地丁草對實驗性小鼠急性肝損傷保護作用

1、地丁草對實驗性小鼠急性肝損傷保護作用         10-09-02 10:56:00     編輯：studa20                作者：韓在剛 袁紅艷 郭偉康 王芳 張曉玲 李鎬 呂惠子【摘要】  目的探討地丁草水提取物對四氯化碳引起小鼠急性肝損傷的保護作用。方法60只小鼠隨機分為正常組，模型組，地

2、丁草水提取物高劑量組、中劑量組、低劑量組，陽性對照組。地丁草水提取物高、中、低劑量組分別按2.0，1.0，0.5 g/kg灌胃地丁草水提取物；陽性對照組按0.1 g/kg水飛薊賓灌胃；正常組和模型組給予等體積生理鹽水，共5 d。第5天給藥1 h后，模型組，地丁草水提取物高、中、低劑量組和陽性對照組按0.15 ml/10 g腹腔注射0.1% CCl4，正常對照組腹腔注射等體積生理鹽水。測定小鼠血清天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶（AST）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）活性和肝組織超氧化歧化酶（SOD）活性及丙二醛（MDA）含量。結(jié)果地丁草水提取物能顯著降低CCl4所致小鼠血清ALT(P< 0.01)和AST活

3、性 (P< 0.05)，升高肝組織SOD活性(P< 0.01)，降低肝組織MDA的含量(P< 0.01)。結(jié)論地丁草水提取物對 CCl4 所致小鼠急性肝損傷具有保護作用。 【關(guān)鍵詞】  地丁草 急性肝損傷 保護作用    地丁草Corydalis bungeana Turcz.為罌粟科一年生草本植物，為中藥苦地丁的基源植物,其別名多，因地域不同而不同，有紫花地丁(北京)、苦丁小雞菜、苦丁茶、地丁紫堇、扁豆根(遼寧、河北)等。本品具有清熱解毒、活血消腫的作用，對感冒發(fā)熱、肝炎等多種炎癥有較好療效1。本實驗探討了地丁草水提物對四氯化碳引起小

4、鼠肝損傷的影響。1  材料與儀器1.1  藥品與試劑藥材采于吉林省延吉市，由延邊大學(xué)藥學(xué)院劉永鎮(zhèn)教授鑒定為地丁草Corydalis bungeana Turcz，標(biāo)本存放于延邊大學(xué)藥學(xué)院生藥學(xué)標(biāo)本室；水飛薊賓：西安天一生物技術(shù)有限公司。AST， ALT，MDA，SOD試劑盒：南京建成生物工程研究所產(chǎn)品。1.2  儀器紫外分光光度計(上海棱光技術(shù)有限公司，S22PC)，全自動離心機(SIGMA公司產(chǎn)品, 5308型), 全自動生物化學(xué)分析儀(日本Arkray公司, SP 4430) 等。1.3  動物昆明種雄性小鼠，體重1820 g，由延邊大學(xué)醫(yī)學(xué)部動物實

5、驗中心提供。2  方法2.1  地丁草水提物的制備用水煎煮提取3次，合并濾液，干燥得浸膏，備用。2.2  動物模型的制備與藥物處理昆明種小鼠60只，隨機分為6組，每組10只：分別為正常對照組，模型組，地丁草高劑量組（2.0 g/kg）、中劑量組（1.0 g/kg）、低劑量組（0.5 g/kg），陽性對照組（水飛薊賓）。給藥組灌胃1次/d，正常對照組和模型組給予等體積（0.50 ml）生理鹽水，連續(xù)5 d，第5天給藥1 h后，除正常對照組外，其余均腹腔注射0.1% CCl4 0.015 ml·g-1，禁食20 h，眼球取血，離心取血清；同時剖腹取肝，分別稱

6、重取0.1 g，加入1.8 ml生理鹽水進行勻漿。2.3  生化指標(biāo)檢測按試劑盒的檢測方法測定“2.2”項血清中的ALT和AST活性，肝組織中MDA含量和SOD活性。2.4  統(tǒng)計學(xué)分析統(tǒng)計學(xué)處理數(shù)據(jù)以表示，各組樣本均數(shù)間差別的假設(shè)檢驗用方差分析(ANOVA)，P< 0.05認(rèn)為有統(tǒng)計學(xué)意義。     10-09-02 10:56:00     編輯：studa203  結(jié)果3.1  地丁草水提物對CCl4所致肝損傷小鼠血清ALT和AST活性的影響模型組ALT，AST活

7、性較正常組明顯升高，具有顯著性差異（P< 0.001），表明CCl4引起小鼠肝損傷模型成功。地丁草高、中劑量組與模型組比較ALT活性顯著降低（P<0.01），AST檢測結(jié)果也有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)果見表1。表1  地丁草水提取物對CCl4（略）與模型組比較，*P<0.001，*P<0.01，*P<0.05；n=103.2  地丁草水提取物對CCl4引起肝損傷小鼠肝組織SOD活性及MDA含量的影響模型組肝組織SOD活性及MDA含量與正常組相比有顯著性差異，地丁草高、中、低劑量組均能與顯著升高SOD活性（P< 0.01），同時

8、明顯降低給藥組小鼠肝組織MDA的含量（P< 0.01）。結(jié)果見表2。表2  地丁草水提取物對CCl4所致肝損傷小鼠肝組織SOD活性和MDA含量的影響（略）與模型組比較，*P<0.001，*P<0.01，*P<0.05；n=104  討論    四氯化碳引起肝損傷是傳統(tǒng)的肝毒模型，它對肝損傷的毒性作用是通過脂質(zhì)過氧化作用進行2。存在于肝細(xì)胞質(zhì)中的可溶性酶ALT，AST在肝細(xì)胞損傷后釋放入血，血清中兩者水平高低可以反應(yīng)肝細(xì)胞損傷程度，可作為早期肝損傷的指標(biāo)。本實驗結(jié)果地丁草高、中兩個劑量顯著降低CCl4 所致小鼠急性肝損傷血

9、清ALT和AST的升高(P< 0.01，P< 0.05)，表明地丁草提取物具有肝保護作用。    SOD是細(xì)胞內(nèi)主要的防御性抗氧化酶，能夠清除自由基，并可抑制自由基啟動的脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，從而起到保護細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)與功能的完整作用。MDA是脂質(zhì)過氧化的最終產(chǎn)物，可嚴(yán)重破壞細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致細(xì)胞腫脹、壞死，含量高低可反應(yīng)映氧化的損傷程度3，4。本實驗結(jié)果表明，地丁草提取物明顯提高肝組織SOD活性(P< 0.01)，明顯降低急性肝損傷小鼠肝組織MDA含量(P< 0.01)。提示地丁草水提物有良好的肝保護作用。    地丁草

10、具有清熱解毒的功效，臨床上用于治療感染性疾病。藥效學(xué)證實，其水提物對單純皰疹病毒有抑制作用；體外抑菌試驗表明地丁草對甲型鏈球菌、肺炎球菌、痢疾桿菌、大腸桿菌、綠膿桿菌、葡萄球菌等均有抑制作用。本實驗顯示地丁草水提物具有肝保護作用，這為地丁草的另一種藥效提供科學(xué)依據(jù)。本實驗只利用一個模型進行探討，地丁草的肝保護機制以及藥效需進一步深入的研究?！緟⒖嘉墨I】  1江蘇新醫(yī)學(xué)院.中藥大辭典，上冊M.上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1997：1290.2Weisburger JH.Mechanisms of action of antioxidants as exemplified in vegetables tom