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1、廣州地區(qū)A組鏈球菌T分型的分布狀況    【摘要】目的 研究廣州地區(qū)風(fēng)濕熱易感自然人群A組鏈球菌(GAS)T型的分布狀況。方法從1990年5月至1991年4月,對(duì)廣州地區(qū)914歲學(xué)齡兒童共453名(城市250名,農(nóng)村203名)每月取咽拭子培養(yǎng)1次,分離-溶血性鏈球菌后,采用蘭菲分組鑒定出GAS共732株,對(duì)GAS采     陳志紅黃震東董太明吳紅穗陳劍光羅健蘇健  中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志 2000年第2期第23卷 論著摘要 【摘要】目的研究廣州地區(qū)風(fēng)濕熱易感自然人群A組鏈球菌(GAS)T型的分布狀況。方法從19

2、90年5月至1991年4月,對(duì)廣州地區(qū)914歲學(xué)齡兒童共453名(城市250名,農(nóng)村203名)每月取咽拭子培養(yǎng)1次,分離-溶血性鏈球菌后,采用蘭菲分組鑒定出GAS共732株,對(duì)GAS采用凝集法進(jìn)行T分型。結(jié)果廣州市學(xué)齡兒童攜帶的GAS的T型以T6(20.5%)、T4(12.0%)、T12(10.9%)多見。T型分布無性別差異(P0.05),但有季節(jié)差異。同一學(xué)校不同班級(jí)有不同的 T型分布。不可分型菌株占13.3%。結(jié)論19901991年廣州地區(qū)學(xué)齡兒童流行GAS的T型主要以T6、4、12為多見;不同時(shí)期和不同地區(qū)流行GAS的T型分布存在差異。 Epidemic trends of T-typi

3、ng of group A streptococci in guangzhou area CHEN Zhihong, HUAMG Zhendong, DONG Taiming, et al. Rhemmatic Fever Laboratory, Cardiavascular Disease Institute, Guangdong Provincial Peoples Hospital Guangzhou 510100, China 【Abstract】ObjectiveTo investigate the epidemic trends of the T typing of group A

4、 hemolytic streptococci (GAS) isolated from Guangzhou school children in China from 1990 to 1991.Methods732 group A streptococci were isolated from throat culture of 453 school children aged 914 years in Guangzhou City, South China from May 1990 to April 1991. Their T-type detection rates, T-type ep

5、idemics, monthly isolation rates, and isolation rates by sex were analysed epidemiologically.ResultsAmong the children, the most common serotype was T6 (20.5%),followed by T4(12.0%), and T12 (10.9%). The main serotype in Guangzhou urban areas was T6 (30.6%), and in the rural areas was T12 (21.0%). T

6、here was statistically significant difference (P0.005) between urban and rural areas. There was no significant difference between male and female, but quite difference in different seasons. Different class in the same school had different T serotype distribution. Non-typable strains reached 13.3%.Co

7、nclusionThe dominant prevalent strains of GAS were T6, 4, 12 in Guangzhou school children, South China from 1990 to 1991. The distribution of GAS T-typing varied from different regions and periods. 【Key words】Streptococci pyogenes;Bacterial typing techniques;Rheymatic fever 研究證實(shí),風(fēng)濕熱 (RF)的發(fā)生僅與 A組溶血性鏈

8、球菌(GAS)上呼吸道感染有關(guān),因而對(duì)GAS分型的分布狀況研究顯得非常重要。國外對(duì)風(fēng)濕熱易感自然人群(518歲)中攜帶GAS血清學(xué)分型已進(jìn)行了大量的研究,對(duì)風(fēng)濕熱的流行病學(xué)、預(yù)防和控制以及對(duì)GAS疫苗的研制均具有重要的意義。在我國,對(duì)此方面的研究較少。由于M蛋白容易丟失,其抗血清難以制備,通過對(duì)GAS菌株的 T型推斷 M型的流行分布趨勢(shì),使 T型變得更加重要。我們分析了廣州地區(qū) RF易感人群攜帶GAS者菌株的 T型的分布,擬推測(cè)相應(yīng)的 M型流行趨勢(shì),為研制適合我國國情的 M分型抗血清和有效的GAS疫苗奠定重要的基礎(chǔ)。 材料與方法 一、材料 1.研究對(duì)象:為RF易感自然人群,年齡 914歲的小學(xué)

9、生共453名,其中城市組:隨訪人群為城市3所小學(xué)6個(gè)班的學(xué)生共250名。男131名,女119名,年齡914歲,平均年齡10.24±1.27歲。共分離GAS菌株399株。農(nóng)村組:隨訪人群為農(nóng)村兩間小學(xué)4個(gè)班的學(xué)生共203名。男96名,女107名,年齡 913歲,平均年齡10.46±0.91歲。共分離GAS菌株333株。 2.試劑:GAS標(biāo)準(zhǔn)菌株:32132A,由美國明尼蘇達(dá)大學(xué)世界衛(wèi)生組織鏈球菌參考合作中心贈(zèng)送;托氏培養(yǎng)基:美國Difco公司;營(yíng)養(yǎng)瓊脂:日本進(jìn)口分裝;分組抗血清:按WHO工作手冊(cè)制備1;胰蛋白酶:美國feinbiochemica GmBH 公司;T分型抗血清:

10、捷克布拉格血清疫苗研究所生產(chǎn)。 二、方法 從1990年 5月到1991年 4月,每月每人取咽拭子1次,接種至5%的羊血平板中,置35溫箱培養(yǎng)過夜,將有-溶血環(huán)存在的菌落分離培養(yǎng),然后再用蘭菲法(毛細(xì)管沉淀法)進(jìn)行分組,將已確定的GAS再培養(yǎng),抽提 T蛋白后進(jìn)行 T分型1。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 T型分布率的差異采用2檢驗(yàn)。 結(jié)果 1.城市與農(nóng)村學(xué)齡兒童帶菌者T分型分布構(gòu)成:以T6(20.5%)、T4(12.0%)、T12(10.9%)多見。城市與農(nóng)村之間 T型分布差異有顯著性(P0.005)。城市組與農(nóng)村組各所小學(xué)之間的T型分布差異均有顯著性(P0.005)。 2.T分型的性別分布構(gòu)成:城市或農(nóng)村組男女性

11、別的 T型分布差異均無顯著性(P0.05)。 3.農(nóng)村及城市主要T型季度分布:城市組流行最多的T6,四季皆可見,T4則多見于冬春季;農(nóng)村組最為多見的T12多見于冬夏季,T11則多見于冬春秋季。 討論 GAS的M分型多達(dá)80個(gè)血清型,但并非所有型別的GAS都與風(fēng)濕熱/風(fēng)濕性心臟?。≧F/RHD)發(fā)病有關(guān)。國外經(jīng)多年的研究,提出“致風(fēng)濕熱原性”的GAS明確有M1、3、5、6、14、18、19、24、27、29等10個(gè)血清型,其相對(duì)應(yīng)的常見 T型可能為T1、T3、T5、T5/27/44、T6、T14、T9、T18、T23、T4、T27等。 M分型是經(jīng)典的GAS最終分型方法。但因其型別多達(dá)80多個(gè),兼

12、之M蛋白容易丟失,制備M分型血清非常困難,目前世界上尚未有商品M分型血清出售,僅少數(shù)實(shí)驗(yàn)室掌握了該項(xiàng)技術(shù)。T分型技術(shù)是M分型的重要補(bǔ)充,盡管T分型的特異性不及M分型,但其型別少,可分辨率高,一般為90%以上,而M分型則只有50%以下2。T分型一般含有20多個(gè)型別,Johnson2總結(jié)了20年歐洲、亞洲、中東等地區(qū)25 000例GAS的血清分型,發(fā)現(xiàn)每個(gè)T型相對(duì)應(yīng)于特定的幾個(gè)M型,因而在做M分型之前,均應(yīng)常規(guī)做T分型,縮小菌株M分型的范圍,這樣可減少M(fèi)分型的次數(shù),從而節(jié)約寶貴的M分型血清。另外,T型結(jié)合濁度因子(OF)試驗(yàn),更可進(jìn)一步縮窄M分型范圍。 同一時(shí)期,不同國家的菌型分布和主要流行菌株存

13、在很大差異,且同一國家不同地區(qū)亦有差異。本研究中發(fā)現(xiàn)農(nóng)村和城市、各學(xué)校、各班之間流行的菌型分布均不同。原因是GAS可通過飛沫、唾液等方式傳播。因而,同一菌型就在一個(gè)群體中流行,而在另一個(gè)群體中,則可能出現(xiàn)另一個(gè)菌型的流行趨勢(shì)。不同的季節(jié),菌型的流行情況亦不一樣。由此可推斷,不同的季節(jié),致風(fēng)濕熱的菌型也不同。這與國外文獻(xiàn)報(bào)道的結(jié)果3,4相符。 盡管T分型可分型率比較高,但不同地區(qū)、不同實(shí)驗(yàn)室GAS的T分型率均有不同。19881990年美國可分型率達(dá)93%,而泰國只有61%5。埃塞俄比亞為54.7%3,這可能是不可分型的菌株在此地區(qū)占主要趨勢(shì)。 盡管我們不能根據(jù)有限的菌株數(shù)作出結(jié)論,但我們的結(jié)果卻

14、強(qiáng)調(diào)了繼續(xù)對(duì)GAS進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查的重要性,GAS的疫苗制備應(yīng)根據(jù)不同地區(qū)流行狀況選擇備選菌株。 蘇?。?10100 廣州市,廣東省人民醫(yī)院心血管病研究所風(fēng)濕熱實(shí)驗(yàn)室) 參考文獻(xiàn) 1Johnson DR, Kaplan EL,Sramek J, et al. Laboratory diagnosis of group A streptococcal infections. Genava: WHO, 1996, 23-32, 37-41. 2Johnson DR, Kaplan EL. A review of the correlation of T-agglutination patterns

15、 and M-protein typing and opacity factor production in the identification of group A streptococci. J Med Microbiol, 1993, 38: 311-315. 3Tewodros W, Muhe L, Daniel E, et al. A one-year study of steiptococcal infections and their epidemiol. Epidemiol Infect, 1992, 109: 211-225. 4Okuyama Y, Inoue Y, Ishihara H. Isolation trends on group A streptococci isolated from clinical specimens in hospitals in Saitama, 1979-1989. Kansensho

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