植物病害標(biāo)本的采集制作與保存(一)

1、植物病害標(biāo)本的采集制作與保存(一)    摘要:植物病害標(biāo)本是植物病理學(xué)實(shí)驗(yàn)對(duì)病害癥狀最好的描述。因此,病害標(biāo)本的采集、制作和保存是植物病理學(xué)科實(shí)驗(yàn)教學(xué)中必不可少的基礎(chǔ)知識(shí)和技能。探討了不同類型的植物病害標(biāo)本的采集、制作和保存技巧。 關(guān)鍵詞:植物病害標(biāo)本;采集;制作;保存 植物病害標(biāo)本是高等農(nóng)業(yè)院校植物病理學(xué)科本科教學(xué)不可缺少的實(shí)物,它在教學(xué)中具有直觀、不受季節(jié)和區(qū)域限制的特點(diǎn)。因此,植物病害標(biāo)本的采集、制作和保存是植物病理學(xué)科實(shí)驗(yàn)教學(xué)中必不可少的基礎(chǔ)知識(shí)和技能。 1植物病害標(biāo)本的采集 在北方由于季節(jié)分明,作物品種豐富,植物病害發(fā)生頻繁,大部分的植物病害

2、標(biāo)本都能從田間采集到。但是,病害的發(fā)生有一定的規(guī)律,要充分掌握病害發(fā)生的季節(jié)規(guī)律及寄主的生長(zhǎng)規(guī)律才能收獲癥狀特征比較典型的標(biāo)本。由于本科教學(xué)所用的標(biāo)本大部分來(lái)源于學(xué)生的實(shí)習(xí),因此大部分都是來(lái)源于大田采集。 1.1病害標(biāo)本采集的工具 植物病害大多發(fā)生在根、莖、葉和果實(shí)上,因此所用工具要針對(duì)不同的部位,常用的工具有刀、剪、鋤、鋸等,還有標(biāo)本夾、標(biāo)本箱、標(biāo)本紙、小玻瓶、紙袋、標(biāo)簽和記錄本等1。 1.2標(biāo)本的采集 大田采集主要分為按季節(jié)采集和按寄主采集。按季節(jié)采集主要是針對(duì)每年只在特定時(shí)期發(fā)生的病害。如白粉病具有性階段,小麥白粉病多在每年56月能夠采集到;植物的灰霉病則在低溫陰雨的條件下容易發(fā)病,每年

3、35月最容易采到。按寄主采集主要針對(duì)寄主范圍廣泛的病害,如霜霉病,可以在很多植物病害的葉片上發(fā)現(xiàn),常見(jiàn)的有萵苣、葡萄、白菜等;疫病如番茄、馬鈴薯、辣椒疫病等2。 1.3采集標(biāo)本的記錄 為了區(qū)分采集的不同的標(biāo)本,采集時(shí)要進(jìn)行記載。主要包括寄主名稱、時(shí)間和地點(diǎn)、采集人姓名、主要發(fā)生情況和必要的生態(tài)環(huán)境因子。 2植物病害標(biāo)本的制作 采集的標(biāo)本通過(guò)鑒定以后,除去作為分離用的標(biāo)本外,一般都用干燥法或浸漬法進(jìn)行保存,要求能夠盡量保存標(biāo)本的本來(lái)性狀。一些微小的可以做成玻片標(biāo)本,比較難以保存的和特殊的標(biāo)本可通過(guò)多媒體掃描系統(tǒng)或顯微系統(tǒng)存入計(jì)算機(jī)中,制成相應(yīng)的文體圖形、動(dòng)畫(huà)、視頻圖像等3。 2.1標(biāo)本干燥制作法

4、 2.1.1壓制法。采到的植物病害標(biāo)本,若干燥后容易卷縮的(如稻葉),最好隨采隨壓。其他的可以放到采集箱內(nèi)帶回去后壓在吸水紙中,用標(biāo)本夾夾緊,日曬任其干燥。在此期間,要經(jīng)常更換標(biāo)本紙。夏季溫度和濕度較高,容易使標(biāo)本發(fā)霉變色,標(biāo)本紙要勤更換。通常前34 d換12次/d,以后23 d換1次,至標(biāo)本完全干燥。 2.1.2燙干法或硅膠烘干法。不準(zhǔn)備作為分離用的標(biāo)本可以采用此2種方法。為了加快標(biāo)本的干燥速度,更好地保持標(biāo)本原有的色澤,可以將剛采集的標(biāo)本放在吸水紙或布中用電熨斗來(lái)回迅速燙干或?qū)⑵浼虞d草紙和干燥過(guò)的硅膠粉的標(biāo)本夾中捆緊,放入50 烘箱中23 d,使其很快干燥4。 2.1.3微波爐干燥保色法。

5、為了彌補(bǔ)燙干法的不足之處,劉春元等(2003)報(bào)道了根據(jù)植物病害標(biāo)本的質(zhì)地,摸索了一套微波干燥保色法。此法干燥迅速,保色效果較佳,可長(zhǎng)期保存而不褪色。如豆科植物病葉處理1 min,效果最佳,癥狀保存完好5。 2.1.4冷凍干燥法。是目前比較好的方法。標(biāo)本在冷凍的情況下干燥,幾乎能完全保持原有的色澤和形狀。 2.1.5自然干燥法。水分很少的標(biāo)本如枝干病害的枝條等,不需要采取任何干燥的手段,在空氣中自然干燥即可。 2.2浸漬標(biāo)本制作法 對(duì)于果實(shí)病害和汁液較多的病害以及肉質(zhì)的子囊菌和擔(dān)子菌的子實(shí)體,均可以采用浸漬法保存。但此方法占的面積大,保存時(shí)間有限,只能用于保存少量的標(biāo)本,這些標(biāo)本大多用于教學(xué)和

6、示范。浸漬標(biāo)本的制作,需要配備各種類型的浸漬液,主要包括各種保持原本顏色的保存液和防腐的保存液。 2.2.1保色浸漬液的配制。根據(jù)植物果實(shí)病害的寄主植物的顏色,可將保色的浸漬液分為保存綠色浸漬液、保存黃色和桔色的浸漬液、保存紅色的浸漬液等。保存綠色的浸漬液。保存綠色的浸漬液很多,要根據(jù)不同的植物病害標(biāo)本選擇適當(dāng)?shù)姆椒?才能達(dá)到好的效果。如醋酸銅浸漬液:將醋酸銅結(jié)晶逐漸加在50%的醋酸溶液中,到不再溶解為止,原液要根據(jù)標(biāo)本顏色的不同將其用水稀釋34倍,然后使用。將標(biāo)本加入到煮沸的稀釋液中,繼續(xù)加熱,標(biāo)本的綠色開(kāi)始褪去,經(jīng)34 min,使綠色恢復(fù)后,將其取出,用清水沖凈,保存于5%的福爾馬林溶液中

7、,或壓制成干燥的標(biāo)本。這種方法保色效果良好,但與原色稍有出入。不能煮的如淡綠色蘋(píng)果、梨、綠色葡萄等的病害標(biāo)本可直接浸泡在1%亞硫酸100 mL、95%酒精100 mL、水800 mL配成的溶液中浸泡1020 d,然后取出,沖洗干凈,再保存在5%的福爾馬林溶液中6。另外,還有硫酸銅亞硫酸浸漬液、瓦查(Vacha)浸漬液等,也是保存綠色標(biāo)本常用的方法。保存紅色的浸漬液。對(duì)于紅色的果實(shí)病害標(biāo)本如草莓、辣椒、馬鈴薯以及其他的植物紅色組織,選擇病害癥狀典型的標(biāo)本,可以將標(biāo)本浸入瓦查的紅色浸漬液(硝酸亞鈷15 g,福爾馬林25 mL,氯化錫10 g,水1 000 mL)內(nèi),2周后取出沖洗干凈,浸泡在亞硫酸

8、3050 mL,福爾馬林10 mL,酒精(95%)10 mL,水1 000 mL配成的溶液中加以保存。保存黃色和桔紅色標(biāo)本的浸漬液。含葉黃素和胡蘿卜素的果實(shí)如杏、梨、柿子、柑橘等,用亞硫酸溶液保存比較適宜。方法是將亞硫酸(含SO2 5%6%)配成4%10%的水溶液(含SO2 0.2%0.5%)中1?？傊?各種保色的浸漬液,除有些保存綠色的浸漬液外,保存其他顏色的浸漬液,效果都不理想。為了更好的顯示植物病害的危害狀,最好采用多媒體系統(tǒng)將其掃描或攝影,制作成相應(yīng)的圖片和視頻進(jìn)行保存1。 2.2.2防腐浸漬液。對(duì)于浸漬標(biāo)本的保存來(lái)說(shuō),防腐是最重要的一個(gè)環(huán)節(jié)。因此,需要防腐浸漬液對(duì)其進(jìn)行保存。主要成分

9、如下:福爾馬林50 mL,酒精(95%)300 mL,水2 000 mL,也可單用福爾馬林和酒精。 3植物病害標(biāo)本的保存 3.1蠟葉標(biāo)本的保存 3.1.1散裝標(biāo)本。將干燥好的蠟葉標(biāo)本放進(jìn)消毒室或消毒箱內(nèi),傳統(tǒng)的方法是用酒精、升汞液消毒,或?qū)硵澄坊蛩穆然寂c二硫化碳混合液置于玻皿內(nèi),利用毒氣熏殺標(biāo)本上的蟲(chóng)或蟲(chóng)卵,約3 d后即可取出。有條件也在-40 低溫處理消毒。將消毒好的蠟葉標(biāo)本鑒定、整理,然后裝進(jìn)標(biāo)本袋中,貼好標(biāo)簽,以備實(shí)驗(yàn)課用作實(shí)物標(biāo)本,供學(xué)生上課使用。 3.1.2制作盒裝標(biāo)本。將植物病害癥狀典型的蠟葉標(biāo)本和干燥的果實(shí)標(biāo)本,可利用玻面紙盒的方法進(jìn)行保藏。按照標(biāo)本的大小,選擇合適的紙盒(一

10、般為長(zhǎng)28 cm、寬20 cm、高1.53.0 cm),在紙盒中鋪1層棉花,棉花上放標(biāo)本和標(biāo)簽,注明寄主植物、寄生菌的名稱、采集時(shí)間等,然后加上玻蓋。棉花中可加入少量的樟腦粉或驅(qū)蟲(chóng)的藥劑。這種方法制作的標(biāo)本可長(zhǎng)期保存,循環(huán)使用。 3.1.3塑封標(biāo)本。適合保存葉片標(biāo)本和較小的莖稈(如小麥、水稻)標(biāo)本。做法是:根據(jù)植物病害標(biāo)本的大小選擇適當(dāng)?shù)淖o(hù)卡膜,將1張比護(hù)卡膜稍小的白紙放入護(hù)卡膜中,在白紙右下角寫(xiě)上該標(biāo)本的標(biāo)簽,然后把標(biāo)本放在白紙上擺好,再把膜放平,放入預(yù)熱到160 的過(guò)塑機(jī)封塑即可。如果標(biāo)本較小、較窄,1張紙上可放幾個(gè)標(biāo)本,可根據(jù)需要分類裝訂成冊(cè)7。這種方法做出的標(biāo)本彌補(bǔ)了以上盒裝方法存在許

11、多缺點(diǎn),如標(biāo)本盒體積大,攜帶不便,造價(jià)較高,只能用肉眼和手持放大鏡觀察標(biāo)本的局部,對(duì)細(xì)小組織和結(jié)構(gòu)觀察困難,標(biāo)本易變色、發(fā)霉、受蟲(chóng)蛀、不耐貯存等。 3.2浸漬標(biāo)本的保存 將已鑒別的標(biāo)本適當(dāng)處理后放在盛有保存液的標(biāo)本瓶中,用蠟或火棉膠封口后,將標(biāo)簽貼在標(biāo)本瓶上進(jìn)行保存。由于浸漬液所使用的藥品大都為揮發(fā)性的,或容易氧化,因此浸漬標(biāo)本最好放在暗處,以減少藥液的氧化,或瓶口因溫度變化而造成破裂。 4注意事項(xiàng) 植物病害標(biāo)本的采集受植物生長(zhǎng)季節(jié)、氣候條件、采集地點(diǎn)、采集時(shí)間及作物品種布局等多種因素的影響,要把握時(shí)機(jī)才能采到需要的癥狀典型的標(biāo)本。另外,對(duì)于病害標(biāo)本的制作,不同部位制作和保存的方法不同。蠟葉標(biāo)本在保存過(guò)程中,要保持標(biāo)本室的干燥才能防止發(fā)霉,但干燥標(biāo)本易遭蟲(chóng)蛀,因此最好每年用甲基溴等藥劑熏蒸,以保證標(biāo)本的完好。浸漬標(biāo)本保存液也要經(jīng)常更換,以保證標(biāo)本不腐爛。這樣,逐漸積累和補(bǔ)充各種病害標(biāo)本,才能使實(shí)驗(yàn)課程順利進(jìn)行,達(dá)到預(yù)期的良好效果。 5參考文獻(xiàn) 1 方中達(dá).植病研究方法M.北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,1996. 2 黃艷花,覃連紅,梁萍,等.植病制片材料的準(zhǔn)備與簡(jiǎn)易保存技術(shù)研究J.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2008,36(11):4577-4578. 3 劉春元,劉建華,邢小萍. 談植病實(shí)驗(yàn)教學(xué)標(biāo)本的建設(shè)和管理J.實(shí)驗(yàn)室科學(xué),2006,4(2):121-