化妝品中禁用物質(zhì)和限用物質(zhì)檢測(cè)方法驗(yàn)證技術(shù)規(guī)范

1、化妝品中禁用物質(zhì)和限用物質(zhì)檢測(cè)方法驗(yàn)證技術(shù)規(guī)范為加強(qiáng)對(duì)化妝品中禁用物質(zhì)和限用物質(zhì)檢測(cè)方法研究工作的技術(shù)指導(dǎo)，規(guī)范化妝品中禁用物質(zhì)和限用物質(zhì)檢測(cè)方法研究和驗(yàn)證工作， 明確檢測(cè)方法驗(yàn)證內(nèi)容和評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，有效保證研究制定的檢測(cè)方法具備先進(jìn)性和可行性，特制定本規(guī)范。1 適用范圍本規(guī)范規(guī)定了化妝品中禁用物質(zhì)和限用物質(zhì)檢測(cè)方法研究和建立過(guò)程中檢測(cè)方法驗(yàn)證內(nèi)容、技術(shù)要求和評(píng)價(jià)指標(biāo)。本規(guī)范適用于化妝品中禁用物質(zhì)和限用物質(zhì)檢測(cè)方法的驗(yàn)證與評(píng)價(jià)。2 依據(jù)化妝品衛(wèi)生規(guī)范3 釋義3.1 本規(guī)范中所指化妝品中禁用物質(zhì)是指化妝品衛(wèi)生規(guī)范中規(guī)定的化妝品禁用組分。3.2 本規(guī)范中所指化妝品中限用物質(zhì)是指化妝品衛(wèi)生規(guī)范中規(guī)定的化

2、妝品組分中限用物質(zhì)、限用防曬劑、限用防腐劑、限用著色劑、暫時(shí)允許使用的染發(fā)劑等。4 定義與術(shù)語(yǔ)4.1 被測(cè)物質(zhì)是指本規(guī)范第3 項(xiàng)規(guī)定的禁用物質(zhì)和限用物質(zhì)。4.2 特異性在確定的分析條件下，檢測(cè)方法所具備的檢測(cè)和區(qū)分共存組分中被測(cè)物能力的特性。4.3 線性及線性范圍4.3.1 線性是指在設(shè)計(jì)范圍內(nèi)檢測(cè)響應(yīng)值與樣品中被測(cè)物質(zhì)濃度或量成比例關(guān)系的程度。4.3.2 線性范圍是指利用一種方法取得精密度、準(zhǔn)確度均符合要求的檢測(cè)結(jié)果，而且呈線性的被測(cè)物質(zhì)濃度或量的變化范圍。4.4 檢出限和定量下限4.4.1 檢出限：被測(cè)物質(zhì)能被檢測(cè)出的最低量。4.4.2 定量下限：能夠?qū)Ρ粶y(cè)物質(zhì)準(zhǔn)確定量的最低濃度或質(zhì)量。4

3、.5 檢出濃度和最低定量濃度4.5.1 檢出濃度：按照檢測(cè)方法操作，方法檢出限對(duì)應(yīng)的被測(cè)物質(zhì)濃度。4.5.2 最低定量濃度：按照檢測(cè)方法操作，定量下限對(duì)應(yīng)的被測(cè)物質(zhì)濃度。4.6 精密度在確定的分析條件下，相同濃度被測(cè)物質(zhì)的一系列獨(dú)立測(cè)量結(jié)果的一致程度，包括日內(nèi)精密度和日間精密度。日內(nèi)精密度：同一天測(cè)定的精密度。日間精密度：不同天測(cè)定的精密度。4.7 回收率提取回收率：是指在確定的分析條件下，回收到物質(zhì)的實(shí)際濃度的百分比，以樣品提取和處理過(guò)程前后被測(cè)物質(zhì)含量百分比表示方法回收率：是指在確定的分析條件下，被測(cè)物質(zhì)測(cè)得值與真實(shí)值的接近程度，以百分比表示。4.8 實(shí)驗(yàn)樣品為建立和驗(yàn)證檢測(cè)方法而使用的化

4、妝品。4.9 空白樣品能夠以可重復(fù)方式獲得或制備的，不含被測(cè)物質(zhì)的化妝品。4.10 穩(wěn)定性在確定的分析條件下，一定時(shí)間內(nèi)被測(cè)物質(zhì)在一定溶劑或空白樣品中的化學(xué)穩(wěn)定性，包括日內(nèi)穩(wěn)定性和日間穩(wěn)定性。日內(nèi)穩(wěn)定性：在一定溶劑或空白樣品中的被測(cè)物質(zhì)在正常實(shí)驗(yàn)條件或適宜樣品保存的條件下放置一天的穩(wěn)定性。日間穩(wěn)定性：在一定溶劑或空白樣品中的被測(cè)物質(zhì)在正常實(shí)驗(yàn)條件或適宜樣品保存的條件下放置多天的穩(wěn)定性。5 檢測(cè)方法驗(yàn)證的內(nèi)容方法驗(yàn)證包括實(shí)驗(yàn)室內(nèi)驗(yàn)證和實(shí)驗(yàn)室間驗(yàn)證。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)驗(yàn)證的內(nèi)容一般包括：方法特異性、線性及線性范圍、檢出限和定量下限、檢出濃度和最低定量濃度、精密度、準(zhǔn)確度、回收率和實(shí)驗(yàn)樣品檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)室間驗(yàn)證的

5、內(nèi)容一般包括：方法特異性、線性及線性范圍、檢出限、最低定量濃度、日內(nèi)精密度、回收率和實(shí)驗(yàn)樣品檢測(cè)。6 檢測(cè)方法驗(yàn)證的技術(shù)要求6.1 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)方法驗(yàn)證6.1.1 特異性所采用的檢測(cè)方法需要克服任何可預(yù)見(jiàn)的干擾，特別是來(lái)自實(shí)驗(yàn)樣品中除被測(cè)物質(zhì)以外的其他組分的干擾，一般對(duì)具有代表性的空白樣品和空白樣品加被測(cè)物質(zhì)的樣品，按照確定的樣品前處理方法處理后， 進(jìn)樣檢測(cè)分析，考察實(shí)驗(yàn)樣品中除被測(cè)物質(zhì)以外的其他組分對(duì)被測(cè)物質(zhì)的測(cè)定有無(wú)干擾。6.1.2 線性及線性范圍線性考察：制備至少5 個(gè)系列濃度（不包括零點(diǎn)）的被測(cè)物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品溶液，進(jìn)行檢測(cè)分析，記錄相應(yīng)的信號(hào)響應(yīng)值，以被測(cè)物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品溶液的濃度為橫坐標(biāo)（X）、信

6、號(hào)響應(yīng)值為縱坐標(biāo)（y）建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行相關(guān)性分析，并回歸得到線性方程和相關(guān)系數(shù)（r） 。呈線性的被測(cè)物質(zhì)的濃度或量的變化范圍確定為線性范圍。方法線性考察：在空白樣品中加入被測(cè)物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品，制備成至少5 個(gè)系列濃度（不包括零點(diǎn)）的樣品溶液，進(jìn)行檢測(cè)分析，記錄相應(yīng)的信號(hào)響應(yīng)值，以被測(cè)物質(zhì)的濃度為橫坐標(biāo)（X） 、信號(hào)響應(yīng)值為縱坐標(biāo)（y）建立方法標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行相關(guān)性分析，并回歸得到線性方程和相關(guān)系數(shù)（ r） 。 呈線性的被測(cè)物質(zhì)濃度的變化范圍確定為線性范圍。必要時(shí)，信號(hào)響應(yīng)值可進(jìn)行數(shù)學(xué)轉(zhuǎn)換，再進(jìn)行回歸計(jì)算。6.1.3 檢出限和定量下限檢出限和定量下限考察見(jiàn)化妝品衛(wèi)生規(guī)范。6.1.4 檢出濃度和最低定量

7、濃度按照檢測(cè)方法操作，能夠從實(shí)驗(yàn)樣品背景中區(qū)分出被測(cè)物質(zhì)響應(yīng)信號(hào)的最低濃度為檢出濃度，能夠?qū)?shí)驗(yàn)樣品背景中被測(cè)物質(zhì)進(jìn)行準(zhǔn)確定量的最低濃度或質(zhì)量為最低定量濃度。1.1.1.1 日內(nèi)精密度通常至少采用高低兩種適宜濃度的被測(cè)物質(zhì)或在空白樣品中加 入被測(cè)物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)溶液，其中：高濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液應(yīng)接近標(biāo)準(zhǔn)曲線或 方法標(biāo)準(zhǔn)曲線的最高點(diǎn)（下同）；低濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液應(yīng)接近最低定量 濃度（下同），于同一日內(nèi)測(cè)定至少6次，記錄被測(cè)物質(zhì)的信號(hào)響應(yīng) 值，考察該組測(cè)量值的彼此符合程度，以相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）表示。1.1.1.2 日間精密度通常至少采用高低兩種適宜濃度的被測(cè)物質(zhì)或在空白樣品中加入被測(cè)物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)溶液，于不同日

8、測(cè)定，記錄被測(cè)物質(zhì)的信號(hào)響應(yīng)值， 考察該組測(cè)量值的彼此符合程度，以相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（ RSD）表示。1.1.1.3 相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）的計(jì)算6.1.6 回收率6.1.6.1 提取回收率采用在空白樣品或?qū)嶒?yàn)樣品中添加高低兩種濃度被測(cè)物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn) 品的方法測(cè)定，記錄被測(cè)物質(zhì)的信號(hào)響應(yīng)值，代入標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算被測(cè) 物質(zhì)的濃度，計(jì)算提取回收率。6.1.6.2 方法回收率采用在空白樣品或?qū)嶒?yàn)樣品中添加高低兩種濃度被測(cè)物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn) 品的方法測(cè)定，記錄被測(cè)物質(zhì)的信號(hào)響應(yīng)值，代入方法標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算 被測(cè)物質(zhì)的濃度，計(jì)算方法回收率。6.1.6.3 回收率的計(jì)算公式回收率=（樣品中被測(cè)物質(zhì)的測(cè)定量一樣品中被測(cè)物質(zhì)的原有 量）/

9、實(shí)際添加量x 100%6.1.7 穩(wěn)定性6.1.7.1 日內(nèi)穩(wěn)定性通常至少采用高低兩種適宜濃度的被測(cè)物質(zhì)或在空白樣品中加入被測(cè)物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)溶液，在正常實(shí)驗(yàn)條件或適宜樣品保存的條件下，在不同時(shí)間點(diǎn)分別測(cè)定，代入標(biāo)準(zhǔn)曲線或方法標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算被測(cè)物質(zhì)的濃度，并計(jì)算其準(zhǔn)確度和RSD 值，考察被測(cè)物質(zhì)在溶液或空白樣品中放置一天內(nèi)的穩(wěn)定性。6.1.7.2 日間穩(wěn)定性通常至少采用高低兩種適宜濃度的被測(cè)物質(zhì)或在空白樣品中加入被測(cè)物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)溶液，在正常實(shí)驗(yàn)條件或適宜樣品保存的條件下，連續(xù)多天測(cè)定，代入標(biāo)準(zhǔn)曲線或方法標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算被測(cè)物質(zhì)的濃度，并計(jì)算其準(zhǔn)確度和RSD 值，考察被測(cè)物質(zhì)在溶液或空白樣品中放置多天的穩(wěn)定性

10、。6.1.8 實(shí)驗(yàn)樣品檢測(cè)分析選擇具有代表性的實(shí)驗(yàn)樣品，按照 化妝品衛(wèi)生規(guī)范規(guī)定取樣，嚴(yán)格按照檢測(cè)方法進(jìn)行檢測(cè)分析。6.1.9 禁用物質(zhì)陽(yáng)性結(jié)果判定依據(jù)考察化妝品中禁用物質(zhì)陽(yáng)性結(jié)果必須采用適宜的、可靠的方法進(jìn)行確證。采用色譜-質(zhì)譜技術(shù)確證化妝品中禁用物質(zhì)陽(yáng)性結(jié)果時(shí)，按照確定的分析條件，考察實(shí)驗(yàn)樣品與加入被測(cè)禁用物質(zhì)的空白樣品的質(zhì)量色譜峰保留時(shí)間以及濃度相當(dāng)時(shí)的定性離子的相對(duì)豐度比的一致性。采用其他技術(shù)確證化妝品中禁用物質(zhì)陽(yáng)性結(jié)果時(shí)，應(yīng)建立能夠保證確 證結(jié)果正確性的依據(jù)和評(píng)價(jià)指標(biāo)。6.2 實(shí)驗(yàn)室間方法驗(yàn)證6.2.1 參加檢測(cè)方法驗(yàn)證的機(jī)構(gòu)或?qū)嶒?yàn)室 參加檢測(cè)方法驗(yàn)證的機(jī)構(gòu)或?qū)嶒?yàn)室必須是按照國(guó)家有關(guān)

11、認(rèn)證認(rèn)可的規(guī)定，取得資質(zhì)認(rèn)定，其檢測(cè)人員、環(huán)境條件、設(shè)施設(shè)備等應(yīng)滿足檢測(cè)方法驗(yàn)證的要求。每種檢測(cè)方法參加方法驗(yàn)證的檢測(cè)機(jī)構(gòu)或?qū)嶒?yàn)室應(yīng)不少于3 家。6.2.2 方法驗(yàn)證樣品的提供方法建立機(jī)構(gòu)或?qū)嶒?yàn)室應(yīng)向參與方法驗(yàn)證的機(jī)構(gòu)或?qū)嶒?yàn)室提供一致的實(shí)驗(yàn)樣品、空白樣品和標(biāo)準(zhǔn)品，并應(yīng)注意樣品的被測(cè)物質(zhì)的本底情況。6.2.3 方法驗(yàn)證技術(shù)要求實(shí)驗(yàn)室間的具體驗(yàn)證技術(shù)要求同6.1 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)方法驗(yàn)證。6.3 方法驗(yàn)證內(nèi)容的評(píng)價(jià)指標(biāo)6.3.1 特異性實(shí)驗(yàn)樣品中共存物質(zhì)應(yīng)對(duì)被測(cè)物質(zhì)的測(cè)定結(jié)果無(wú)干擾。6.3.2 線性及線性范圍線性范圍適宜，能夠滿足化妝品中被測(cè)物質(zhì)測(cè)定要求，且線性良好，線性相關(guān)系數(shù)A 0.99。6.3.3

12、檢出限和定量下限具有足夠低的檢出限和定量下限，能夠滿足化妝品中被測(cè)物質(zhì)測(cè)定要求。6.3.4 檢出濃度和最低定量濃度具有足夠低的檢出濃度和最低定量濃度，能夠滿足化妝品中被測(cè)物質(zhì)測(cè)定要求。通常要求方法最低定量濃度的精密度的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)應(yīng)不超過(guò)20%,方法回收率要求在 80%-120%之間。6.3.5 精密度根據(jù)化妝品中被測(cè)物質(zhì)的含量及確定的分析方法， 精密度應(yīng)能夠 滿足化妝品中被測(cè)物質(zhì)的測(cè)定要求，通常日內(nèi)和日間精密度的相對(duì)標(biāo) 準(zhǔn)偏差（RSD）應(yīng)不超過(guò)表1所列水平。特殊情況應(yīng)予以說(shuō)明。表1 ：精密度的接受范圍被測(cè)物精密度RSD含量詞0聞/ kg20%10 聞 / kg < 含量 &l

13、t; 100 聞 / kg15%100 聞 / kg < 含量 < 1000 聞 / kg10%含量> 1000聞/ kg5%6.3.6 回收率根據(jù)化妝品中被測(cè)物質(zhì)的含量及確定的分析方法， 回收率應(yīng)能夠 滿足化妝品中被測(cè)物質(zhì)的測(cè)定要求。通常提取回收率要求在 85%-115%之間，如果提取回收率超出85%-115%的范圍，則要求方 法回收率在85%-115%之間。特殊情況應(yīng)予以說(shuō)明。6.3.7 穩(wěn)定性要求被測(cè)物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)溶液或前處理后的樣品在穩(wěn)定時(shí)間內(nèi)使用 和測(cè)定。6.3.8 實(shí)驗(yàn)樣品分析結(jié)果在重復(fù)條件下兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)偏差在已確定分析方法 的精密度接受范圍內(nèi)。6.3.9 禁用物質(zhì)陽(yáng)性結(jié)果判定依據(jù)采用色譜-質(zhì)譜技術(shù)確證化妝品中禁用物質(zhì)陽(yáng)性結(jié)果時(shí)，實(shí)驗(yàn)樣品與加入被測(cè)禁用物質(zhì)的空白樣品的質(zhì)量色譜峰保留時(shí)間要求一致，至少兩組濃度相當(dāng)時(shí)的定性離子的相對(duì)豐度比一致，定性離子的相對(duì)豐