實(shí)驗(yàn)三黃連中鹽酸小檗堿的提取分離與鑒定

1、實(shí)驗(yàn)三 黃連中鹽酸小檗堿的提取分離與鑒定小檗堿又稱黃連素，是在高等植物中分布比較廣泛的、有明顯生理活性的化學(xué)成分。主要存在于黃連、黃柏、三顆針等中草藥中。小檗堿具有顯著的抗微生物、抗原蟲的作用，臨床用其鹽酸鹽（即鹽酸黃連素）治療細(xì)菌性感染如痢疾、急性腸胃炎、呼吸道感染等癥。黃連為毛茛科黃連屬植物黃連（Coptis chinensis Franch。），三角葉黃連（C。deltoidea C。 Y。Cheng et Hsiao）或云連（C。teetoides C。Y。 Cheng）的根莖，含有小檗堿(1)、巴馬汀(2)、黃連堿(3)、甲基黃連堿(4)、藥根堿(5)等生物堿，其中以小檗堿含量最高，

2、可達(dá)10%左右，小檗堿以鹽酸鹽的形式存在于黃連中。目前制藥工業(yè)提取小檗堿主要以三顆針為原料。三顆針來源于小檗科小檗屬（Berberis）多種植物，其根皮含生物堿約2%，主要含小檗堿、小檗胺、藥根堿、巴馬汀等生物堿。 R1 R2 R3 R4 R51R1OR2OR5£-OR3OR4+3 CH3 HCH2CH3 CH3 CH3 CH3 HCH2CH2CH2CH23H CH3 CH3 CH3 H2345小檗堿 (Berberine)屬異喹啉類生物堿，自水和乙醇中結(jié)晶出來的小檗堿為黃色長(zhǎng)針狀結(jié)晶，含5個(gè)結(jié)晶水，在100干燥時(shí)即失去結(jié)晶水，轉(zhuǎn)為棕黃色，加熱至110時(shí)，其顏色加深變暗色。Mp.14

3、5至160即分解。OCH3H3NHOCH3OH小檗胺H3COHCH3游離小檗堿能緩緩溶于水，在熱水及熱乙醇中易溶，而在冷乙醇中溶解度為1：100，但難溶于苯、氯仿、丙酮等溶劑。醇式和醛式小檗堿則具有一般生物堿的通性，難溶于水，易溶于有機(jī)溶劑。小檗堿的鹽類除中性硫酸鹽、磷酸鹽外，一般在水中的溶解度均較小。小檗堿及其鹽類在水、乙醇中的溶解度如下表：小檗堿還能與苯、氯仿、丙酮等溶劑結(jié)合成分子縮合物，有完好的結(jié)晶狀態(tài)，可作為小檗堿的識(shí)別之用。如用過量的氫氧化鈉處理小檗堿鹽類，使其轉(zhuǎn)變?yōu)榇际叫￠迚A，就能與丙酮縮合成結(jié)晶型的丙酮小檗堿。一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?. 學(xué)會(huì)從黃連中提取、精制鹽酸小檗堿的方法； 2. 學(xué)會(huì)

4、小檗堿的化學(xué)與色譜檢識(shí)方法。二、實(shí)驗(yàn)原理利用小檗堿的硫酸鹽在水中的溶解度較大，而鹽酸鹽幾乎不溶于水的性質(zhì)，先將藥材中的小檗堿轉(zhuǎn)變?yōu)榱蛩猁}用水提出；再使其轉(zhuǎn)化為鹽酸鹽，結(jié)合鹽析法降低其在水中的溶解度，制得鹽酸小檗堿。三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容（一）鹽酸小檗堿的提取1.潤(rùn)濕取黃連粗粉50g置燒杯中，加0.3%硫酸約10ml潤(rùn)濕，放置30min2.裝筒（分次裝入滲漉筒并排氣）3.浸漬用0.3%硫酸浸泡過夜4.滲漉收集910倍量的滲漉液等待空余時(shí)間：10g硅膠G + 30ml(0.8 % CMC-Na)研勻，鋪板（二）分離1.取滲漉液，加40% NaOH調(diào)PH至1112，放置過夜；2.抽濾，將濾液加濃鹽酸調(diào)PH值2

5、3，加入6% NaCl，攪拌均勻，放置過夜；3.抽濾(盡量抽干),濾取結(jié)晶,即得鹽酸小檗堿粗品。（三）精制1.將上述粗品放入25倍量沸水中，于水浴上加熱使溶解，趁熱過濾液在65時(shí)加濃鹽酸調(diào)PH值23，放置過夜2.抽濾(盡量抽干),濾取結(jié)晶,即得鹽酸小檗堿精品。（四）檢識(shí)1. 取自制精制鹽酸小檗堿 50mg，加水 5ml，緩緩加熱溶解后，加氫氧化鈉試液2滴顯橙紅色，放冷，加丙酮4滴，即發(fā)生渾濁，放置后，生成黃色沉淀，即為丙酮小檗堿。2. 取自制精制鹽酸小檗堿少許，加入稀硫酸8ml溶解，攪拌均勻，分置兩支試管中，一支加漂白粉少量，即顯櫻紅色；另一支加入2滴濃硝酸,也顯櫻紅色。3. 取自制精制鹽酸小檗堿少許，加稀硫酸12m1使溶解，分置于三支試管中，分別加入碘化汞鉀試劑、碘化鉍鉀試劑及硅鎢酸試劑，觀察其產(chǎn)生的現(xiàn)象。4. 鹽酸小檗堿的薄層層析吸附劑：硅膠G硬板(未活化)樣 品：自制精制鹽酸小檗堿乙醇溶液鹽酸小檗