家庭組織培養(yǎng)

1、家庭組織培養(yǎng)植物的組織培養(yǎng)沒有最基本的條件和物品是搞不成的，當(dāng)時(shí)合理的利用一些最簡(jiǎn)單的用具也并非無(wú)法辦到。一、最必需的物品1、.家用高壓鍋1個(gè)最好大一點(diǎn)的，裝的東西多一點(diǎn)。用于培養(yǎng)基、無(wú)菌水等的消蠹2、接種箱(無(wú)菌箱)1個(gè)，需要自己自制，用一些木板和一塊玻璃和二尺布料。用于接種和轉(zhuǎn)移。3、藥用天平1架最好是500g稱量的，小一點(diǎn)也可以，主要用來(lái)稱瓊脂、糖等物品。4、不銹鋼鍋或鋁鍋。用于煮制培養(yǎng)基用的。5、攪拌和分裝培養(yǎng)基用的調(diào)羹一個(gè)，用于煮制和分裝培養(yǎng)基。6、培養(yǎng)用的瓶子若十，7、制棉塞用的棉花、紗布和線若十，用于做瓶口的塞子，要注意的是，棉花要使用普通做棉衣的棉花，不要用醫(yī)院用的脫脂棉，這樣

2、容易穿塞污染。8、牛皮紙、橡皮圈若十，用于包瓶頭和扎包頭紙用。9、灑精燈1盞、解剖刀1把，刀片若十、鑲子2把、10ml、100ml量筒各一個(gè)，2ml移液管1只、藥棉若十。二、怎樣解決蒸僻水和基本藥品培養(yǎng)基的用水在一般人的心目總是覺的十分重要的，其實(shí)是多余的擔(dān)心。冷開水、活潔的河水都是給以用的，并不影響培養(yǎng)的效果。市場(chǎng)上出售的純凈水更是一般培養(yǎng)基理想的用水。最常用、最必要、用量最大的只需購(gòu)買以下幾種就行了。1、MS培養(yǎng)基的大量元素共5種。也可以買市售的MS培養(yǎng)基(1) 、硝酸鉉(2) 、硝酸鉀(3) 、氯化鈣(4) 、硝酸鎂、磷酸二氫鉀2、灑精3、精密試紙(PH5.4-7.0)4、漂白粉或漂白精

3、5、瓊脂6、白糖7、福爾馬林8、高鋌酸鉀(可以到醫(yī)院或藥材商店去買)9、微量元素、鐵鹽、維生素類以及激素類藥品應(yīng)用量極少。比如一些激素、維生素類的藥品及有針劑也有片劑，他們都有比較準(zhǔn)確的含量，你可以去按你的需要去配制比例。愛好者在家庭環(huán)境下進(jìn)行組織培養(yǎng)的探討與建議植物組織培養(yǎng)技術(shù)，尤其是快速繁殖，并非只有專業(yè)人員和專業(yè)實(shí)驗(yàn)室才能夠完成的。作為對(duì)多肉植物和組織培養(yǎng)有著濃厚興趣的愛好者，在充分利用家庭條件的基礎(chǔ)上，同樣可以制備出自己的試管苗來(lái)的。在我們進(jìn)行多肉植物的栽培中認(rèn)識(shí)到，一些比較名貴的園藝品種，比如：萬(wàn)象、玉扇、壽、高紋鷹爪等十二卷屆品種，還是繽紛橄欖、何魯牽牛等塊莖類植物，甚至于星球?qū)谩?/p>

4、巖牡丹屆等等，這些植物的常規(guī)繁殖系數(shù)很低，他們都可以采用組織培養(yǎng)來(lái)解決其繁殖問(wèn)題，并且可以得到相當(dāng)數(shù)量的幼苗。對(duì)于奇想天外等種子萌發(fā)困難的植物，同樣可以借助組織培養(yǎng)來(lái)進(jìn)行無(wú)菌播種。在進(jìn)行組織培養(yǎng)過(guò)程中，不但可以對(duì)培養(yǎng)的植物有更深一層的認(rèn)識(shí)，對(duì)常規(guī)的栽培有著相當(dāng)大的意義。許多搞組織培養(yǎng)的專家，最初都不是專業(yè)學(xué)組培的，就是憑著興趣和探索精神取得輝煌成績(jī)的。關(guān)鍵是，愛好者有著濃厚的興趣，非凡的觀察力和細(xì)致入微的操作，這些都可以彌補(bǔ)非專業(yè)的缺陷，并且可以充分利用日常生活中的各種可利用資源，這些就足以讓愛好者在家庭環(huán)境下完成組織培養(yǎng)了。同時(shí)這也不僅僅滿足了自己的興趣，還可以有一定的經(jīng)濟(jì)收益，甚至可以有所

5、創(chuàng)新和發(fā)明。一、如何解決場(chǎng)地和基本設(shè)備：進(jìn)行組織培養(yǎng)，沒有一定的設(shè)備是無(wú)法開展的。正規(guī)實(shí)驗(yàn)室的組織培養(yǎng)設(shè)備是昂貴的，不適合家庭消費(fèi)，但如果能有途徑買到廉價(jià)的實(shí)驗(yàn)室設(shè)備，那就在好不過(guò)了。如果沒有辦法搞到實(shí)驗(yàn)室設(shè)備，就不妨動(dòng)手自己制作一些簡(jiǎn)單的設(shè)備。1. 無(wú)菌操作的主要設(shè)備一一接種箱和壓力鍋：接種箱：植物組織培養(yǎng)的主題操作需要在一個(gè)相對(duì)密閉的無(wú)菌環(huán)境中進(jìn)行。那么說(shuō)我們首先要?jiǎng)?chuàng)造一個(gè)密閉的環(huán)境，可以利用一些木料、塑料板、有機(jī)玻璃、鋁合金骨架等等廉價(jià)的材料，動(dòng)手粘合一個(gè)小巧的接種箱。具體的參數(shù)可以找一本食用菌栽培”的書籍，模仿種蘑菇的接種箱做一個(gè)即可。需要注意的是，組織培養(yǎng)的接種箱的密閉性要求比較高，

6、盡量避免腐朽的木材和易生銹的材料，箱子的頂端按放兩盞燈：20w的紫外線燈和20w的日光燈。箱體的周邊盡量采用玻璃材料，因?yàn)檫@樣便于觀察，有時(shí)候接種箱還可以借用為培養(yǎng)箱，周邊采用玻璃材料更方便于觀察和培養(yǎng)。高壓鍋：主要用來(lái)對(duì)培養(yǎng)基和其他材料的滅菌。在實(shí)驗(yàn)室通常使用醫(yī)用高壓滅菌器，然而在家庭要充分利用廚房使用的高壓鍋，高壓鍋的壓力要低于滅菌器，但是適當(dāng)延長(zhǎng)滅菌時(shí)間，還是可以取得較好的效果的。比如：對(duì)培養(yǎng)基滅菌40分鐘就基本上可以達(dá)到滅菌效果；無(wú)菌水采用間歇滅菌法，先用高壓鍋壓40分鐘，放置24小時(shí)，再壓20分鐘即可達(dá)到效果。2場(chǎng)地：這個(gè)就因人而易了，總體的要求就是進(jìn)行組織培養(yǎng)操作的地方要盡量無(wú)塵，

7、減少空氣流動(dòng),最好有一定的陽(yáng)光。比如書房、寫字問(wèn)都可以用來(lái)進(jìn)行無(wú)菌操作。進(jìn)行培養(yǎng)基的配制可以借用一下廚房，但所使用的器具必須和廚具分開。一般說(shuō)，組織培養(yǎng)中的幾乎全部化學(xué)物質(zhì)對(duì)人體是無(wú)害的，除了少數(shù)激素類物質(zhì)和滅菌劑。對(duì)于有蠹害的物質(zhì)，需要認(rèn)真保管，以免發(fā)生危險(xiǎn)。3. 輔助設(shè)備：主要指冰箱，它是用來(lái)儲(chǔ)存化學(xué)物質(zhì)和培養(yǎng)基的。天平，可以采用感量在100克的托盤天平，甚至用中藥的藥衡都可以代替。培養(yǎng)架，這個(gè)就更簡(jiǎn)單了，采用鋁合金-玻璃的培養(yǎng)箱既可以滿足要求，如果日光不足，可配合日光燈補(bǔ)光等。4. 化學(xué)試劑:化學(xué)試劑是不可缺少的，因?yàn)榻M織培養(yǎng)的核心就是培養(yǎng)基的成分，而并不是簡(jiǎn)單的無(wú)菌操作。一些用量較大的

8、化學(xué)物質(zhì)是有必要買的，比如大量元素（、高鋌酸鉀、甲醛、灑精、白砂糖、瓊脂等等。微量元素和有機(jī)復(fù)合物不需要購(gòu)買，因?yàn)樗鼈兊挠昧亢苄?，我們可以用蔬菜浸汁或者馬鈴薯浸汁來(lái)代替。激素是必不可少的，他們的稱量需要借助分析天平，但這是家庭條件所不允許的，如果有條件可以借助關(guān)系單位代替配成母液，每次取一些使用即可。最好的辦法是到農(nóng)資商店，它們一般出售農(nóng)業(yè)用的激素，有的是用安音瓦裝的，按照一定的比例加入到培養(yǎng)基當(dāng)中即可。近幾年來(lái)，有些化學(xué)品公司開始生產(chǎn)植物組織培養(yǎng)基原粉，只需要稱取一定量加水即可，很方便。比如泛生化學(xué)品公司生產(chǎn)的ms原粉，只需要稱量40克，加1升水，用微波爐加熱5分鐘即可分裝，相當(dāng)簡(jiǎn)便。5.

9、消蠹劑通常采用氯化汞（劇蠹）,如果不容易搞到，可以用漂白粉代替調(diào)節(jié)酸堿度時(shí)，可以采用家庭常用的純堿和白醋培養(yǎng)容器和玻璃儀器:組織培養(yǎng)的容器要求并不高，只要玻璃顏色為透明色即可。我們可以到垃圾站去看看，撿回一些廢舊的果醬瓶就可以了。比較好用的是阿香婆辣醬瓶，我們實(shí)驗(yàn)室也是采用的這種瓶子。瓶子的封口膜采用聚丙烯塑料即可，如果不好找到，可以采用微波爐專用的錫箔紙甚至方便面的袋子，折疊成雙層，用橡皮圈固定即可。其它玻璃儀器，比如燒杯、玻璃棒都可以用家庭的杯子和筷子代替；一些度量?jī)x器，如量筒和移液管最好到玻璃儀器商店購(gòu)買，恐怕花不了20元錢就可以配置一套相當(dāng)棒的組培玻璃儀器。6. 其它:還有一些用品是必

10、需的。比如精密ph試紙（5.47.0）,需要買一本，大約花1.5元即可搞定；灑精燈也不需要買，用墨水瓶配上一個(gè)玻璃環(huán)，再加上一個(gè)棉花芯，最后用農(nóng)夫山泉礦泉水的瓶蓋做燈冒，這樣的灑精燈很小巧，適合接種箱使用。刀子剪子鑲子是必需的，到花市的工具攤位上，花10元錢全部搞定，注意選比較小巧的工具。關(guān)于用水，按理說(shuō)應(yīng)該使用蒸僻水，但是我們家庭飲用的純凈水比蒸僻水還要純，那么說(shuō)借用一些飲用水就可以了。我們?cè)?jīng)采用康師傅純凈水進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)，效果都是很不錯(cuò)的，更何況于植物細(xì)胞培養(yǎng)了。以上是組織培養(yǎng)的基本設(shè)備和試劑，主要突出了他們相關(guān)的替代品，因?yàn)樽鳛榻M織培養(yǎng)中的快速繁殖，它的要求是相當(dāng)?shù)偷?。我們的家庭?/p>

11、養(yǎng)和工廠化是不同的，工廠化生產(chǎn)組培苗要追求高增殖率，所以它的要求就比較精細(xì)和標(biāo)準(zhǔn)。我們的家庭培養(yǎng)則不需要那么準(zhǔn)確，只要達(dá)到培養(yǎng)成功的目的即可。當(dāng)然，如果想提高增殖倍率和試管苗的品質(zhì)，必須盡量貼近實(shí)驗(yàn)室的用具和器材，代用品總是有一定的缺陷的。（一）必須的設(shè)施物品及代用品1、代用品家庭用的電冰箱，可用于貯存培養(yǎng)基母液（4C）及需低溫貯存的藥品。高壓鍋：它可用于培養(yǎng)基、無(wú)菌水、玻璃器也及其他組培用具的消蠹滅菌。如所用水硬度大可用涼白開水，進(jìn)行消蠹滅菌。避免被消蠹滅菌物品表面結(jié)垢。不銹鋼鍋或鋁鍋：它可用于培養(yǎng)基、溶化瓊脂及組培用具消蠹滅菌。刷凈的廢棄食油桶：它可以用來(lái)貯存蒸僻水。小白瓷碟：可以用于接種

12、及盛放消蠹液。日光燈：它可用于組培過(guò)程中光源補(bǔ)充。洗凈廢棄的罐頭瓶：它可以用于組培培養(yǎng)之用，代替錐形瓶、試管。組培場(chǎng)地可在自己的房間內(nèi)進(jìn)行。在配制培養(yǎng)基和接種時(shí)，不要趕在家庭成員較多時(shí)進(jìn)行，如室內(nèi)已安裝了空調(diào)，那么在初代培養(yǎng)和繼代培養(yǎng)、乃至小苗過(guò)渡時(shí)均有好處。2、自制用具（1）接種箱的制作：組培過(guò)程中的超凈工作臺(tái)是很貴重的設(shè)備。如果我們用自制的接種箱來(lái)代替，就可以大大節(jié)省開支，有利于普及。自制的接種箱的用料，可以是膠合板、纖維板、玻璃（3毫米厚）、木條甚至可以用使紙板的包裝箱，也可以用有機(jī)玻璃。其接種箱的大小，可以根據(jù)各自的家庭條件制作。制作太小不便于操作，但相對(duì)來(lái)說(shuō)消蠹容易，且占地較少；制作

13、較大的便于操作，但消蠹工作顯得不易，且占地面積較多。一般來(lái)說(shuō)作成70厘米長(zhǎng)、45厘米寬。50厘米高較為合適。（2）培養(yǎng)箱的制作：培養(yǎng)箱可代替培養(yǎng)室，也可以用于過(guò)渡苗使用。它可以用玻璃制作，或利用長(zhǎng)方形魚缶工。因此，可用玻璃粘結(jié)制作。其大小可按自己家庭居室面積和組培的量來(lái)決定。3、需購(gòu)置用具普通天平（500克）：用于稱量配制培養(yǎng)基藥品，或用稱量金銀、中藥的我子稱，用于稱量配制培養(yǎng)基藥品、微量元素及生物調(diào)節(jié)劑；或購(gòu)買微量元素及生物調(diào)節(jié)劑時(shí)，買已分裝的。灑精燈1盞：用于接種時(shí)，灼燒消蠹滅菌。漏斗：用于分裝培養(yǎng)基用。長(zhǎng)鑲子2把：用于接種。解剖刀2把、刀片若十：用于接種。10、50、100毫升量筒各1個(gè)

14、：用于配制培養(yǎng)基用。長(zhǎng)把牛角勺2把：用于配制培養(yǎng)基取藥品。1、2、5毫升移液管各1個(gè)：用于配制培養(yǎng)基用。耐高溫塑料膜或牛皮紙：用于包扎培養(yǎng)瓶口及表糊自制接種箱內(nèi)部棱角處。橡膠圈：用于綁扎培養(yǎng)瓶口。脫脂棉：用于操作人員及組培用具灑精棉球消蠹。pH（57）試紙1本：用時(shí)可剪成小條檢測(cè)培養(yǎng)基pH值。灑精1瓶：用于灑精燈及消蠹。漂白粉1瓶：用于消蠹。福爾馬林1瓶：用于接種箱消蠹（在每次操作前210小時(shí)，將1020毫升福爾馬林倒入小白瓷碟內(nèi)，在操作前取出）。MS培養(yǎng)基所需藥品；用于配制培養(yǎng)基。鹽酸及氫氧化鈉：用于調(diào)pH值。如若購(gòu)置1盞紫外燈，進(jìn)行室內(nèi)及接種箱消蠹更為理想。（二）操作時(shí)注意事項(xiàng)家庭操作與單

15、位不同，因而要注意以下事項(xiàng)：要注意安全，妥善保管藥品。特別對(duì)老人和小孩；操作時(shí)要消蠹仔細(xì)嚴(yán)格，接種時(shí)操作人員戴好口罩、工作帽，避開電風(fēng)扇及大風(fēng)沙天氣，家庭成員多時(shí)避免操作；消蠹前后避免家庭所養(yǎng)寵物進(jìn)人工作問(wèn)；藥品稱量要準(zhǔn)確無(wú)誤；如果家庭不具備溫度調(diào)控（如調(diào)溫空調(diào)），應(yīng)避免在盛夏、寒冬進(jìn)行；紅掌組培要一步步來(lái)作，可先作容易組培的花卉，待取得經(jīng)驗(yàn)后再做難作的花卉。1.培養(yǎng)容器和玻璃儀器的準(zhǔn)備：進(jìn)行培養(yǎng)基的配制首先要準(zhǔn)備好培養(yǎng)瓶和配制使用的玻璃儀器。培養(yǎng)瓶一般使用各種果醬瓶，要先用洗潔精浸泡瓶子48小時(shí)，再用流水沖洗數(shù)次。其他的玻璃儀器同樣需要這樣活潔，直到玻璃壁上不掛水珠而是成為水膜為止?；钕赐戤?/p>

16、的玻璃容器要倒扣，空去瓶?jī)?nèi)的水。活洗十凈的容器要注意防塵，盡量放置在玻璃柜中。更簡(jiǎn)單的是用十凈的毛巾將容器蓋住。移液管要用吸球來(lái)活洗，反復(fù)用蒸僻水吹吸直到潔凈為止，將移液管放置在一個(gè)長(zhǎng)筒中，便于使用。一般移液管只能使用一次，即要活洗，所以有多必要準(zhǔn)備幾只移液管，建議：10ml/2支,5ml/2支,1ml/5支。2. 培養(yǎng)基的配制：經(jīng)典的組織培養(yǎng)用培養(yǎng)基是ms配方，其基本上劃分為：大量元素、微量元素、鐵鹽、有機(jī)復(fù)合物、植物激素、糖和支持物。這些成分的用量都在毫克級(jí)，用普通天平是難以稱量的，為了解決這個(gè)問(wèn)題，我們可以按比例放大各成分的用量配制成母液，使用的時(shí)候按一定比例加入即可。下面將一種ms培養(yǎng)

17、基的母液配制方案公布如下：大量元素：硝酸鉉66.0克；硝酸鉀76.0克；無(wú)水氯化鈣13.3克；七水硫酸鎂14.8克；磷酸二氫鉀6.8克。以上分別溶解后合并定容到1升，每配制1升標(biāo)準(zhǔn)ms培養(yǎng)基取25毫升。鐵鹽：七水硫酸業(yè)鐵5.56克；乙二胺四乙酸二鈉（edtan®7.46克。以上兩種分別加熱溶解，混合，定容到1升，調(diào)整ph到5.5以下，每配制一升ms取5毫升。微量元素和有機(jī)復(fù)合物的用量過(guò)于微小，為了簡(jiǎn)便我們可以用蔬菜提取液或者馬鈴薯提取液代替。通常我們習(xí)慣用100克菠菜加100ml的水煮沸10分鐘，過(guò)濾留濾液，每配制1升ms培養(yǎng)基加入2050毫升提取液。同樣也可以使用帶皮馬鈴薯100克

18、加200毫升水煮沸15分鐘，過(guò)濾留濾液，每升ms加入50100毫升即可。加入上述各組分后，每升ms培養(yǎng)基還需要加入白砂糖30克，瓊脂7克。這里要說(shuō)明的是，糖和瓊脂都是可變的量，要根據(jù)需要調(diào)整。另外制作果凍用的卡拉膠也可以代替瓊脂，透明度更好。上述各成分加入后，定容到800毫升左右，用微波爐加熱，直到瓊脂全部溶解為止。此時(shí)加入所需的植物激素（通常配制成0.1%溶液，這樣每取1毫升，換算到培養(yǎng)基中就是1ppm）。然后加水定容到1100毫升（1.1升），之所以多出0.1升是為了抵消分裝和消蠹中的損耗。最后用酸堿調(diào)整ph到5.86.0。3. 使用ms原粉配制培養(yǎng)基：目前國(guó)內(nèi)的一些化學(xué)品公司開發(fā)了簡(jiǎn)便的

19、ms培養(yǎng)基原粉，大大簡(jiǎn)便了培養(yǎng)基的配制，根據(jù)不同公司的說(shuō)明選擇培養(yǎng)基的種類。下面就以ms原粉為例：ms培養(yǎng)基原粉，包括了大量元素、微量元素、鐵鹽、有機(jī)復(fù)合物、糖和瓊脂，一般按使用方法稱量，微波爐加熱溶解，加入激素，定容到1100毫升（1.1升），調(diào)整ph值到5.86.0。4. 分裝：將配制好的培養(yǎng)基分裝在培養(yǎng)容器中，注意要趁熱分裝，因?yàn)榄傊?0度以下就會(huì)凝固每個(gè)培養(yǎng)瓶裝培養(yǎng)基大約是瓶容積的1/61/5,注意不要將培養(yǎng)基掛在瓶的外壁，這樣容易造成污染。分裝后用聚丙烯薄膜或著方便面的袋子封口，用膠圈固定（膠圈盡量選擇自行車的內(nèi)胎，這種膠圈比較耐熱）。5.滅菌:采用家庭壓力鍋消蠹，建議到醫(yī)療器械用

20、品商店買一些災(zāi)菌效果試紙”，它們可以指示滅菌效果，當(dāng)滅菌達(dá)到效果時(shí)會(huì)變色。把試紙和培養(yǎng)基同時(shí)放入鍋內(nèi)，加熱到有大量蒸汽冒出，再加上壓力伐，維持小火3040分鐘?；鹁戤吅笞匀焕鋮s，將培養(yǎng)基取出，放在陰涼無(wú)塵處備用。6.接種箱的準(zhǔn)備：新制作的接種箱必須要活潔十凈，盡量做到無(wú)死角。每次使用前2小時(shí)，將操作所需要的全部物品放入接種箱，再用一個(gè)小燒杯加入35克高鋌酸鉀放入接種箱內(nèi)，在箱內(nèi)向燒杯中倒入23毫升的甲醛溶液，大約幾秒鐘后會(huì)看到甲醛蒸汽出現(xiàn)，這樣可以對(duì)接種箱內(nèi)的所有物品進(jìn)行初次消蠹；同時(shí)打開紫外線燈照射。紫外線燈是高電壓穿激汞蒸汽產(chǎn)生的，紫外線進(jìn)行第二道滅菌，在紫外線照射大約15分鐘后，會(huì)激發(fā)

21、氧氣形成臭氧，臭氧作為第三道滅菌防線，這樣經(jīng)過(guò)三次滅菌，接種箱基本上可以達(dá)到無(wú)菌標(biāo)準(zhǔn)。在操作前15分鐘內(nèi)，向剛才蒸發(fā)甲醛用的燒杯中倒入5毫升濃氨水，因?yàn)榧兹?duì)人體有蠹害作用，氨水可以和甲醛形成一種叫做六業(yè)甲基四胺”的固體物質(zhì)，從而中和了甲醛的刺激性蒸汽。這個(gè)時(shí)候紫外燈不要關(guān)掉，要繼續(xù)照射，直到操作前5分鐘關(guān)閉，維持黑暗5分鐘，然后再打開日光燈進(jìn)行操作。維持5分鐘黑暗的原因是，紫外光對(duì)微生物的殺滅是作用于dna的胸腺嚅噬，形成四聚體，但是微生物具有一種光復(fù)活蛋白，可以在有可見光的環(huán)境下還原胸腺四聚體，而使微生物復(fù)活，這個(gè)作用叫做光復(fù)活作用”，所以在關(guān)掉紫外燈后必須維持黑暗幾分鐘，避免光復(fù)活作用的

22、出現(xiàn)。怎樣在家庭開展組培工作制備家庭組培因受到條件的限制，不可能配置大量的配養(yǎng)基，一般每次配置1升為宜。煮制后用PH試紙測(cè)定后，分裝成35-40瓶，塞好棉塞，包好包頭紙。（棉塞一定要用作棉衣的棉花卷制，不能使用脫脂棉，然后用紗布包緊，用棉線扎好。棉塞的松緊以手提棉塞瓶子不滑落為宜。）然后放入高壓鍋里高壓滅菌，待高壓鍋噴嘴噴出蒸汽時(shí)，扣上壓力閥，從壓力閥噴氣時(shí)起計(jì)時(shí)，連續(xù)維持15-20分鐘后關(guān)火，壓力消失后，打開鍋蓋，取出配養(yǎng)基，放入接種箱內(nèi)待用。初次實(shí)驗(yàn)時(shí)，火菌后的培養(yǎng)基應(yīng)放置二五天后，觀察無(wú)霉菌生長(zhǎng)時(shí)才能使用。如有霉菌長(zhǎng)出，這說(shuō)明滅菌時(shí)間不夠，需要適當(dāng)增加滅菌時(shí)間。接種將滅菌后的配養(yǎng)基、無(wú)菌

23、水、消蠹藥水及使用的器材放入接種箱內(nèi)，因接種箱內(nèi)的體積相對(duì)較小，所以所用的一切物品都要有序地?cái)[放在相應(yīng)的位置上，不能隨意擺放，箱內(nèi)濕度較大，點(diǎn)灑精燈一定要是用打火機(jī)，不要使用火柴。要特別注意準(zhǔn)備好裝污水、污物的容器，盡可能地大一些，因?yàn)椴僮鲿r(shí)是不容許開箱取物的。把所有的物品放置好以后，將一裝有10-20ml福爾馬林的磁杯放入箱內(nèi)（最好不要使用玻璃杯，因反應(yīng)時(shí)溫度較高，容易炸裂。），倒入2-5g高鋌酸鉀（PP粉），使其蒸氣充滿箱內(nèi)，達(dá)到滅菌的效果。這時(shí)要將接種箱的通氣孔和操作孔封閉好，避免甲醛蒸氣很快散盡。待箱內(nèi)蒸氣散盡后，才能開始接種工作，這段時(shí)間大約需要5-10個(gè)小時(shí)。接種時(shí)，揭去密封在接種

24、箱通氣孔和操作孔上的密封物，取出熏蒸用的磁杯，將接種用的材料送入接種箱內(nèi)，開啟紫外線燈，十五分鐘后關(guān)閉紫外線燈，開啟照明燈，即可開始工作。操作時(shí)一定要樹立無(wú)菌觀念，要把一切物品都看成是帶菌的，要時(shí)時(shí)都注意防范。工作是由于箱內(nèi)溫度較高，濕度較大，手容易出汗，所以每接種一瓶后都要用灑精擦拭手指，也可以戴指套。另外，操作時(shí)要注意防火，由于空間較小，一不小心就容易燒傷手指或引起灑精起火。打開瓶塞時(shí)，要將瓶口置于灑精燈上方，用右手的無(wú)名指和小指夾住棉塞尾，輕輕將棉塞拔出，棉塞不能置于箱內(nèi)物品上，應(yīng)用手指夾住，接種后，將瓶口在灑精燈上燒灼一下，棉塞也燒灼一下，然后在灑精燈火焰上方輕輕塞好，扎好包頭紙，用鉛

25、筆標(biāo)明品種、接種日期、編號(hào)等,然后重復(fù)下一瓶。其實(shí)，用接種箱接種與超凈工作臺(tái)相比較，工作時(shí)人要感覺舒適得多。污染率也是很低的，操作熟練后幾乎沒有什么污染發(fā)生。接種后愈傷組織分化、小苗分化、生長(zhǎng)狀態(tài)與在超凈臺(tái)上接種的沒有什么兩樣。培養(yǎng)在家庭的業(yè)余條件下培養(yǎng)培養(yǎng)的條件不可能得到?？兀砸浞值睦米匀粭l件，接種后的培養(yǎng)瓶可以放在有較強(qiáng)散射光的地方，如靠窗的書柜、寫字臺(tái)上，但要避免日光直射，一股室溫在22-28攝氏度時(shí)都能正常生長(zhǎng)，不是特殊的品種不需要特殊的護(hù)理。如室溫太低，可以用紙板、木條、塑料薄膜做一個(gè)簡(jiǎn)單的培養(yǎng)箱，里面裝一兩個(gè)15-25瓦的白織燈，既可以補(bǔ)助光照也可以提高培養(yǎng)的溫度。夏天溫度

26、過(guò)高時(shí)，有條件的可以擺放在空調(diào)室內(nèi)，沒有空調(diào)室的，降溫雖然困難一些，但大多數(shù)試管苗是可以耐受的，不至于死去。小苗長(zhǎng)出后，擺放在書柜或工作臺(tái)上，感到自己培養(yǎng)出來(lái)的生機(jī)勃勃的小生靈，無(wú)疑是一種享受。栽培當(dāng)小苗長(zhǎng)到一定的時(shí)候，就可以配置一些生根配養(yǎng)基將小苗轉(zhuǎn)移培養(yǎng)生根，待長(zhǎng)出一定根系時(shí)，就可以出瓶種植了。小苗出瓶種植的時(shí)候一定要注意以下幾個(gè)方面，一是要適當(dāng)降低溫度；二是要增大濕度；三是要嚴(yán)格控制雜菌危害；四是要保證種植介質(zhì)的疏松透氣；五是要保證適當(dāng)?shù)墓庹?。我通常是用跖石、木屑、稻谷殼混合作基質(zhì)，把小苗種植后用白菌活噴霧澆根，蓋上塑料薄膜，少量的小苗十脆用玻璃杯蓋住，大約15天后就能揭去覆蓋物，便可進(jìn)行正常管理了。家庭開展組培其實(shí)也并不是一件什么很困難的事情，只