順序注射分光光度法測定左氧氟沙星、氧氟沙星和洛美沙星

1、順序注射分光光度法測定左氧氟沙星、氧氟沙星和洛美沙星         09-08-25 17:02:00     作者：韓相明 馮素玲 樊靜    編輯：studa20【摘要】  本文基于左氧氟沙星、氧氟沙星和洛美沙星分別與Fe(III)作用形成黃色絡(luò)合物的現(xiàn)象，建立了簡單、快速測定藥物中左氧氟沙星、氧氟沙星和洛美沙星的順序注射分光光度新方法。討論了物理因素和化學(xué)因素對方法靈敏度的影響。測定左氧氟沙星、氧氟沙星和洛美沙星的工作

2、曲線的線性范圍均為10250g/ml。采用摩爾比法和連續(xù)變換法測定絡(luò)合物的組成，F(xiàn)e(III)與藥物的組成比為12。將方法用于藥物中左氧氟沙星、氧氟沙星和洛美沙星的測定，并與參考方法進行了對照。 【關(guān)鍵詞】  順序注射分析技術(shù)； 分光光度法； 左氧氟沙星； 氧氟沙星； 洛美沙星    ABSTRACT  A simple and rapid sequential injection spectrophotometric method for the determination of levofloxacin, ofloxacin and lom

3、efloxacin in pharmaceutical preparation was described, based on the complexation reaction between the drug and Fe(III) in sulfuric acid solution. The various chemical and physical conditions that affected the reaction were studied. The calibration graphs were linear in the range of 10250 g/ml for le

4、vofloxacin, ofloxacin and lomefloxacin. The composition of the complexes was found 12 Fe (III): drug by molar ratio method and Jobs method of continuous variation. The method was successfully applied to the determination of levofloxacin, ofloxacin and lomefloxacin in pharmaceutical commercial formul

5、ations. The results obtained were compared with those of the reference methods.    KEY WORDS  Sequential injection analysis;  Spectrophotometry;  Levofloxacin;  Ofloxacin;  Lomefloxacin    左氧氟沙星、氧氟沙星和洛美沙星是三個重要的合成的氟喹諾酮類衍生物，其中左氧氟沙星是氧氟沙星的S(-)異構(gòu)體，抗菌

6、作用是氧氟沙星的2倍，是R(-)氧氟沙星的8128倍。上述藥物一方面可以抑制革蘭陰性菌和革蘭陽性菌DNA的旋轉(zhuǎn)，另一方面可以消滅分枝桿菌、支原體和發(fā)疹傷寒等的病原體而被廣泛應(yīng)用。已經(jīng)報道有各種方法用于測定藥物、體液和組織中這些藥物的含量，其中包括萃取13和非萃取4分光光度法、高效液相色譜法58、熒光分析法911、電化學(xué)分析法1214、流動注射化學(xué)發(fā)光法1518和毛細管電泳分析法19，20等。上述方法通常會消耗相對多的試劑，并產(chǎn)生大量廢液。    順序注射分析是20世紀(jì)90年代產(chǎn)生的新分析技術(shù)，屬于第二代流動注射分析。順序注射分析具有簡便、節(jié)省樣品和試劑、宜于進行自

7、動化過程檢測等特點。在進行藥物分析時，不僅要考慮方法的靈敏度、重現(xiàn)性，而且由于要分析大量的樣品，必須考慮分析人員的勞動強度，因此，順序注射技術(shù)在藥物分析中的應(yīng)用越來越多21。本文的目的是建立一種簡單、自動化的方法用于分析藥物中上述組分的含量。根據(jù)所研究的藥物可以分別與Fe(III)生成黃色絡(luò)合物，運用順序注射分析技術(shù)結(jié)合分光光度檢測建立了測定左氧氟沙星、氧氟沙星和洛美沙星的新方法。    1  實驗部分    1.1  儀器與試劑    FIAlab 3500順序注射分光光度計(美國F

8、IAlab儀器公司)；2.5ml注射泵，8通道選擇閥。儲存管為200cm×0.5mm，反應(yīng)管為50cm×0.5mm，其它聚四氟乙烯管均為0.5mm內(nèi)徑。系統(tǒng)由計算機控制，采用FIAlab軟件(FIAlab 5.0 E)進行數(shù)據(jù)采集和處理。USB2000UVVIS分光光度計(美國海洋光纖公司)，10mm長的光纖SMAZ型流通池。    稱取1.2055g NH4Fe(SO4)2·12H2O置于0.2ml濃硫酸中加適量水，加熱溶解，定容于100ml容量瓶中，即得到0.025mol/L Fe(III)的0.036mol/L的硫酸溶液。取此溶

9、液2.0ml于5.0ml 0.036mol/L的硫酸中，稀釋至10ml作為工作液。準(zhǔn)確稱取適量左氧氟沙星、氧氟沙星和洛美沙星對照品(中國藥品生物制品檢定所)，分別用3%乙醇溶解并定容于100ml容量瓶中，配制成500g/ml的標(biāo)準(zhǔn)液。    1.2  實驗步驟    采用順序注射測定左氧氟沙星、氧氟沙星和洛美沙星的步驟見Fig.1。以50l/s吸取1700l水作載流，再以50l/s分別吸取50l Fe(III)溶液和200l標(biāo)準(zhǔn)溶液或樣品溶液，以20l/s推動1000l樣品塞到達檢測器，再以30l/s推出剩余載流清洗流路。在

10、437nm處測定體系的吸光度。    2  結(jié)果與討論    當(dāng)Fe(III)溶液分別與左氧氟沙星、氧氟沙星和洛美沙星溶液共存時，溶液立即顯示黃色，說明Fe(III)和藥物形成了新的絡(luò)合物。掃描溶液的紫外可見吸收光譜發(fā)現(xiàn)，三種絡(luò)合物的最大吸收波長均位于紫外區(qū)，并延伸到可見區(qū)， 其中Fe(III)洛美沙星絡(luò)合物在437nm有一個肩峰存在； Fe(III)左氧氟沙星和    Fig.1    Schematic diagram of sequential injecti

11、on systemFe(III)氧氟沙星絡(luò)合物沒有明顯的肩峰存在?？紤]到三種藥物分別在絡(luò)合物的最大吸收波長處存在吸收，產(chǎn)生干擾，本文均在437nm測量體系的吸光度。    2.1  反應(yīng)管和儲存管的影響    考察了內(nèi)徑分別為0.5和0.7mm的儲存管對體系靈敏度的影響，結(jié)果表明，0.5mm內(nèi)徑的儲存管具有更高的靈敏度，故選用200cm×0.5mm的儲存管。與內(nèi)徑為0.7mm的反應(yīng)管相比，內(nèi)徑為0.5mm的反應(yīng)管靈敏度更高，因此本實驗選用0.5mm的反應(yīng)管。在2490cm范圍內(nèi)研究了反應(yīng)管長度對體系靈敏度的影響。反

12、應(yīng)管長度在4070cm內(nèi)，靈敏度最高且吸光度保持不變，本實驗選用50cm的反應(yīng)管。    2.2  流速的影響    在1560l/s范圍內(nèi)考察了流速對體系靈敏度的影響。實驗發(fā)現(xiàn)，流速慢時反應(yīng)靈敏度較高。本實驗采用流速為20l/s。    2.3  試劑體積的影響和樣品體積的影響    在1595l內(nèi)考察了Fe(III)溶液體積對體系靈敏度的影響，當(dāng)Fe(III)溶液的體積大于40l時，體系吸光度達到最大并保持恒定，實驗選用吸入50l Fe(III)溶液。

13、樣品體積對檢測靈敏度也有影響。隨著樣品體積的增加，形成了更多絡(luò)和物，體系吸光度增大。當(dāng)樣品體積大于190l時，吸光度變化緩慢，故本實驗選用200l的樣品溶液。    2.4  Fe(III)和硫酸濃度的影響    考察了Fe(III)溶液濃度的影響。隨著Fe(III)溶液濃度的增加，反應(yīng)的靈敏度也隨之增大。當(dāng)Fe(III)溶液濃度大于2.5×10-3mol/L時，吸光度變化緩慢。實驗選用Fe(III)溶液濃度為5.0×10-3mol/L。在0.75×10-23.25×10-2mol/L

14、內(nèi)考察了硫酸濃度對體系的影響。硫酸濃度對體系靈敏度幾乎沒有影響，實驗選用2.52×10-2mol/L硫酸溶液。    2.5  工作曲線和方法的靈敏度及精密度    在最佳實驗條件下，分別繪制了洛美沙星、左氧氟沙星和氧氟沙星的工作曲線。結(jié)果表明，上述三種藥物均在10250g/ml范圍內(nèi)遵守朗伯比爾定律，其線性回歸方程和回歸系數(shù)分別為：    A洛美沙星=0.020+0.00592Cr=0.9993(n=5)    A左氧氟沙星=0.0409+0.00548Cr=0.9996(n=5)    A氧氟沙星=0.0368+0.00546Cr=0.9996(n=5)    檢測限分別為1