心腦血管藥理、食管癌放療增敏研究MnSOD基因單核苷酸多態(tài)性與食管癌放療敏感性

1、心腦血管藥理、食管癌放療增敏研究 MnSOD基因單核苷酸多態(tài)性與食管癌放療敏感性研研 究究 背背 景景錳超氧化物歧化酶錳超氧化物歧化酶（ MnSOD ）存在于線粒體中，可使細(xì)胞代謝過程中產(chǎn)生的超氧陰離子（存在于線粒體中，可使細(xì)胞代謝過程中產(chǎn)生的超氧陰離子（ O2-. ）轉(zhuǎn)化為）轉(zhuǎn)化為H2O2，H2O2又在谷胱甘肽過氧化物酶（又在谷胱甘肽過氧化物酶（GPx）和過氧化氫酶（）和過氧化氫酶（ CAT ）兩酶的作用下）兩酶的作用下，生成水和氧，使細(xì)胞無毒化，生成水和氧，使細(xì)胞無毒化，是體內(nèi)重要的抗氧化物質(zhì)是體內(nèi)重要的抗氧化物質(zhì) 。 O2-. H2O2 H2OO2 研究背景研究背景放射治療放射治療直接作

2、用：放射線損傷直接作用：放射線損傷DNA細(xì)胞死亡細(xì)胞死亡MnSOD間接作用：間接作用：H2O O2-、OH和和H自由基與生物大分子相互作用，自由基與生物大分子相互作用，形成不可逆損傷形成不可逆損傷放射線放射線研究背景研究背景MnSOD對放射敏感性的影響對放射敏感性的影響中國倉鼠卵巢細(xì)胞系中國倉鼠卵巢細(xì)胞系新型抑癌基因新型抑癌基因 胃癌、前列腺癌、乳腺癌等多種胃癌、前列腺癌、乳腺癌等多種 腫瘤組織中存在腫瘤組織中存在 MnSOD低表達低表達 或不表達或不表達 MnSOD 高表達使細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力和腫瘤高表達使細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力和腫瘤形成能力降低形成能力降低研究背景研究背景 染色體基因組水平染色體基因組水平

3、上單個核苷酸變異引起的上單個核苷酸變異引起的DNA序列多態(tài)性。包括序列多態(tài)性。包括單堿基的單堿基的轉(zhuǎn)換、顛換，轉(zhuǎn)換、顛換，不不包括插入、缺失等其它的包括插入、缺失等其它的遺傳變化類型遺傳變化類型 。它是人。它是人類可遺傳的變異中最常見類可遺傳的變異中最常見的一種。的一種。 研究背景研究背景研究背景研究背景Sutton A et al. Pharmacogenetics 2003;13(3):145157 啟動子上游第啟動子上游第9位點位點TC纈氨酸纈氨酸(Val)丙氨酸丙氨酸(Ala)Ala-MnSODT）SNP 延長了放療后乳腺癌患者的無復(fù)發(fā)延長了放療后乳腺癌患者的無復(fù)發(fā) 生存時間。生存時間

4、。 研究背景研究背景研究目的研究目的 探討探討MnSOD基因啟動子區(qū)上游第基因啟動子區(qū)上游第9位點位點TC多態(tài)性與食管癌放射敏感性的關(guān)系多態(tài)性與食管癌放射敏感性的關(guān)系目目 的的材料與方法材料與方法2006.92007.12 我科收治的食管鱗狀細(xì)胞癌患者我科收治的食管鱗狀細(xì)胞癌患者93例。例。符合放療入組標(biāo)準(zhǔn)，完成所有放療計劃且可行放療后評價。符合放療入組標(biāo)準(zhǔn)，完成所有放療計劃且可行放療后評價。 材料與方材料與方法法入入 組組 標(biāo)標(biāo) 準(zhǔn)準(zhǔn)23例例照射范圍：食管原發(fā)灶上下外擴照射范圍：食管原發(fā)灶上下外擴35 cm ，野寬，野寬58cm照射方式：等中心照射技術(shù)，三野或四野照射，照射方式：等中心照射技

5、術(shù)，三野或四野照射， 照射劑量：照射劑量：6064 Gy/3032次次/66.5W普通普通70例例照射范圍：照射范圍： GTV：食管原發(fā)灶（長度以影像學(xué)和內(nèi)鏡檢查為主要依據(jù)，：食管原發(fā)灶（長度以影像學(xué)和內(nèi)鏡檢查為主要依據(jù)， 前后左右以前后左右以CT顯示大小）和長徑顯示大?。┖烷L徑1cm腫大淋巴結(jié)腫大淋巴結(jié) CTV：臨床靶區(qū)包括原發(fā)灶上下外擴：臨床靶區(qū)包括原發(fā)灶上下外擴3cm、周圍外擴、周圍外擴0.8 1.0cm 及相應(yīng)的淋巴引流區(qū)及相應(yīng)的淋巴引流區(qū) PTV：計劃靶區(qū)為：計劃靶區(qū)為CTV均勻外擴均勻外擴0.5cm適形適形照射劑量：照射劑量： 6064Gy/3032次次/66.5W，材料與方材料與

6、方法法療療 效效評評價價萬鈞等萬鈞等“食管癌近期療效評價標(biāo)準(zhǔn)食管癌近期療效評價標(biāo)準(zhǔn)”CR：X片上顯示粘膜像，可見粘膜基本恢復(fù)正?；蛟龃?；若食管鋇餐造影充盈片邊片上顯示粘膜像，可見粘膜基本恢復(fù)正?；蛟龃?；若食管鋇餐造影充盈片邊緣緣 光滑，鋇劑通過順利，但管壁可稍僵硬，管壁無狹窄或稍顯狹窄，病變上光滑，鋇劑通過順利，但管壁可稍僵硬，管壁無狹窄或稍顯狹窄，病變上最寬處最寬處 橫徑與病變最狹窄處橫徑之比，小于或等于橫徑與病變最狹窄處橫徑之比，小于或等于1.5PR：食管鋇餐食管走行無明顯扭曲或成角，無明顯潰瘍，鋇劑通過尚順利，但邊緣：食管鋇餐食管走行無明顯扭曲或成角，無明顯潰瘍，鋇劑通過尚順利，但邊緣欠

7、欠 光滑，有小的充盈缺損及或小龕影，或邊緣雖光滑，但管腔有明顯的狹窄，光滑，有小的充盈缺損及或小龕影，或邊緣雖光滑，但管腔有明顯的狹窄，病變病變 上最寬處橫徑與病變最狹窄處橫徑之比大于上最寬處橫徑與病變最狹窄處橫徑之比大于1.5NR：食管鋇餐片病變?nèi)杂袣埩艋蚩床怀霾∽冇忻黠@好轉(zhuǎn)，：食管鋇餐片病變?nèi)杂袣埩艋蚩床怀霾∽冇忻黠@好轉(zhuǎn)， 仍有明顯的充盈缺損及龕仍有明顯的充盈缺損及龕影影 或狹窄加重或狹窄加重材料與方材料與方法法療效評價療效評價療療 效效評評價價材料與方材料與方法法隨訪截止時間為隨訪截止時間為2009年年2月月22日，共計隨訪患日，共計隨訪患者者93例，失訪例，失訪3例，隨訪率例，隨訪率9

8、7%，總體中位生，總體中位生存時間（存時間（median survival time，MST）18.0個月。個月。 療效評價療效評價提取基因組提取基因組DNADNAPCR-RFLPPCR-RFLPMnSODMnSOD基因型分析基因型分析采集外周血采集外周血5ml5ml各組間基因型分析各組間基因型分析食管癌患者食管癌患者材料與方材料與方法法PCR-RFLP（聚合酶鏈反應(yīng)（聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長度多態(tài)性）限制性片段長度多態(tài)性）預(yù)變性預(yù)變性預(yù)變性：預(yù)變性：95 5min變變 性：性： 95 30s退退 火：火：64.5 30s延延 伸：伸：72 1min延延 伸：伸： 72 5min 延伸延伸3

9、5個循環(huán)個循環(huán)上游引物：上游引物： 5 -ACCAGCAGGCAGCTGGCGCCGG-3下游引物：下游引物： 5 -GCGTTGATGTGAGGTTCCAG-3材料與方材料與方法法 卡方檢驗分析不同MnSOD基因型之間 即期療效的差異 采用Kaplan-Meier法計算生存率，差異 顯著性檢驗采用Logrank法檢驗 分析不同MnSOD基因型之間預(yù)后的差 異，顯著性水平為P0.05C/C或或C/T262273%結(jié)結(jié) 果果討討 論論討討 論論 討討 論論 纈氨酸纈氨酸(Val)丙氨酸丙氨酸(Ala)Ala-MnSOD Val-MnSODMnSOD 啟動子上游啟動子上游第第9位點位點TC多態(tài)多態(tài)

10、MnSOD活性活性放射敏感性放射敏感性ROS清除能力清除能力結(jié)結(jié) 論論 病變長度病變長度5cm患者中，攜帶患者中，攜帶T/C或或C/C基因型患者即期療效優(yōu)于攜帶基因型患者即期療效優(yōu)于攜帶T/T基因型患者，即基因型患者，即MnSOD（T/CC/C）基因型增加了病變長度）基因型增加了病變長度5cm食管癌患者的放療敏感性。食管癌患者的放療敏感性。結(jié)結(jié) 論論 本研究顯示：攜帶本研究顯示：攜帶MnSOD （T/C+C/C）基因型患者）基因型患者1年生存率為年生存率為73%，好于攜帶，好于攜帶MnSOD（T/T）基因型患者一年生存率）基因型患者一年生存率68%，但未顯出統(tǒng)計學(xué)差異，可能與病例數(shù)少，或觀察時間，但未顯出統(tǒng)計學(xué)差異，可能與病例數(shù)少，或觀察時間短有關(guān)，有待于加大樣本量及進一步隨訪，以期得出可靠的結(jié)論。短有關(guān)，有待于加大樣本量及進一步隨訪，以期得出可靠的結(jié)論。 結(jié)結(jié) 論論 人有了知識，就會具備各種分析能力，明辨是非的能力。所以我們要勤懇讀書，廣泛閱讀，古人說“書中自有黃金屋?！蓖ㄟ^閱讀科技書籍，我們能豐富知識，培養(yǎng)邏輯思維能力；通過閱讀文學(xué)作品，我們能提高文學(xué)鑒賞水平，培養(yǎng)文學(xué)情趣；通過閱讀報刊，我們能增長見識，擴大自己的知識面。有許多書籍還能培養(yǎng)我們的道德情操，給我們巨大的精神力量，鼓舞