通腑法開通玄府對大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷腦含水量的影響

1、通腑法開通玄府對大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷腦含水量的影響         作者：胡建芳 余志輝 汪峰 黃培新 尤勁松 【摘要】 目的研究通腑醒神膠囊（簡稱TFXSJN，下同）通腑法開通玄府對大鼠急性局灶性腦缺血再灌注損傷模型腦含水量的影響。方法采用線栓法制作大鼠大腦中動脈阻塞模型,2h后拔線實現(xiàn)再灌注損傷，于拔線后1，3 d及7 d不同時間點              

2、0;           作者：胡建芳余志輝汪峰黃培新尤勁松【摘要】  目的研究通腑醒神膠囊（簡稱TFXSJN，下同）通腑法開通玄府對大鼠急性局灶性腦缺血再灌注損傷模型腦含水量的影響。方法采用線栓法制作大鼠大腦中動脈阻塞模型,2h后拔線實現(xiàn)再灌注損傷，于拔線后1，3 d及7 d不同時間點觀察神經(jīng)功能評分、大鼠腦含水量及腦組織病理的改變。結(jié)果造模后模型組及治療組大鼠的腦含水量在1 d時均明顯升高，與假手術(shù)組及正常組相比有顯著性差異（P<0.05），3 d時腦含水量最高，7 d時基本

3、恢復(fù)正常，與假手術(shù)組及正常組相比無明顯統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。而治療組在3d時的腦含水量明顯低于模型組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；而TFXSJN治療后能有效降低模型鼠1，3 d及7 d時的神經(jīng)功能缺損評分；明顯減輕腦組織病理損傷程度。結(jié)論TFXSJN通腑法開通玄府能減輕大鼠急性局灶性腦缺血再灌注損傷的腦含水量，減輕腦組織損傷程度，從而減輕神經(jīng)功能缺損癥狀。 【關(guān)鍵詞】  局灶性腦缺血；缺血再灌注損傷；通腑法/中醫(yī)藥療法；玄府腦水腫是缺血性中風(fēng)早期常見的病理反應(yīng)，其嚴(yán)重程度和持續(xù)時間與腦缺血的預(yù)后有著密切的關(guān)系，嚴(yán)重者可導(dǎo)致顱內(nèi)高壓、腦疝的形成，甚至死亡。對于

4、腦水腫的防治，目前常用的方法主要有脫水、激素、白蛋白等預(yù)防和治療，但會出現(xiàn)水電解質(zhì)平衡紊亂、低血容量、腎功能損害、反跳等一系列并發(fā)癥1。研究認(rèn)為以通腑法為主的治療方法可以減輕腦水腫，起到與脫水藥類似的效果，保護(hù)受損的腦細(xì)胞2，3。為了進(jìn)一步探討通腑法對缺血性腦水腫的治療作用，我們建立了大鼠急性局灶性腦缺血再灌注損傷模型，觀察TFXSJN通腑法對該模型大鼠腦水腫的影響，把通腑法與中醫(yī)的玄府理論相結(jié)合，用玄府理論來闡釋通腑法治療中風(fēng)的實質(zhì)內(nèi)涵，有助于中風(fēng)病臨床療效的提高和中醫(yī)理論的創(chuàng)新及現(xiàn)代化。1  材料與方法1.1  試劑及儀器10水合氯醛。白熾燈、眼科剪、眼科鑷子、手術(shù)剪、

5、直徑0.220.28 mm的漁線、04外科縫線、微動脈夾、微量精密天平儀、烘干箱等。1.2 藥物通腑醒神膠囊為廣東省中醫(yī)院自制藥劑，由番瀉葉、虎杖、人工牛黃、天竺黃、栝蔞仁等藥物組成。1.3 動物分組及給藥選用健康雄性SpragueDawley大鼠120只，SPF級，體重250300 g，由廣州中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心提供（動物合格證號：0014930）。120只大鼠隨機分為正常對照組（n12）、假手術(shù)組（n36）、模型組（n36）、TFXSJN治療組（n36）。TFXSJN按大鼠每日每公斤體重1.5g計算藥量，按動物系數(shù)折算，相當(dāng)于70 kg成人臨床劑量的3倍，均于術(shù)前一天及術(shù)后麻醉清醒后，每

6、日分兩次灌胃給藥（2 ml）或者蒸餾水2 ml，上、下午各1次。各組動物如有死亡應(yīng)及時補充。1.4 大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷模型的建立大鼠大腦中動脈閉塞（Middle cerebral artery occlusion，MCAO）模型制作參照koizumi線栓法4，從右側(cè)頸總動脈（common carotid artery，CCA）進(jìn)線，栓線采用尼龍漁線，長約4 cm，直徑約0.26 mm，術(shù)后2 h拔出線栓約1.5 cm形成缺血再灌注損傷。大鼠術(shù)中及清醒前均給予白熾燈（100W）照射，保持肛溫36左右，室溫25。假手術(shù)組漁線插入CCA深度為0.5cm，其余操作均同手術(shù)組。1.5 觀察指標(biāo)及

7、檢測方法1.5.1 腦含水量的測定模型組、TFXSJN組及假手術(shù)組于術(shù)后第1天、第3天、第7天時間點各取6只大鼠，同時取正常大鼠6只做對照，評分后斷頭取腦，去除腦表面的硬脊膜、小腦及腦干部分，立即用微量精密天平稱取腦濕重，然后放置烘箱里，80烘72h至恒重，計算腦含水量。腦含水量（%）=(濕重-干重)濕重×100。1.5.2 動物神經(jīng)功能評分參照Zealonga 5分制評分標(biāo)準(zhǔn)。0分：無神經(jīng)系統(tǒng)損傷癥狀；1分：不能完全伸展對側(cè)前爪；2分：向?qū)?cè)轉(zhuǎn)圈；3分：向?qū)?cè)傾倒；4分：不能自發(fā)行走；5分：意識喪失。累計一分以上即為成功模型。動物清醒后觀察拔線時及再灌注后1，3，7 d時的神經(jīng)功能缺失評分。1.5.3 腦組織的病理改變各組大鼠于術(shù)后1，3 d及7 d觀察神經(jīng)功能評分后，分別取6只，并取6只正常大鼠作對照，斷頭處死，取腦，去除小腦、腦干，取視交叉為中心水平相當(dāng)于前聯(lián)合水平腦片，置入10中性福爾馬