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1、第7章 微生物遺傳變異和育種填空題 1證明DNA是遺傳物質(zhì)的三個(gè)經(jīng)典實(shí)驗(yàn)是 、 、 和 。而證明基因突變自發(fā)性和不對(duì)應(yīng)性的三個(gè)經(jīng)典實(shí)驗(yàn)是 、 、和 細(xì)菌轉(zhuǎn)化 噬菌體感染 植物病毒重建 變量試驗(yàn) 涂布試驗(yàn) 影印平板培養(yǎng)法2_是第一個(gè)發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)化現(xiàn)象的。并將引起轉(zhuǎn)化的遺傳物質(zhì)稱為_。Griffith 轉(zhuǎn)化因子3Avery和他的合作者分別用降解DNA、RNA和蛋白質(zhì)的酶作用于有毒的S型細(xì)胞抽提物,然后分別與_混合,結(jié)果發(fā)現(xiàn),只有DNA被酶解而遭到破壞的抽提物無轉(zhuǎn)化活性,說明DNA是轉(zhuǎn)化所必須的轉(zhuǎn)化因子。無毒的R型細(xì)胞(活R菌)4Alfred D.Hershey和Martha Chase用P32標(biāo)記T2噬
2、菌體的DNA,用S35標(biāo)記的蛋白質(zhì)外殼所進(jìn)行的感染實(shí)驗(yàn)證實(shí):DNA攜帶有T2的_。全部遺傳信息5H. Fraenkel Conrat用含RNA的煙草花葉病毒進(jìn)行的拆分與重建,實(shí)驗(yàn)證明_也是遺傳物質(zhì)。RNA 6細(xì)菌在一般情況下是一套基因,即_;真核微生物通常是有兩套基因又稱_。單倍體 二倍體7DNA分子中一種嘧啶被另一種嘌呤取代稱為_。顛換8_質(zhì)粒首先發(fā)現(xiàn)于大腸桿菌中而得名,該質(zhì)粒含有編碼大腸菌素的基因Col 9原核生物中的基因重組形式有4種類型:_、_、_和_。轉(zhuǎn)化 轉(zhuǎn)導(dǎo) 接合 原生質(zhì)體融合10當(dāng)DNA的某一位置的結(jié)構(gòu)發(fā)生改變時(shí),并不意味著一定會(huì)產(chǎn)生突變,因?yàn)榧?xì)胞內(nèi)存在一系列的_,能清除或糾正
3、不正常的DNA分子結(jié)構(gòu)和損傷,從而阻止突變的發(fā)生。修復(fù)系統(tǒng)11營(yíng)養(yǎng)缺陷型是微生物遺傳學(xué)研究中重要的選擇標(biāo)記和育種的重要手段,由于這類突變型在_上不生長(zhǎng),所以是一種負(fù)選擇標(biāo)記?;九囵B(yǎng)基 12兩株多重營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株只有在混合培養(yǎng)后才能在基本培養(yǎng)墓上長(zhǎng)出原養(yǎng)型菌落,而未混合的兩親菌均不能在基本培養(yǎng)基上生長(zhǎng),說明長(zhǎng)出的原養(yǎng)型菌落是兩菌株之間發(fā)生了遺傳_和_所致。交換 重組13在_轉(zhuǎn)導(dǎo)中,噬菌體可以轉(zhuǎn)導(dǎo)供體染色體的任何部分到受體細(xì)胞中;而在_ 轉(zhuǎn)導(dǎo)中,噬菌體總是攜帶同樣的片段到受體細(xì)胞中。普遍性 局限性14基因突變具有7個(gè)共同特點(diǎn):_、_、_ _、_、_和_。自發(fā)性 不對(duì)應(yīng)性 稀有性 獨(dú)立性 可誘變性
4、 穩(wěn)定性 可逆性15篩選高產(chǎn)菌株用_法;篩選抗藥性菌株用_法。瓊脂塊培養(yǎng) 梯度平板單項(xiàng)選擇題1最小的遺傳單位是( )。(1)染色體 (2)基因 (3)密碼子 (4)核苷酸2、細(xì)菌直接攝取外界游離的DNA片段發(fā)生變異稱為( )(1)轉(zhuǎn)導(dǎo) (2)轉(zhuǎn)化 (3)接合 (4)轉(zhuǎn)換 3、由于個(gè)別堿基的置換、插入或缺失引起的突變稱為( )(1)染色體突變 (2)基因突變 (3)自發(fā)突變 (4)人工誘導(dǎo)突變 4細(xì)胞在DNA復(fù)制過程中會(huì)出現(xiàn)差錯(cuò),細(xì)菌細(xì)胞具有校正和修復(fù)功能,除了DNA聚合酶的糾錯(cuò)功能外;還有比較復(fù)雜的( )。(1)光保護(hù)作用 (2)調(diào)控系統(tǒng) (3)突變作用 (4)修復(fù)系統(tǒng) 5某個(gè)堿基的改變,使代
5、表某種氨基酸的密碼子變?yōu)榈鞍踪|(zhì)合成的終止密碼子(UAA,UAG,UGA)。蛋白質(zhì)的合成提前終止,產(chǎn)生截短的蛋白質(zhì),這種基因突變是( )。 (1)同義突變 (2)錯(cuò)義突變 (3)無義突變 (4)移碼突變6F是攜帶有宿主染色體基因,F(xiàn)× F-的雜交與F+ × F-不同的是供體的部分染色體基因隨F一起轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞,并且不需要整合就可以表達(dá),實(shí)際上是形成一種部分二倍體,此時(shí)的受體細(xì)胞也就變成了( )。 (1) F+ 2) F (3) F- (4) F7形成轉(zhuǎn)導(dǎo)顆粒的噬菌體可以是溫和的也可以是烈性的,主要的要求是具有能偶爾識(shí)別宿主DNA的( ),并在宿主基因組完全降解以前進(jìn)行包裝。
6、(1)裂解機(jī)制 (2)包裝機(jī)制 (3)識(shí)別機(jī)制 (4)侵入機(jī)制8絲狀真菌遺傳學(xué)研究主要是借助有性過程和準(zhǔn)性生殖過程,準(zhǔn)性生殖的過程可出現(xiàn)很多新的( ),因此可成為遺傳育種的重要手段,其次,在遺傳分析上也是十分有用的。(1)減數(shù)分裂 (2)基因組合 (3)生殖現(xiàn)象 (4)有性生殖9誘變育種是指利用各種誘變劑處理微生物細(xì)胞,提高基因的隨機(jī)( ),通過一定的篩選方法獲得所需要的高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)菌株。 (1)重組頻率 (2)融合頻率 (3)突變頻率 (4)調(diào)控頻率10采用接合、轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)和原生質(zhì)體融合等遺傳學(xué)方法和技術(shù)使微生物細(xì)胞內(nèi)發(fā)生基因重組,以增加優(yōu)良性狀的組合,或者導(dǎo)致多倍體的出現(xiàn),從而獲得優(yōu)良菌株,這
7、種育種方法被稱為( )重組育種。 (1)誘變 (2)體內(nèi)基因 (3)體外基因 (4)融合基因是非題1組氨酸突變株(his-)表示該菌不能利用組氨酸。2質(zhì)粒作為細(xì)胞中的主要遺傳因子,攜帶有在所有生長(zhǎng)條件下所必需的基因。3F質(zhì)粒是最早發(fā)現(xiàn)的一種與大腸桿菌的有性生殖現(xiàn)象有關(guān)的質(zhì)粒,攜帶F質(zhì)粒的菌株稱為Hfr,F(xiàn)質(zhì)粒整合到宿主細(xì)胞染色體上的菌株稱之為F+。4基因型和表型是遺傳學(xué)中常用的兩個(gè)概念,基因型是指可觀察或可檢測(cè)到的個(gè)體性狀或特征;表型是指貯存在遺傳物質(zhì)中的信息,也就是它的DNA堿基順序。5DNA鏈上發(fā)生的損傷一定發(fā)生表型的改變。6F+菌或F菌與F-菌接合時(shí),使F+或F菌變成F-菌。 7自然感受
8、態(tài)除了對(duì)線型染色體DNA分子的攝取外,也能攝取質(zhì)粒DNA和噬菌體DNA,后者又稱為轉(zhuǎn)染。+ 8一般認(rèn)為各種抗性突變是通過適應(yīng)而發(fā)生的,即由其所處的環(huán)境誘發(fā)出來的。9如果堿基的置換,并不引起其編碼的肽鏈結(jié)構(gòu)的改變,那么,這種突變現(xiàn)象稱為無義突變。10所謂轉(zhuǎn)導(dǎo)子是帶有供體基因的缺陷噬菌體。 名詞解釋:表型p188 變異p188 移碼突變p208 光復(fù)活作用p212 感受態(tài)p225 轉(zhuǎn)化因子p225 營(yíng)養(yǎng)缺陷型p221 補(bǔ)充培養(yǎng)基p221 接合p229 轉(zhuǎn)化p224 衰退p240復(fù)壯p240問答題1.微生物的DNA分子中堿基發(fā)生改變可能會(huì)出現(xiàn)哪些情況? 堿基改變是否一定會(huì)產(chǎn)生變異菌株? P
9、2082、篩選營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變株的主要步驟和方法。P221營(yíng)養(yǎng)缺陷型的篩選一般要經(jīng)過誘變、淘汰野生型、檢出和鑒定營(yíng)養(yǎng)缺陷型四個(gè)環(huán)節(jié)。第一步,誘變劑處理:與上述一般誘變處理相同。 第二步,淘汰野生型:在誘變后的存活個(gè)體中,營(yíng)養(yǎng)缺陷型的比例一般較低。通過抗生素法或菌絲過濾法就可淘汰為數(shù)眾多的野生型菌株即濃縮了營(yíng)養(yǎng)缺陷型。 第三步,檢出缺陷型:具體方法很多。用一個(gè)培養(yǎng)皿即可檢出的,有夾層培養(yǎng)法和限量補(bǔ)充培養(yǎng)法;在不同培養(yǎng)皿上分別進(jìn)行對(duì)照和檢出的,有逐個(gè)檢出法和影印接種法。可根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求和實(shí)驗(yàn)室具體條件加以選用。 第四步,鑒定缺陷型:可借生長(zhǎng)譜法進(jìn)行。3.什么是轉(zhuǎn)導(dǎo)?試比較普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)和局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)的異同。
10、P227通過缺陷噬菌體的媒介,把供體細(xì)胞的小片段DNA攜帶到受體細(xì)胞中,通過交換與整合,使后者獲得前者部分遺傳性狀的現(xiàn)象,稱為轉(zhuǎn)導(dǎo)。攜帶供體部分遺傳物質(zhì) (DNA 片段 ) 的噬菌體稱為轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體。在噬菌體內(nèi)僅含有供體菌 DNA 的稱為完全缺陷噬茵體;在噬菌體內(nèi)同時(shí)含有供體 DNA 和噬菌體 DNA 的稱為部分缺陷噬菌體 ( 部分噬菌體DNA被供體DNA所替換 ) 。根據(jù)噬菌體和轉(zhuǎn)導(dǎo) DNA 產(chǎn)生途徑的不同,可將轉(zhuǎn)導(dǎo)分為普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)和局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)。比較項(xiàng)目 普通性轉(zhuǎn)導(dǎo) 局限性轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)導(dǎo)的發(fā)生 自然發(fā)生 人工誘導(dǎo) 噬菌體形成 錯(cuò)誤的裝配 前噬菌體反常切除 內(nèi)含 DNA 只含宿主染色體 DNA 同時(shí)有
11、噬菌體 DNA 和宿主 DNA 轉(zhuǎn)導(dǎo)性狀 供體的任何性狀 多為前噬菌體鄰近兩端的 DNA 片斷 4、什么是質(zhì)粒?有哪些特點(diǎn)?質(zhì)粒的種類有哪些?p197-201 凡游離于原核生物核基因組以外,具有獨(dú)立復(fù)制能力的小型共價(jià)閉合環(huán)狀的dsDNA分子,即cccDNA,就是典型的質(zhì)粒。質(zhì)粒的特點(diǎn):質(zhì)粒具有麻花狀的超螺旋結(jié)構(gòu),大小一般為1.5300kb,相對(duì)分子質(zhì)量為106108,因此,僅相當(dāng)約1%核基因組的大小.。主要質(zhì)粒有:1)F質(zhì)粒 2)R質(zhì)粒 3)Col質(zhì)粒4)Ti質(zhì)粒5)Ri質(zhì)粒 6)mega質(zhì)粒 7)降解性質(zhì)粒。5什么是影印平板培養(yǎng)法?有何理論與實(shí)際應(yīng)用?P206 影印平板培養(yǎng)法是一種通過蓋印章
12、的方式,達(dá)到在一系列培養(yǎng)皿平板的相同位置上出現(xiàn)相同遺傳型菌落的接種和培養(yǎng)方法。把長(zhǎng)有數(shù)百個(gè)菌落的E.coli母種培養(yǎng)皿倒置于包有一層滅菌絲絨布的木質(zhì)圓柱體(直徑應(yīng)略小于培養(yǎng)皿平板)上,使其上均勻地沾滿來自母培養(yǎng)皿平板上的菌落,然后通過這一”印章”把母皿上的菌落”忠實(shí)地”一一接種到不同的選擇性培養(yǎng)基平板上,經(jīng)培養(yǎng)后,對(duì)各平板相同位置上的菌落進(jìn)行對(duì)比,就可選出適當(dāng)?shù)耐蛔冃途辍4朔砂涯钙桨迳?0%20%數(shù)量的細(xì)菌轉(zhuǎn)移到絲絨布上,并可利用這一”印章”連續(xù)接種8個(gè)子培養(yǎng)皿。因此,通過影印接種法,就可從非選擇性條件下生長(zhǎng)的微生物群體中,分離到過去只有在選擇性條件下才能分離到的相應(yīng)突變株。影印平板培養(yǎng)法
13、不僅在遺傳學(xué)基礎(chǔ)理論的研究中發(fā)揮了重要作用,而且在育種實(shí)踐和其他研究中也具有重要的應(yīng)用。6. 試述用艾姆氏(Ames)法檢測(cè)致癌劑的理論依據(jù)、方法概要和優(yōu)點(diǎn)。P215艾姆氏試驗(yàn)是一種利用細(xì)菌營(yíng)養(yǎng)缺陷型的回復(fù)突變來檢測(cè)環(huán)境或食品中是否存在化學(xué)致癌劑的簡(jiǎn)便有效方法。此法測(cè)定潛在化學(xué)致癌物是基于這樣的原理:鼠傷寒沙門氏菌的組氨酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型(his-)菌株在基本培養(yǎng)基-的平板上不能生長(zhǎng),如發(fā)生回復(fù)突變變成原養(yǎng)型(his+)后則能生長(zhǎng)。方法大致是在含待測(cè)可疑“三致”物例如黃曲霉毒素、二甲氨基偶氮苯(俗名“奶油黃”)、“反應(yīng)?!钡鹊脑嚇又?,加入鼠肝勻漿液,經(jīng)一段時(shí)間保溫后,吸入濾紙片中,然后將濾紙片放置于上述平板中央。經(jīng)培養(yǎng)后,出現(xiàn)3種情況:1.在平板上無大量菌落產(chǎn)生,說明試樣中不含誘變劑;2.在紙片周圍有一抑制圈,其外周出現(xiàn)大量菌落,說明試樣中有某種高濃度的誘變劑存在;2.在紙片周圍長(zhǎng)有大量菌落,說明試樣中有濃度適當(dāng)?shù)恼T變劑存在。此法具有快速(約3天)、準(zhǔn)確(符合率>85%)和費(fèi)用省等優(yōu)點(diǎn).7、列表比較轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)、接合和原生質(zhì)體融合間的異同。參照課件8、試比較大腸桿菌的F+、F-、Hfr和F'菌株的異同,并圖示這四者之間的關(guān)系。P230F+ 菌株:F因子以游離狀態(tài)存在,可獨(dú)立于染色體進(jìn)行自主復(fù)制,且細(xì)胞表面有相當(dāng)數(shù)量的性菌毛。
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