結(jié)核滅活疫苗的臨床研究進(jìn)展.docx

1、綜述結(jié)核滅活疫苗的臨床研究進(jìn)展盧錦標(biāo)綜述M徐苗審校中國食品藥品檢定研究院結(jié)核病疫苗室衛(wèi)生部生物技術(shù)產(chǎn)品檢定方法及其標(biāo)準(zhǔn)化重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京102629摘要：分枝桿菌滅活疫苗(:mc:iv3：edmjcob3c:erumticcn?s)是一種最原始，簡單制備方法的產(chǎn)物但在結(jié)核疫苗史上始終擁有一席之地月從早期的III結(jié)核菌素和死卡介苗以及中期唯-的分枝桿菌疫苗il到如今逐個出現(xiàn)的新疫苗H分枝桿菌滅活疫苗仍受到研究者的重視彳其用途也從結(jié)核病患者的免疫治療f擴(kuò)大到潛伏感染人群的預(yù)防和卡介苗(Bh:.USCa.ml：.eGu.niBCG)初免后的加強(qiáng)免疫；現(xiàn)就分枝桿菌滅活疫苗的臨床研究歷史和現(xiàn)狀作一綜述V

2、為新疫苗的研制提供參考J關(guān)鍵詞:結(jié)核分枝桿菌j滅活，臨床試驗(yàn)：疫苗中圖分類號：R979.9文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號：1005_5673(2019)04_006916D0I；llM3309Jki.pini.2019.04.Q13ProgressinclinicaltrialsofinaclivaledmycobacleriumvaccinesagainsttuberculosisLUJin_biniiXUMiioDiviiionoiTuberculousVaccinesiNationalInHitutesfoiFoodandDrugControlhIKeyLaboratoryoilheMinish

3、yofHealihiorResearchonQualityandS:andafdia*ionolB:o!ech甫Beijingii1。262抽ChinaCoirespond!ngaulhon：XUM:ao»iE'mai)：xum:aob;Abstract：Thtidc:iuUdmytibitaccinesi$:heoutcomeofhtmosIprmiLveiniimpes:vhcnedeve.opmen:hii11wiyihidipintin!h(hijloiyollubercu.otitiictint.Fromtheshirlliud(diuber;u.danddeadB

4、CGin!beeirljdinind*biiniymi(obaceriiiiccnein:bemediumhrmiftoservalnewon”inrecenIjejiflhein(liultdmycibicIeriauccinehitrecejedintreatingilltolioninditsunhaitipindedfromtheimmunolbenpjolpalen:swithtubtr(ulisitloprivenlionifhlenIinItclionindbits:a:erBCGpr.mng.Hire11rnitwlb(clinitilremirchhijloryindcurr

5、enttli:uio：niciivaledm>obitleriilntc:ntsandpmidttreitrtncelorshetludjolnewTittinthKeywords：Mycobac'eriumtubercu!oii<iinirintejiCJnica；IriaVutine通信作者:徐苗i研究員fEmi:iumub.U結(jié)核滅活疫苗(luhereuloinactivateduccine)的研究最早可追溯至結(jié)核分枝桿菌的發(fā)現(xiàn)者一KOCH,在19世紀(jì)90年代it用滅活的結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)物粗提純制的結(jié)核菌素(oldtuberculin。0T)治療結(jié)核病患者彳盡管效果不

6、佳且不良反應(yīng)嚴(yán)重r但也開啟了結(jié)核病免疫治療的先河I卡介苗(Bac'.lujCameh.e_Gu6r:n(BCG)誕生后i在越南戰(zhàn)爭時期進(jìn)行過滅活卡介苗替代活卡介苗用于新生兒接種的研究彳以解決疫苗保存和運(yùn)輸問題2j中國依此應(yīng)用到結(jié)核病的治療2H隨著越南戰(zhàn)爭結(jié)束1滅活BCG的研究也就終止.f迄今彳研制新型的結(jié)核滅活疫苗已成為防、治結(jié)核病的一個重要方向N不再局基金項(xiàng)目:國家科技重大專項(xiàng)(？W"XII門3。I)作者簡介:盧錦標(biāo)(198】-)?男'副研究員J主要從事結(jié)核生物制品的質(zhì)量控制研究M:mmnonoic:lyofIhtinelioHtubtrcolonticcineRU

7、T:rsiiomizeiiMcehtotio.phase二clita.Irii.ipteoijwkileitiubertDlosisacl.onI.PL«S01e(201H9(?)：e89612,32 VONREYNCFiLAKEYIfARBEITRDlelal.Sale!；indimmuieoicilyofininiclinictwholecelllibei<ios$vacciiebOHieriniii.lsprimHw:ltBCG:i：indomiiedt«n!*4lledHiilDAR'SOltJ.PL»SOneiMl"1!(5):e

8、Ol/5215.33 BOTHAMLEYGHiGRANGEJM.TieKocbphenomtcontnddelayedbyptinsiiiiily:1891HHJ.Tjbeicltf1991(12：廠11.EROOKGiALATT1YAHR.Ct!«LoesindlbtKocijltncmeioiJ.TuberclefI9JUi!(1):IMO.35 WALLACHD.T1etJbe.-IfilesoiINF:»Hrews8iiotwtr(De$J,SeniiCellDetBio42HH50:H5'l14.36 BRAROIAlEGESAM-K：MUDASie!i.

9、E:feclo：preten:：veihnpyoiimmuie:es?ou»j:omy(obat：e!：umlubef'Culosii：udbolibelliidomiied(wutrolledieiplouloristoi<J.BMCloftc:Did2IU<15:4M3門LEW：NSOHNDA(LEWINSOHNDM(SCRBATI.Polyiut'ii»nrCDI*Iellsi$iirjeisl»rlobeitDl«iisucciniii«DJ.F-oniImmunoli20Hil:U(2*12H.3JSATT

10、IIfMCSHANEH.CtrienilovirdiitniilfiDic«rre.a!eMImmuitpio!eti.on：-om:ibeitu.i)$ijJ.EipeilReiVaccintslHI9lH(1):43勺.19ZHENGJiCHENLiLIULieta.Pro:esnnomiciniyjsinidjconiyo：immuiealiigeosinMycobadeiiumvactaeJ.Mo.CeJPioteomicsi20171H(J):ISIl'lHO.HUPLEKARMWEILD(LONNROTHKitlil.WHO'slewendTBsluten

11、tJ-liicetf!II5(99T9):179)*1111.41SCHRAGERLKlCHANDRASEKARANPlFR：TZEILBHieial.WHOpreferredpojec!chiricItri$tit$ioroevvaccilesalinsi:ubticilositJ.LneetnittiDid2118(11(8)：8!829.4!VANDERMEERENOfHATHERillMlNDUBAVie:il.PhnetontrolIedtrillof2ASIIEvaccineI«tvenltaker<uoiisJ.NEntlJMeH201HJH(17):I6?II.

12、收稿日期JliroCH修回日期：2019'06'll編輯：王春暉文摘激光佐劑輔助的肽疫苗促進(jìn)皮膚樹突細(xì)胞的轉(zhuǎn)移并加強(qiáng)抵御皰疹病毒感染及疾病的保護(hù)性CD8+TEM以及TRM細(xì)胞應(yīng)答針對諸如單純皰疹病毒2（HSV_2）這類分布廣泛并可感染全球大部分人口的病毒類病原體B人們一直迫切地需要無化學(xué)及生物成分的安全佐劑以加強(qiáng)疫苗的免疫原性沖在此研究中。研究者考察了在生殖器皰疹B6小鼠模型中激光佐劑輔助肽（LAP）疫苗的安全性、免疫原性和保護(hù)性效力甘LAP疫苗及其無激光肽（LFP）疫苗類似物均含有與各種糖蛋白DCD4+輔助T細(xì)胞表位（HSV?D（3-m）共價連接的免疫顯性HSV-2糖蛋白BC

13、D8+T細(xì)胞表位（HSV-gBm頃'）§在用LAP進(jìn)行皮內(nèi)投遞之前i下部被剃的B6或CD11c/eYFP轉(zhuǎn)基因小鼠首先接受5%咪哇莫特乳膏的局部處理府然后將其暴露于采用FDA認(rèn)可的非燒蝕二極管的激光中持續(xù)60秒（與LFP疫苗相比il首先府LAP疫苗觸發(fā)了皮膚中樹突細(xì)胞（CDD調(diào)動i使其沿激光處理部位形成斑點(diǎn)j其次小誘導(dǎo)DCs表型及功能成熟再次R在陰道皮膚黏膜組織（VM）中刺激持久的HSV特異性效應(yīng)記憶CD8+T細(xì)胞（TEM細(xì)胞）以及在組織中定居的CD8+T細(xì)胞（TRM細(xì)胞）I最后1誘導(dǎo)產(chǎn)生抵御生殖器皰疹感染及疾病的保護(hù)性免疫力月作為目前常用傳統(tǒng)佐劑的替代物川在強(qiáng)化為抵御廣泛分

14、布的病毒感染而開展大規(guī)模群體接種的項(xiàng)目中用不含化學(xué)及生物成分的激光佐劑提供了一種易耐受且生產(chǎn)簡便的方法K全世界人口中很大一部分為1型及2型單純皰疹病毒（HSV、和HSV2）所感染F人們迫切需求既不含化學(xué)及生物成分K又能夠改進(jìn)群體免疫以抵御皰疹蔓延及感染的安全佐劑用此研究闡釋了使用激光輔助皰疹肽疫苗進(jìn)行免疫接種彳觸發(fā)DCs在皮膚中調(diào)動并在陰道皮膚黏膜組織中刺激強(qiáng)烈且持久的HSV特異性效應(yīng)記億CD8+T細(xì)胞（TEM細(xì)胞）以及在組織中定居的CD8+T細(xì)胞（TRM細(xì)胞）M這些被誘導(dǎo)的局部CD8+T細(xì)胞應(yīng)答與抵御生殖器皰疹感染及疾病的保護(hù)力有關(guān)沖這些研究結(jié)果使人們的注意力轉(zhuǎn)移至不含化學(xué)及生物成分的激光佐

15、劑作為當(dāng)前常規(guī)佐劑的替代以加強(qiáng)針對廣布病毒所造成感染而進(jìn)行的群體免疫諸如HSV1和HSV_2所造成的那些疾病#（張軼摘劉方蕾校）LOPESPPf11.JVhonilJhU8）:限于結(jié)核分枝桿菌提取物£各種非結(jié)核分枝桿菌(Dod.uhereulousmycobac!er；aiNTM)滅活疫苗也進(jìn)入廣大研究者的視野f其主要用途依然是免疫治療R8OOftOIlatenttubercu1osisinfectiod(LTBl)人群的免疫預(yù)防了目前i進(jìn)入臨床研究的結(jié)核滅活疫苗有Mk疫苗，母牛分枝桿菌、M【P、RUTI和DAR_HII1Mk疫苗在20世紀(jì)70年代初R英國倫敦大學(xué)學(xué)院STANFORD

16、教授從烏干達(dá)Kyoga湖的土媛中分離出一株快生長的非結(jié)核分枝桿菌彳當(dāng)時鑒定為母牛分枝桿l»(NCTC11659)1叼用該萌株為種子制備過不同工藝的結(jié)核疫苗K實(shí)驗(yàn)初期采用輻射滅活和熱滅活制備的兩種疫苗小無正式起名i僅在早期臨床研究中應(yīng)用項(xiàng)后按GMP要求生產(chǎn)的疫苗。有以瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)制備的SRL172疫苗和以肉湯培養(yǎng)基培養(yǎng)新無活動性結(jié)核病癥狀彳將他們隨機(jī)分成疫苗制備的DAR_90l疫苗.12016年ilLAHEY等4研究表明HNCTC11659菌株的16SRNA序列與奧布分枝桿菌（MytobaHuFumobuense）具有更高的同源性i因此DAR_901疫苗研究者將其疫苗菌種由母牛分枝桿

17、菌更正為奧布分枝桿菌！201S年iNOUIOUl等發(fā)布的最新的16SrRNA.gyrB,h$p65.recA和河基因分析，化學(xué)和表型特征以及DNA相關(guān)性I）表明NCTC11659菌株應(yīng)歸屬于另一類新的分枝桿菌并正式命名為My（bacteriumkyogaense$p.nov.（Mk）f至此i國外幾十年冠以“母牛分枝桿菌”疫苗的研究實(shí)質(zhì)是分類定性的錯誤K目前NCTC11659編號的菌株信息在英國國家典型菌種保藏中心己查詢不到府只存在于文獻(xiàn)中9除了SRL172疫苗和DAR-901疫苗外i其他原有的“母牛分枝桿菌（Mytobatieriumvactae）"疫苗府統(tǒng)一以Mk疫苗表示R與國內(nèi)真

18、正的母牛分枝桿菌疫苗（微卡）以示區(qū)分M20世紀(jì)90年代ifSTANFORD等3主導(dǎo)研究的Mk疫苗W在印度、阿根廷、尼日利亞、羅馬尼亞、越南、伊朗、南非、烏干達(dá)、馬拉維和贊比亞等國家進(jìn)行了一系列隨機(jī)、安慰劑對照和部分盲法的中小規(guī)模臨床試驗(yàn)#試驗(yàn)研究對象包括初治、復(fù)治以及耐多藥結(jié)核病患者F以其評價疫苗的免疫治療效果/這些研究均使用熱滅活制備的Mk疫苗K以單針次免疫為主R較少為兩針次W總體上研究結(jié)果并不理想*甚至互相沖突，其原因是：由于Mk疫苗單針次免疫誘導(dǎo)的保護(hù)性免疫不夠?qū)е乱呙缑庖呓M與安慰劑組在細(xì)菌學(xué)陰轉(zhuǎn)等關(guān)鍵指標(biāo)的統(tǒng)計學(xué)差異無顯著性采用全菌體高壓滅活后直接皮內(nèi)注射*局部不良反應(yīng)較高R易形成類似

19、于“卡疤”的長期疤痕這些問題均限制了Mk滅活疫苗的進(jìn)一步應(yīng)用此后i研究者將Mk疫苗免疫針次增加到3針次#并在臨床試驗(yàn)中評估聯(lián)合化療后的免疫效果8M結(jié)果顯示F多針次免疫程序能提高痰菌陰轉(zhuǎn)率4促進(jìn)病灶清除彳并改善免疫學(xué)指標(biāo)N如增強(qiáng)Th1類細(xì)胞因子應(yīng)答等#Mk疫苗除了對已感染人群的免疫治療外&也用于BCG初免人群的加強(qiáng)免疫F2001200$年f美國達(dá)特茅斯（DMmoih）醫(yī)學(xué)院在坦桑尼亞首都達(dá)累斯薩拉姆（Dm”完成了一項(xiàng)臨床111期試驗(yàn)（代號'DarDar*）I入組的20H例H1V感染者免疫功能正常N有BCG接種史（以卡疤為判斷標(biāo)組（1006例）和安慰劑組（1007例）W疫苗組在第0

20、、2、4、6、12月皮內(nèi)注射共5劑SRL172疫苗陌在平均3.5年的隨訪時間里11安慰劑組發(fā)病52例it疫苗組發(fā)病33例才疫苗保護(hù)率36%|fdi口服Mk疫苗f因其費(fèi)用低、依從性好彳也在初步臨床研究中#2012年RBUTOV等10在烏克蘭完成的臨床11期試驗(yàn)中以Mk疫苗片劑（1mm。dum）用于初治、復(fù)治、耐多藥結(jié)核?。∕ulli'drugreti:aot:uberculoMDRIB）以及合并HIV感染的TB患者的輔助治療il結(jié)果顯示配合化療f每日1次彳連服一個月Mk疫苗片劑可提高痰菌陰轉(zhuǎn)率。且安全性高F該臨床試驗(yàn)中彳研究者還使用中國生產(chǎn)的口服母牛分枝桿菌疫苗片劑（Longcom）i也

21、獲得了同樣的結(jié)果2母牛分枝桿菌疫苗鑒于當(dāng)時“母牛分枝桿菌”疫苗（實(shí)際上是Mk疫苗）在結(jié)核病免疫治療領(lǐng)域開始應(yīng)用/世界衛(wèi)生組織在20世紀(jì)90年代結(jié)核病研究與發(fā)展戰(zhàn)略規(guī)劃中i以母牛分枝桿菌（Mytobatieriumva（ae）為例i提出與化療相結(jié)合進(jìn)行免疫治療的策略12#受此啟發(fā)M990年初百中國藥品生物制品檢定所王國治和解放軍三O九醫(yī)院莊玉輝建立了母牛分枝桿菌種子庫（CMCC95051）（進(jìn)行國內(nèi)母牛分枝桿菌滅活疫苗的研究13M應(yīng)指出這是一段將錯就錯的研究用但也成就了真正的母牛分枝桿菌疫苗的研發(fā)月通過優(yōu)化工藝用提高了母牛分枝桿菌疫苗的安全性寸并將免疫針次確定為6針次R提高了免疫效果14K在19

22、961998年i母牛分枝桿菌疫苗先后完成了初'復(fù)治和難治菌陽活動性肺結(jié)核共568例的臨床療效對照觀察用全國微卡菌苗臨床研究協(xié)作組在臨床研究中R共納入342例初治菌陽肺結(jié)核患者,隨機(jī)分為疫苗組和對照組（各171例）”邛'疫苗組采用抗結(jié)核藥物（2HRZE/2HR）聯(lián)合疫苗治療6個月R對照組僅采用抗結(jié)核藥物治療（2HRZE/4HR）I結(jié)果顯示R接種母牛分枝桿菌疫苗組的菌陽肺結(jié)核患者不良反應(yīng)少旦較輕微并且免疫治療后可加快結(jié)核菌陰轉(zhuǎn)、病灶吸收及空洞縮小閉合的速度J一年后隨訪汁疫苗組的細(xì)菌學(xué)復(fù)發(fā)率（3.0%）顯著低于對照組（5.6%）M2001年。中國自主研發(fā)的注射用母牛分枝桿菌疫苗獲準(zhǔn)生

23、產(chǎn)批號（商品名：微卡）«正式應(yīng)用于臨床結(jié)核病化療的輔助治療N在國內(nèi)臨床應(yīng)用中*微卡已廣泛用于初治、復(fù)治和耐藥結(jié)核輔助治療的療效觀察JMe:a分析表明微卡聯(lián)合抗生素或安慰劑：結(jié)果顯示MIP疫苗免疫未表現(xiàn)出明顯療效i且不良反治療安全性好£有利于初治、復(fù)治和耐藥結(jié)核病患者的痰菌轉(zhuǎn)陰中增強(qiáng)化療效果$提高臨床治愈率杵但其遠(yuǎn)期療效仍需有待進(jìn)一步研究#iSOOOlhtenttuberculosisinfec:ioniLTBI）的預(yù)防日益受到重視！據(jù)WHO估計GLTBI約占總?cè)丝诘?/4uil中國則約有3.5億LTBI者寸5%1。的LTB1可能一生中發(fā)展為活動性結(jié)核病R因此R對這一龐大人群

24、進(jìn)行干預(yù)應(yīng)是中國結(jié)核病控制工作的首要問題19N2012年12月（微卡經(jīng)CFDA批準(zhǔn)巾作為預(yù)防用生物制品獲得臨床批件R于2013年1。月正式開展III期臨床試驗(yàn)（NCT019799I0）：在試驗(yàn)中采用嚴(yán)格的雙盲，隨機(jī)和安慰劑對照f共納入15'65歲LTBI受試者1000以期評估微卡免疫預(yù)防的有效性和安全性20I目前小臨床試驗(yàn)已于2018年初完成il詳細(xì)的臨床數(shù)據(jù)目前尚未正式發(fā)布f3M1P非結(jié)核分枝桿謹(jǐn)iMycobadefium:ndi（u$pranii（MIPi曾用名MwCn）早期被劃分為RunyonV組i屬于與母牛分枝桿菌同一類的快生長分枝桿菌j后根據(jù)其生長特點(diǎn)、生化和化學(xué)特征、代謝基

25、因和途徑以及全基因組分析iMip被確定為鳥-胞內(nèi)分枝桿菌復(fù)合群的祖先*介于快生長和慢生長分枝桿菌之間的一個獨(dú)有菌株”"JMIP可增強(qiáng)Tbl類應(yīng)答i誘導(dǎo)以IFN'y為主的Thl類細(xì)胞因子的釋放！從而促進(jìn)抗結(jié)核的細(xì)胞免疫應(yīng)答，這可能與MIP的細(xì)胞壁成分具有佐劑效應(yīng)有關(guān)23N在小鼠和豚鼠模型上動物初免BCG后i再經(jīng)皮下或氣溶膠途徑給予MIP疫苗it均顯示出對H37Rv攻擊有更高的抵抗能力24I2011年印度完成了MIP疫苗用于復(fù)治結(jié)核病免疫治療的隨機(jī)、雙盲、安慰劑對照的多中心臨床III期試驗(yàn)25f受試者在化療強(qiáng)化期接種6針次MIP疫苗與單純化療（以生理鹽水為安慰劑）相比；評估其疫苗

26、輔助性治療的安全性和有效性H結(jié)果顯示i注射M1P疫苗的患者無不良反應(yīng)j在免疫治療完成4周后的各個檢測時間點(diǎn)（M1P疫苗組的痰培養(yǎng)陰轉(zhuǎn)率均顯著高于安慰劑組i提示MIP疫苗對結(jié)核桿菌有清除作用年發(fā)布的另一項(xiàng)M任疫苗免疫治療結(jié)核性心包炎的臨床III期試驗(yàn)26（1400例受試者中有23合并H1V感染i在接受潑尼松龍或安慰劑治療后$1250例受試者又被隨機(jī)分成兩組i分別皮內(nèi)注射5針次MiP疫苗應(yīng)嚴(yán)重F其注射部位的膿牌形成率高達(dá)15.0%沖而且HiV陽性患者的Kapof肉瘤發(fā)生率也偏高i提示H1V感染人群接種疫苗的風(fēng)險更高！4RUTI西班牙巴塞羅那自治大學(xué)的CARDONA等模擬結(jié)核分枝桿菌在肉芽腫中的生長

27、環(huán)境£在體外低氧分壓、低pH及低營養(yǎng)條件下培養(yǎng)結(jié)核分枝桿菌HHRvi收獲后經(jīng)破碎和TiihnX'lH脫毒i包埋于脂質(zhì)體中制備成RUT1疫苗在不同動物模型上（RUTI疫苗誘導(dǎo)的細(xì)胞應(yīng)答呈現(xiàn)Thl'Th2Th3混合型：也可激發(fā)多達(dá)13種結(jié)核抗原的GlJgG2a和IgGS表達(dá)"門J盡管RUTI疫苗具有廣譜的免疫原性B但直接免疫對活動性結(jié)核感染動物無效只有感染動物經(jīng)抗生素治療后i再注射RUTI疫苗才能顯示出免疫效果”"2w這可能是處于活動性部蜒程的機(jī)體對生長期始核值的免疫應(yīng)答異?；钴Si當(dāng)H接注射RUT：疫苗反而引起免疫投傷：化療一定時間后S大iS分生長期結(jié)

28、核朝彼殺滅機(jī)體亢布的免疫應(yīng)答得到抑制，再注射iCT疫苗可以獲待較好保護(hù)性免疫效果1因此，RUT疫苗主要針對潛伏性結(jié)核分枝桿I版其臨床試5ft包括化療后的輔助治療以及LTB】的預(yù)防J2008年在西班牙完成的臨床1期研究。首次評估了RUTI疫苗的安全性和免疫原性小邛劑量爬坡（5>25.100.200ng）顯示i皮下注射RUT1疫苗2針次對健康受試者耐受性良好N但不良反應(yīng)與劑量呈正相關(guān)K引起研究者對高劑量疫苗注射的安全性關(guān)注U2010年NELL等花南非升保的"*試駭"低劑信（$.“，so>i）葩圍內(nèi)對1CT疫苗避行評估，為降低MT：疫苗宜接注射的安全性風(fēng)險'該

29、研究的95例LTB：受試者頃中例B：TPflftH均經(jīng)過個月異煙舶治療后再皮卜注射R1H按苗f結(jié)果顯示（接種低劑量MT疫苗未發(fā)生全身性不良事俐但注即部位結(jié)節(jié)發(fā)生率偏高，尤其足舅2甘龜疫后，電25pgiHfity可達(dá)到最佳的免校效賽njs2針免疫的健升效果并不明顯E因此<考也到>4接空的安全性f研究者建議未來臨床研究中擬采用康針次ffi高劑質(zhì)的免疫程序J目前（8UT：疫苗用于MDRTB»助治療的臨床一試臉正在實(shí)整中（NCH2?llT3S）<M>B"TBe#采1日碗準(zhǔn)化療方案治療16MJ.E12周扁痢“針次!5hRUT：疫苗'評估其安全性和免疫原

30、性（以及以虞那Utt為指標(biāo)的療效，DAR901DAR-901疫苗由美國達(dá)特茅斯蓋澤爾醫(yī)學(xué)院和Aei85基金會共同合作研發(fā)1采用新制備工藝i即以肉湯培養(yǎng)基培養(yǎng)NCTC11659菌株府提高了分枝桿菌的產(chǎn)量并降低了成本沖新制備的疫苗命名為DAR-90H區(qū)別于之前使用瓊脂培養(yǎng)基制備的SRL172疫苗由臨床前評價中'C57BL/6小鼠初免BCG后寸分別加強(qiáng)免疫？針次DAR101疫苗或BCGf攻毒結(jié)果顯示1mg劑量DAR-901疫苗的保護(hù)效果顯著優(yōu)于BCG4K依據(jù)該疫苗良好的動物保護(hù)力it以及上述*DarDar9SRL112疫苗臨床試驗(yàn)的結(jié)果i研究者開啟了DAR'?！恳呙缬糜贐CG接種人群

31、的加強(qiáng)免疫臨床試驗(yàn).?2014年，達(dá)特茅斯醫(yī)學(xué)院和Aeras基金會聯(lián)合開展了dar_mi疫苗的臨床1期試驗(yàn)受試者59名i根據(jù)BCG接種史、HIV和GRA的感染狀況以及疫苗注射劑量#分成6個隊列彳評估DAR'MI疫苗對不同免疫背景人群的安全性和免疫原性用其安全性評價顯示*皮內(nèi)注射3針次（間隔2個月）不同劑量（O.LO.h1.0mg）的DAR_H1疫苗的耐受性均良好序無嚴(yán)重不良反應(yīng)！對1mg疫苗的免疫原性分析表明i該劑量疫苗可誘導(dǎo)DAR'901裂解物和MTB裂解物特異性的IFN_y表達(dá)i且MTB脂阿拉們甘露聚糖抗體水平明顯上升月2016年3月#達(dá)特茅斯醫(yī)學(xué)院在坦桑尼亞首都達(dá)累斯薩拉

32、姆進(jìn)行的DAR'ni疫苗隨機(jī)、雙盲、安慰劑對照臨床II粼驗(yàn)（NCT02712424）R物入650名1315歲青少年F所有受試者均有BCG接種史（有卡疤）且1GRA陰性iII隨機(jī)分組后分別接種3針次1mgDAR'901疫苗或安慰劑（間隔2個月）在疫苗免疫后的不同時間點(diǎn)經(jīng)3次1GRA檢測彳以受試者M(jìn)TB感染狀態(tài)作為指標(biāo)i評估DAR'MI疫苗對BCG接種人群加強(qiáng)免疫后的結(jié)核病預(yù)防效果N該研究項(xiàng)目尚在進(jìn)行中預(yù)計2019年底完成沖等細(xì)胞因子的大量釋放有關(guān)面繼而導(dǎo)致組織損傷34-35!對分枝桿菌滅活疫苗®由于含有多種結(jié)核不良反應(yīng)33E這作職發(fā)型超故!£行祓認(rèn)為與

33、TNF由于卡介菌活疫苗的存在。分枝桿菌滅活疫苗主要用于結(jié)核分枝桿菌感染人群（結(jié)核病患者或LTBI）的免疫干預(yù)早期Koch觀察到i'給結(jié)核病患者注射舊結(jié)核菌素會導(dǎo)致病情加重甚至死亡用那時起N以他名字命名的“Koch現(xiàn)象"（或“Koch反應(yīng)”）府提出結(jié)核感染人群免疫疫苗可能會引起嚴(yán)重抗原成分F如何利用其保護(hù)性免疫反應(yīng)R又避免Koch現(xiàn)象彳在疫苗安全性上應(yīng)受到特別關(guān)注沖上述分枝桿菌滅活疫苗用于結(jié)核病患者時#普遍采用化療配合疫苗免疫的方式百均未出現(xiàn)有與疫苗相關(guān)的嚴(yán)重不良反應(yīng)的報道仲這可能是化療下調(diào)了Th1細(xì)胞因子的表達(dá)36。接種疫苗所誘導(dǎo)的免疫應(yīng)答不會出現(xiàn)誘發(fā)Koch現(xiàn)象的風(fēng)險if對

34、LTBI人群進(jìn)行務(wù)疫干預(yù)時i同樣也需要考慮這種風(fēng)險月因此#有研究者對LTBI人群同樣采用先化療后免疫的方式以規(guī)避Koch現(xiàn)象的出現(xiàn)K但又能獲得疫苗免疫保護(hù)效果27m，hL7B,此類人浦的分枝杯茵滅活疫苗或并他給核新疫苗的研充也隨之增無論臨床調(diào)動物模型評估還足臨床試都3把KochSt篁作為發(fā)疹的員KifJU苗的安全怕免疫燎性評估是臨床試姓的另一個改耍考核指標(biāo)？通常認(rèn)為始核病的免疫機(jī)制主要由CD"和CD8TMI極介導(dǎo)3Nft?JfcA票的核疫苗誘9抗版特異性多勸能T砌【37f0!目前尚未發(fā)現(xiàn)哪些免疫學(xué)指征與技苗的抗靖核保護(hù)效果有必然聯(lián)系亍對保護(hù)力相關(guān)的免疫學(xué)指標(biāo)還需進(jìn)圻深入研究381分枝

35、桿圜火活疫苗由于抗峻成分多C其免技治療的輸恨刑但通過全基因如測序和蛋白也學(xué)分柿也許在助于理解其免疫機(jī)制39)I2014年wH0提出“2015年后全球結(jié)核病戰(zhàn)略”i旨在2015-2035年之間將結(jié)核病死亡率降低95%*將新發(fā)病例數(shù)減少90%*最終遏制全球結(jié)核病白勺流彳亍“on要達(dá)到這nt伊垂要的是研發(fā)能預(yù)防結(jié)核料的新疫苗。分枝桿檔火活段伯研究史已fl30多年，盡卷部分疫苗已批準(zhǔn)用于結(jié)核病患淘免疫治療M!對LTB人群的免技預(yù)防以曰疏結(jié)枝麻按把的關(guān)8K步JF發(fā)J2018料WHO年發(fā)布的優(yōu)選的結(jié)核胸0艾苗產(chǎn)品特愕X成人用簡防仲疫苗雀達(dá)月不長于50%保護(hù)力【41i反陜了結(jié)核新疫苗研發(fā)的蒲度8最近市外Uf

36、i白佐刑疫削72/ASDIE的就【lb試剿探踢湖LTBI庸的保護(hù)第達(dá)到54%"?可被為不小的迎步*上i£分枝桿茴滅活疫苗正在臨床試娥階段接受徐這將為站核新按苗的研制提供*貴的經(jīng)別參考文獻(xiàn)iKAUFMANNSHElWINAUF.Fromhctiiolini<mmunology:ihedualismofspec'cityJ.NatImmoDoli20P5fi:1H3.2 林福增.死卡介苗研究概況J.廣東醫(yī)藥資料1911(12):38一43.3 STANFORDJtSTANFORDCiGRANGEJ.!mmuio:ie:ipyvilbMycobadeiiumvacc

37、aeiitiita：meiio'iibeicuos<J.FioniB：Mcif2tHI9flill'1719.LAKEYHLADDYD?HiLLKiei.Immuiogen:citytaip:！edlee'licicyoI!ieDAR111boo$tei<accineintmroemoielol:obticil»tisJ.PLoSOnti2016(11(1!):eOlH521.5 NOUIOU!ItBRUNETLRfSIMPSOND(eli.DeH：i|iioi*ftnoTespeceio:a$ig:own?mycoiicercm:Mytobac：

38、eiiumkyo'gaen>eip.nov.i8jcoub-omenc5：tdifcrvei8$Mycobatien'umvaccaeJ.IllISyiiEviloil2HH68(12):3門3734.6 GROUPDIT.ImmuuHeisnwithMycobacteriumvaccaeipi'iienitvilbnew；tdis(oohipilmonirttibtrcilosis:inDemisedcooitdledliitlI.Luceti199時354(9171):lli'lM.iJOHNSONJLiKAMYARMfOKWERAA<etal.

39、Riodomitticoon»ledIriilpfMycobadeiiumvattae：mmun»ihe'ipynnon'ii'mummunode!.c：encjiiiu$jittltd“andtnNullsw:bttwyd：81D4HipulmooirjluhiculosisJ.JliltclDi"2041(181(!):】H131LGROSCHELM：(PRABOWOSAfCARDONAPHe!il.peulitth(:nesio:luie:crojisairsumilicuiiewI.Vktne(201。3!(26):8 VONREY

40、NCFlMTE：LiARBEITRD(elil.Prerenitno!be-ttos$ioBuilieCaImttie-Gb6HipiimeHHiVinlecititdullsbooslejw/iioinid;uteiwholecellmycohcleliaIucciteJ,A：DSiWlM24(5):6ii'H5.IfBU1OVDA(EFREMENKOYViPRIHODANDie!il.Rifi:mied;|icebo'cm:n.edPh!h:lr：8.o:herkedMycobac'teriumvaccae(Immoiu.oihici)io-milleiaslaot

41、t.ill(V7)J,immoooihrujf20Bi5(10):lH7'll54.11 EFREMENKOYV(BUTOVDAiPRIHODANDfilil.Rifi»mled-'f.tctbo'c»oii«!ed|hie：itro:heil'kiiMycobac'teriumvaccae(Ion?combatch)l«rmiliiedisioo-tlpII(VT)J.HomVaccin:mminotbejj!I!U8(9)：1H2185f.12 WorliHealthOifinitiiioa.Tibeicolo

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45、!lTAIWARGP(AHMEDN«SAiNiV.(beunoi:belameMf(obacteriumw:o:h.e):onmmito:bejpej：:cbic/usnet:eicifiiDtionwithM.tuberculonfw(Btjitgsiuin):isuestioiJ.Iniee:GenelE<«llHl):lOO'KII.22RAHMANSk'iSINGHYiKOHL!Sitiil.摭山io*4Myco'bacieriumind:cu5pranii'isisiniolMycobactefiummPacellu'