認 識 實 習 報 告 生工

1、 認 識 實 習 報 告學 院 生物與制藥工程學院 專 業(yè) 生物工程與生物技術 班 級 生工類1001班 學 號 1309100104 姓 名 武晴 起訖日期 2012,11,19-2012,12,7 2012年11月前言實習目的：了解典型發(fā)酵工廠的基本組成及企業(yè)各部門之間的協(xié)作關系；通過對本專業(yè)領域典型工廠或生產(chǎn)車間的參觀學習，加深對基礎理論及專業(yè)基礎理論課程的理解；通過對部分典型發(fā)酵產(chǎn)品的生產(chǎn)過程參觀學習，強化對設備、工程全局觀的意識，并能夠獲得對后繼專業(yè)理論課程的感性認識。 回顧并加深理解生物技術與生物工程原理、生物工程機械基礎、生物化學、微生物學等基本內(nèi)容。實習時間2012年11月19

2、日-12月7日實習單位南京工業(yè)大學國家生化工程技術研究中心百威英博啤酒有限公司南京分公司實習準備 根據(jù)學校所給資料，對所參觀實習的單位及公司進行了大體的了解，包括公司概況以及其主要產(chǎn)品。進圖書館，利用館藏資源，查閱相關產(chǎn)品的工藝流程以及生產(chǎn)環(huán)節(jié)中的控制點和影響的關鍵因素。一、 實習單位概況1. 南京工業(yè)大學國家生化工程技術研究中心南京工業(yè)大學國家生化工程技術研究中心是于1996年4月經(jīng)國家科學技術部批準依托南京工業(yè)大學組建而成的高新技術研發(fā)實體，以基因工程、酶、蛋白質工程、細胞工程及發(fā)酵工程等生物技術為主的生化工程領域的科學研究、研究成果的工程化、產(chǎn)業(yè)化開發(fā)。中心的“化學生物學技術重點實驗室”

3、包括了儀器裝備先進的基因工程、工業(yè)微生物、酶工程、生物物理（等離子注射等）、食品工程、分離工程以及現(xiàn)代儀器分析等實驗室?，F(xiàn)代儀器分析實驗室裝備了國內(nèi)最先進的LC/MS/MS系統(tǒng)、全自動多肽合成儀、基因解析軟件、蛋白解析儀和平行計算系統(tǒng)等。中心已建立了生物催化多樣性的研究平臺、生物催化劑的快速改造技術平臺、生物催化技術研究平臺、生物分離工程新技術研究平臺和生物催化系統(tǒng)集成平臺等較完整的工業(yè)生物技術研究平臺以及不同規(guī)模的中試線，已建成了較完善的工業(yè)生物技術研究體系和研究團隊，在生物質資源代替化石資源和生物基化學品的生物制造、生物材料、大宗化學品，精細化學品和技術裝備等領域已取得了一定的成績。2.

4、百威英博啤酒有限公司南京分公司。百威英博是一家上市公司，總部位于比利時魯汶。百威英博是全球領先的釀酒制造商，也是全球五大消費品公司之一。作為一家以消費者為中心、以銷售為推動力的大型公司，百威英博旗下經(jīng)營著 300 多個品牌，其中包括百威、時代 (Stella Artois) 、貝克啤酒等全球旗艦品牌. Bud Light 、 Brahma 、 Quilmes 、 Michelob 、哈爾濱啤酒、雪津 、科羅娜、 等本土明星品牌。此外，公司擁有此公司 50% 的股份。 此公司是墨西哥領先的啤酒制造商，也是享譽全球的科羅娜啤酒品牌所有者。 百威英博對于傳統(tǒng)以及品質的執(zhí)著追求可以追溯到 1366 年

5、成立于比利時魯汶的 Den Hoorn 酒廠和 1860 年成立于美國圣路易斯市的 Anheuser & Co 啤酒公司。 Den Hoorn 酒廠釀造啤酒的悠久傳統(tǒng)和 Anheuser & Co 啤酒公司的領先意識都對今天的百威英博產(chǎn)生了巨大而深遠的影響。公司業(yè)務遍及全球 30 余個國家，擁有員工 12 萬余名，多元化的業(yè)務版圖使得百威英博得以集中發(fā)揮雙方的綜合優(yōu)勢，在發(fā)達和發(fā)展中國家市場均取得驕人的成績。 百威英博的夢想是：“釀造更美好的世界”。根據(jù) 2008 年的統(tǒng)計，合并后的公司總收入達到 392 億美元。更多信息請登陸 www.ab- 世界領先的啤酒公司 “百威英博的業(yè)務在全球主要分

6、為 6 大區(qū)域，全球各地的消費者都可以享用我們生產(chǎn)的啤酒。” 百威英博公司概況： 百威英博公司是世界啤酒行業(yè)的領導者 全球五大消費品制造公司之一 全球銷量位居前四的啤酒品牌中百威英博旗下?lián)碛腥齻€品牌：百威、時代、貝克 公司業(yè)務遍及 30 余個國家 其中，在 20 多個市場中占據(jù)第一或第二的位置 員工人數(shù)約 12 萬余名 根據(jù) 2008 年的統(tǒng)計，合并后的公司總收入達到 392 億美元。 旗下?lián)碛?300 余個品牌，包括百威啤酒（ Budweiser ）、時代啤酒（ Stella Artois ）、貝啤酒（ Becks ）等全球旗艦品牌； 以及 Bud Light 、博浪（ Brahma ）、

7、Quilmes 、 Michelob 、哈爾濱（ Harbin ）、雪津等地方性知名品牌。 百威英博將為打造最佳啤酒公司 , 釀造更美好的世界的夢想而奮斗。 百威英博中國概況： 全國擁有超過 30 個酒廠 , 遍布 11 個?。汉邶埥⒓?、遼寧、福建、江西、廣東、江蘇、 浙江、湖南、湖北、河北 品牌：百威、哈爾濱、雪津、紅石梁、雙鹿、 KK 、 金陵、白沙、金龍泉 中國雇員總數(shù)近 3 萬 5 千名 南京英博金陵啤酒有限公司，創(chuàng)建于 1958 年的金陵啤酒是江蘇省第一家啤酒生產(chǎn)企業(yè)，她依托名城，在幾代市民的生活中占據(jù)著重要的地位。在經(jīng)歷了近半個世紀的蓬勃發(fā)展，公司不僅注入了全球第一大啤酒集團百

8、威英博啤酒集團的雄厚資金和技術力量，更名為南京英博金陵啤酒有限公司，同時引進了國際領先的精良設備和技術以及營銷管理經(jīng)驗?，F(xiàn)在生產(chǎn)能力達 12 萬噸，年產(chǎn)銷量、銷售額、利稅、市場占有率穩(wěn)步增長并均在江蘇省內(nèi)名列前茅。 2000 年金陵啤酒被推薦為“國家級優(yōu)質產(chǎn)品”。公司也于 2002 年通過了 ISO9001 質量體系認證。金陵、亞力先后獲得多項殊榮，金陵干啤酒更是多年穩(wěn)居南京市場銷售榜首。 現(xiàn)在南京人驚喜地看到了金陵啤酒的包裝開始變得時尚而現(xiàn)代 - “金陵純爽”恰到好處地加入了南京城墻的元素而顯得脫俗高雅。南京人欣喜地嘗到，金陵的口味開始變得多樣而清爽 - “ 9 度金陵啤酒”在南京城第一個喊

9、出清爽到底的領“鮮”主張，可以說，金陵啤酒已經(jīng)脫胎換骨，浴火重生了。 金陵啤酒憑借古都金陵深厚的歷史底蘊和豐富的文化元素，張揚自信，激發(fā)豪情，為城市個性注入活力，已成為南京一張亮麗的城市名片二、 產(chǎn)品生產(chǎn)工藝2.1 FDP的生產(chǎn)2.1.1 FDP背景介紹近十多年來，日益富足的人民群眾正把注意力越來越多的投向了對生活質量和身體健康的提高上。而FDP作為一種新型的生物藥品，其在治療心血管病、糖尿病和肝炎上的廣泛實用性使之成為當今世界各國競相研究的熱點。FDP是1,6-二磷酸果糖（英文名稱Fructose 1,6-diphosphate）的英文縮寫，是生物體細胞內(nèi)糖代謝的一種中間產(chǎn)物，純FDP的性狀

10、呈白色或類白色的結晶性粉末，易溶于水。研究發(fā)現(xiàn)它可作用于細胞膜，調(diào)節(jié)糖代謝中若干酶活性，尤其是激活磷酸果糖激酶（PFK），聚增細胞內(nèi)高能磷酸池，產(chǎn)生大量的ATP，促進鉀離子內(nèi)流，恢復細胞極化狀態(tài)，從而有益于休克、缺血、缺氧、損傷體外循環(huán)和輸血等狀態(tài)下的細胞能量代謝以及對葡萄糖的利用，以促進細胞修復和改善功能。上個世紀八十年代，意大利Foscama公司開發(fā)成功FDP靜脈注射液，在臨床上得到廣泛運用，是治療和急救新腦血管方面疾病的特效藥之一。近年來，隨著制備工藝的不斷改進，F(xiàn)DP的酶法合成及其應用受到受到世界上越來越多國家的關注。因此，進一步開發(fā)新生產(chǎn)工藝，研制新鹽類型、開發(fā)新劑型和新產(chǎn)品、開拓新

11、應用領域具有十分重要和現(xiàn)實的意義?？梢灶A見，這種來自生物質的新型藥物的生產(chǎn)及應用將會獲得更大的發(fā)展，并且今后還能創(chuàng)造出巨大的經(jīng)濟效益和不可低估的社會價值。啤酒酵母過濾葡萄糖磷酸轉化過濾離子交換柱脫色濃縮結晶干燥成品包裝2.1.2 FDP生產(chǎn)工藝介紹目前我們生產(chǎn)工藝是在啤酒酵母的作用下，通過糖酵解（EMP）途徑將葡萄糖和磷酸鹽轉化為1,6-二磷酸果糖，再經(jīng)過過濾、離子交換、脫色、濃縮、結晶、干燥、成品包裝等獲得最終產(chǎn)品。具體過程見下圖：具體糖酵解途徑（EMP，部分）見下圖：2.1.3 生產(chǎn)注意轉化反應溫度對酶活的影響溫度對酶反應速度的影響是多方面的。總體來說，主要兩個方面：一方面酶作為一種生物催

12、化劑，具有普通無楊催化劑的一般特性，即溫度上升使底物能量增加，分子碰撞概率增加，從而使反應速度加快。通常反應溫度每升高10度，反應速度便增加1-2倍；另一方面，隨著溫度上升超過某一界限，酶蛋白開始變性，有活性的酶減少，從而降低了酶反應的速度。反應的最適溫度就是這兩種效應平衡的結果。結果見下圖。較好的生產(chǎn)溫度應該控制在2534C pH對酶轉化的影響酶分子上有許多酸性、堿性氨基酸的側鏈基團，pH值的改變底物分子（s）、中間產(chǎn)物（ES）甚至酶（E）分子活性部位催化基團的解離狀態(tài)。酶活性中心含有COOH和NH基團，可分別解離為COO和NH。當將OH或H+加入有活性的酶液中時，pH值的變化

13、必然會些起一個或兩個基團的解離形式變化，從而影響酶的活性，其機理如圖。 在不同pH條件下測定酶的活力，可發(fā)現(xiàn)在某一pH值時，酶的活力最大，這特定PH值稱為最適pH值，偏離此值則酶活力顯著下降。攪拌對酶轉化反應的影響 反應初期，提高攪拌轉速可以加快底物轉化，但到反應中后期過高的攪拌速度反而使轉化率降低，這是由于攪拌的剪切力對酶產(chǎn)生了機械損傷，便酶活下降，轉化減慢，而靜置反應由于酶與底物無法充分接觸，轉化率也較低，而采用間歇攪拌方式，即保證了酶和底物的良好接觸，又可以減少由于攪拌導致的機械損傷，是一種比較適合的生產(chǎn)方式。底物濃度對酶的穩(wěn)定性的影響對酵母轉化FDP中底物葡萄糖和磷酸鹽濃度的影響進行了

14、研究，結果見下圖。 從以上結果可以看出：磷酸鹽在一定濃度范圍內(nèi)，F(xiàn)DP的生成速率隨其濃度的增加而增大。但是在磷酸鹽加入量大于5.0g后，F(xiàn)DP生成速率在前期卻隨著磷酸鹽濃度的增加而減少，這是因為磷酸鹽在較高的濃度下對FDP的生成產(chǎn)生一定抑制作用，但隨著磷酸鹽的轉化，這種抑制現(xiàn)象逐漸減弱，在經(jīng)過足夠長的時間后，最終的培養(yǎng)液中FDP含量仍高于較低濃度的培養(yǎng)液，但對于生產(chǎn)來說，無機磷酸鹽的加入量在5.0g以上是有利的，因為反應時間較短,降低了產(chǎn)品的成本。在反應中當葡萄糖的加入量達到8.0g/L時，4h內(nèi)FDP的生成量最高。同時從磷酸鹽的轉化率來看，此時無機磷的轉化率也是最高的。當進一步增加葡萄糖用量

15、，F(xiàn)DP的產(chǎn)量及無機磷的轉化率均呈下降趨勢，此時葡萄糖對酵母生成FDP產(chǎn)生抑制作用。分離提取FDP在FPD提取過程中需要采用過濾、離子交換、濃縮結晶、膜過濾（可選）、脫色、結晶、干燥等工藝獲得最后產(chǎn)品2.2 核苷酸的生產(chǎn)2.2.1 核苷酸的背景意義5-核苷酸在農(nóng)業(yè)、食品和醫(yī)藥行業(yè)有著廣泛的用途。尤其是在嬰兒食品和醫(yī)藥領域的應用中，有著不可替代的功能。在嬰兒食品中，作為嬰兒食品的添加劑其可以明顯提高嬰兒的免疫能力，促進腸道的成熟，促進脂蛋白和多不飽和脂肪酸的合成，減少嬰兒感冒和腹瀉等疾病的發(fā)生，有利于嬰兒的正常生長和發(fā)育。在醫(yī)藥領域，臨床實驗表明，%(核苷酸參與人體代謝，促進內(nèi)臟器官改進和恢復，

16、改善骨髓造血功能，可作為治療癌癥病毒的輔助藥物，是一種非常重要的醫(yī)藥原料。%(核苷酸可使白細胞過量增生，對于各種放射性物質或藥物引起的白細胞下降、非特性血小板減少等癥狀有良好的療效，也可用于急、慢性肝炎的治療2.2.2 核苷酸的主要生產(chǎn)方法 化學法化學法生產(chǎn)5-核苷酸，主要是以核苷為原料進行磷酸酯化反應。一般常用的核苷磷酸化試劑主要是磷酸或者焦磷酸的活性衍生物，如磷酸的一氯和二氯衍生物，焦磷酸酰氯，雙(對(硝基(苯焦磷酸等。要在核苷的5位的羥基上導入磷酸基而得到5-核苷酸，必須在進行磷酸化反應之前預先以適當?shù)谋Ｗo基保護核苷上核糖的2，3位的羥基。一般可以采用異丙叉基、卞基、乙?；虮絹喖谆然?/p>

17、團保護，然后等磷酸化完成后再脫去保護基。這種方法因采用了保護、去保護步驟使得反應整體產(chǎn)率下降。目前，在工業(yè)上己經(jīng)實現(xiàn)了用P2O5或POCl3為磷酸化試劑，在少量水存在下，不用任何保護劑，核苷直接進行磷酸化反應，從而生成相應的5-核苷酸，得到較高的產(chǎn)率。如以POCl3使肌苷，鳥苷，腺苷，鳥苷，尿苷磷酸化，其相應的5-核苷酸產(chǎn)率分別為91% ，90% ，84% ，89%，88%。此方法也適用于許多非天然核苷酸的合成。但是，當?shù)孜锇瑢λ岵环€(wěn)定的基團時，此法效果不好。同時，此方法的直接產(chǎn)品5-核苷酸極性強，提純困難、耗時。一些POCl3的衍生物較MND4L更溫和，如磷酸咪唑，磷酸三唑，磷酸羥基苯并三

18、唑等。應用這種磷酸化試劑前，核苷中糖基上其它羥基的保護是必要的。這類磷酸化試劑引入的磷酸基中含有保護基團，極性較小，其提純也比較方便。這類磷酸化反應中的主要問題在于除去保護基團所需條件劇烈。用b-取代乙基保護基可以解決這個問題，它可以在溫和的堿性條件下發(fā)生b-消除而離去2，3。但是，這種反應較難控制。 圖1 磷酸化試劑1磷酸化試劑1（ 圖1 ）既易于除去，又容易控制，但不足之處在于含有的亞磷酰胺基團不穩(wěn)定2。人們還報道了許多此類保護基團，但是這些保護基都存在一定局限性，同時，保護和去保護步驟使得磷酸化產(chǎn)率降低。圖2 磷酸化試劑2為避免這些缺陷，Michael T和Vasu N開發(fā)了新型磷酸化試

19、劑2（ 圖2 ）,它可以使核苷中的伯醇和仲醇磷酸化，并能得到較高產(chǎn)率。此反應的一大優(yōu)點是，磷酸化后的去保護步驟不會使整體反應產(chǎn)率降低，反而能起到促進作用，所以，整體反應產(chǎn)率可以達到80%-95%3，4。盡管人們開發(fā)出了許多化學合成5-核苷酸的方法，但是，由于化學法有著各種局限，所涉及的試劑昂貴，且有一定毒性，生產(chǎn)成本偏高。因此化學合成法一般用于生產(chǎn)一些有特殊用途的5-核苷酸，且僅限于實驗室規(guī)模，工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)有一定的難度。 微生物發(fā)酵法微生物發(fā)酵法生產(chǎn)5-核苷酸，主要是利用微生物菌株的生物合成途徑來生產(chǎn)5-核苷酸。對于核苷這樣的物質，比較容易透過微生物細胞，所以利用微生物發(fā)酵生產(chǎn)核苷比較容易

20、。目前已有較成熟的發(fā)酵生產(chǎn)肌苷，鳥苷，黃苷，腺苷，尿苷，胞苷的方法。但是核苷酸極性較大，難于透過細胞膜，因此增加了菌體發(fā)酵生產(chǎn)核苷酸的難度。目前利用直接發(fā)酵法生產(chǎn)核苷酸僅適于生產(chǎn)5-肌苷酸和5-鳥苷酸。 酶解法酶解法生產(chǎn)5-核苷酸是歷史最長、技術最成熟的生產(chǎn)方法。在日本，有近40% 的核苷酸是以RNA為底物酶解得到的。利用桔青霉發(fā)酵生產(chǎn)出的核酸酶P1與從酵母中提取的RNA 反應即可得到四種5-核苷酸的混合物，將該混合物經(jīng)離子交換樹脂分離純化可以得到四種核苷酸的純品10-13。其流程如圖四種核苷酸生產(chǎn)工藝流程圖除桔青霉提取的核酸酶P1 可酶解RNA 外，還可以從麥芽根中提取磷酸二酯酶進行酶解反應

21、14，15而利用固定化核酸酶生產(chǎn)5-核苷酸的研究報道較多。除固定化酶生產(chǎn)核苷酸外，邵晶平等人利用膜反應器實現(xiàn)RNA連續(xù)水解生產(chǎn)核苷酸，為生產(chǎn)核苷酸提供了新的思路17。但是此法由于反應器的膜易堵塞而且膜反應器維護費用高，故不適用于大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)。 酶催化法酶催化核苷磷酸化法，可用于制備許多5-核苷酸，特別是一些具有高效藥性而非自然存在的核苷酸，具有其他方法無法比擬的優(yōu)越性。此法可以合成許多天然和非天然核苷酸，而且具有反應條件溫和，容易控制，不需要保護基團，步驟簡單，反應專一性強，副反應少，后處理容易等優(yōu)點。目前，可用于5-核苷酸合成的方法的酶主要是各種激酶。同時核糖磷酸轉移酶和5-核酸酶，酸性磷

22、酸酶也被報道可用于核苷的5位的單磷酸化。 方法比較化學法一般所需原料或催化劑較難得到，產(chǎn)率較低，后處理也麻煩，但此對底物核苷結構限制不大，具有廣泛的作用范圍；微生物發(fā)酵法，副產(chǎn)物少，成本低，但此法的應用受到微生物特性的很大限制；酶解法已成為制備各種天然核苷酸的經(jīng)典方法；酶催化方法同時具有微生物法的產(chǎn)物單一，成本低的優(yōu)點，又有化學法的作用范圍廣泛的特點，正受到越來越多的重視，此法的不足之處在于對酶的篩選工作量很大，同時酶的底物作用范圍也有一定的限制。2.3 啤酒的釀造工藝（金陵英博啤酒有限公司）2.3.1啤酒生產(chǎn)原理基本流程麥芽輔料 釀造水酒花 麥汁 氧氣酵母啤酒2.3.2 裝置流

23、程圖為：2.3.3操作要點啤酒是以大麥和其它谷物為主要原料，添加少量酒花，經(jīng)酵母發(fā)酵釀制而成的，一種含有少量酒精度和充足的二氧化碳，具有酒花香和爽口的苦味，營養(yǎng)豐富、風味獨特的低度釀造酒。啤酒生產(chǎn)過程主要分為：糖化、發(fā)酵、罐裝三個部分。 麥芽由大麥制成。大麥是一種堅硬的谷物，成熟比其他谷物快得多，正因為用大麥制成麥芽比小麥、黑麥、燕麥快，所以才被選作釀造的主要原料。大麥必須通過發(fā)麥芽過程將內(nèi)含地難溶性淀料轉變?yōu)橛糜卺勗旃ば虻目扇苄蕴穷?。總的來說，全世界有三大啤酒麥產(chǎn)地，澳州、北美和歐州。其中澳州啤酒麥因其講求天然、光照充足、不受污染和品種純潔而最受啤酒釀酒專家的青睞，所以它又有金質麥芽之稱。

24、酒花是屬于蕁麻或大麻系的植物。正是這些酒花給啤酒注入了苦味與甘甜，使啤酒更加清爽可口，并且有助消化。不同品牌選用不同的優(yōu)質酒花。 酵母是真菌類的一種微生物。在啤酒釀造過程中，酵母把麥芽和大米淀粉中的糖分發(fā)酵成啤酒，產(chǎn)生酒精、二氧化碳和其他微量發(fā)酵產(chǎn)物。這些微量但種類繁多的發(fā)酵產(chǎn)物與其它那些直接來自于麥芽、酒花的風味物質一起，組成了成品啤酒誘人而獨特的感官特征。有兩種主要的啤酒酵母菌：上面發(fā)酵酵母和下面發(fā)酵酵母。上面發(fā)酵酵母是由于發(fā)酵過程中，酵母上升至啤酒表面并能夠在頂部撇取。下面發(fā)酵酵母則一直存在于啤酒內(nèi)，在發(fā)酵結束后并最終沉淀在發(fā)酵罐底部。如南京英博金陵啤酒有限公司的產(chǎn)品都是下面發(fā)酵酵母產(chǎn)出

25、的貯藏啤酒。 水：每瓶啤酒90%以上的成份是水，水在啤酒釀造的過程中起著非常重要的作用。啤酒釀造所需要的水質的潔凈外，還必須去除水中所含的礦物鹽成為軟水。 麥芽在送入釀造車間之前，先被送去粉碎。在這里，麥芽經(jīng)過輕壓粉碎制成釀造用麥芽。 糊化處理即將粉碎的麥芽/谷粒與水在糊化鍋中混合。糊化鍋是一個巨大的回旋金屬容器，裝有熱水與蒸汽入口，攪拌裝置如攪拌棒、攪拌槳或螺旋槳，以及大量的溫度與控制裝置。 麥芽汁在被泵入煮沸鍋之前需先在過濾機中去除其中的麥芽皮殼。 煮沸 在煮沸鍋中，混合物被煮沸以吸取酒花的味道，并起色和消毒。 在煮沸后，加入酒花的麥芽汁被泵入回旋沉淀槽以去處不需要的酒花剩余物和不溶性的蛋

26、白質。 冷卻、發(fā)酵：潔凈的麥芽汁從回旋沉淀槽中泵出后，被送入熱交換器冷卻。隨后，麥芽汁中被加入酵母，開始進入發(fā)酵的程序。 在發(fā)酵的過程中，人工培養(yǎng)的酵母將麥芽汁中可發(fā)酵的糖份轉化為酒精和二氧化碳，生產(chǎn)出啤酒。發(fā)酵在八個小時內(nèi)發(fā)生并以加快的速度進行，積聚高密度泡沫。這種泡沫在第3或第4天達到它的最高階段。從第5天開始，發(fā)酵的速度有所減慢。酵母在發(fā)酵完麥芽汁中所有可供發(fā)酵的物質后，就開始在容器底部形成一層稠狀的沉淀物。隨之溫度逐漸降低，在810天后發(fā)酵就完全結束了。整個過程中，需要對溫度和壓力做嚴格的控制。當然啤酒的不同、生產(chǎn)工藝的不同，導致發(fā)酵的時間也不同。 發(fā)酵結束以后，絕大部分酵母沉淀于罐底

27、。將這部分酵母回收起來以供下一罐使用。成熟的時間隨啤酒品種的不同而異，一般在1021天。 經(jīng)過后發(fā)酵而成熟的啤酒在過濾機中將所有剩余的酵母和不溶性蛋白質濾去，就成為待包裝的清酒。過濾不但對釀造產(chǎn)生的雜質去處更徹底，而且使酒液特別清澈，晶瑩的水光使飲用者在享受啤酒美味的同時，還可以得到視覺的享受。 每一批南京英博的啤酒在包裝前，還會通過嚴格的理化檢驗和感官品評合格后才能送到包裝流水線。 瓶裝啤酒是最為大眾化的包裝形式，也具有最典型的包裝工藝流程，即洗瓶、灌酒、封口、殺菌、貼標和裝箱。 南京英博金陵啤酒生產(chǎn)的成品啤酒的包裝都是瓶裝。瓶子形狀、容量的不同，標簽、頸套和瓶蓋的不同以及外包裝的多樣化，從而構成了市場中琳瑯滿目的啤酒產(chǎn)品。 越是離生產(chǎn)日期近的啤酒，即越是新鮮越是好喝。從釀酒廠生產(chǎn)出來的啤酒，通過運輸?shù)椒咒N商處，再從分銷商處到零售商處，最后到消費者手中，高效及通暢的分銷渠道是確保消費者飲用到新鮮啤酒的保證。 2.3.4生產(chǎn)注意 要保證潔凈洗瓶劑、消毒劑、噴淋潤滑劑（1）包裝容器的潔凈 所使用的包裝容器必須經(jīng)過清洗和嚴格檢查，不能使包裝后的啤酒污染。（2）灌裝設備的潔凈 對灌裝設備尤其是灌裝機的酒閥、酒槽要進行刷洗和滅菌，灌酒結束后每班應走水，加入消毒液殺菌，每周要對酒閥、酒槽、酒管進行刷洗和滅菌，凡與啤酒接