細菌培養(yǎng)常用培養(yǎng)基和抗生素的配制方法

1、細菌培養(yǎng)常用培養(yǎng)基和抗生素的配制方法、常用培養(yǎng)基1、LB培養(yǎng)基將下列組分溶解在0.9L水中：蛋白月東10g酵母提取物5g氯化鈉10g如果需要用INNaOH（1ml）調(diào)整pH至7.0,再補足水至1L。注：瓊脂平板需添加瓊脂粉12g/L,上層瓊脂平板添加瓊脂粉7g/L。2、SOB培養(yǎng)基將下列組分溶解在0.9L水中：蛋白月東20g酵母提取物5g氯化鈉0.5g1mol/L氯化鉀2.5ml用水補足體積到1L。分成100ml的小份，高壓滅菌。培養(yǎng)基冷卻到室溫后，再在每100ml的小份中加1ml滅過菌的1mol/L氯化鎂。3、SO%養(yǎng)基成分、方法同SOB培養(yǎng)基的配制，只是在培養(yǎng)基冷卻到室溫后，除了在每100

2、ml的小份中加1ml滅過菌的1mol/L氯化鎂外，再加2ml滅菌的1mol/L葡萄糖（18g葡萄糖溶于足夠水中，再用水補足到100ml,用0.22um的濾膜過濾除菌）。4、TB培養(yǎng)基將下列組分溶解在0.9L水中：蛋白月東12g酵母提取物24g甘油4ml各組分溶解后高壓滅菌。冷卻到60C,再加100ml滅菌的170mmol/LKH2PO4/0.72mol/LK2HPO4的溶液（2.31g的KH2PO4和12.54gK2HPO4溶在足量的水中，使終體積為100ml。高壓滅菌或用0.22um的濾膜過濾除菌）。5、2XY培養(yǎng)基將下列組分溶解在0.9L水中：蛋白月東16g酵母提取物10g氯化鈉4ml如果

3、需要用INNaOH(1ml)調(diào)整pH至7.0,再補足水至1L。注：瓊脂平板需添加瓊脂粉12g/L,上層瓊脂平板添加瓊脂粉7g/L。6、YPD培養(yǎng)基將下列組分溶解在0.9L水中：蛋白月東20g酵母提取物10g葡萄糖20g用水補足體積為1L后，高壓滅菌。建議在高壓滅菌之前，對色氨酸營養(yǎng)缺陷型每升培養(yǎng)基添加1.6g色氨酸，因為YPD培養(yǎng)基是色氨酸限制型培養(yǎng)基。為了配制平板，需要在高壓滅菌前加入20g瓊脂粉。二、常用抗生素氨芳青霉素(ampicillin)(100mg/ml)10mlo分裝成小份于-20C貯存。常以溶解1g氨芳青霉素鈉鹽于足量的水中，最后定容至25ug/ml50ug/ml的終濃度添加于

4、生長培養(yǎng)基?？⒎记嗝顾?carbenicillin)(50mg/ml)溶解0.5g竣芳青霉素二鈉鹽于足量白水中，最后定容至10mlo分裝成小份于-20C貯存。常以25ug/ml50ug/ml的終濃度添加于生長培養(yǎng)基。甲氧西林(methicillin)(100mg/ml)溶解1g甲氧西林鈉于足量的水中，最后定容至10ml。分裝成小份于-20C貯存。常以37.5ug/ml終濃度與100ug/ml氨芳青霉素-一起添加于生長培養(yǎng)基?？敲顾?kanamycin)(10mg/ml)溶解0.1g卡那霉素于足量的水中，最后定容至10ml。分裝成小份于-20C貯存。常以10ug/ml50ug/ml的終濃度添加

5、于生長培養(yǎng)基。氯霉素(chloramphenicol)(25mg/ml)溶解0.25g氯霉素足量的無水乙醇中，最后定容至10mlo分裝成小份于-20C貯存。常以12.5ug/ml25ug/ml的終濃度添加于生長培養(yǎng)基。鏈霉素(streptomycin)(50mg/ml)溶解0.5g鏈霉素硫酸鹽于足量的無水乙醇中，最后定容至10mlo分裝成小份于-20C貯存。常以10ug/ml50ug/ml的終濃度添加于生長培養(yǎng)基。蔡咤酮酸(nalidixicacid)(5mg/ml)溶解0.05g蔡咤酮酸鈉鹽于足量的水中，最后定容至10mlo分裝成小份于-20C貯存。常以15ug/ml的終濃度添加于生長培養(yǎng)基

6、。四環(huán)素（tetracyyline）（10mg/ml）溶解0.1g四環(huán)素鹽酸鹽于足量的水中，或者將無堿的四環(huán)素溶于無水乙醇，定容至10ml。分裝成小份用鋁箔包裹裝液管以免溶液見光，于-20C貯存。常以10ug/ml50ug/ml的終濃度添加于生長培養(yǎng)基。小技巧：如配制10mg/ml卡那霉素，先在鹽水瓶或血清瓶加入10ml雙蒸水，高壓，冷卻后加入0.1g卡那霉素，混勻，濾膜過濾到試管中，再以1ml/管分裝到EP管中待用?？股貎Υ嬉汗ぷ鳚舛龋╩g/ml）保存條件嚴(yán)緊型質(zhì)粒（ug/ml）松馳型質(zhì)粒（ug/ml）氨葦青霉素50（溶于水）-202060竣葦青霉素50（溶于水）-20C2060氯霉素34（溶于乙醇）-20C25170卡那霉素10（溶于水）-20C1050鏈霉素10（溶于水）-20C1050四環(huán)素5（溶于甲醇）-201050抗生素儲存液工作濃度（mg/ml）保存條件嚴(yán)緊型質(zhì)粒（ug/ml）松馳型質(zhì)粒（ug/ml）昂事霉素50（溶于水）-20C2060竣節(jié)青霉素50（溶于水）-20C2060氯霉素34（溶于乙醇）-20C25170卡那霉素10（溶于水）-20C1050鏈霉素10（溶于水）-20C1050四環(huán)素5（溶于甲醇）-20C1050利福平配法：濃度：50mg/ml配制量：50ml配制方法：1 .稱取2.5g利福平置于50ml塑料離心管中。2