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1、中藥藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)總結(jié)學(xué)院:農(nóng)學(xué)院專業(yè):中草藥栽培與鑒定班級(jí):121姓名學(xué)號(hào)1實(shí)驗(yàn)組實(shí)驗(yàn)時(shí)間指導(dǎo)教師成績(jī)實(shí) 驗(yàn) 內(nèi) 容實(shí)驗(yàn)一 小白鼠的捉拿、固定、給藥、標(biāo)記及處死方法實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括小白鼠的捉拿、小白鼠的固定、小白鼠的給藥、小白鼠的標(biāo)記、小白鼠的處死方法實(shí)驗(yàn)二中藥鎮(zhèn)痛作用比較(扭體法)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括小白鼠的選擇、小白鼠的分組、小白鼠的給藥、扭體次數(shù)的測(cè)量、鎮(zhèn)痛率的計(jì)算、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的處理。實(shí)驗(yàn)三 中藥番瀉葉對(duì)小白鼠腸蠕動(dòng)的影響實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括小白鼠的選擇、小白鼠的分組、小白鼠的灌胃給藥、小白鼠的處死和解剖、炭末推進(jìn)長(zhǎng)度和小腸長(zhǎng)度的測(cè)量、炭末推進(jìn)率的計(jì)算、實(shí)驗(yàn)數(shù) 據(jù)處理。實(shí)驗(yàn)四補(bǔ)益藥抗應(yīng)激作用實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括小白鼠的
2、選擇、小白鼠的分組、小白鼠的給藥、密封計(jì)時(shí)、測(cè)量小鼠耐缺氧時(shí)間、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的處理。實(shí) 驗(yàn) 目 的實(shí)驗(yàn)一 通過(guò)本實(shí)驗(yàn)的學(xué)習(xí),讓學(xué)生了解實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的捉拿、固定、給藥、標(biāo)記及處死方法。實(shí)驗(yàn)二通過(guò)本實(shí)驗(yàn)的學(xué)習(xí),讓學(xué)生了解用扭體法篩選鎮(zhèn)痛藥的實(shí)驗(yàn)方法;觀察中約的鎮(zhèn)痛作用。實(shí)驗(yàn)三通過(guò)本實(shí)驗(yàn)的學(xué)習(xí),讓學(xué)生了解生番瀉葉對(duì)腸蠕動(dòng)的影響實(shí)驗(yàn)四通過(guò)本實(shí)驗(yàn)的學(xué)習(xí),讓學(xué)生學(xué)習(xí)小白鼠耐常壓缺氧的實(shí)驗(yàn)方法,研究補(bǔ)中益氣丸的抗應(yīng)激作用。實(shí)驗(yàn)材料與藥品實(shí)驗(yàn)方法與步驟實(shí)驗(yàn)一 儀器設(shè)備條件:鼠籠(1個(gè))、灌胃針(1支)、燒杯(2個(gè))、1 ml注射器 (4支)等,小白鼠,每組 3只雌鼠,3只雄鼠。實(shí)驗(yàn)二 儀器設(shè)備條件:鼠籠(1個(gè))、灌胃
3、針(1支)、燒杯(2個(gè))、1 ml注射器(4支)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物一一小鼠(每組 3只雌鼠,3只雄鼠)、實(shí)驗(yàn)三 儀器設(shè)備條彳鼠籠1個(gè))、灌胃針(1支)、燒杯(2個(gè))、1 ml注射器(3 支)、電爐、鐵鍋、鐵鏟、搪瓷盤、蛙板、眼科剪、眼科鐐、直尺。物質(zhì)條件:實(shí)驗(yàn)動(dòng)物一一小鼠(每組 4只),番瀉葉實(shí)驗(yàn)四 儀器設(shè)備條件:鼠籠(1個(gè))、灌胃針(1支)、燒杯(2個(gè))、1 ml注射器(3支)、線、玻璃缸(水桶)、200ml磨口瓶等物質(zhì)條件:實(shí)驗(yàn)動(dòng)物一一小鼠(小鼠每組4只)、補(bǔ)中益氣中藥水煎液實(shí)驗(yàn)一 小白鼠是藥理實(shí)驗(yàn)常用的一種動(dòng)物,常用于藥物的篩選、LD5oED5o的測(cè)定、中樞神經(jīng)系統(tǒng)藥試驗(yàn)、抗炎免疫藥試驗(yàn)、避孕藥
4、、抗腫瘤以及抗衰老藥試驗(yàn)等。常用體重18 22g。1 .捉拿方法 右手提起鼠尾,放在粗糙物(如鼠籠)上面,輕向后拉其尾,用左手 拇指和食指捏住其頭部皮膚及雙耳,將小白鼠固定在掌中,使其腹部朝上,然后以第四 指和小指夾住鼠尾。2 .給藥途徑:(1)經(jīng)口給藥法:口服(PO :將受試藥物放入飼料或溶于飲用水中,由動(dòng)物自由提取的一種方法。 缺點(diǎn)是攝入劑量不夠準(zhǔn)確。灌胃(IG):將小鼠固定后,右手持裝有灌胃針頭的注射器,自口角插入口腔,沿上 腭插入食道。如遇阻力,可將針頭抽出再另插,以免穿破食道或誤入氣管。灌注量為0.1 0.3ml/10g 體重。(2)皮下注射(SC):常在背部皮下注射。一手固定動(dòng)物,
5、另一手注射,注射量為0.1 0.3ml/10g 體重。(3)肌內(nèi)注射(IM):多注射于后肢股部肌肉,每側(cè)不超過(guò) 0.1ml.(4)腹腔注射(IP):左手固定小鼠,右手持注射器,從下腹部外側(cè)進(jìn)針約 35mm呈450角刺入腹腔,注射量 0.10.2ml/10g體重。(5)靜脈注射(IV):將小鼠至于固定筒內(nèi),使尾巴露在外面,用7075%酉精棉球擦尾部,或?qū)⑹笪步?550OC溫水中。待尾部左右側(cè)靜脈擴(kuò)張后,左手拉尾,右手進(jìn)針。注射量不超過(guò) 0.5ml/只。實(shí)驗(yàn)二 1.藥品的配制元胡止痛分散片每片重0.4g,成人的劑量每天 3次,每次3片,即成人劑量是3.6g/60Kg ,換算成小白鼠的劑量是0.0
6、144g/20g(即0.72g/Kg)。又因?yàn)樾“资蠼o藥量是 0.4mL/20g ,故元胡止痛片溶液的濃度應(yīng)該為 0.0144g/0.4mL,所 以將18g的元胡止痛分散片溶于 500mL的去離子水中,制成0.0036g/mL (即14.4g/400mL ) 的元胡止痛片溶液。阿咖酚散同樣的方法換算成小白鼠的劑量也是0.0144g/20g(即0.72g/Kg)。小白鼠的給藥量是是 0.4mL/20g,故阿咖酚散溶液的濃度應(yīng)該為0.0144g/0.4mL,所以將18g的阿咖酚散溶于 500mL的去離子水中,制成 0.0036g/mL (即14.4g/400mL )的阿咖酚散 溶液。生理鹽水配制成
7、 0.9%的濃度。冰醋酸配制成0.6%的濃度。2.將小鼠隨機(jī)分為3組,每組3只,稱重并編號(hào)。第一組灌胃未知中藥醇提液 0.2ml/10g (體重),第二組腹腔注射顱痛定 0.2ml/10g (體重)(40mg/kg),第三組灌胃等容量生理鹽水作為對(duì)照。給藥30min后,每組小鼠均腹腔注射0.6%冰醋酸0.2ml/只,觀察并記錄20min內(nèi)小鼠扭體次數(shù)。對(duì)照組扭體次數(shù)一給藥組扭體次數(shù)鎮(zhèn)痛率= x 100%對(duì)照組扭體次數(shù)實(shí)驗(yàn)三1.藥品不同炮制品的處理要求學(xué)生根據(jù)所學(xué)知識(shí)擬寫操作步驟和實(shí)際操作。2 . 藥品制備:炭末生理鹽水混懸液0.1g/ml (炭末為活性炭),番瀉葉水煎液1g/ml(含炭末 0.
8、1g/m1),3 .取禁食20-24h成年、體重相近的4只小白鼠,隨機(jī)分為 2組,每組2只,用苦 味酸標(biāo)記。分別用上述 2種炭末液0.3ml/10g體重灌胃。給藥 30min后脫頸椎處死,打 開腹腔分離腸系膜,剪取上端至幽門,下端至回盲部的腸管,置于托盤上。輕輕將小腸 拉成直線,測(cè)量腸管長(zhǎng)度作為“小腸總長(zhǎng)度”。從幽門至炭末前沿的距離作為“炭末在 腸內(nèi)推進(jìn)距離”。取各組 2只小自鼠平均值,用公式汁算炭末推進(jìn)百分率,并注意觀察 各組小腸容積是否增大。炭末在腸內(nèi)推進(jìn)距離(cm)炭末推進(jìn)率= X 100%小腸全長(zhǎng)(cm)實(shí)驗(yàn)四 取4只小鼠,雌雄不限,稱重,用苦味酸標(biāo)記,隨機(jī)分為兩組。給藥組每只灌胃未知
9、中藥水煎液 0.25ml/10g ,對(duì)照組每只灌胃等容量的生理鹽水,給藥后 30min將小鼠放入盛有15g鈉石灰的廣口瓶?jī)?nèi)(每瓶只放1只小鼠),用凡士林涂抹瓶口蓋嚴(yán),是之不漏氣,立即計(jì)時(shí)。以呼吸停止為判斷死亡指標(biāo),記錄小鼠因缺氧而死亡的時(shí)間。與對(duì)照組 比較并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。綜合全實(shí)驗(yàn)室的結(jié)果,分別算出兩組的平均存活時(shí)間按表記錄未知中藥對(duì)小鼠耐常壓缺氧的影響組別動(dòng)物數(shù)劑量存活時(shí)間(n)(ml/10g )(min)生理鹽水 未知中藥水煎液實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析實(shí)驗(yàn)一 小白鼠的捉拿、給藥、注射操作不熟練,致使小白鼠受傷實(shí)驗(yàn)二表 未知中藥對(duì)小白鼠鎮(zhèn)痛作用的影響(X± SDD (實(shí)驗(yàn)小組數(shù)據(jù))組別動(dòng)物
10、數(shù) 劑量(g/kg )開始扭體時(shí)間20min內(nèi)扭體 炭末推進(jìn)率生理鹽水20.4ml雄10次;雌4次阿咖酚20.4ml雄16次;雌0次元胡鎮(zhèn)痛片20.4ml雄9次;雌0次表 未知中藥對(duì)小白鼠鎮(zhèn)痛作用的影響(X± SD (全班數(shù)據(jù))(全班數(shù)據(jù))動(dòng)物數(shù)開始扭體時(shí)間20min內(nèi)扭體炭末推進(jìn)率組別齊【J量(g/kg )(只)(min)次數(shù)(cm)(%生理鹽水210.7249.56元胡止痛片220.7234.48阿咖酚散190.7232.02分析:根據(jù)全班實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn),一生理鹽水組為對(duì)照發(fā)現(xiàn)元胡止痛片和阿咖酚散均有止 痛作用,且阿咖酚散的止痛效果比元胡止痛片的止痛效果略明顯;根據(jù)小組實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),
11、發(fā)現(xiàn)雄性小鼠的比雌性小鼠的痛感更敏感,而且兩種止痛藥對(duì)雌性小鼠的作用效果跟好實(shí)驗(yàn)三表 中藥對(duì)小白鼠腸蠕動(dòng)的影響( X± sp組別動(dòng)物數(shù)劑量小腸總炭末推進(jìn)炭末推進(jìn)腸容積變化(只)(g/Kg)長(zhǎng)度距離cm 率()生理鹽140.6050.2840.4990.45小變水番瀉葉180.6049.9340.6295.51 增大分析:根據(jù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果分析,番瀉葉炭末推進(jìn)率比生理鹽水的炭末推進(jìn)率高出番瀉葉液可促進(jìn)炭末在小腸推進(jìn),番瀉葉有助于小腸蠕動(dòng)5.06%。說(shuō)明實(shí)驗(yàn)四表中藥對(duì)小鼠耐常壓缺氧的影響( X± SDD組別動(dòng)物數(shù)(只)劑量(g/kg)存活時(shí)間(min)生理鹽水151.859.50補(bǔ)中
12、益氣丸211.867.15分析:上表的統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明,補(bǔ)中益氣丸有抗耐常壓缺氧的作用。1、所有實(shí)驗(yàn)中小白鼠體重越接近越好,平均體重最好用20g左右的小鼠,腸管比較粗大,易于操作。2、實(shí)驗(yàn)三番瀉葉的瀉下作用實(shí)驗(yàn)中腸容積變化可以上下端接扎,稱取重量,以定量化。3、實(shí)驗(yàn)三和實(shí)驗(yàn)四即番瀉葉瀉下作用實(shí)驗(yàn)和補(bǔ)中益氣丸的常壓耐缺氧試驗(yàn)中,開始給藥至處死動(dòng)物的時(shí)間必須準(zhǔn)確,以免時(shí)間不同造成實(shí)驗(yàn)誤差。4、實(shí)驗(yàn)四中的實(shí)驗(yàn)之前先檢查鈉石灰,若鈉石灰吸水和二氧化碳變色以后應(yīng)立即更換,再放入瓶子中開始試驗(yàn)。5、實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中避免錯(cuò)誤操作,使用器械時(shí)不要傷到操作者及周圍的同學(xué),帶乳膠手套,以防被小鼠咬傷。6、請(qǐng)珍愛生命,尊
13、重生命。小鼠為實(shí)驗(yàn)奉獻(xiàn)生命,實(shí)驗(yàn)者應(yīng)認(rèn)真對(duì)待實(shí)驗(yàn)中藥藥理學(xué)是以中醫(yī)藥基本理論為指導(dǎo),運(yùn)用現(xiàn)代科學(xué)方法,研究中藥和機(jī)體(包 括正常機(jī)體、病理機(jī)體和病原體)相互作用及規(guī)律的一門學(xué)科。本學(xué)期通過(guò)羅老師的講 授,我學(xué)習(xí)了中藥藥理學(xué)這一課程,對(duì)中醫(yī)藥的基本理論和現(xiàn)在科學(xué)方法的結(jié)合有所了 解,并在羅老師的指導(dǎo)下完成了課程設(shè)計(jì)中的實(shí)驗(yàn)部分。在實(shí)驗(yàn)操作之前,通過(guò)一些實(shí)驗(yàn)視頻也對(duì)實(shí)驗(yàn)中的操作細(xì)節(jié)有所了解,大概幾乎 沒(méi)有接觸過(guò)這種情景,也許是女生的心天生就膽小慈悲,看到一些血淋淋的場(chǎng)面,身上 的汗毛不禁豎立起來(lái)。等到親自實(shí)驗(yàn),看到活生生的小白鼠時(shí),其實(shí)心理準(zhǔn)備也做的差 不多了,但是小白鼠的味道真的很不容易讓人接受。實(shí)驗(yàn)小結(jié)在一旁觀察老師的操作示范后,自己去模仿練習(xí),第一次接觸,小白鼠的捉拿真的 不容置操作好,每次用手抓住小白鼠的耳朵及背后的皮,小白鼠就會(huì)蜷縮起來(lái),更不用 說(shuō)再去把灌胃針伸進(jìn)它的胃里了。在捉拿過(guò)程中,發(fā)現(xiàn)有的小白鼠排泄,難道是知道自 己命不久矣而害怕到如此。輕撫它的背,跟它說(shuō)話,漸漸的對(duì)小白鼠的恐懼和嫌棄就消 失了,在我眼里這就是我的實(shí)驗(yàn)材料。接下來(lái)的實(shí)驗(yàn)灌藥,打針,觀察,解剖等過(guò)程,其實(shí)還是勉強(qiáng)不了自己親自操刀上 陣,還好組里有其他的小伙伴躍躍欲試,所以分工就明確和合理了。一人操作,一人督 導(dǎo)、觀察并記錄結(jié)果,實(shí)驗(yàn)就這
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