第三講植物組織培養(yǎng)、DNA技術(shù)及植物有效成分的提取

1、循著示想一想知識(shí)點(diǎn)一植物組織培養(yǎng)1.原理和基本過(guò)程物織養(yǎng)植組培原酹植物細(xì)胞的全能性過(guò)程外植體亞翌愈傷組織蚤仝旦根、芽一植物體2.菊花的組織培養(yǎng)材料選擇材料木身的種類、年齡、保存時(shí)間的長(zhǎng)短等。菊花的 組織培養(yǎng),一般選擇未開(kāi)花植株的莖上部新生的側(cè)枝營(yíng)養(yǎng)因素MS培養(yǎng)基:大量元素、微量元素、有機(jī)物等植物激素生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素外界條件pH:5.8；溫度:18-22 °C；每日光照 12 h實(shí)驗(yàn)操作配制培養(yǎng)基f外植體消毒f接種f培養(yǎng)f移栽f栽培3月季的花藥培養(yǎng)月 季 的 花 藥 培 養(yǎng)被子植物花過(guò)程:小砲子母細(xì)胞f小抱子四分體時(shí)期f單 粉的發(fā)育核期一雙核期一花粉粒產(chǎn)生花粉L花藥中宓進(jìn)胚狀體診復(fù)叢

2、 植株的兩- 種途徑砧卄沁脫分化再分化的屁粉愈傷組織叢芽影響因素1材料的選擇h般選擇單核期H培養(yǎng)基的組成斤植物激素的用量及配比實(shí)驗(yàn)操作斤材料的選取材料的消毒接種和培養(yǎng)-> 鑒定和篩選知識(shí)點(diǎn)二DNA的粗提取與鑒定DNA的粗提取與鑒定基本原理<0提取思路利用DNA和其他物質(zhì)在理化性質(zhì)方面的差異,1提取I)NADNA 的性質(zhì)一I丿溶解度：DNA在014mol/L的NaCl中溶解度 最低；DNA不溶于酒精對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性DNA的鑒定：DNA+二苯胺試劑 沁養(yǎng)藍(lán)色實(shí)驗(yàn)流程選取材料一破碎細(xì)胞,獲取含DNA的濾液去除濾液 中的雜質(zhì)一DNA的析出與鑒定知識(shí)點(diǎn)三植物有效成分的提取提取方法實(shí)

3、驗(yàn)流程玫瑰精油 的提取水蒸氣 蒸億法鮮玫瑰花+清水一水蒸氣蒸憎一油水混合 物加入NK1分離油層加應(yīng)水山洪）4除水弊 玫瑰油橘皮精汕 的提取壓榨法石灰水浸泡一漂洗壓榨一過(guò)濾一靜置 f再次過(guò)濾f橘皮汕胡蘿卜素 的提取萃取法（石油 瞇最適宜作 萃取劑）胡蘿卜粉碎一干燥萃取一過(guò)濾一濃 縮f胡蘿卜素胡蘿卜素的性質(zhì):不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石汕瞇 等有機(jī)溶劑鑒定方法:紙層析法也I課堂考點(diǎn)一站突破分點(diǎn)編排講練設(shè)計(jì)氣貫通更系統(tǒng)in考點(diǎn)_ I植物組織培養(yǎng)和花藥離體培養(yǎng)必備知能1.植物細(xì)胞全能性表達(dá)的條件(1) 離體狀態(tài)。(2) 適宜的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：大量元素、微量元素等無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)和有 機(jī)營(yíng)養(yǎng)。(3) 植物激素：生長(zhǎng)

4、素、細(xì)胞分裂素。(4) 適宜環(huán)境條件：溫度、pH和光照條件。(5) 無(wú)菌條件。2.植物組織培養(yǎng)技術(shù)和花藥離體培養(yǎng)技術(shù)的比較目 項(xiàng)相同點(diǎn)激 七E1II 林 選等 照 光、H PN不同點(diǎn)體 植 外胞 細(xì) 體方結(jié) 培性 育育可不育 度可 高后體f 植養(yǎng) 外普 基沖培 養(yǎng)接栽 培二 備毒栽 制消移歸納串記生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素在植物組織培養(yǎng)中的作用(1)使用順序不同，結(jié)果不同：使用順序?qū)嶒?yàn)結(jié)果先生長(zhǎng)素，后細(xì)胞分裂素有利于細(xì)胞分裂，但細(xì)胞不 分化先細(xì)胞分裂素，后生長(zhǎng)素細(xì)胞既分裂也分化同時(shí)使用分化頻率提高(2)用量比值不同，結(jié)果也不同:生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素結(jié)果比值間時(shí)促根分化，抑芽形成比值低時(shí)促芽分化，抑根形成

5、比值適中促進(jìn)愈傷組織形成必明考向考向一植物組織培養(yǎng)和花藥離體培養(yǎng)的過(guò)程1. (2012-山"考辣椒素作為一種生物堿廣泛用于食品保健、醫(yī)藥工業(yè)等領(lǐng)域。辣椒素的獲得途徑如下圖。(1)圖中和分別表示辣椒組織培養(yǎng)中細(xì)胞的和過(guò)程。2.某二倍體植物是雜合體，下圖為其花藥中未成熟花粉在適宜的培養(yǎng)基上培養(yǎng)產(chǎn)生完整植株的過(guò)程。據(jù)下圖回答：(1)圖中表示的是該花粉培養(yǎng)過(guò)程中的過(guò)程，表示的是過(guò)程，X代表的是,表示的是過(guò)程,表示的是誘導(dǎo)過(guò)程。培養(yǎng)基編號(hào)濃度/mgLTml%/個(gè)6BAIAA10.5076.73.110.177.46.130.266.75.340.560.05.0項(xiàng)目2 mol/LNaCl溶液0

6、.14 mol/LNaCl溶液溶解規(guī)律DNA溶解析出IV0.14 mol/L NaCl 溶液蛋白部分發(fā)生鹽析溶解NaCl溶液從2 mol/L降低過(guò)質(zhì)沉淀程中，溶解度逐漸增大可移動(dòng)的實(shí)驗(yàn)平臺(tái) 可揭為己有的實(shí)驗(yàn)室 手指輕點(diǎn)玩轉(zhuǎn)實(shí)驗(yàn)1. DNA與蛋白質(zhì)在不同NaCl溶液中溶解度特點(diǎn)比較考點(diǎn)二DNA的粗提取與鑒定必備知能必明考向考向DNA的提取與鑒定1. （2014江蘇髙考）下列關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)敘述,錯(cuò)誤的是取DNA的材料D原則上含DNA的生物材料都可用來(lái)提取DNA ,只是選用DNA含量高 缶半弩如一盒功的可能件審大fDNA在2 nwl/L NaCl溶液和超留水中溶解度都較大 才占為卻

7、央物向雞血細(xì)胞液中加蒸懾水?dāng)嚢?雞血細(xì)胞會(huì)吸水破裂，但在蒸偶水DNA溶液加入 苯胺試劑后需沸水浴加熱,待冷卻后溶液變監(jiān)。95 %酒精單層紗布過(guò)濾濾液雞血細(xì)胞2 mol/L.J NaCl溶液Q2下圖為“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的一些重要操作示意 圖，據(jù)圖回答下列有關(guān)該實(shí)驗(yàn)的問(wèn)題：析出較純1一/凈的絲狀2物DNA濃NaCl溶液在“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)中，將含有一定雜質(zhì)的DNA 絲狀物分別放入體積為2mL的4種溶液中，經(jīng)攪拌后過(guò)濾，獲得如下表所示的4種濾液，含DNA最少的是濾液o1B液中攪拌研磨后過(guò)濾濾液E22 mol/L 的NaCl溶液攪拌后過(guò)濾濾液F30.14 mol/L 的NaCl溶液

8、中攪拌后過(guò)濾濾液G4冷卻的體積分?jǐn)?shù)為95 %的 酒精溶液中攪拌后過(guò)濾濾液H考點(diǎn)三I植物有效成分的提取必備知能1. 三種提取方法的比較提取 方法水蒸氣蒸館法壓榨法有機(jī)溶劑萃取法實(shí)驗(yàn) 原理利用水蒸氣將揮 發(fā)性較強(qiáng)的植物 芳香油攜帶出來(lái)通過(guò)機(jī)械加壓，壓榨 出果皮中的芳香油使芳香油溶解在有 機(jī)溶劑中，蒸發(fā)溶 劑獲得芳香油方法 步驟 水蒸氣蒸餡 分離油層 除水過(guò)濾 石灰水浸泡、漂洗 壓榨、過(guò)濾、靜置 再次過(guò)濾 粉碎、干燥 萃取、過(guò)濾 濃縮提取 方法水蒸氣蒸憎法壓榨法有機(jī)溶劑萃取法適用 范圍適用于提取玫瑰 油、薄荷油等揮 發(fā)性強(qiáng)的芳香油適用于柑橘、檸 檬等易焦糊原料的提取適用范圍廣，要求原 料的顆粒要盡可能細(xì) 小，能充分浸泡在有 機(jī)溶液中優(yōu)點(diǎn)簡(jiǎn)單易行，便于 分離生產(chǎn)成本低，易 保持原料原有的 結(jié)構(gòu)和功能出油率高，易分離局限 性水中蒸館會(huì)導(dǎo)致 原料焦糊和有效 成分水解等問(wèn)題分離較為困難， 出油率相對(duì)較低使用的有機(jī)溶劑處理 不當(dāng)會(huì)影響芳香油的 質(zhì)量考向二胡蘿卜素的提建2. (2013山東K)胡蘿卜素是一種常用的食用色