血球計數(shù)板的使用

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上血球計數(shù)板的使用 姓名 原理血球計數(shù)板是由一塊比普通載玻片厚的特制玻片制成的。玻片中有四條下凹的槽，構(gòu)成三個平臺。中間的平臺較寬，其中間又被一短橫槽隔為兩半，每半邊上面刻有一個方格網(wǎng)。方格網(wǎng)上刻有9個大方格，其中只有中間的一個大方格為計數(shù)室，供微生物計數(shù)用。這一大方格的長和寬各為1mm，深度為0.1mm，其體積為0.1mm3。計數(shù)室通常有兩種規(guī)格。一種是大方格內(nèi)分為16中格，每一中格又分為25小格；另一種是大方格內(nèi)分為25中格，每一中格又分為16小格。但是不管計數(shù)室是哪一種構(gòu)造，它們都有一個共同的特點，即每一大方格都是由16×25=25×16=40

2、0個小方格組成。每一個大方格邊長為1 mm，則每一個大方格的面積為1 mm2，蓋上蓋玻片后，蓋玻片與載玻片之間的高度為0.1mm，所以計數(shù)室的容積為0.1 mm3血球計數(shù)板的使用方法（以計數(shù)酵母菌為例)：1  樣品稀釋的目的是便于酵母菌懸液的計數(shù)，以每小方格內(nèi)含有4-5個酵母細(xì)胞為宜，一般稀釋10倍即可。2  將血球計數(shù)板用擦鏡紙擦凈，在中央的計數(shù)室上加蓋專用的厚玻片。3  將稀釋后的酵母菌懸液用吸管吸取一滴置于蓋玻片的邊緣，使菌液緩緩滲入。多余的菌液用吸水紙吸取。稍待片刻，使酵母菌全部沉降到血球計數(shù)室內(nèi)。4  計數(shù)時，如果使用16格×25格規(guī)

3、格的計數(shù)室，要按對角線位，取左上、右上、左下、右下4個中格(即100個小格)的酵母菌數(shù)；如果規(guī)格為25格×16格的計數(shù)板，除了取其4個對角方位外，還需再數(shù)中央的一個中格(即80個小方格)的酵母菌數(shù)。5  當(dāng)遇到位于大格線上的酵母菌，一般只計數(shù)大方格的上方和右方線上的酵母細(xì)胞(或只計數(shù)下方和左方線上的酵母細(xì)胞)。6  對每個樣品計數(shù)三次，取其平均值，按下列公式計算每1ml菌液中所含的酵母菌個數(shù)。計算公式：(1) 16格×25格的血球計數(shù)板計算公式：酵母細(xì)胞數(shù)/ml=100小格內(nèi)酵母細(xì)胞個數(shù)/100×400×104×稀釋倍數(shù)(2

4、) 25格x16格的血球計數(shù)板計算公式：酵母細(xì)胞數(shù)/ml=80小格內(nèi)酵母細(xì)胞個數(shù)/80×400×104×稀釋倍數(shù)7血球計數(shù)板的清潔：血球汁數(shù)板使用后，用自來水沖洗，切勿用硬物洗刷。洗后自行晾干或用吹風(fēng)機吹干，或用95%的乙醇、無水乙醇、丙酮等有機溶劑脫水使其干燥。通過鏡檢觀察每小格內(nèi)是否殘留菌體或其他沉淀物。若不干凈，則必須重復(fù)清洗直到干凈為止例題:(2012年江蘇27).藍(lán)藻、綠藻和硅藻是湖泊中常見藻類。某課題組研究了不同pH對3種藻類的生長及光合作用的影響，實驗結(jié)果見圖1、圖2，請回答下列問題：（1）根據(jù)圖1和圖2分析，3種藻類中pH適應(yīng)范圍最廣的是 

5、;     ，在pH為8.0時，3種藻類中利用CO2能力最強的是       。（2）在培養(yǎng)液中需加入緩沖劑以穩(wěn)定pH，其原因是          。（3）在實驗中需每天定時對藻細(xì)胞進(jìn)行取樣計數(shù)，請回答下列問題：取出的樣液中需立即加入固定液，其目的是           

6、;   。在計數(shù)前通常需要將樣液稀釋，這是因為              。將樣液稀釋100倍，采用血球計數(shù)板(規(guī)格為1mm×1mm×0.1mm)計數(shù)，觀察到的計數(shù)室中細(xì)胞分布圖見圖3，則培養(yǎng)液中藻細(xì)胞的密度是              個/mL?！敬鸢浮浚?）綠藻&#

7、160;  藍(lán)藻（2）藻類生長代謝會改變培養(yǎng)液pH（3）維持藻細(xì)胞數(shù)目不變 藻細(xì)胞密度過大 1×108【解析】（1）由圖1、圖2可知，pH改變后綠藻的生長速率和光合速率變化不大，其次是藍(lán)藻。由圖2在pH為8.0時，藍(lán)藻的光合速率最大，利用CO2能力最強。（2）藻類植物在光合作用時大量吸收CO2，代謝過程產(chǎn)生一些物質(zhì)會改變培養(yǎng)液的pH。（3）取樣后向樣液中加入固定液來殺死細(xì)胞，維持藻類細(xì)胞數(shù)目不變；由于樣液藻類細(xì)胞的密度比較高，稀釋后方便計數(shù)；血球計數(shù)板規(guī)格為1mm×1mm×0.1mm，采用五點取樣法，取四角和最中間的5個中方格計數(shù)，采取“數(shù)上線不數(shù)下線，數(shù)左線不數(shù)右線”的原則處理，平均每個中方格內(nèi)有4個酵母菌。計數(shù)區(qū)有25個中方格，共計有酵母菌4×25=100個。(上圖中的五個紅色方格