì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)；不與結(jié)晶物質(zhì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)；u 對結(jié)晶物質(zhì)的溶解度隨溫度不同有顯著差異，熱時溶對結(jié)晶物質(zhì)的溶解度隨溫度不同有顯著差異，熱時溶解度大，冷時溶解度??；解度大，冷時溶解度?。籾 對可能存在的雜質(zhì)溶解度非常大或非常?。蠢錈峋鶎赡艽嬖诘碾s質(zhì)溶解度非常大或非常?。蠢錈峋芑蚓蝗埽?；溶或均不溶）；u 沸點適中，不宜過高或過低；沸點適中，不宜過高或過低；u 能給出較好的結(jié)晶。能給出較好的結(jié)晶。 常用的溶劑有水、乙酸、甲醇、乙醇、丙酮、乙常用的溶劑有水、乙酸、甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、三氯甲烷等。當(dāng)不能選擇到一種合適的溶劑酸乙酯、三氯甲烷等。當(dāng)不能選擇到一種合適的溶劑時，通常選用兩種或

30、兩種以上溶劑組成的混合溶劑。時，通常選用兩種或兩種以上溶劑組成的混合溶劑。 四、結(jié)晶與重結(jié)晶法四、結(jié)晶與重結(jié)晶法章目錄章目錄操作技術(shù)：操作技術(shù)：四、結(jié)晶與重結(jié)晶法四、結(jié)晶與重結(jié)晶法制備結(jié)晶溶液制備結(jié)晶溶液趁熱濾過，除去不溶性雜質(zhì)趁熱濾過，除去不溶性雜質(zhì)將濾液放冷，使析出結(jié)晶將濾液放冷，使析出結(jié)晶抽氣濾過，將結(jié)晶從母液中分出抽氣濾過，將結(jié)晶從母液中分出重結(jié)晶重結(jié)晶晶體的干燥晶體的干燥章目錄章目錄難點釋疑難點釋疑結(jié)晶法如何選擇合適的混合溶劑？結(jié)晶法如何選擇合適的混合溶劑？ 選用混合溶劑，最好選擇結(jié)晶成分能在低沸點選用混合溶劑，最好選擇結(jié)晶成分能在低沸點溶劑中易溶解，而在高沸點溶劑中難溶解的兩種混溶

31、劑中易溶解，而在高沸點溶劑中難溶解的兩種混合溶劑，因為低沸點溶劑較易揮發(fā)而逐漸減少在混合溶劑，因為低沸點溶劑較易揮發(fā)而逐漸減少在混合溶劑中的比例，結(jié)晶即可慢慢析出。合溶劑中的比例，結(jié)晶即可慢慢析出。章目錄章目錄五、透析法五、透析法是利用透析膜具有選擇性透過的特點，使提取是利用透析膜具有選擇性透過的特點，使提取液中小分子物質(zhì)可通過透析膜，而大分子物質(zhì)液中小分子物質(zhì)可通過透析膜，而大分子物質(zhì)不能通過，則分子量差異較大的物質(zhì)獲得分離不能通過，則分子量差異較大的物質(zhì)獲得分離的方法。的方法。 章目錄章目錄 操作技術(shù)：操作技術(shù)： 如圖所示，將提取液置透析膜中，如圖所示，將提取液置透析膜中，扎緊口，外面護以

32、尼龍網(wǎng)袋，放入清水扎緊口，外面護以尼龍網(wǎng)袋，放入清水缸中。不斷更換缸內(nèi)的水，使膜內(nèi)外的缸中。不斷更換缸內(nèi)的水，使膜內(nèi)外的濃度差增加，或稍加攪拌或適當(dāng)加溫處濃度差增加，或稍加攪拌或適當(dāng)加溫處理；也可以在近透析膜兩旁處放置兩個理；也可以在近透析膜兩旁處放置兩個電極，稱電透析，通電后使帶電荷離子電極，稱電透析，通電后使帶電荷離子的透析速度增加的透析速度增加1010倍以上，以加快透析倍以上，以加快透析的速度。透析過程中，用定性反應(yīng)對膜的速度。透析過程中，用定性反應(yīng)對膜內(nèi)藥液有效成分或指標成分進行檢查分內(nèi)藥液有效成分或指標成分進行檢查分析，判斷透析是否完全。析，判斷透析是否完全。 五、透析法五、透析法章

33、目錄章目錄六、分餾法六、分餾法是利用各沸點不同的化合物組成的混合物，在分是利用各沸點不同的化合物組成的混合物，在分餾過程中產(chǎn)生高低不同的蒸氣壓，從而收集到不餾過程中產(chǎn)生高低不同的蒸氣壓，從而收集到不同沸點溫度的餾分，達到分離目的的方法。同沸點溫度的餾分，達到分離目的的方法。 章目錄章目錄操作技術(shù)：操作技術(shù)： 實驗室常用簡單分餾裝置如圖所示，操實驗室常用簡單分餾裝置如圖所示，操作時將待分餾的試樣放入圓底燒瓶中，加入作時將待分餾的試樣放入圓底燒瓶中，加入沸石，安裝好裝置后，在分餾柱的外圍盡量沸石，安裝好裝置后，在分餾柱的外圍盡量用石棉繩包住，選擇合適的熱浴加熱。當(dāng)瓶用石棉繩包住，選擇合適的熱浴加熱

34、。當(dāng)瓶內(nèi)液體一開始沸騰時，就要注意調(diào)節(jié)溫度，內(nèi)液體一開始沸騰時，就要注意調(diào)節(jié)溫度，使蒸氣緩慢升入分餾柱。當(dāng)蒸氣進入分流柱使蒸氣緩慢升入分餾柱。當(dāng)蒸氣進入分流柱時，由于柱外空氣的冷卻，部分蒸氣凝成液時，由于柱外空氣的冷卻，部分蒸氣凝成液體，顯然高沸點的組分較易被冷凝，隨著分體，顯然高沸點的組分較易被冷凝，隨著分流柱管的升高，愈向上混合蒸氣中所含高沸流柱管的升高，愈向上混合蒸氣中所含高沸點的組分愈少，到了一定高度時可獲得某一點的組分愈少，到了一定高度時可獲得某一純的組分。待低沸點組分蒸完后，再逐漸升純的組分。待低沸點組分蒸完后，再逐漸升溫，如此進行操作，使不同沸點的組分逐一溫，如此進行操作，使不同

35、沸點的組分逐一分餾出來。分餾出來。 六、分餾法六、分餾法章目錄章目錄課堂活動課堂活動 天然藥物提取液為混合物，根據(jù)成分性質(zhì)的不同，請用連天然藥物提取液為混合物，根據(jù)成分性質(zhì)的不同，請用連線選擇相適應(yīng)的分離方法。線選擇相適應(yīng)的分離方法。系統(tǒng)溶劑萃取法系統(tǒng)溶劑萃取法 從某天然藥物的水提液中加入戊醇獲取皂苷從某天然藥物的水提液中加入戊醇獲取皂苷兩相溶劑萃取法兩相溶劑萃取法 分離未知成分的天然藥物提取液分離未知成分的天然藥物提取液沉淀法沉淀法 去除鹽酸小檗堿粗制品中的雜質(zhì)（已知鹽酸小檗堿熱水去除鹽酸小檗堿粗制品中的雜質(zhì)（已知鹽酸小檗堿熱水 易溶，冷水難溶）易溶，冷水難溶）結(jié)晶法結(jié)晶法 加入雷氏銨鹽從某

36、天然藥物水提液中獲得季銨鹽加入雷氏銨鹽從某天然藥物水提液中獲得季銨鹽透析法透析法 毒芹總堿中的毒芹堿（沸點毒芹總堿中的毒芹堿（沸點166166167167）和羥基毒芹堿）和羥基毒芹堿 （沸點（沸點226226）分餾法分餾法 分離某天然藥物蛋白質(zhì)提取液中的無機鹽和其他小分子分離某天然藥物蛋白質(zhì)提取液中的無機鹽和其他小分子 雜質(zhì)雜質(zhì)章目錄章目錄七、色譜法七、色譜法 色譜法（色譜法（chromatographychromatography），又稱為色譜分離法、層析法），又稱為色譜分離法、層析法，是一種分離、純化和鑒定化合物的物理化學(xué)分離分析方，是一種分離、純化和鑒定化合物的物理化學(xué)分離分析方法。法。

37、 基本原理基本原理: : 是利用混合物中各成分在固定相和移動相中吸附、分是利用混合物中各成分在固定相和移動相中吸附、分配及其親和力的差異而達到分離。配及其親和力的差異而達到分離。章目錄章目錄色譜法的分類色譜法的分類 依據(jù)依據(jù)分類分類按固定相或支持劑按固定相或支持劑種類不同種類不同氧化鋁色譜、硅膠色譜、聚酰胺色譜氧化鋁色譜、硅膠色譜、聚酰胺色譜、凝膠、凝膠 色譜等色譜等按移動相種類不同按移動相種類不同氣相色譜、液相色譜氣相色譜、液相色譜按色譜原理不同按色譜原理不同吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜、凝膠色譜等、凝膠色譜等按操作方式不同按操作方式不同柱色譜、紙色譜、薄

38、層色譜等柱色譜、紙色譜、薄層色譜等七、色譜法七、色譜法章目錄章目錄被分離化合物與相應(yīng)選擇的色譜方法被分離化合物與相應(yīng)選擇的色譜方法 被分離化合物被分離化合物可選用色譜可選用色譜生物堿類生物堿類一般生物堿一般生物堿硅膠、氧化鋁柱色譜硅膠、氧化鋁柱色譜極性較大的生物堿極性較大的生物堿分配色譜分配色譜季銨型水溶性生物堿季銨型水溶性生物堿分配色譜、離子交換色譜分配色譜、離子交換色譜皂苷類、強心苷類皂苷類、強心苷類分配色譜、硅膠吸附色譜分配色譜、硅膠吸附色譜揮發(fā)油、甾體、萜類揮發(fā)油、甾體、萜類硅膠、氧化鋁色譜硅膠、氧化鋁色譜黃酮類、鞣黃酮類、鞣質(zhì)質(zhì)聚酰胺吸附色譜聚酰胺吸附色譜有機酸、氨基酸有機酸、氨基酸

39、離子交換色譜、分配色譜、活性炭離子交換色譜、分配色譜、活性炭吸附色譜吸附色譜蛋白質(zhì)、多肽、多糖類蛋白質(zhì)、多肽、多糖類凝膠濾過色譜凝膠濾過色譜七、色譜法七、色譜法章目錄章目錄（一）柱色譜法（一）柱色譜法 是一種將分離材料裝入柱狀容器中，以適當(dāng)?shù)南疵搫┻M是一種將分離材料裝入柱狀容器中，以適當(dāng)?shù)南疵搫┻M行洗脫而使不同成分得到分離的色譜分離方法，也是色譜法行洗脫而使不同成分得到分離的色譜分離方法，也是色譜法最早出現(xiàn)的形式，可用于分離天然藥物中各種化學(xué)成分。最早出現(xiàn)的形式，可用于分離天然藥物中各種化學(xué)成分。 l 1 1吸附柱色譜法吸附柱色譜法 是一種在柱狀容器中操作，利用作為固定相的吸附劑對是一種在柱狀

40、容器中操作，利用作為固定相的吸附劑對混合物中各種成分吸附能力的大小不同，使各成分得到相互混合物中各種成分吸附能力的大小不同，使各成分得到相互分離的方法。分離的方法。 七、色譜法七、色譜法章目錄章目錄l1 1吸附柱色譜法吸附柱色譜法 （1 1）基本原理：）基本原理： 當(dāng)混合物成分到達作為固定相的吸附劑表面時，由于當(dāng)混合物成分到達作為固定相的吸附劑表面時，由于吸附劑表面與成分分子的吸附作用，產(chǎn)生了成分分子在吸吸附劑表面與成分分子的吸附作用，產(chǎn)生了成分分子在吸附劑表面濃度增大的吸附現(xiàn)象；當(dāng)移動相連續(xù)通過吸附劑附劑表面濃度增大的吸附現(xiàn)象；當(dāng)移動相連續(xù)通過吸附劑表面時，由于移動相與混合物成分爭奪吸附劑活

41、性表面，表面時，由于移動相與混合物成分爭奪吸附劑活性表面，產(chǎn)生了成分分子溶解于移動相的解吸附現(xiàn)象；隨著移動相產(chǎn)生了成分分子溶解于移動相的解吸附現(xiàn)象；隨著移動相的移動，混合物在不斷進行著吸附的移動，混合物在不斷進行著吸附- -解吸附的可逆過程，利解吸附的可逆過程，利用各成分在兩相中遷移速度的不同而達到分離。用各成分在兩相中遷移速度的不同而達到分離。 七、色譜法七、色譜法章目錄章目錄l1 1吸附柱色譜法吸附柱色譜法 （2 2）常用的吸附劑：吸附劑有氧化鋁、硅膠、硅藻土、氧常用的吸附劑：吸附劑有氧化鋁、硅膠、硅藻土、氧化鎂、碳酸鈣、聚酰胺和活性炭等，常用的有以下幾種：化鎂、碳酸鈣、聚酰胺和活性炭等，

42、常用的有以下幾種： 1 1）硅膠）硅膠 2 2）氧化鋁）氧化鋁 3 3）聚酰胺）聚酰胺 4 4）活性炭）活性炭 七、色譜法七、色譜法章目錄章目錄 1 1）硅膠）硅膠 硅膠是一種微呈酸性的多孔性物質(zhì)。常用硅膠是一種微呈酸性的多孔性物質(zhì)。常用SiOSiO2 2xHxH2 2O O表表示，為硅氧烷交鏈結(jié)構(gòu)：示，為硅氧烷交鏈結(jié)構(gòu)： OSiOSiOHOOOO 其骨架表面具有很多硅醇基，使硅膠能與許多化合其骨架表面具有很多硅醇基，使硅膠能與許多化合物形成氫鍵而產(chǎn)生吸附作用。游離硅醇基數(shù)目的多少決物形成氫鍵而產(chǎn)生吸附作用。游離硅醇基數(shù)目的多少決定了硅膠吸附作用的強弱。硅醇基也容易通過氫鍵與水定了硅膠吸附作用

43、的強弱。硅醇基也容易通過氫鍵與水結(jié)合，隨著含水量的增加，硅膠表面的游離硅醇基數(shù)目結(jié)合，隨著含水量的增加，硅膠表面的游離硅醇基數(shù)目減少，硅膠吸附其他化合物的能力便隨之減弱。減少，硅膠吸附其他化合物的能力便隨之減弱。 七、色譜法七、色譜法章目錄章目錄 2 2）氧化鋁）氧化鋁 氧化鋁是一種吸附力很強的親水性吸附劑，有酸性、氧化鋁是一種吸附力很強的親水性吸附劑，有酸性、堿性、中性三種規(guī)格。其吸附活性也與含水量有關(guān)，隨著堿性、中性三種規(guī)格。其吸附活性也與含水量有關(guān)，隨著含水量的增加，吸附能力減弱。含水量的增加，吸附能力減弱。 七、色譜法七、色譜法章目錄章目錄硅膠、氧化鋁活度與含水量關(guān)系硅膠、氧化鋁活度與

44、含水量關(guān)系 活度等級含水量%硅膠氧化鋁005315625103815七、色譜法七、色譜法章目錄章目錄 3 3）聚酰胺）聚酰胺 聚酰胺是由酰胺聚合而成的一類高分子化合物。商品聚酰胺是由酰胺聚合而成的一類高分子化合物。商品名又稱為綿綸、尼龍。色譜分離常用聚己內(nèi)酰胺（綿綸名又稱為綿綸、尼龍。色譜分離常用聚己內(nèi)酰胺（綿綸6 6）和聚己二酰己二胺（綿綸和聚己二酰己二胺（綿綸6666），其中聚己內(nèi)酰胺可用結(jié)構(gòu)），其中聚己內(nèi)酰胺可用結(jié)構(gòu)式表示為：式表示為： CH3NCCH2H2CCH2H2CCH2H3COHn七、色譜法七、色譜法章目錄章目錄 3 3）聚酰胺）聚酰胺 移動相移動相聚酰胺吸附色譜的原理聚酰胺吸附

45、色譜的原理固定相固定相七、色譜法七、色譜法章目錄章目錄 3 3）聚酰胺）聚酰胺 聚酰胺對化合物吸附力的強弱取決于形成氫鍵的能力，聚酰胺對化合物吸附力的強弱取決于形成氫鍵的能力，形成氫鍵的能力受以下因素影響：形成氫鍵的能力受以下因素影響： 溶劑的種類：聚酰胺形成氫鍵的能力在水中最強，在溶劑的種類：聚酰胺形成氫鍵的能力在水中最強，在有機溶劑中較弱，在堿性溶劑中最弱。若應(yīng)用各種溶劑在聚有機溶劑中較弱，在堿性溶劑中最弱。若應(yīng)用各種溶劑在聚酰胺柱色譜中作為洗脫劑，則洗脫能力的順序如下：水甲酰胺柱色譜中作為洗脫劑，則洗脫能力的順序如下：水甲醇或乙醇丙酮稀氫氧化鈉液或稀氨溶液甲酰胺或二甲醇或乙醇丙酮稀氫氧化

46、鈉液或稀氨溶液甲酰胺或二甲基甲酰胺尿素水溶液。基甲酰胺尿素水溶液。 化合物分子結(jié)構(gòu)：在含水溶劑中，化合物分子結(jié)構(gòu)對化合物分子結(jié)構(gòu)：在含水溶劑中，化合物分子結(jié)構(gòu)對氫鍵締合的影響有以下幾點規(guī)律：氫鍵締合的影響有以下幾點規(guī)律：七、色譜法七、色譜法章目錄章目錄 3 3）聚酰胺）聚酰胺 A.A.化合物分子中能形成氫鍵的基團數(shù)目越多，被化合物分子中能形成氫鍵的基團數(shù)目越多，被聚酰胺吸附越強。如：聚酰胺吸附越強。如： 七、色譜法七、色譜法章目錄章目錄 3 3）聚酰胺）聚酰胺 B.B.形成氫鍵的基團所處位置不同，被吸附的強度也不同。如：形成氫鍵的基團所處位置不同，被吸附的強度也不同。如： C.C.分子中芳香核

47、、共軛雙鍵多者被吸附強度大，少者則被吸分子中芳香核、共軛雙鍵多者被吸附強度大，少者則被吸附強度小。附強度小。 如：如：七、色譜法七、色譜法章目錄章目錄 3 3）聚酰胺）聚酰胺 D.D.能形成分子內(nèi)氫鍵者被吸附強度減小。能形成分子內(nèi)氫鍵者被吸附強度減小。 如：如：七、色譜法七、色譜法章目錄章目錄 4 4）活性炭）活性炭 活性炭是一種非極性吸附劑，具有較強的吸附能力，活性炭是一種非極性吸附劑，具有較強的吸附能力， 其其吸附能力受溶劑的影響，在水溶液中的吸附力最強，在有機吸附能力受溶劑的影響，在水溶液中的吸附力最強，在有機溶劑中吸附力較弱。在一定條件下，對不同物質(zhì)的吸附力也溶劑中吸附力較弱。在一定條

48、件下，對不同物質(zhì)的吸附力也有差別。一般對極性基團多的化合物的吸附力大于極性基團有差別。一般對極性基團多的化合物的吸附力大于極性基團少的化合物；對芳香族化合物的吸附力大于脂肪族化合物；少的化合物；對芳香族化合物的吸附力大于脂肪族化合物；對分子量大的化合物的吸附力大于分子量小的化合物。對分子量大的化合物的吸附力大于分子量小的化合物。七、色譜法七、色譜法章目錄章目錄l1 1吸附柱色譜法吸附柱色譜法 （3 3）移動相：用吸附柱色譜法分離混合物，選擇何種溶劑移動相：用吸附柱色譜法分離混合物，選擇何種溶劑為移動相對分離效果有極大的影響。所選移動相溶劑應(yīng)具為移動相對分離效果有極大的影響。所選移動相溶劑應(yīng)具備

49、純度高，不含水分；與試樣、吸附劑不起化學(xué)反應(yīng)；對備純度高，不含水分；與試樣、吸附劑不起化學(xué)反應(yīng)；對被分離成分有適當(dāng)?shù)娜芙舛?；黏度小；易揮散等條件。對被分離成分有適當(dāng)?shù)娜芙舛?；黏度小；易揮散等條件。對于極性吸附劑，若選擇的移動相溶劑極性越大，則其展開于極性吸附劑，若選擇的移動相溶劑極性越大，則其展開或洗脫能力就越強；對于非極性吸附劑，則剛好相反，選或洗脫能力就越強；對于非極性吸附劑，則剛好相反，選擇的移動相溶劑極性越小，其展開或洗脫能力就越強。具擇的移動相溶劑極性越小，其展開或洗脫能力就越強。具體選擇時，尚需結(jié)合被分離物質(zhì)的極性來綜合考慮。體選擇時，尚需結(jié)合被分離物質(zhì)的極性來綜合考慮。 七、色譜

50、法七、色譜法章目錄章目錄l1 1吸附柱色譜法吸附柱色譜法 （4 4）被分離物質(zhì)：被分離成分、吸附劑、移動相三者為組被分離物質(zhì)：被分離成分、吸附劑、移動相三者為組成吸附柱色譜必不可少的要素，被分離成分的結(jié)構(gòu)和極性成吸附柱色譜必不可少的要素，被分離成分的結(jié)構(gòu)和極性大小決定了其與吸附劑、移動相之間的相互作用。對于極大小決定了其與吸附劑、移動相之間的相互作用。對于極性吸附劑，被分離物質(zhì)的極性越大，被吸附越強，移動相性吸附劑，被分離物質(zhì)的極性越大，被吸附越強，移動相進行洗脫就越困難?；衔锏臉O性與其官能團的種類、數(shù)進行洗脫就越困難?；衔锏臉O性與其官能團的種類、數(shù)目及位置有關(guān)，同時也應(yīng)注意考慮分子中電效

51、應(yīng)、立體效目及位置有關(guān)，同時也應(yīng)注意考慮分子中電效應(yīng)、立體效應(yīng)等因素的影響。應(yīng)等因素的影響。七、色譜法七、色譜法章目錄章目錄l1 1吸附柱色譜法吸附柱色譜法 （4 4）被分離物質(zhì)：被分離物質(zhì)：常見一些化合物官能團的極性大小順序如下：常見一些化合物官能團的極性大小順序如下： （烷烴烯烴芳烴）（鹵烴）RHRXOCH3COORCHOSHNH2OHArOHCOOH C O 七、色譜法七、色譜法章目錄章目錄l1 1吸附柱色譜法吸附柱色譜法 被分離成分、吸附劑、移動相三者關(guān)系密不可分，一被分離成分、吸附劑、移動相三者關(guān)系密不可分，一般而言，極性吸附劑如硅膠、氧化鋁等適用于分離親脂性般而言，極性吸附劑如硅膠

52、、氧化鋁等適用于分離親脂性成分，非極性吸附劑如活性炭適用于分離親水性成分。若成分，非極性吸附劑如活性炭適用于分離親水性成分。若被分離物質(zhì)的極性較大，可選用活度較低的吸附劑，而移被分離物質(zhì)的極性較大，可選用活度較低的吸附劑，而移動相的極性較大；若被分離物質(zhì)的極性較小，可選用活度動相的極性較大；若被分離物質(zhì)的極性較小，可選用活度較高的吸附劑，而移動相的極性較小。具體應(yīng)用時，需全較高的吸附劑，而移動相的極性較小。具體應(yīng)用時，需全面考慮吸附劑、移動相及被分離成分三者間相互聯(lián)系又相面考慮吸附劑、移動相及被分離成分三者間相互聯(lián)系又相互制約的關(guān)系，選擇合適的條件，使達到分離的目的。互制約的關(guān)系，選擇合適的條

53、件，使達到分離的目的。 七、色譜法七、色譜法章目錄章目錄l1 1吸附柱色譜法吸附柱色譜法 （5）操作技術(shù)）操作技術(shù)： 選擇色譜柱選擇色譜柱 裝柱裝柱 上樣上樣 洗脫洗脫 收集洗脫液收集洗脫液七、色譜法七、色譜法章目錄章目錄課堂活動課堂活動 模擬實驗室硅膠柱色譜操作，取一色譜柱和模擬實驗室硅膠柱色譜操作，取一色譜柱和適量硅膠，學(xué)生練習(xí)濕法裝柱，敘述操作步驟及適量硅膠，學(xué)生練習(xí)濕法裝柱，敘述操作步驟及操作過程中的注意事項；教師針對崗位工作，講操作過程中的注意事項；教師針對崗位工作，講解實際應(yīng)用。解實際應(yīng)用。章目錄章目錄l2 2分配柱色譜法分配柱色譜法 是一種在柱狀容器中操作，利用混合物中各成分在互

54、是一種在柱狀容器中操作，利用混合物中各成分在互不相溶的兩相溶劑中分配系數(shù)的不同，來達到分離的色譜不相溶的兩相溶劑中分配系數(shù)的不同，來達到分離的色譜分離方法。分離方法。 （1）基本原理：分配柱色譜的基本原理與兩相逆流萃取法）基本原理：分配柱色譜的基本原理與兩相逆流萃取法相同。兩相溶劑中的一相需作為固定相，常以某種惰性固相同。兩相溶劑中的一相需作為固定相，常以某種惰性固體吸住該相溶劑，使之固定，這種吸著了固定相溶劑的固體吸住該相溶劑，使之固定，這種吸著了固定相溶劑的固體物質(zhì)稱為支持劑（也稱載體或擔(dān)體）；另一相溶劑則作體物質(zhì)稱為支持劑（也稱載體或擔(dān)體）；另一相溶劑則作為移動相。進行分離時，將被分離的

55、混合物配成試樣溶液為移動相。進行分離時，將被分離的混合物配成試樣溶液加到固定相上，通過移動相的流動，使試樣中各成分在兩加到固定相上，通過移動相的流動，使試樣中各成分在兩相之間的分配不同而獲得分離。相之間的分配不同而獲得分離。七、色譜法七、色譜法章目錄章目錄l2 2分配柱色譜法分配柱色譜法 分配柱色譜根據(jù)固定相與移動相的極性不同又可分為正相分配柱色譜根據(jù)固定相與移動相的極性不同又可分為正相分配色譜和反相分配色譜。以極性大的溶劑（如水或親水分配色譜和反相分配色譜。以極性大的溶劑（如水或親水性溶劑）為固定相，極性小的溶劑為移動相的分配色譜稱性溶劑）為固定相，極性小的溶劑為移動相的分配色譜稱為正相分配

56、色譜，固定相常用水或緩沖液，移動相則采用為正相分配色譜，固定相常用水或緩沖液，移動相則采用三氯甲烷、乙酸乙酯、丁醇等弱極性有機溶劑。而以極性三氯甲烷、乙酸乙酯、丁醇等弱極性有機溶劑。而以極性小的溶劑（如三氯甲烷、石油醚等親脂性有機溶劑）為固小的溶劑（如三氯甲烷、石油醚等親脂性有機溶劑）為固定相，移動相溶劑卻極性較大的分配色譜則稱為反相分配定相，移動相溶劑卻極性較大的分配色譜則稱為反相分配色譜，固定相可選用石蠟油，移動相可選擇水或甲醇。色譜，固定相可選用石蠟油，移動相可選擇水或甲醇。七、色譜法七、色譜法章目錄章目錄l2 2分配柱色譜法分配柱色譜法 （2 2）支持劑：在分配柱色譜中，作為支持劑的固

57、）支持劑：在分配柱色譜中，作為支持劑的固體物質(zhì)要求其本身無吸附作用，不溶于兩相溶劑體物質(zhì)要求其本身無吸附作用，不溶于兩相溶劑中，不與被分離物質(zhì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，但能吸著一中，不與被分離物質(zhì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，但能吸著一定量的固定相，且移動相能自由通過卻不改變其定量的固定相，且移動相能自由通過卻不改變其組成。常用的有吸水硅膠、硅藻土、纖維素粉和組成。常用的有吸水硅膠、硅藻土、纖維素粉和濾紙等。濾紙等。七、色譜法七、色譜法章目錄章目錄l2 2分配柱色譜法分配柱色譜法 （3 3）溶劑系統(tǒng)：分配色譜中的固定相和移動相是由二元或）溶劑系統(tǒng)：分配色譜中的固定相和移動相是由二元或三元甚至三元以上溶劑按一定比例組成的復(fù)

58、合兩相溶劑系三元甚至三元以上溶劑按一定比例組成的復(fù)合兩相溶劑系統(tǒng)。選擇適當(dāng)?shù)娜軇┫到y(tǒng)，可提高分離的效率。常用紙色統(tǒng)。選擇適當(dāng)?shù)娜軇┫到y(tǒng)，可提高分離的效率。常用紙色譜摸索具體的分離條件，尋找合適的溶劑系統(tǒng)。譜摸索具體的分離條件，尋找合適的溶劑系統(tǒng)。 （4 4）被分離物質(zhì)：一般在正相分配色譜中，因移動相極性）被分離物質(zhì)：一般在正相分配色譜中，因移動相極性較固定相極性小，故被分離物質(zhì)中極性較小的成分隨移動較固定相極性小，故被分離物質(zhì)中極性較小的成分隨移動相遷移速度較快；反之，在反相分配色譜中，被分離物質(zhì)相遷移速度較快；反之，在反相分配色譜中，被分離物質(zhì)中極性較大的成分隨移動相遷移速度較快。中極性較大

59、的成分隨移動相遷移速度較快。 七、色譜法七、色譜法章目錄章目錄難點釋疑難點釋疑 如何正確理解分配柱色譜法中固定相、移動相與被分離如何正確理解分配柱色譜法中固定相、移動相與被分離物質(zhì)三者間的關(guān)系？物質(zhì)三者間的關(guān)系？ 對于正相分配色譜，常選用極性大的溶劑（如水、緩沖對于正相分配色譜，常選用極性大的溶劑（如水、緩沖溶液或親水性溶劑等）為固定相，極性小的溶劑（如三氯甲溶液或親水性溶劑等）為固定相，極性小的溶劑（如三氯甲烷、乙酸乙酯、丁醇等）為移動相，用于極性較大的化合物烷、乙酸乙酯、丁醇等）為移動相，用于極性較大的化合物如生物堿、苷類、酚性物質(zhì)、有機酸和糖類等的分離，被分如生物堿、苷類、酚性物質(zhì)、有機

60、酸和糖類等的分離，被分離物質(zhì)中極性較小的成分隨移動相遷移速度較快；對于反相離物質(zhì)中極性較小的成分隨移動相遷移速度較快；對于反相分配色譜，常選用極性小的溶劑（如三氯甲烷、石油醚等親分配色譜，常選用極性小的溶劑（如三氯甲烷、石油醚等親脂性有機溶劑等）為固定相，極性大的溶劑（如水或甲醇等脂性有機溶劑等）為固定相，極性大的溶劑（如水或甲醇等）為移動相，用于極性較小的化合物的分離，被分離物質(zhì)中）為移動相，用于極性較小的化合物的分離，被分離物質(zhì)中極性較大的成分隨移動相遷移速度較快。極性較大的成分隨移動相遷移速度較快。 章目錄章目錄l3. 3. 離子交換柱色譜法離子交換柱色譜法 是一種利用離子交換樹脂上的功