阿莫西林舒巴坦匹呋酯匹呋酯片劑生物等效性測定

1、阿莫西林/舒巴坦匹呋酯匹呋酯片劑生物等效性測定         06-07-05 16:44:00     編輯：studa20       作者：郁繼誠，張菁，曹國英，施耀國【摘要】  目的  研究國產(chǎn)阿莫西林/舒巴坦匹呋酯（1：1）片劑在22名男性健康志愿者中的生物等效性。方法  22名健康志愿者分別雙交叉空腹口服國產(chǎn)阿莫西林1000mg/舒巴坦匹呋酯1000mg片劑（國產(chǎn)品）和對照

2、品進(jìn)口阿莫西林1000mg/舒巴坦匹呋酯1000mg片劑（進(jìn)口品）各一次。用高效液相色譜法測定血漿中的濃度。采用雙向單側(cè)t檢驗進(jìn)行生物等效性評價。結(jié)果  22名受試者單劑空腹口服國產(chǎn)品和進(jìn)口品后的體內(nèi)過程均符合血管外一室模型。口服國產(chǎn)品和進(jìn)口品后，阿莫西林實測平均高峰血藥濃度(Cmax)分別為（12.48±3.05）mg/L和（10.86±2.75）mg/L，達(dá)峰中位時間（Tmax）分別為1.5（1.0，2.0）h和2.0（1.0，4.0）h，平均藥時曲線下面積 (AUC0) 分別為（33.42±7.58）h·mg/L和（32.71±

3、7.18）h·mg/L；舒巴坦匹呋酯實測平均高峰血藥濃度(Cmax)分別為（8.44±2.43）和（9.20±3.00）mg/L，達(dá)峰中位時間（Tmax）分別為2.0（1.0，5.0）h和2.0（0.75，5.0）h，平均藥時曲線下面積 (AUC0) 分別為（35.31±10.81）h·mg/L和（36.52±12.94）h·mg/L。對國產(chǎn)片劑與進(jìn)口片劑中阿莫西林和舒巴坦匹呋酯的Cmax、AUC08和AUC0對數(shù)值進(jìn)行方差分析，結(jié)果除國產(chǎn)品與進(jìn)口品中阿莫西林Cmax對數(shù)值在兩制劑間差異具統(tǒng)計學(xué)意義外(P0.05)、其他參數(shù)

4、在兩制劑間、試驗階段間、服藥順序間的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。但在服藥順序組中受試者間差異具統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)，國產(chǎn)品與進(jìn)口品相比，制劑中阿莫西林相對生物利用度為(102.47±9.70)。 舒巴坦匹呋酯相對生物利用度為(98.61±14.91)。結(jié)論  受試國產(chǎn)片劑與對照進(jìn)口片劑具生物等效性。    【關(guān)鍵詞】  阿莫西林/舒巴坦；生物等效性    The evaluation of bioequivalence of amoxycillin/sulbactum pivoxil&

5、#160;   【Abstract】  Objective  To study the bioequivalence of amoxycillin/sulbactum pivoxil.Methods  Twenty two normal volunteers were enrolled in a randomized crossover study. Each volunteer was given orally a single dose of 1000mg domestic amoxycillin/sulbactum pivoxil (te

6、sted preparation) or 1000mg imported amoxycillin/sulbactum pivoxil (reference preparation) in empty. The plasma concentrations were determined by high performance liquid chromatography (HPLC) . Two one-sided t-test was used to evaluate the bioequivalence.Results  The concentration-versus-time d

7、ata in both groups were fitted to a one-compartment model. The  pharmacokinetic parameters of amoxycillin in domestic and imported tablets were : Cmax (12.48±3.05)mg/L and (10.86±2.75)mg/L; Tmax 1.5 (1.02.0 )h and 2.0 (1.04.0 )h ; AUC0 (33.42±7.58)h·mg/L and (32.71±7.18

8、) h·mg/L，respectively. The  pharmacokinetic parameters of sulbactum in domestic and imported tablets were:Cmax (8.44±2.43)mg/L and (9.20±3.00)mgL ; Tmax 2.0 (1.05.0 )h and 2.0 (0.755.0 )h ; AUC0 (35.31±10.81)h·mg/L and (36.52±12.94) h·mg/L ，respectively. Analy

9、sis of variance (ANOVA) was used to analysed the logarithm of Cmax， AUC08， AUC0 of amoxycillin and sulbactum pivoxil in the two preparations . The difference of all the parameters between the two tablets， test phases， administration sequence had no statistical significance (P0.05) ，except the differ

10、ence of Cmax between the two preparations (P0.05) . But there was statistical difference among the participants in administration sequence (P0.05). Compared with the imported!tablets ，the relative bioavailability of amoxycillin and sulbactum pivoxil in domestic tablets were (102.49±9.70)% and (

11、98.61±14.91)%， respectively.Conclusion  Domestic and imported amoxicilin/sulbactum pivoxil were bioequivalent.    【Key words】  amoxicilin/sulbactum；bioequivalence        阿莫西林/舒巴坦匹呋酯為阿莫西林加入-內(nèi)酰胺酶抑制劑舒巴坦的衍生物（舒巴坦匹呋酯）復(fù)合制劑，舒巴坦匹呋酯改善了舒巴坦口服吸收差的缺點，但其必

12、須在人體腸道酯酶的作用下分解成舒巴坦才能發(fā)揮作用13。國外僅有阿根廷Bago公司生產(chǎn)阿莫西林/舒巴坦匹呋酯復(fù)方口服制劑，上海四藥有限公司研制了國產(chǎn)阿莫西林/舒巴坦匹呋酯（1：1配比）片劑，獲藥政部門批準(zhǔn)進(jìn)行人體生物等效性測定，其臨床試驗方案經(jīng)華山醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)后在我所進(jìn)行了生物等效性測定。    1  資料與方法      受試者  健康男性志愿者按臨床試驗方案中入選標(biāo)準(zhǔn)及排除標(biāo)準(zhǔn)篩選受試者。所有志愿者于篩選時詳細(xì)詢問病史及用藥史無殊后，進(jìn)行全面體格檢查、青霉素皮試以及血、尿常規(guī)，血生化等實驗室檢查。

13、經(jīng)篩選合格的22名受試者在詳細(xì)了解受試藥物的特性、藥物試驗的全過程、可能發(fā)生的不良事件以及受試者的各種權(quán)利與義務(wù)，并表示理解后簽署書面知情同意書。受試者平均年齡（24.23±2.91）歲，平均體重（64.27±5.40）kg，平均身高（173.30±5.86）cm。     藥品     受試者用藥品  受試品：阿莫西林/舒巴坦匹呋酯片劑（1：1），每片含阿莫西林250mg及舒巴坦匹呋酯250 mg，（以下簡稱國產(chǎn)品)，批號010903。上海四藥有限公司提供。對照品：阿莫西林

14、/舒巴坦匹呋酯片劑（1：1），每片含阿莫西林250mg及舒巴坦匹呋酯250 mg，（以下簡稱進(jìn)口品），批號3009712。阿根廷拜克（Bago）公司產(chǎn)品。     藥物濃度測試用標(biāo)準(zhǔn)品  (1)阿莫西林：批號：04099907，含量: 84.5%。(2)舒巴坦匹呋酯：批號：0430200002，含量: 92.0%。中國藥品生物制品檢定所標(biāo)定。      給藥劑量及方法  22名受試者按隨機(jī)表隨機(jī)分為兩組，分別接受兩次給藥，即每名受試者隨機(jī)先后分別接受國產(chǎn)品和進(jìn)口品各一次，均為單劑空腹口服阿莫西林

15、1000mg/舒巴坦匹呋酯1000mg。受試者于受試前一日進(jìn)入受試場所，當(dāng)晚10時后禁食，受試當(dāng)日晨經(jīng)主要生命體征檢查合格和青霉素皮試陰性后空腹口服國產(chǎn)品或進(jìn)口品，每次服藥后3h進(jìn)統(tǒng)一早餐。服藥時飲水200ml。兩次試驗交叉進(jìn)行，間隔1周。    留取受試者服藥前和服藥后0.25、0.5、0.75、1、1.5、2、3、4、5、6、7和8h血標(biāo)本各6ml，置于含肝素的試管中，立即離心10min（4），取血漿分裝3份，放置-80冰箱保存待測。    定時觀察并記錄受試者服藥后8h內(nèi)生命體征，觀察受試者服藥后出現(xiàn)的所有不良事件，記錄于記錄報

16、告表（CRF）中作安全性評價。每次給藥前及給藥后24h留取血、尿標(biāo)本進(jìn)行實驗室檢查。所有結(jié)果均填入CRF中。    2  材料及方法     儀器設(shè)備  (1)Waters Alliance 2690型系列高效液相色譜儀，包括UV2487型紫外檢測儀，Millennium32數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)以及DELL微機(jī)等；(2)Millipore 純水系統(tǒng)；(3)METTLER AE240 分析天平。    試劑  甲醇：高效液相色譜純，Caledon實驗有限公司；乙腈：高效液相色

17、譜純，飛世爾(Fisher)科學(xué)世界公司；四丁基氫氧化銨水溶液(10%)：分析純， 上海試劑一廠；磷酸：分析純，蘇州振亞化工廠；磷酸二氫鉀及磷酸氫二鉀：分析純，汕頭金砂化工廠；二氯甲烷：分析純，中國醫(yī)藥集團(tuán)上?；瘜W(xué)試劑公司。      血藥濃度測定及計算方法  以高效液相色譜法分別測定血漿標(biāo)本中阿莫西林和舒巴坦?jié)舛?。阿莫西林測試條件為:(1)流動相 2磷酸：乙腈(97:3)；(2)固定相 Hamilton PRP-1反相層析柱(5m，150mm×4.1mm)；(3)檢測波長:214nm；(4)流速：為0.6ml/min。舒巴坦測試條件

18、為:(1)流動相：1磷酸-四丁基氫氧化銨緩沖液（以10%四丁基氫氧化銨調(diào)pH至2.28）:甲醇(83:17)；(2)固定相：Waters Symmetry C18對稱反相層析柱(5m，150mm×4.6mm)；(3)檢測波長: 210nm；(4)流速：為1.0ml/min。血漿標(biāo)本分析前預(yù)處理：血漿標(biāo)本0.8ml加入0.8ml乙腈混勻后10000rmin離心10min，取上清液1ml加入二氯甲烷溶液10ml混勻后20rmin旋轉(zhuǎn)混勻20min，4000rmin和10000rmin離心2次、取上清液80l（阿莫西林）和100l（舒巴坦）100l進(jìn)樣分析。由Millennium32數(shù)據(jù)處

19、理系統(tǒng)根據(jù)阿莫西林和舒巴坦的峰面積制訂標(biāo)準(zhǔn)曲線，以外標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法分別測讀阿莫西林和舒巴坦血藥濃度。      體液濃度測定方法學(xué)研究  阿莫西林和舒巴坦色譜峰分離良好，空白血漿中雜峰對阿莫西林和舒巴坦色譜峰無干擾。見圖1。阿莫西林和舒巴坦血漿溶液濃度與峰面積間呈良好線性關(guān)系，阿莫西林血漿溶液標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍為(0.2525)mg/L，線性回歸方程為C=1.97×105PA2.49×104 (PA為峰面積);回歸系數(shù)R2=0.9994（權(quán)重因子為1C）， 最低檢測限為0.1mg/L（信噪比>3）。阿莫西林血漿溶液提取回收率(

20、血漿高、中、低濃度/緩沖液高、中、低濃度×100)為（95.74±3.49）%。舒巴坦血漿溶液標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍為(0.2525)mg/L，線性回歸方程為C=5.44×104PA9.97×103 (PA為峰面積);回歸系數(shù)R2=0.9958（權(quán)重因子為1C）， 最低檢測限為0.1mg/L（信噪比>3）。舒巴坦血漿提取回收率(血漿高、中、低濃度/緩沖液高、中、低濃度×100)為（92.58±16.07）%。測定方法的精確性：阿莫西林和舒巴坦不同濃度血漿溶液標(biāo)本進(jìn)樣間重復(fù)性測定結(jié)果的相對標(biāo)準(zhǔn)差（RSD）分別為3.92%和5.18%；阿莫西林和舒巴坦不同濃度血漿標(biāo)本日內(nèi)測定結(jié)果RSD分別為3.92%和5.18%，日間測定結(jié)果RSD分別為4.57% 和5.56%。測定方法準(zhǔn)確性：阿莫西林和舒巴坦不同濃度血漿溶液測得濃度回收率分別為96.68%105.70%和96.22%101.22%。血漿樣品穩(wěn)定性：阿莫西林和舒巴坦高、中、低質(zhì)控血漿濃度標(biāo)本室溫放置至24h后，24h時阿莫西林不同濃度藥物回收率為91.1