選修一專題2課題1

1、課題課題1微生物的實驗室培養(yǎng)微生物的實驗室培養(yǎng)課標領航課標領航1舉例說明有關(guān)培養(yǎng)基的基礎知識。舉例說明有關(guān)培養(yǎng)基的基礎知識。2概述無菌操作技術(shù)包括的主要內(nèi)容。概述無菌操作技術(shù)包括的主要內(nèi)容。3能制備培養(yǎng)基，并進行微生物的分離和能制備培養(yǎng)基，并進行微生物的分離和培養(yǎng)。培養(yǎng)?！局攸c】【重點】培養(yǎng)基中各營養(yǎng)要素的作用及配培養(yǎng)基中各營養(yǎng)要素的作用及配制原則。制原則?！倦y點】【難點】微生物培養(yǎng)中的有關(guān)實驗操作。微生物培養(yǎng)中的有關(guān)實驗操作。情境導引情境導引拿破侖曾經(jīng)說過，部隊只有吃飽了才能行軍。但是在拿破侖曾經(jīng)說過，部隊只有吃飽了才能行軍。但是在行軍過程中，卻不能經(jīng)常給士兵提供新鮮的食物，所行軍過程中，卻

2、不能經(jīng)常給士兵提供新鮮的食物，所以他決定出大價錢懸賞對此有所發(fā)明的人，結(jié)果，法以他決定出大價錢懸賞對此有所發(fā)明的人，結(jié)果，法軍的一個叫弗朗屯斯軍的一個叫弗朗屯斯阿貝特的炊事班長贏得了這筆阿貝特的炊事班長贏得了這筆獎金。阿貝特保存食物的方法是這樣的，把食物放在獎金。阿貝特保存食物的方法是這樣的，把食物放在一個帶盒子的玻璃罐中，然后進行蒸煮，在煮的過程一個帶盒子的玻璃罐中，然后進行蒸煮，在煮的過程中中,不能把蓋子擰緊。用蒸煮的方式殺死微生物，這實不能把蓋子擰緊。用蒸煮的方式殺死微生物，這實際上是高溫消毒。蓋子在煮時稍松，煮后擰緊，這樣際上是高溫消毒。蓋子在煮時稍松，煮后擰緊，這樣里面近似真空，微生

3、物缺乏生長繁衍的環(huán)境，所以食里面近似真空，微生物缺乏生長繁衍的環(huán)境，所以食物可長期不變質(zhì)。這就是原始的罐頭。物可長期不變質(zhì)。這就是原始的罐頭。核心要點突破核心要點突破知能過關(guān)演練知能過關(guān)演練課課題題1微微生生物物的的實實驗驗室室培培養(yǎng)養(yǎng)基礎自主梳理基礎自主梳理基礎自主梳理基礎自主梳理一、培養(yǎng)基的概念、種類及營養(yǎng)要素一、培養(yǎng)基的概念、種類及營養(yǎng)要素1概念：人們按照微生物對概念：人們按照微生物對_的不的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。2種類：按照培養(yǎng)基的形態(tài)劃分。種類：按照培養(yǎng)基的形態(tài)劃分。(1)液體培養(yǎng)基：配制成的液體培養(yǎng)基：配制成的_狀態(tài)的基質(zhì)。狀

4、態(tài)的基質(zhì)。營養(yǎng)物質(zhì)營養(yǎng)物質(zhì)液體液體(2)固體培養(yǎng)基：配制成的固體培養(yǎng)基：配制成的_狀態(tài)的基質(zhì)。在液狀態(tài)的基質(zhì)。在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑，如瓊脂，制成瓊脂固體培體培養(yǎng)基中加入凝固劑，如瓊脂，制成瓊脂固體培養(yǎng)基，是實驗室中最常用的培養(yǎng)基之一，微生物在養(yǎng)基，是實驗室中最常用的培養(yǎng)基之一，微生物在其上面生長，可形成肉眼可見的其上面生長，可形成肉眼可見的_，主要用于，主要用于微生物的分離、鑒定等。微生物的分離、鑒定等。3營養(yǎng)要素：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、營養(yǎng)要素：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對_、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求

5、。特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。固體固體菌落菌落pH二、無菌技術(shù)二、無菌技術(shù)1獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止_的入的入侵，具體操作如下：侵，具體操作如下：(1)對實驗操作的對實驗操作的_、操作者的衣著和手進行清、操作者的衣著和手進行清潔和消毒。潔和消毒。(2)將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進行滅菌。等器具進行滅菌。(3)為避免周圍環(huán)境中為避免周圍環(huán)境中_的污染，實驗操作的污染，實驗操作應在酒精燈火焰附近進行。應在酒精燈火焰附近進行。(4)實驗操作時應避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與實驗操作時應避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與_

6、相接觸。相接觸。外來雜菌外來雜菌空間空間微生物微生物周圍的物品周圍的物品2消毒和滅菌消毒和滅菌(1)消毒消毒概念：使用較為溫和的物理或化學方法僅殺死物概念：使用較為溫和的物理或化學方法僅殺死物體表面或體表面或_一部分對人體有危害的微生物一部分對人體有危害的微生物(不不包括芽孢和孢子包括芽孢和孢子)。常用方法：常用方法：_消毒法、巴氏消毒法、化學藥消毒法、巴氏消毒法、化學藥劑消毒法等。劑消毒法等。(2)滅菌滅菌概念：使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外概念：使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外_的的微生物。微生物。常用方法：灼燒滅菌、干熱滅菌、常用方法：灼燒滅菌、干熱滅菌、_滅滅菌。菌。內(nèi)部內(nèi)部煮沸煮沸所有

7、所有高壓蒸汽高壓蒸汽三、純化大腸桿菌的無菌操作三、純化大腸桿菌的無菌操作本實驗使用本實驗使用_固體培養(yǎng)基進行大腸固體培養(yǎng)基進行大腸桿菌的純化培養(yǎng)，可分成桿菌的純化培養(yǎng)，可分成_和純化大和純化大腸桿菌兩個階段進行。腸桿菌兩個階段進行。1制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的一般步驟：計制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的一般步驟：計算、稱量、溶化、算、稱量、溶化、_、倒平板。、倒平板。2純化大腸桿菌純化大腸桿菌(1)平板劃線法：通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表平板劃線法：通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面面_的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。散到培養(yǎng)基的表面。牛肉膏蛋白胨牛肉膏

8、蛋白胨制備培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基滅菌滅菌連續(xù)劃線連續(xù)劃線(2)稀釋涂布平板法：將菌液進行一系列的梯度稀釋稀釋涂布平板法：將菌液進行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)?；谋砻?，進行培養(yǎng)。3結(jié)果分析結(jié)果分析(1)如果接種大腸桿菌的培養(yǎng)基上生長的菌落顏色、如果接種大腸桿菌的培養(yǎng)基上生長的菌落顏色、形狀、大小基本一致，說明接種操作符合要求。形狀、大小基本一致，說明接種操作符合要求。(2)若培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其他菌落，則說明接種過程中若培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其他菌落，則說明接種過程中_未達到要求。未達到要求。(3)未接種大腸桿菌的

9、作為對照的培養(yǎng)基，在培養(yǎng)過未接種大腸桿菌的作為對照的培養(yǎng)基，在培養(yǎng)過程中若長出菌落，則說明培養(yǎng)基程中若長出菌落，則說明培養(yǎng)基_不徹底，不徹底，實驗失敗。實驗失敗。無菌操作無菌操作滅菌滅菌思考感悟思考感悟你還知道哪些微生物的接種技術(shù)？這些技術(shù)的你還知道哪些微生物的接種技術(shù)？這些技術(shù)的核心是什么？核心是什么？【提示】【提示】微生物接種技術(shù)很多，除了最常用微生物接種技術(shù)很多，除了最常用的平板劃線法和稀釋涂布平板法外，還包括斜的平板劃線法和稀釋涂布平板法外，還包括斜面接種、穿刺接種等方法。雖然這些技術(shù)的操面接種、穿刺接種等方法。雖然這些技術(shù)的操作方法各不相同，但是其核心都是要防止雜菌作方法各不相同，但

10、是其核心都是要防止雜菌污染，保證培養(yǎng)物的純度。污染，保證培養(yǎng)物的純度。四、菌種保存四、菌種保存1臨時保藏法：適用于臨時保藏法：適用于_使用的菌種。使用的菌種。(1)過程過程接種：將菌種接種到試管的接種：將菌種接種到試管的_培養(yǎng)基上培養(yǎng)基上,合適溫度下培養(yǎng)。合適溫度下培養(yǎng)。保藏：菌落長成后，放入保藏：菌落長成后，放入4冰箱中。冰箱中。轉(zhuǎn)移：每隔轉(zhuǎn)移：每隔36個月，將菌種從舊的培養(yǎng)基上轉(zhuǎn)個月，將菌種從舊的培養(yǎng)基上轉(zhuǎn)移到新鮮的培養(yǎng)基上。移到新鮮的培養(yǎng)基上。(2)缺點：菌種容易被缺點：菌種容易被_或產(chǎn)生變異。或產(chǎn)生變異。2甘油管藏法：適用于需要甘油管藏法：適用于需要_保存的菌種。保存的菌種。操作：將培

11、養(yǎng)的菌液與等體積滅菌后的操作：將培養(yǎng)的菌液與等體積滅菌后的_混合混合均勻，放在均勻，放在20的冷凍箱中保存。的冷凍箱中保存。頻繁頻繁固體斜面固體斜面污染污染長期長期甘油甘油核心要點突破核心要點突破培養(yǎng)基培養(yǎng)基按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，人們可以配制按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，人們可以配制出供微生物生長和繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)，即培養(yǎng)基。出供微生物生長和繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)，即培養(yǎng)基。1培養(yǎng)基的種類培養(yǎng)基的種類培養(yǎng)基種類培養(yǎng)基種類特點特點用途用途液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基不加凝固劑不加凝固劑工業(yè)生產(chǎn)工業(yè)生產(chǎn)半固體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基加凝固劑，加凝固劑，如瓊脂如瓊脂觀察微生物的運動、觀察微生物的運動、分類鑒定分

12、類鑒定固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基微生物分離、鑒定、微生物分離、鑒定、活菌計數(shù)、保藏菌種活菌計數(shù)、保藏菌種2.微生物所需的有機營養(yǎng)物質(zhì)及其功能微生物所需的有機營養(yǎng)物質(zhì)及其功能碳源碳源氮源氮源生長因子生長因子概念概念凡能為微生物提供所需碳凡能為微生物提供所需碳元素的營養(yǎng)物質(zhì)元素的營養(yǎng)物質(zhì)凡能為微生物提供所需凡能為微生物提供所需氮元素的營養(yǎng)物質(zhì)氮元素的營養(yǎng)物質(zhì)微生物生長不可缺微生物生長不可缺少的微量有機物少的微量有機物來源來源無機碳源：無機碳源：CO2、NaHCO3等；有機碳源：等；有機碳源：糖類、脂肪酸、花生粉餅、糖類、脂肪酸、花生粉餅、石油等石油等無機氮源：無機氮源：N2、氨、銨、氨、銨鹽、硝酸鹽等；

13、有機氮鹽、硝酸鹽等；有機氮源：尿素、牛肉膏、蛋源：尿素、牛肉膏、蛋白胨、氨基酸等白胨、氨基酸等酵母膏、蛋白胨、酵母膏、蛋白胨、動植物組織提取液動植物組織提取液最常用最常用來源來源糖類，尤其是葡萄糖糖類，尤其是葡萄糖銨鹽、硝酸鹽銨鹽、硝酸鹽維生素、氨基酸、維生素、氨基酸、堿基堿基作用作用主要用于構(gòu)成微生物的細主要用于構(gòu)成微生物的細胞物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物；胞物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物；異養(yǎng)微生物的主要能源物異養(yǎng)微生物的主要能源物質(zhì)質(zhì)主要用于合成蛋白質(zhì)、主要用于合成蛋白質(zhì)、核酸以及含氮的代謝產(chǎn)核酸以及含氮的代謝產(chǎn)物物酶和核酸的組成成酶和核酸的組成成分分3.配制培養(yǎng)基所遵循的原則配制培養(yǎng)基所遵循的原則(1)目的

14、要明確，要根據(jù)所培養(yǎng)的微生物的種類、目的要明確，要根據(jù)所培養(yǎng)的微生物的種類、培養(yǎng)的目的選擇原料。培養(yǎng)的目的選擇原料。(2)營養(yǎng)要協(xié)調(diào)，配制培養(yǎng)基時必須要注意各種營營養(yǎng)要協(xié)調(diào)，配制培養(yǎng)基時必須要注意各種營養(yǎng)物質(zhì)的濃度和比例，否則會產(chǎn)生不良后果。養(yǎng)物質(zhì)的濃度和比例，否則會產(chǎn)生不良后果。(3)pH要適宜，這是因為各種微生物適宜生長的要適宜，這是因為各種微生物適宜生長的pH范圍不同。范圍不同。(2011年南京市高二檢測年南京市高二檢測)科學家發(fā)現(xiàn)家蠅體科學家發(fā)現(xiàn)家蠅體內(nèi)存在一種抗菌活性蛋白，這種蛋白質(zhì)具有極強的內(nèi)存在一種抗菌活性蛋白，這種蛋白質(zhì)具有極強的抗菌能力，受到研究者重視?？咕芰?，受到研究者重

15、視。(1)可用金黃色葡萄球菌來檢驗該蛋白質(zhì)的抗菌特性可用金黃色葡萄球菌來檢驗該蛋白質(zhì)的抗菌特性.抗菌實驗中所用培養(yǎng)基中的牛肉膏和蛋白胨主要為抗菌實驗中所用培養(yǎng)基中的牛肉膏和蛋白胨主要為細菌生長提供細菌生長提供_和和_。(2)分別在加入和未加入該抗菌蛋白的培養(yǎng)基中接種分別在加入和未加入該抗菌蛋白的培養(yǎng)基中接種等量菌液。培養(yǎng)一定時間后，比較兩種培養(yǎng)基中菌等量菌液。培養(yǎng)一定時間后，比較兩種培養(yǎng)基中菌落的落的_，確定該蛋白質(zhì)的抗菌效果。，確定該蛋白質(zhì)的抗菌效果。(3)細菌培養(yǎng)常用的接種方法有細菌培養(yǎng)常用的接種方法有_和和_。實驗結(jié)束后，對使用過的培。實驗結(jié)束后，對使用過的培養(yǎng)基應進行養(yǎng)基應進行_處理。

16、處理?！緡L試解答】【嘗試解答】(1)碳源氮源碳源氮源(2)數(shù)量數(shù)量(3)平板平板劃線法稀釋涂布平板法滅菌劃線法稀釋涂布平板法滅菌【解析】【解析】牛肉膏和蛋白胨都是天然培養(yǎng)基成分，牛肉膏和蛋白胨都是天然培養(yǎng)基成分，含有豐富的蛋白質(zhì)、糖類等營養(yǎng)成分，可以為微含有豐富的蛋白質(zhì)、糖類等營養(yǎng)成分，可以為微生物的生長提供碳源和氮源以及生長因子；在培生物的生長提供碳源和氮源以及生長因子；在培養(yǎng)細菌時，往往采用平板劃線法和稀釋涂布平板養(yǎng)細菌時，往往采用平板劃線法和稀釋涂布平板法進行接種；操作過程中用完的培養(yǎng)基都要進行法進行接種；操作過程中用完的培養(yǎng)基都要進行滅菌處理，以防止污染環(huán)境和對人造成感染。滅菌處理，以

17、防止污染環(huán)境和對人造成感染?！咎揭?guī)尋律】【探規(guī)尋律】(1)在微生物所需要的化合物中需在微生物所需要的化合物中需要量最大的是碳源。對異養(yǎng)微生物來說，含要量最大的是碳源。對異養(yǎng)微生物來說，含C、H、O、N的化合物既是碳源，又是氮源。的化合物既是碳源，又是氮源。(2)滅菌所依據(jù)的原理基本都是使菌體內(nèi)的蛋白質(zhì)滅菌所依據(jù)的原理基本都是使菌體內(nèi)的蛋白質(zhì)和核酸發(fā)生變性，從而達到殺菌的效果。和核酸發(fā)生變性，從而達到殺菌的效果。(3)消毒時一般不能殺死微生物的芽孢的原因是：消毒時一般不能殺死微生物的芽孢的原因是：芽孢是細胞生長發(fā)育后期，在細胞內(nèi)形成的一個芽孢是細胞生長發(fā)育后期，在細胞內(nèi)形成的一個圓柱或橢圓形圓柱

18、或橢圓形 、厚壁、含水量極低、抗逆性很、厚壁、含水量極低、抗逆性很強的休眠體，它抗熱、抗化學藥物、抗靜水壓的強的休眠體，它抗熱、抗化學藥物、抗靜水壓的能力極強。能力極強。跟蹤訓練跟蹤訓練(2011年泰安市高二檢測年泰安市高二檢測)下表是關(guān)于下表是關(guān)于幾種微生物能利用的碳源物質(zhì)和氮源物質(zhì)的描幾種微生物能利用的碳源物質(zhì)和氮源物質(zhì)的描述，描述錯誤的微生物有幾種述，描述錯誤的微生物有幾種()硝化細硝化細菌菌圓褐固氮圓褐固氮菌菌甲烷氧化甲烷氧化菌菌乳酸菌乳酸菌碳源物碳源物質(zhì)質(zhì)CO2CO2葡萄糖葡萄糖葡萄糖葡萄糖氮源物氮源物質(zhì)質(zhì)NH3N2尿素尿素N2A.1種種B2種種C3種種D4種種解析：解析：選選C。硝

19、化細菌為化能自養(yǎng)型，以。硝化細菌為化能自養(yǎng)型，以CO2為為碳源，以碳源，以NH3為氮源。圓褐固氮菌為異養(yǎng)固氮菌，為氮源。圓褐固氮菌為異養(yǎng)固氮菌，碳源為含碳有機物，氮源為分子態(tài)氮。甲烷氧碳源為含碳有機物，氮源為分子態(tài)氮。甲烷氧化菌對碳源要求嚴格，只能是甲烷或甲醇。乳化菌對碳源要求嚴格，只能是甲烷或甲醇。乳酸菌不能固氮，其氮源不可能是酸菌不能固氮，其氮源不可能是N2。微生物培養(yǎng)中有關(guān)實驗操作的注意事項微生物培養(yǎng)中有關(guān)實驗操作的注意事項1倒平板操作倒平板操作(1)培養(yǎng)基滅菌后，需冷卻至培養(yǎng)基滅菌后，需冷卻至50左右時才能倒平左右時才能倒平板，原因是瓊脂在板，原因是瓊脂在44以下凝固。以下凝固。(2)

20、培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，不要完全培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，不要完全打開。打開。(3)整個操作過程要在酒精燈火焰旁進行，避免雜整個操作過程要在酒精燈火焰旁進行，避免雜菌污染。菌污染。(4)平板冷凝后要倒置的原因：防止皿蓋上的冷凝平板冷凝后要倒置的原因：防止皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基，造成污染。水落入培養(yǎng)基，造成污染。(5)若倒平板時，培養(yǎng)基濺在皿蓋和皿底之間的部若倒平板時，培養(yǎng)基濺在皿蓋和皿底之間的部位，這個平板應丟棄。位，這個平板應丟棄。2平板劃線操作平板劃線操作(1)第一次劃線及每次劃線之前都需灼燒接種環(huán)滅第一次劃線及每次劃線之前都需灼燒接種環(huán)滅菌，劃線操作結(jié)束仍需灼燒接種環(huán)，每

21、次灼燒目菌，劃線操作結(jié)束仍需灼燒接種環(huán)，每次灼燒目的如下表：的如下表：第一次灼第一次灼燒燒每次劃線之前灼燒每次劃線之前灼燒劃線結(jié)束灼燒劃線結(jié)束灼燒目目的的避免接種避免接種環(huán)上可能環(huán)上可能存在的微存在的微生物污染生物污染培養(yǎng)物培養(yǎng)物殺死上次劃線結(jié)束殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的后接種環(huán)上殘留的菌種，使每次劃線菌種，使每次劃線的菌種來自上次劃的菌種來自上次劃線末端線末端殺死接種環(huán)上殺死接種環(huán)上殘留的菌種，殘留的菌種，避免細菌污染避免細菌污染環(huán)境和感染操環(huán)境和感染操作者作者(2)灼燒接種環(huán)之后，要等其冷卻后才能伸入菌液，灼燒接種環(huán)之后，要等其冷卻后才能伸入菌液，以免溫度太高殺死菌種。以免溫度太高殺

22、死菌種。(3)劃線時最后一區(qū)域不要與第一區(qū)域相連。劃線時最后一區(qū)域不要與第一區(qū)域相連。(4)劃線用力要大小適當，防止用力過大將培養(yǎng)基劃線用力要大小適當，防止用力過大將培養(yǎng)基劃破。劃破。3稀釋涂布平板操作稀釋涂布平板操作(1)稀釋操作時：每支試管及其中稀釋操作時：每支試管及其中9mL水、移液管水、移液管均需滅菌；操作時，試管口和移液管應在離火焰均需滅菌；操作時，試管口和移液管應在離火焰12cm處。處。(2)涂布平板時：稀釋涂布平板的操作比較復雜，涂布平板時：稀釋涂布平板的操作比較復雜，且各個細節(jié)均需保證且各個細節(jié)均需保證“無菌無菌”，應特別注意：，應特別注意：酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適；酒精燈與

23、培養(yǎng)皿的距離要合適；吸管頭不要接觸任何其他物體；吸管頭不要接觸任何其他物體；吸管要在酒精燈火焰周圍使用。吸管要在酒精燈火焰周圍使用。特別提醒特別提醒(1)移液管需要經(jīng)過滅菌。操作時，移液后用手指移液管需要經(jīng)過滅菌。操作時，移液后用手指輕壓上端的橡皮頭，吹吸三次，使菌液與水充分輕壓上端的橡皮頭，吹吸三次，使菌液與水充分混勻?；靹?。(2)將涂布器末端浸在盛有體積分數(shù)為將涂布器末端浸在盛有體積分數(shù)為70%的酒精的酒精的燒杯中。取出時，要讓多余的酒精在燒杯中滴的燒杯中。取出時，要讓多余的酒精在燒杯中滴盡，然后將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃。盡，然后將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃。(3)操作中一

24、定要注意防火！不要將過熱的涂布器操作中一定要注意防火！不要將過熱的涂布器放在盛放酒精的燒杯中。以免引燃其中的酒精。放在盛放酒精的燒杯中。以免引燃其中的酒精。(2)設置對照組，將葡萄汁進行高壓滅菌，分別裝設置對照組，將葡萄汁進行高壓滅菌，分別裝入入A、B兩個發(fā)酵瓶，并各留有兩個發(fā)酵瓶，并各留有1/3空間，空間，A組加組加入酵母菌，入酵母菌，B組不加，進行發(fā)酵，可證明葡萄酒組不加，進行發(fā)酵，可證明葡萄酒的產(chǎn)生是由于酵母菌的作用。證明葡萄汁中有醋的產(chǎn)生是由于酵母菌的作用。證明葡萄汁中有醋酸生成，簡單易行的方法是品嘗或用酸生成，簡單易行的方法是品嘗或用pH試紙鑒試紙鑒定。定。(3)制作的葡萄酒色澤鮮艷

25、、爽口、柔和、有濃郁制作的葡萄酒色澤鮮艷、爽口、柔和、有濃郁的果實香味；果醋為琥珀色或棕紅色，具有獨特的果實香味；果醋為琥珀色或棕紅色，具有獨特的果香，酸味柔和，稍有甜味，不澀。的果香，酸味柔和，稍有甜味，不澀。微生物與人類關(guān)系密切。雖然有些微生微生物與人類關(guān)系密切。雖然有些微生物能使動植物患病，但多數(shù)微生物對人類是有物能使動植物患病，但多數(shù)微生物對人類是有益的。請回答下列問題：益的。請回答下列問題：(1)培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基配方中一般含有水、碳培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基配方中一般含有水、碳源、氮源和無機鹽。從土壤中分離分解尿素的源、氮源和無機鹽。從土壤中分離分解尿素的細菌時，培養(yǎng)基中加的唯一氮源為細菌

26、時，培養(yǎng)基中加的唯一氮源為_，這種培養(yǎng)基稱為選擇培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基稱為選擇培養(yǎng)基。(2)在制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的倒平板操在制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的倒平板操作時，平板冷凝后，為什么要將平板倒置？作時，平板冷凝后，為什么要將平板倒置？_。(3)微生物接種的方法很多，最常用的是平板劃線微生物接種的方法很多，最常用的是平板劃線法和法和_法。在用平板劃線法接種時，為什法。在用平板劃線法接種時，為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)種環(huán)_。在劃線操作結(jié)束時，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為在劃線操作結(jié)束時，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？什么？_。【嘗

27、試解答嘗試解答】(1)尿素尿素(2)皿蓋上會凝有水珠，皿蓋上會凝有水珠，防止水珠落入培養(yǎng)皿造成污染，還可使培養(yǎng)基表防止水珠落入培養(yǎng)皿造成污染，還可使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)面的水分更好地揮發(fā)(3)稀釋涂布平板第一步稀釋涂布平板第一步灼燒接種環(huán)是防止接種環(huán)上有其他微生物而污染灼燒接種環(huán)是防止接種環(huán)上有其他微生物而污染培養(yǎng)基。每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次培養(yǎng)基。每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次接種時留下的菌種，使下一次劃線時接種環(huán)上的接種時留下的菌種，使下一次劃線時接種環(huán)上的菌種直接來自上次劃線的末端，以便通過多次劃菌種直接來自上次劃線的末端，以便通過多次劃線后，得到單個的菌落劃線結(jié)束后

28、仍要灼燒接線后，得到單個的菌落劃線結(jié)束后仍要灼燒接種環(huán)以免菌種對環(huán)境造成污染種環(huán)以免菌種對環(huán)境造成污染【解析解析】從土壤中分離出分解尿素的細菌，從土壤中分離出分解尿素的細菌，需用選擇性培養(yǎng)基，唯一的氮源是尿素。接種需用選擇性培養(yǎng)基，唯一的氮源是尿素。接種過程中，最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平過程中，最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法兩種方法。每次劃線前都要灼燒接種環(huán)的板法兩種方法。每次劃線前都要灼燒接種環(huán)的目的是殺死上次接種時留下的菌種，使下一次目的是殺死上次接種時留下的菌種，使下一次劃線時接種環(huán)上的菌種直接來自上次劃線的末劃線時接種環(huán)上的菌種直接來自上次劃線的末端，以便通過多次劃線后，得到單個的菌落。端，以便通過多次劃線后，得到單個的菌落。操作