高中生物選修一知識點填空

1、 【果酒和果醋的制作】一、果酒制作原理1原理：果酒的制作離不開 ，它屬于 微生物。在有氧條件下，可以進行 呼吸，大量繁殖，反應式為：_ _；在無氧條件下，進行 (或無氧呼吸)，反應式為：_。2條件：溫度是酵母菌生長和發(fā)酵的重要條件，繁殖最適溫度為 ，酒精發(fā)酵時一般控制在 。3.菌種來源： 二、果醋制作原理1原理：果醋制作離不開 ，它是一種 細菌，對氧氣含量特別敏感，只有當氧氣 時，才能進行旺盛的生理活動。當氧氣、糖源充足時，醋酸菌將葡萄汁中的 分解成 ，其反應式為 ；當缺少糖源時，醋酸菌將 變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)?，其反應簡式為：_ _。2條件：醋酸菌的最適生長溫度為 ，此外還需要充足的 。3

2、菌種來源：可從食醋中分離；到生產(chǎn)食醋的工廠或菌種保藏中心購買。三、實驗設計流程圖四、關鍵操作步驟1材料的選擇與處理：選擇新鮮的葡萄，榨汁前先將葡萄進行沖洗， 2防止發(fā)酵液被污染：榨汁機要清洗干凈，并晾干；發(fā)酵裝置要清洗干凈，并用70%的酒精 ；裝入榨好的葡萄汁后， 。3控制好發(fā)酵條件：將葡萄汁裝入發(fā)酵瓶，留大約 的空間。制葡萄酒的過程中，將溫度嚴格控制在 ，時間控制在 天左右，可通過 對發(fā)酵的情況進行及時的監(jiān)測。制葡萄醋的過程中，將溫度嚴格控制在 ，時間控制在 天左右，并注意適時通過充氣口 。 五、結(jié)果分析與評價可通過嗅聞、觀察和品嘗初步鑒定。(可能的結(jié)果如下)酒精發(fā)酵醋酸發(fā)酵氣味和味道酒味酸

3、味氣泡和泡沫有氣泡和泡沫無氣泡和泡沫發(fā)酵液狀態(tài)渾濁渾濁，液面形成白色菌膜 六、課題延伸：發(fā)酵后是否有酒精產(chǎn)生，可用 來檢驗。先在試管中加入2 mL發(fā)酵液，再滴入物質(zhì)的量濃度為3 mol·L1的 3滴，振蕩混勻，最后滴加常溫下飽和的 溶液3滴，如果有酒精產(chǎn)生，則會觀察到的現(xiàn)象是出現(xiàn) 否則為 色。證明是否產(chǎn)生醋酸，可用pH試紙。 【腐乳的制作】一、腐乳制作的原理1原理：腐乳的發(fā)酵有多種微生物的協(xié)同作用，其中起主要作用的是 ，它是一種絲狀 ，分布廣泛，生長迅速，具有發(fā)達的_。 等微生物產(chǎn)生的 可以將豆腐中的 分解成小分子的 和 ； 可以將 水解成 和 。通過腌制并配以各種輔料，使蛋白酶作用

4、緩慢，促進其他生化反應，生成腐乳的香氣。 2菌種來源：自制腐乳利用的菌種來自于 ?，F(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)是在嚴格 的條件下，將優(yōu)良的 菌種直接接種在豆腐上，這樣可以避免 ，保證產(chǎn)品的質(zhì)量。3條件：溫度應控制在 ，并保持一定 。二、腐乳制作的實驗流程讓豆腐長出毛霉 密封腌制。三、影響腐乳品質(zhì)的條件1控制好材料的用量(1)腌制時鹽的用量：鹽的濃度過低，則_，可能導致豆腐腐敗變質(zhì)；鹽的濃度過高，會影響腐乳的口味。(2)配制鹵湯時，加酒可以 _，同時能使腐乳具有獨特的香味，鹵湯中酒精含量應控制在_左右，酒精含量過高，腐乳成熟的時間將會 _；酒精含量過低，則 ，可能導致豆腐 。 (3)鹵湯中的香辛料既可以調(diào)制腐

5、乳的風味，也具有 的作用。2防止雜菌污染(1)現(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)是在無菌條件下，使用優(yōu)良的毛霉菌種接種，以避免雜菌污染，影響腐乳質(zhì)量。(2)用來腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干凈后要用沸水 。(3)裝瓶時，操作要迅速小心，放好豆腐，加入鹵湯后，要用膠條密封瓶口。封瓶時，最好將瓶口通過 ，防止瓶口被污染?！局谱髋莶瞬z測亞硝酸鹽含量】一、泡菜的制作1泡菜制作的原理(1)發(fā)酵微生物：泡菜的制作離不開 。(2)分布：在自然界中分布廣泛， 、土壤、植物體表、人和動物的腸道內(nèi)都有乳酸菌分布。(3)種類：常見的乳酸菌有 和 。(4)代謝類型：乳酸菌的新陳代謝類型為 ，在無氧條件下，將葡萄糖分解成 。乳酸桿菌常用于生產(chǎn)

6、 。反應式為： 2實驗流程3操作注意事項(1)泡菜壇的選擇標準是火候好、 、無砂眼、 、 ，否則容易引起 。(2)腌制時要控制腌制的 、 和 的用量。溫度過 、食鹽用量 10%、腌制時間過 ，容易造成細菌大量繁殖，亞硝酸鹽含量 。一般在腌制10 d后，亞硝酸鹽含量開始 。二、亞硝酸鹽的檢測1亞硝酸鹽(1)物理性質(zhì)：亞硝酸鹽為 粉末，易溶于 ，在食品生產(chǎn)中用作食品添加劑(一般用作防腐劑)。(2)分布：在自然界中，亞硝酸鹽分布廣泛。據(jù)統(tǒng)計，蔬菜中亞硝酸鹽的平均含量約為 ，咸菜中亞硝酸鹽的平均含量在 以上，而豆粉中的平均含量可達10 mg/kg。(3)對人體的影響：膳食中的亞硝酸鹽一般不會危害人體健

7、康，但是，當人體攝入的亞硝酸鹽總量達到 時，會中毒；當攝入總量達到 時，會引起死亡。膳食中的絕大部分亞硝酸鹽在人體內(nèi)以“過客”的形式隨 排出，只有在特定條件下(適宜的pH、溫度和一定的微生物作用)，才會轉(zhuǎn)變成致癌物質(zhì) 。它具有致癌、致畸等作用。(4)要求標準：我國衛(wèi)生標準規(guī)定，亞硝酸鹽的殘留量在肉制品中不得超過 ，醬腌菜中不超過 ，而嬰兒奶粉中不得超過 。2比色法測定亞硝酸鹽含量的原理在 條件下，亞硝酸鹽與 發(fā)生 反應后，與 鹽結(jié)合形成 色染料。將顯色反應后的樣品與已知濃度的 目測比較，可以大致估算出泡菜中亞硝酸鹽含量。3測定步驟配制溶液 。【微生物的實驗室培養(yǎng)】一、培養(yǎng)基1概念：人們按照微生

8、物對 的不同需求，配制出供其 的營養(yǎng)基質(zhì)稱為培養(yǎng)基。2種類：分為 培養(yǎng)基和 培養(yǎng)基。3營養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、 、 和無機鹽，此外還要滿足微生物生長對 、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。 二、無菌技術(shù)1獲得純凈培養(yǎng)物的關鍵是防止外來 的入侵，具體操作如下：(1)對實驗操作的 、操作者的衣著和 進行清潔和 。(2)將用于微生物培養(yǎng)的器皿、 和 等進行 。(3)為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實驗操作應在 附近進行。(4)實驗操作時應避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與_ _相接觸。 2消毒和滅菌消毒滅菌概念使用較為 的物理或化學方法殺死物體 或 對人體有害的微生物(不包括 )使用 的理化因素殺死物體

9、內(nèi)外_的微生物(包括_和 )常用方法 消毒法、 消毒法、 消毒法、紫外線消毒法 、 、 適用對象操作空間、液體、雙手等接種環(huán)、接種針、玻璃器皿、培養(yǎng)基等三、大腸桿菌的純化培養(yǎng)(一)制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的步驟：1計算：依據(jù)是培養(yǎng)基 的比例。2稱量：牛肉膏比較 ，可同 一塊稱取。牛肉膏和蛋白胨易吸潮，稱取時動作要 ，稱后及時蓋上瓶蓋。3溶化：牛肉膏和稱量紙水取出稱量紙加蛋白胨和氯化鈉加 (注意：不斷用玻璃棒攪拌，防止_ _而導致_ _)補加蒸餾水至100 mL。4滅菌5倒平板：待培養(yǎng)基冷卻至_左右時，在 附近倒平板。(二)純化大腸桿菌1方法平板劃線法：通過接種環(huán)在 培養(yǎng)基表面的操作，將聚集的

10、菌種逐步 到培養(yǎng)基的表面。稀釋涂布平板法：將 進行一系列的 ，然后將不同 的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)。2鑒定：將接種后的培養(yǎng)基和一個 的培養(yǎng)基都放入 中，培養(yǎng)12 h和24 h后，分別記錄觀察。兩種接種方法都是為了將聚集在一起的微生物 ，得到由 繁殖而來的肉眼可見的單個_。【土壤中分解尿素的細菌的分離和計數(shù)】一、研究思路1篩選菌株尿素是一種重要的 肥，農(nóng)作物不能直接吸收利用，而是首先通過土壤中的細菌將尿素分解為 和CO2，才能被植物利用，土壤中的這些細菌之所以能分解尿素，是因為它們能合成 ?？梢岳眠@一特點，將其從土壤中篩選出來。 (1)實驗室中微生物篩選的原理：人為提供有

11、利于_ _生長的條件(包括營養(yǎng)、 、pH等)，同時_ _或 其他微生物生長。(2)選擇培養(yǎng)基：在微生物學中，將允許 的微生物生長，同時 和 其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱作選擇培養(yǎng)基。2統(tǒng)計菌落數(shù)目(1)常用來統(tǒng)計樣品中 數(shù)目的方法是_ _。即當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中 。通過統(tǒng)計平板上的 ，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。為了保證結(jié)果準確，一般選擇菌落數(shù)在 的平板進行計數(shù)。通常統(tǒng)計出的菌落數(shù)比活菌的實際數(shù)目 。這是因為 。因此，統(tǒng)計結(jié)果一般用 而不是活菌數(shù)來表示。(2) 也是測定微生物數(shù)量的常用方法。(3)細菌的數(shù)目還可以通過 法來測定。例如，測定

12、飲水中大腸桿菌的數(shù)量，可將 的水用細菌過濾器過濾后，將濾膜放到 培養(yǎng)基上培養(yǎng)，大腸桿菌菌落呈現(xiàn) 色，可以根據(jù)培養(yǎng)基上 的數(shù)目，計算出水樣中大腸桿菌的數(shù)量。在該實驗中至少應取_ _個水樣。3設置對照(1)設置對照的主要目的是排除實驗組中_對實驗結(jié)果的影響，提高實驗結(jié)果的 。例如為了排除培養(yǎng)基是否被雜菌污染了，需用_ 作為空白對照。(2)對照實驗是指除了 的條件外，其他條件都 的實驗，其作用是比照實驗組，排除任何其他可能原因的干擾，證明確實是所測試的條件引起相應的結(jié)果。二、實驗設計實驗設計包括對實驗方案，所需儀器、材料，用具和藥品，具體的 以及時間安排等的綜合考慮和安排。關于土壤中某樣品細菌的分離

13、與計數(shù)的實驗操作步驟如下：1土壤取樣土壤微生物約70%80%為 ，主要分布在距地表 的近 性土壤中。 2樣品的稀釋樣品的稀釋程度將直接影響平板上生長的 。由于不同微生物在土壤中含量不同，因此分離不同的微生物要選用不同的稀釋度范圍，以保證獲得_ _、適于計數(shù)的平板。一般來說，細菌稀釋度為_倍，放線菌稀釋度為 倍，真菌稀釋度為 倍。第一次實驗時，可將稀釋范圍放寬些，以保證能從中選擇出適于計數(shù)的平板。3微生物的培養(yǎng)與觀察不同種類的微生物，往往需要不同的培養(yǎng) 和培養(yǎng) 。細菌一般在 培養(yǎng) d，放線菌一般在2528 培養(yǎng)57 d，霉菌一般在 的溫度下培養(yǎng) d。在菌落計數(shù)時，每隔24 h統(tǒng)計一次菌落數(shù)目。選

14、取_ 時的記錄作為結(jié)果，以防止因_而導致遺漏菌落的數(shù)目 。一般來說，在一定的培養(yǎng)條件下(相同的培養(yǎng)基、溫度及培養(yǎng)時間)，同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征。菌落的特征包括 等方面。三、對分離得到的分解尿素細菌的鑒定在對能分解尿素的細菌進行初步篩選后，還需要借助生物化學的方法對分離的菌種作進一步的鑒定。在細菌分解尿素的化學反應中，細菌合成的_ _將尿素分解成了_ _。氨會使培養(yǎng)基的堿性 ，pH 。因此，我們可以通過檢測培養(yǎng)基 變化來判斷該化學反應是否發(fā)生。在以 為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入 指示劑。培養(yǎng)某種細菌后，如果pH升高，指示劑將變 ，說明該細菌能夠 。 【分解纖維素的微生物的分離】一、纖維素與纖

15、維素酶1纖維素的化學組成：纖維素是一種由 首尾相連而成的 化合物，是含量最豐富的 類物質(zhì)。纖維素能被土壤中某些微生物分解利用，這是因為它們能夠產(chǎn)生 。2纖維素的分布： 是自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物，此外，木材、作物秸稈等也富含纖維素。3纖維素酶的作用：纖維素酶是一種 酶，一般認為它至少包括三種組分 。它催化纖維素分解的過程如下：二、纖維素分解菌的篩選1篩選方法： 法。這種方法能夠通過直接對微生物進行篩選。2篩選原理：剛果紅是一種 ，它可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成 ，但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應。當纖維素被纖維素酶分解后，培養(yǎng)基中出現(xiàn)以 為中心的 ，我們可以通過 來篩選

16、纖維素分解菌。三、實驗設計1土壤取樣采集土樣時，應選擇 的環(huán)境。2選擇培養(yǎng)為了增加纖維素分解菌的 ，確保能夠從樣品中分離到所需微生物，可對樣品進行 培養(yǎng)。將土樣加入裝有 培養(yǎng)基的錐形瓶中，將錐形瓶固定在搖床上，在一定溫度下振蕩培養(yǎng)12 d，直至培養(yǎng)液變 ?？芍貜瓦x擇培養(yǎng)。3梯度稀釋4將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上。常用的剛果紅染色法有兩種，一種是先 ，再 ，另一種是在 時就加入剛果紅。5挑選產(chǎn)生 的菌落，一般即為分解纖維素的菌落。為了確定得到的是纖維素分解菌，還需要進行_實驗，纖維素酶的發(fā)酵方法有 發(fā)酵和_ 發(fā)酵兩種。纖維素酶測定方法，一般是對纖維素酶分解濾紙等纖維素所產(chǎn)生的 含量進行

17、定量測定。【菊花的組織培養(yǎng)】一、植物組織培養(yǎng)的基本原理植物細胞具有 。即植物細胞在脫離了原來所在植物體的器官或組織而處于 狀態(tài)時，在一定的 、 和其他外界條件的作用下，表現(xiàn)出可以發(fā)育成 的能力。二、植物組織培養(yǎng)的基本過程1細胞分化在植物的個體發(fā)育過程中，細胞在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能上都會出現(xiàn) 的差異，形成這些差異的過程叫 。2過程三、影響植物組織培養(yǎng)的因素1材料的選擇植物的種類、材料的 和 等都會影響實驗結(jié)果。如 和 的組織培養(yǎng)較為容易，而枸杞愈傷組織的芽誘導就比較難。菊花的組織培養(yǎng)，一般選擇 的莖上部新萌生的側(cè)枝作材料。2培養(yǎng)基植物組織培養(yǎng)需要適宜的培養(yǎng)基，常用的是 培養(yǎng)基，其主要成分包括：

18、，如N、P、K、Ca、Mg、S； ，如B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co； ，如甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素，以及_等；還常常需要添加 ，如 和是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關鍵性激素。3植物激素啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關鍵性激素是：_和 ，二者的 、使用的_、 等都會影響結(jié)果。以生長素和細胞分裂素為例。4其他影響因素pH、溫度、光照等條件是重要因素，pH一般控制在_左右，溫度控制在_ ，每日用日光燈照射_小時。四、實驗操作1制備MS固體培養(yǎng)基配制好的培養(yǎng)基要進行 。2外植體消毒外植體要先用70%酒精 ，再用0.1% ，最后用 清洗。3接種接種時要始終在 旁進行，對接種工具要 。

19、4培養(yǎng)接種后的錐形瓶最好放在無菌箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)期間應定期 。5移栽6栽培 【月季的花藥培養(yǎng)】一、被子植物的花粉發(fā)育1被子植物的花粉是在 中由 經(jīng)過 分裂形成的。2被子植物花粉的發(fā)育要經(jīng)歷 時期、 期和 期等階段。營養(yǎng)細胞在花粉萌發(fā)過程中可控制花粉的萌發(fā)并提供營養(yǎng)。二、產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑生根移栽兩種途徑間沒有絕對的界限，主要取決于培養(yǎng)基中 _ 的種類及其 。三、影響花藥培養(yǎng)的因素1誘導花粉植株成功率高低的主要影響因素是_與。2材料的選擇與不同植物、同種植物親本的發(fā)育時期，以及花粉發(fā)育時期有關。從花藥來看，應當選擇_ _期的花藥；從花粉來看，應當選擇 期的花粉；從花蕾來看，應當選擇 的花蕾。此

20、時期的營養(yǎng)狀態(tài)及生理狀態(tài)比較好，對離體刺激敏感。此時期之前的花藥， ，極易 ；此時期之后，花瓣已有松動，給材料的 帶來困難。3親本植株的生長條件、材料的 以及等對誘導成功率都有一定影響。四、實驗操作1材料的選擇選擇花藥時一般通過 來確定花粉發(fā)育時期，此時需要對花粉 進行染色，最常用的方法是_法和焙花青鉻釩法，它們分別可以將細胞核染成 色和 。2材料的消毒通常先將花蕾用體積分數(shù)為 浸泡大約30 s，立即取出，在 中清洗。取出后用 吸干花蕾表面的水分，再用質(zhì)量分數(shù)為 溶液消毒，最后用無菌水沖洗35次。目的是 。3接種和培養(yǎng)(1)剝離花藥：滅菌后的花蕾，要在 條件下除去萼片和花瓣。剝離花藥時，一是要

21、注意盡量_ (否則接種后容易 )；二是要徹底除去 ，否則不利于 或 的形成。(2)接種花藥：剝離的花藥要立刻接種到培養(yǎng)基上。每個培養(yǎng)瓶接種 個花藥。(3)培養(yǎng)：花藥培養(yǎng)利用的培養(yǎng)基是 培養(yǎng)基，pH為 ，溫度為 左右，幼苗形成之前 光照。培養(yǎng)2030 d后，花藥開裂，長出 或形成_。前者還要轉(zhuǎn)移到 上，以便進一步分化出再生植株；后者要盡快將幼小植株 并轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)基上。在花藥培養(yǎng)基中，用量最高的激素是 ；在誘導叢芽或胚狀體培養(yǎng)基中，用量最高的激素是 ；在誘導生根的培養(yǎng)基中，用量最高的激素是 。(4) 通過愈傷組織形成的花粉植株，常常會出現(xiàn)_的變化，因而需要鑒定和篩選。 【植物芳香油的提取】一、

22、植物芳香油的來源1.天然香料的主要來源是 和 。動物香料主要來源于麝、靈貓、海貍和抹香鯨等，植物芳香油可以從大約50多個科的植物中提取。提取出的植物芳香油具有很強的 ，其組成也比較 ，主要包括 及其 。二、植物芳香油的提取方法1.植物芳香油的提取方法有 、 和 等。具體采用哪種方法要根據(jù)植物原料的 來決定。2 法(常用方法)(1)原理：利用 將揮發(fā)性 的植物芳香油攜帶出來，形成 ，冷卻后，混合物又會重新分出 和 。(2)分類：根據(jù)蒸餾過程中 的位置，可以將水蒸氣蒸餾法劃分為水中蒸餾、 和 。其中，水中蒸餾的方法對于有些原料不適用，如柑橘和檸檬。因為會導致原料 和 等問題。3萃取法植物芳香油不僅

23、 ，而且易溶于 ，如石油醚、酒精、乙醚和戊烷等。不適于用水蒸氣蒸餾的原料，可以考慮使用此法。 (1) 方法：將 、 的植物原料用 浸泡，使 溶解于其中。隨后，只需蒸發(fā)出 ，就可以獲得純凈的植物芳香油了。(2)注意事項：用于萃取的有機溶劑必須事先 ，除去 ，否則會影響芳香油的質(zhì)量。 4 法：柑橘、檸檬芳香油的制備通常使用此法。三、實驗設計1玫瑰精油的提取(1)用途：制作高級香水的主要成分。(2)性質(zhì)：化學性質(zhì) ，難溶于 ，易溶于_ _ ，能隨 一同蒸餾。(3)方法：水蒸氣蒸餾( 蒸餾)。(4)過程：鮮玫瑰花清水 蒸餾 混合物分離 除水玫瑰油。2橘皮精油的提取(1)用途： 、化妝品、 的優(yōu)質(zhì)原料。

24、(2)主要成分： 。(3)方法：一般采用 。(4)過程： 浸泡漂洗 過濾靜置 橘皮油。四、操作提示1玫瑰精油的提取中，蒸餾溫度太 、時間太 ，產(chǎn)品品質(zhì)就比較差。如果要提高品質(zhì)，就需要 蒸餾的時間。2橘皮精油的提取中，橘皮要在 中浸透，這樣壓榨時不會 ，出油率 ，并且壓榨液黏稠度不會太高，過濾時不會 ?！竞}卜素的提取】一、基礎知識1胡蘿卜素的性質(zhì)胡蘿卜素是 結(jié)晶，化學性質(zhì)比較 ，不溶于 ，微溶于 ，易溶于 等有機溶劑。2提取原料：胡蘿卜等蔬菜。3提取方法(1)從 中提取。 (2)從 中獲得。 (3)利用 發(fā)酵生產(chǎn)。二、實驗設計1提取方法： 。2萃取劑的選擇(1)有機溶劑(2)萃取胡蘿卜素的有機

25、溶劑應具有較高的 ，能夠_胡蘿卜素，并且不與 混溶。3影響萃取的因素萃取的效率主要取決于萃取劑的 和 ，同時還受到 、緊密程度、 、萃取的 和時間等條件的影響。一般來說，原料顆粒 ，萃取溫度 ，時間 ，需要提取的物質(zhì)就能充分溶解，萃取效果就好。萃取的最佳溫度和時間可以通過設置 實驗來摸索。4萃取過程的注意事項(1)萃取過程應避免明火加熱，采用 。(2)為防止加熱時有機溶劑 ，要在加熱瓶口安裝 。(3)萃取液的濃縮可直接使用 。(4)濃縮前要進行 。(5)在干燥胡蘿卜時，要注意控制溫度，溫度太 、干燥時間太 會導致胡蘿卜素分解。干燥的速度和效果與 、 有關。5提取的胡蘿卜素粗品的鑒定： 法。方法

26、：(1)在18 cm×30 cm濾紙下端距底邊 cm處作一基線。在基線上取A、B、C、D四點。(2)用最細的注射器針頭分別吸取 mL溶解在石油醚中的 和提取樣品，在 和 點上點樣。(3)將濾紙卷成圓筒狀，置于裝有1 cm深的石油醚的密封玻璃瓶中。(4)觀察對比層析帶。課題5 DNA的粗提取與鑒定DNA的粗提取與鑒定一、提取DNA的方法提取生物大分子的基本思路是 。對于DNA的粗提取而言，就是要利用 、 等在物理和化學性質(zhì)方面的差異，提取DNA，去除其他成分。1）DNA的溶解性 DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的 中溶解度不同，利用這一特點，選擇適當?shù)柠}濃度就能使 充分溶解，而使雜質(zhì)

27、沉淀，或者相反，以達到分離目的。此外，DNA不溶于 溶液，但是細胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。利用這一原理，可以將DNA與蛋白質(zhì)進一步的分離。2）DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性 蛋白酶能水解 ，但是對 沒有影響。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受6080oC的高溫，而DNA在 以上才會變性。洗滌劑能夠瓦解 ，但對DNA沒有影響。3）DNA的鑒定 在 條件下，DNA遇 會被染成 色，因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。二、實驗設計1）實驗材料的選取 凡是含有 的生物材料都可以考慮，但是使用 的生物組織，成功的可能性更大。在下面的生物材料中選取適合的實驗材料：魚卵、豬肝、菜花（花椰菜）、香蕉、雞血、哺乳動物的紅

28、細胞、獼猴桃、洋蔥、豌豆、菠菜、在液體培養(yǎng)基的大腸桿菌2）破碎細胞，獲取含DNA的濾液 動物細胞的破碎比較容易，以雞血細胞為例，在雞血細胞液中加入一定量的 ，同時用 攪拌，過濾后收集濾液即可。如果實驗材料是植物細胞，需要先用 溶解細胞膜。例如，提取洋蔥的DNA時，在切碎的洋蔥中加入一定的 和 ，進行充分的攪拌和研磨，過濾后收集研磨液。3）去除濾液中的雜質(zhì) 4）DNA的析出與鑒定 將處理后的溶液過濾，加入與濾液體積 、冷卻的 ，靜置 ，溶液中會出現(xiàn) ，這就是粗提取的DNA。用玻璃棒 攪拌，卷起絲狀物，并用濾紙吸取上面的水分。取兩支20ml的試管，各加入物質(zhì)的量濃度為 的NaCl溶液5ml，將絲狀

29、物放入其中一支試管中，用玻璃棒攪拌，使絲狀物溶解。然后，向兩支試管中各加入4ml的 ?；旌暇鶆蚝?，將試管置于 中加熱5min，待試管冷卻后，比較兩支試管溶液顏色的變化，看看溶解有DNA的溶液是否變 。三、操作提示以血液為實驗材料時，每100ml血液中需要加入3g ，防止 。加入洗滌劑后，動作要 、 ，否則容易產(chǎn)生大量的泡沫，不利于后續(xù)步驟地操作。加入酒精和用玻璃棒攪拌時，動作要 ，以免 ，導致DNA分子不能形成絮狀沉淀。二苯胺試劑要 ，否則會影響鑒定的效果。四、結(jié)果分析與評價【疑難點撥】1為什么加入蒸餾水能使雞血細胞破裂？答：蒸餾水對于雞血細胞來說是一種低滲液體，水分可以大量進入血細胞內(nèi)，使血細胞脹裂，再加上攪拌的機械作用，就加速了雞血細胞的破裂(細胞膜和核膜的破裂)，從而釋放出DNA。2加入洗滌劑和食鹽的作用分別是什么？答：洗滌劑是一些離子去污劑，能溶解細胞膜，有利于DNA的釋放；食鹽的主要成分是NaCl，有利于DNA的溶解。3如果研磨不