淫羊藿總黃酮的提取工藝及含量分布

1、淫羊藿總黃酮的提取工藝及含量分布         08-05-28 16:15:00     編輯：studa20         作者：劉敏，周芳，黃少偉，池汝安， 吳元欣， 王存文， 巨修練， 郭嘉， 黃齊茂 【關鍵詞】  淫羊藿；,提?。?總黃酮；,正交設計摘要：目的研究淫羊藿總黃酮的提取工藝及產(chǎn)地不同的淫羊藿植株總黃酮在各部位的含量分布。方法用乙醇和水回流提取淫羊藿總黃酮；選取湖

2、北恩施及福建三明淫羊藿為原料，做單因素實驗，再以淫羊藿總黃酮提取率為考察指標，作正交實驗設計；采用紫外分光光度法測定淫羊藿總黃酮含量。結(jié)果以乙醇和水作為提取劑的提取率分別為70.5、31.1；恩施與三明所產(chǎn)的箭葉淫羊藿其淫羊藿總黃酮含量分別為：葉3.24，1.02；莖0.91，0.14；根2.47，0.61。結(jié)論湖北恩施所產(chǎn)的箭葉淫羊藿比福建三明所產(chǎn)的箭葉淫羊藿中總黃酮含量高；乙醇作提取劑的提取率明顯高于水，影響淫羊藿總黃酮提取效果的主次因素為：溶劑濃度回流時間提取次數(shù)液固比。淫羊藿總黃酮的優(yōu)化提取工藝為：液固比為121，以60%乙醇提取3次，1.5 h/次，優(yōu)化工藝的總黃酮提取率達77.5。

3、關鍵詞：淫羊藿；  提取；  總黃酮；  正交設計The Extraction Technology for Total Flavone and its Content Distribution in Herba EpimediumAbstract：ObjectiveTo study an extraction Technology for total flavone and to determine the content distribution in Herba Epimedium. MethodsThe extraction rate was compar

4、ed between ethanol extract and water extract. The optimum extractive conditions were investigated by orthogonal design and one-factor experiment. ResultsThe extraction rates with ethanol and water as extractants were 65.2%, 26.6%, respectively. The contents of Epimedium flavonoids from Enshi in root

5、, stalk and leaf were 3.24，0.91 and 2.43，respectively, while the ones from Sanming were 1.02, 0.14, 0.61, respectively. ConclusionThe factors which influence extraction rate are sorted as follows: ACDB, where A, B, C and D stands for the concentration of ethanol, the dosage of ethanol, extract time

6、and times of leaching, respectively. The optimum technology of extraction is as follows: 60% ethanol, twelve-fold leachant, 3 times extraction and 1.5 hours. The extraction rate is up to 77.5%. Key words：Epimedium；  Extraction；  Flavonoid；  Orthogonal design    淫羊藿Herba

7、 Epimdium為小檗科淫羊藿屬植物，具有溫心陽、通心脈、化淤血等功效1，其中主要有效成分是淫羊藿總黃酮（包括淫羊藿苷、淫羊藿次苷等），現(xiàn)代研究認為該總黃酮具有促進雄性激素分泌、降血壓、擴張血管、增加冠脈流量、增強免疫功能和抗腫瘤等多種藥理作用2。湖北恩施和福建三明地區(qū)淫羊藿資源豐富，但未見以該地區(qū)淫羊藿為原料的提取及測定方法研究，且文獻3，4多報道淫羊藿葉中有效成分（以淫羊藿總黃酮計）含量最高，莖其次，根中最低，因此大多數(shù)提取工藝只采用淫羊藿地上部分（包括葉和莖）作為原材料，導致大量的根被丟棄，造成了巨大的資源浪費。本文從資源有效利用的角度出發(fā)，比較了恩施及三明地區(qū)所產(chǎn)箭葉淫羊藿的葉、莖、

8、根中淫羊藿總黃酮的含量，并比較了醇提與水提的提取率，同時采用正交設計實驗優(yōu)化了醇提工藝。1  儀器與材料1.1   儀器UVVIS 8500 紫外/可見分光光度計，電子分析天平 (AL204)，數(shù)顯無級恒速攪拌器，SHZD（III）循環(huán)水式真空泵。1.2   材料淫羊藿，購自湖北恩施和福建三明，經(jīng)湖北中藥研究院王克勤研究員鑒定為箭葉淫羊藿；淫羊藿苷對照品,批號110737200312，中國藥品生物制品檢定所提供；甲醇（分析純），乙醇（工業(yè)純），雙蒸水（自制）。2  方法2.1   分析方法2.1.1  標

9、準曲線的繪制稱取淫羊藿苷對照品15.2 mg，用甲醇溶解于250 ml容量瓶中，配制成60.8 g/ml對照品溶液。分別移取對照品溶液0.0 ，0.5 ，1.0，1.5 ，2.5，3.5，4.5 ml置于10 ml容量瓶中加甲醇稀釋至刻度，搖勻。對濃度為15.2 g/ml的對照品溶液進行全波長掃描，測得270 nm處有最大吸收，因此于270 nm下測定上述各標準液的吸光度。以濃度（C）與吸光度（A）進行線性回歸，得回歸方程為A0.037 3C0.001 8，r0.999 9，在027.45 g/ml范圍內(nèi)呈線性關系57。2.1.2   樣品溶液的制備取粗提物25 mg于50

10、 ml容量瓶中，加入甲醇約40 ml，超聲使溶解充分，定容至刻度；取部分溶液離心，準確吸取離心后的溶液1 ml至10 ml容量瓶中，用甲醇稀釋，定容，作為樣品溶液備用。2.1.3   重復性實驗將同一樣品溶液連續(xù)測定其吸光度（A）6次，計算相對標準偏差為0.096，重復性良好。2.1.4   加樣回收率實驗分別吸取已知含量的樣品溶液1  ml（10份）至09 10個25 ml容量瓶中，分別加入1 ml對照品溶液，以甲醇溶解并定容，測定吸光度，計算09樣品回收率。各樣品回收率均在98.6101.7之間，平均回收率100.2，相對標準偏差為0.99

11、，精確度良好。2.2  提取方法2.2.1   索氏回流提取湖北恩施、福建三明地區(qū)箭葉淫羊藿葉、莖、根中總黃酮分別取50 g淫羊藿植株的葉、莖和根的粗粉（200目）于索氏提取器中，用乙醇回流提取，直至提取液無顏色為止，提取液過濾，減壓濃縮，干燥至恒重。后續(xù)實驗均以恩施淫羊藿為原料。2.2.2  提取工藝2.2.3   單因素實驗分別考察溫度、溶劑種類、溶劑用量及時間對提取率的影響。2.2.4  醇提工藝的正交設計根據(jù)單因素實驗，結(jié)合文獻8報道，作 L9（34）正交設計9，因素水平表見表1。表1  正交設計因素水平表（略）3  結(jié)果3.1  淫羊藿植株不同部位總黃酮含量分布由于研究淫羊藿不同部位的有效成分含量對指導工業(yè)提取和農(nóng)業(yè)栽培都具有重要意義，測定了淫羊藿植株不同部位總黃酮含量，其分布見表2所示。表2  湖北恩施與福建三明地區(qū)箭葉淫羊藿不同部位的有效成分含量及質(zhì)量分數(shù)（略）由上述結(jié)果可知，淫羊藿葉的提取量最大，但提取的雜質(zhì)也較多，造成提取物中有效成分含量較低；根的提取量較小，但有效成分含量很高；莖的提取量最小，有效成分含量也最低。從表中數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)