藥理學(xué)實驗基本知識

1、主講老師主講老師 胡建平胡建平第一章第一章 藥理學(xué)實驗須知藥理學(xué)實驗須知第二章第二章 藥理學(xué)實驗常用儀器及技術(shù)藥理學(xué)實驗常用儀器及技術(shù)第三章第三章 實驗數(shù)據(jù)的簡單統(tǒng)計學(xué)實驗數(shù)據(jù)的簡單統(tǒng)計學(xué)第一章第一章 藥理學(xué)實驗須知藥理學(xué)實驗須知一藥理學(xué)實驗的重要性一藥理學(xué)實驗的重要性1.藥理學(xué)實驗是藥理學(xué)教學(xué)的一個重要的部分。藥理學(xué)實驗是藥理學(xué)教學(xué)的一個重要的部分。2.用來驗證一些藥理學(xué)理論部分內(nèi)容。用來驗證一些藥理學(xué)理論部分內(nèi)容。二藥理學(xué)實驗課程的目的二藥理學(xué)實驗課程的目的1.選做一些經(jīng)典、實用的實驗，使得學(xué)生熟悉藥理學(xué)實驗選做一些經(jīng)典、實用的實驗，使得學(xué)生熟悉藥理學(xué)實驗的基本操作方法和技能。的基本操作方

2、法和技能。2.了解新藥評價和開發(fā)臨床前的一些藥效學(xué)和毒理學(xué)的一了解新藥評價和開發(fā)臨床前的一些藥效學(xué)和毒理學(xué)的一些基本技能。些基本技能。3.培養(yǎng)學(xué)生獨立思考、操作、分析、解決問題的能力。培養(yǎng)學(xué)生獨立思考、操作、分析、解決問題的能力。第一章第一章 藥理學(xué)實驗須知藥理學(xué)實驗須知三藥理學(xué)實驗課前、課中、課后的要求三藥理學(xué)實驗課前、課中、課后的要求 （一）實驗前（一）實驗前1.仔細(xì)閱讀實驗指導(dǎo)，了解實驗的目的、要求、步驟仔細(xì)閱讀實驗指導(dǎo)，了解實驗的目的、要求、步驟和操作程序。和操作程序。2.結(jié)合實驗內(nèi)容復(fù)習(xí)有關(guān)理論，做到充分理解。結(jié)合實驗內(nèi)容復(fù)習(xí)有關(guān)理論，做到充分理解。3.預(yù)測實驗應(yīng)得到的結(jié)果。預(yù)測實驗

3、應(yīng)得到的結(jié)果。4.寫出預(yù)習(xí)實驗報告（自己隨意寫，對自己做實驗有寫出預(yù)習(xí)實驗報告（自己隨意寫，對自己做實驗有用就好）用就好） （二）實驗時（二）實驗時1.實驗器材安放整齊、清潔有序。實驗器材安放整齊、清潔有序。2.按照實驗步驟，以嚴(yán)肅認(rèn)真的態(tài)度循序操作，不得進(jìn)行按照實驗步驟，以嚴(yán)肅認(rèn)真的態(tài)度循序操作，不得進(jìn)行與實驗無關(guān)的活動，注意保護(hù)實驗動物（以免影響實驗與實驗無關(guān)的活動，注意保護(hù)實驗動物（以免影響實驗結(jié)果），愛護(hù)實驗器材和節(jié)約藥品。結(jié)果），愛護(hù)實驗器材和節(jié)約藥品。3.仔細(xì)觀察實驗過程出現(xiàn)的現(xiàn)象，隨時紀(jì)錄實驗數(shù)據(jù)，聯(lián)仔細(xì)觀察實驗過程出現(xiàn)的現(xiàn)象，隨時紀(jì)錄實驗數(shù)據(jù)，聯(lián)系理論進(jìn)行思考系理論進(jìn)行思考(發(fā)

4、生什么？為何這樣？生理意義發(fā)生什么？為何這樣？生理意義?)。（三）實驗后（三）實驗后1.把實驗用具整理就緒。如有損壞短缺，應(yīng)向教師報告。把實驗用具整理就緒。如有損壞短缺，應(yīng)向教師報告。2.整理實驗數(shù)據(jù)，認(rèn)真書寫實驗報告，按時上交評閱。整理實驗數(shù)據(jù)，認(rèn)真書寫實驗報告，按時上交評閱。四實驗報告的書寫四實驗報告的書寫 藥理學(xué)實驗報告藥理學(xué)實驗報告姓名：班級：姓名：班級： 組別：日期：組別：日期：實驗題目：實驗題目：實驗?zāi)康模簩嶒災(zāi)康模簩嶒瀸ο螅簩嶒瀸ο螅簩嶒灢襟E：實驗步驟：實驗結(jié)果：實驗結(jié)果：分析與討論：分析與討論：結(jié)論：結(jié)論：1.實驗結(jié)果的描述文字上力求從簡，最好用圖表表示。實驗結(jié)果的描述文字上力

5、求從簡，最好用圖表表示。2.填寫實驗結(jié)果時，要堅持真實性和科學(xué)性。填寫實驗結(jié)果時，要堅持真實性和科學(xué)性。3.在分析討論中，可以結(jié)合理論部分進(jìn)行分析，或?qū)嶒灥迷诜治鲇懻撝?，可以結(jié)合理論部分進(jìn)行分析，或?qū)嶒灥玫降囊?guī)律性的東西進(jìn)行分析討論，提出見解，避免抄書。到的規(guī)律性的東西進(jìn)行分析討論，提出見解，避免抄書。4.結(jié)論部分的東西是本次實驗獲得的最為基本的規(guī)律性內(nèi)容。結(jié)論部分的東西是本次實驗獲得的最為基本的規(guī)律性內(nèi)容。文字務(wù)必簡明扼要，不可憑空想象加入一些本實驗沒有證文字務(wù)必簡明扼要，不可憑空想象加入一些本實驗沒有證實的內(nèi)容。實的內(nèi)容。 五實驗室規(guī)則五實驗室規(guī)則1 遵守學(xué)習(xí)紀(jì)律，準(zhǔn)時上下課。實驗期間

6、不得借故外出或早退，特遵守學(xué)習(xí)紀(jì)律，準(zhǔn)時上下課。實驗期間不得借故外出或早退，特 殊情況下，需要請假。殊情況下，需要請假。2 必須認(rèn)真地進(jìn)行實驗操作、觀察實驗結(jié)果。實驗期間要保持安必須認(rèn)真地進(jìn)行實驗操作、觀察實驗結(jié)果。實驗期間要保持安 靜，靜， 不得進(jìn)行任何與實驗無關(guān)的活動。不得進(jìn)行任何與實驗無關(guān)的活動。3 實驗數(shù)據(jù)及實驗紀(jì)錄，必須經(jīng)過教師審核，否則不能結(jié)束實驗。實驗數(shù)據(jù)及實驗紀(jì)錄，必須經(jīng)過教師審核，否則不能結(jié)束實驗。4 各組的儀器、用品，由本組使用，不得與別組調(diào)換，以免混亂。各組的儀器、用品，由本組使用，不得與別組調(diào)換，以免混亂。 如遇到儀器損壞或丟失，應(yīng)報請教師處理。如遇到儀器損壞或丟失，應(yīng)

7、報請教師處理。 5 愛護(hù)公共財物，注意節(jié)約各種實驗用品。實驗動物按組發(fā)給，如愛護(hù)公共財物，注意節(jié)約各種實驗用品。實驗動物按組發(fā)給，如 需要補充使用，須經(jīng)教師同意之后才能補領(lǐng)。需要補充使用，須經(jīng)教師同意之后才能補領(lǐng)。6 保持實驗室清潔整齊，隨時清除污物。實驗完畢后，應(yīng)將實驗器保持實驗室清潔整齊，隨時清除污物。實驗完畢后，應(yīng)將實驗器 材、用具收拾妥當(dāng)；將手術(shù)器械擦洗干凈，清點數(shù)量，放回原處。材、用具收拾妥當(dāng)；將手術(shù)器械擦洗干凈，清點數(shù)量，放回原處。 經(jīng)教師檢查之后才能離開實驗室。經(jīng)教師檢查之后才能離開實驗室。一一 分光光度計分光光度計二二 離心作用離心作用三三 動物的捉持動物的捉持四四 動物的給藥

8、方法動物的給藥方法五五 動物的取血方法動物的取血方法六六 動物的處死方法動物的處死方法一一 分光光度計分光光度計儀器介紹儀器介紹 分光光度計有幾個部件：其中包括光源、提供選擇波長的的單色器、分光光度計有幾個部件：其中包括光源、提供選擇波長的的單色器、可變狹縫、樣品架、光探測器和儀表。不同的光譜區(qū)要使用不同的光可變狹縫、樣品架、光探測器和儀表。不同的光譜區(qū)要使用不同的光源。在可見區(qū)（源。在可見區(qū)（400nm700nm）和紫外區(qū)（）和紫外區(qū)（200nm400nm）分別使用）分別使用鎢燈和氘燈。在這些區(qū)域的光波長是由分光光度計中的單色器選擇的，鎢燈和氘燈。在這些區(qū)域的光波長是由分光光度計中的單色器選

9、擇的，單色器是由棱鏡或衍射光柵構(gòu)成的，在可見區(qū)和紫外區(qū)給出窄帶波長單色器是由棱鏡或衍射光柵構(gòu)成的，在可見區(qū)和紫外區(qū)給出窄帶波長的光，光由可控制光強的可調(diào)狹縫進(jìn)入樣品，然后由光電管探測透過的光，光由可控制光強的可調(diào)狹縫進(jìn)入樣品，然后由光電管探測透過的光，并被電流計所測量。下圖為分光光度計的部件原理圖：的光，并被電流計所測量。下圖為分光光度計的部件原理圖： 鎢燈或鎢燈或氘燈氘燈單色單色器器可 調(diào)可 調(diào)狹縫狹縫樣樣品品池池光光電電管管光度計和光度計和記錄儀記錄儀紫外和可見光譜的應(yīng)用紫外和可見光譜的應(yīng)用 紫外和可見光譜最為主要的應(yīng)用是：測量溶液中物質(zhì)的濃度。其基紫外和可見光譜最為主要的應(yīng)用是：測量溶液

10、中物質(zhì)的濃度。其基本原理是：光吸收值和吸光物質(zhì)的濃度成正比。本原理是：光吸收值和吸光物質(zhì)的濃度成正比。 二二 離心作用離心作用 離心作用是裝有固體顆粒懸浮液的容器迅速旋轉(zhuǎn)的過程，顯著增離心作用是裝有固體顆粒懸浮液的容器迅速旋轉(zhuǎn)的過程，顯著增加的重力場使顆粒沉降，離心力或引力與角速度的平方（加的重力場使顆粒沉降，離心力或引力與角速度的平方（2）乘以距）乘以距轉(zhuǎn)動中心的徑向距離轉(zhuǎn)動中心的徑向距離r（cm）成正比，角速度以每分鐘的轉(zhuǎn)速（）成正比，角速度以每分鐘的轉(zhuǎn)速（rpm）來表示，離心力由下式給出：來表示，離心力由下式給出：F=(1.1210-5) (2) (r) 從上式可以看出：對于徑向距離為從

11、上式可以看出：對于徑向距離為7cm的轉(zhuǎn)子，若角速度為的轉(zhuǎn)子，若角速度為10000 rpm，則離心力為，則離心力為8000g。成功的離心作用取決于兩個因素（。成功的離心作用取決于兩個因素（1）離心）離心時間和（時間和（2）發(fā)揮的）發(fā)揮的g值。如下表：值。如下表： 表表1 在離心場中沉降生物顆粒所需的重力和時間的比較在離心場中沉降生物顆粒所需的重力和時間的比較重力重力時間時間沉降的成分沉降的成分100g5 min真核細(xì)胞真核細(xì)胞4 000g10 min葉綠體、細(xì)胞碎片、細(xì)胞核葉綠體、細(xì)胞碎片、細(xì)胞核15 000g20 min細(xì)菌、線粒體細(xì)菌、線粒體30 000g30 min溶酶體、細(xì)菌細(xì)胞碎片溶酶

12、體、細(xì)菌細(xì)胞碎片100 000g3-10 h核糖體核糖體 所以使用不同的所以使用不同的g力，不同的離心力，不同的離心t的差速離心法可用來分離細(xì)胞組分。的差速離心法可用來分離細(xì)胞組分。三三 動物的提持動物的提持（限小鼠和家兔（限小鼠和家兔）1 小鼠的提持（小鼠的提持（2種方法）種方法）1)雙手提斥法雙手提斥法 右手提起鼠尾，放在鼠籠（或其他粗糙面）上，向后輕拉右手提起鼠尾，放在鼠籠（或其他粗糙面）上，向后輕拉其尾，小鼠即固定于鼠籠上，迅速用左手拇指和食指捏住其尾，小鼠即固定于鼠籠上，迅速用左手拇指和食指捏住小鼠頭頸部皮膚，并以左手小指、無名指壓其尾部于手掌小鼠頭頸部皮膚，并以左手小指、無名指壓其

13、尾部于手掌尺側(cè)。尺側(cè)。2)單手提持法單手提持法 只用左手，先用食指和拇指抓住小鼠尾巴后用手掌尺側(cè)和只用左手，先用食指和拇指抓住小鼠尾巴后用手掌尺側(cè)和小指夾住尾根部，然后用左手拇指和食指捏住頭頸部皮膚小指夾住尾根部，然后用左手拇指和食指捏住頭頸部皮膚2 家兔的提持家兔的提持 一只手抓住兔頸背部皮膚，將兔輕輕提起，另一只手托住一只手抓住兔頸背部皮膚，將兔輕輕提起，另一只手托住臀部，使兔呈蹲坐姿勢。切不可用手握持雙耳提起兔子。臀部，使兔呈蹲坐姿勢。切不可用手握持雙耳提起兔子。 1 灌胃方法灌胃方法2 皮下注射方法皮下注射方法3 肌內(nèi)注射方法肌內(nèi)注射方法4 腹腔注射方法腹腔注射方法5 靜脈注射方法靜脈

14、注射方法四四 動物的給藥方法動物的給藥方法（限小鼠和家兔）（限小鼠和家兔）動物給藥方式一動物給藥方式一 - 灌胃方法灌胃方法v 小鼠的灌胃方法小鼠的灌胃方法 左手捉持小鼠，腹部朝向操作者，右手持灌胃管，經(jīng)口角插入口腔，左手捉持小鼠，腹部朝向操作者，右手持灌胃管，經(jīng)口角插入口腔，使灌胃管與食管成一直線，將灌胃管沿上腭壁緩慢插入食管使灌胃管與食管成一直線，將灌胃管沿上腭壁緩慢插入食管2cm3cm，灌胃管的前端即達(dá)膈肌部位，此時操作者可有抵抗感，如動物安靜，呼灌胃管的前端即達(dá)膈肌部位，此時操作者可有抵抗感，如動物安靜，呼吸無異常，即可將藥液注入。操作宜輕柔，防止損傷食管。如遇阻力應(yīng)吸無異常，即可將藥

15、液注入。操作宜輕柔，防止損傷食管。如遇阻力應(yīng)抽出灌胃管重新插入，若將藥液誤注氣管，動物立即死亡。抽出灌胃管重新插入，若將藥液誤注氣管，動物立即死亡。v 家兔的灌胃方法家兔的灌胃方法 給兔灌胃需兩人合作，一人坐好將兔軀體夾于兩腿之間，左手抓住給兔灌胃需兩人合作，一人坐好將兔軀體夾于兩腿之間，左手抓住雙耳，固定其頭部，左手抓住兩前肢，使兔頭稍向后仰；另一人將開口雙耳，固定其頭部，左手抓住兩前肢，使兔頭稍向后仰；另一人將開口器橫放于兔口中，慢慢旋轉(zhuǎn)開口器，將兔舌壓住，并固定之。將器橫放于兔口中，慢慢旋轉(zhuǎn)開口器，將兔舌壓住，并固定之。將8號導(dǎo)尿號導(dǎo)尿管經(jīng)開口器中央孔，沿上腭壁慢慢插入食管管經(jīng)開口器中央

16、孔，沿上腭壁慢慢插入食管15cm18cm。為避免誤入氣。為避免誤入氣管，可將導(dǎo)尿管的外口端放入清水中，無氣泡逸出方可注入藥液，再用管，可將導(dǎo)尿管的外口端放入清水中，無氣泡逸出方可注入藥液，再用少量清水沖洗管內(nèi)殘存藥液。灌畢，慢慢拔出導(dǎo)尿管，取出開口器。少量清水沖洗管內(nèi)殘存藥液。灌畢，慢慢拔出導(dǎo)尿管，取出開口器。 v 小鼠的皮下注射方法小鼠的皮下注射方法 一般需要兩個人合作，一人左手捏小鼠頭部皮膚，右手拉住小鼠一般需要兩個人合作，一人左手捏小鼠頭部皮膚，右手拉住小鼠尾巴使小鼠固定；另一人左手提起背部皮膚，右手持注射器將針頭刺尾巴使小鼠固定；另一人左手提起背部皮膚，右手持注射器將針頭刺入皮下，稍稍

17、擺動針頭，若容易擺動則表明針尖確實位于皮下，此時入皮下，稍稍擺動針頭，若容易擺動則表明針尖確實位于皮下，此時注入藥液。拔針時，右手捏住針刺部位片刻，以防止藥液逸出。注入藥液。拔針時，右手捏住針刺部位片刻，以防止藥液逸出。 也可一人操作，將小鼠放在粗糙的平面上，左手拉小鼠尾巴，趁也可一人操作，將小鼠放在粗糙的平面上，左手拉小鼠尾巴，趁小鼠向前爬動時，右手持注射器迅速將針頭刺入小鼠背部皮下，推注小鼠向前爬動時，右手持注射器迅速將針頭刺入小鼠背部皮下，推注藥液。藥液。v 家兔的皮下注射方法家兔的皮下注射方法 通常選擇背頸部皮下注射。操作者左手拇指、食指和中指提起背頸通常選擇背頸部皮下注射。操作者左手

18、拇指、食指和中指提起背頸部皮膚，使其折成三角體，右手持注射器自皺折下方刺入皮下，松開部皮膚，使其折成三角體，右手持注射器自皺折下方刺入皮下，松開皮膚注入藥液。皮膚注入藥液。 動物給藥方式二動物給藥方式二 - 皮下注射方法皮下注射方法v 小鼠的肌內(nèi)注射方法小鼠的肌內(nèi)注射方法 需兩人合作，一人左手捏小鼠頭部皮膚，右手拉住小需兩人合作，一人左手捏小鼠頭部皮膚，右手拉住小鼠尾巴使小鼠固定；另一人左手固定注射側(cè)后肢，右手持鼠尾巴使小鼠固定；另一人左手固定注射側(cè)后肢，右手持注射器，將針頭刺入外側(cè)股部肌內(nèi)。小鼠肌肉較少，肌內(nèi)注射器，將針頭刺入外側(cè)股部肌內(nèi)。小鼠肌肉較少，肌內(nèi)注射不常用。注射不常用。v 家兔的

19、肌內(nèi)注射方法家兔的肌內(nèi)注射方法 注射部位為臀部和股部肌肉。注射部位為臀部和股部肌肉。 動物給藥方式三動物給藥方式三 - 肌內(nèi)注射方法肌內(nèi)注射方法v 小鼠的腹腔注射方法小鼠的腹腔注射方法 左手捉持小鼠，將腹部朝上，頭部下傾，右手持注射器在左手捉持小鼠，將腹部朝上，頭部下傾，右手持注射器在下腹左側(cè)或右側(cè)（避開膀胱）向頭端穿刺，針頭與皮膚呈下腹左側(cè)或右側(cè)（避開膀胱）向頭端穿刺，針頭與皮膚呈30,刺入腹腔（有落空感）注入藥液。注意針頭不要刺入太深，太刺入腹腔（有落空感）注入藥液。注意針頭不要刺入太深，太靠上，以免刺破肝臟?？可希悦獯唐聘闻K。v 家兔的腹腔注射方法家兔的腹腔注射方法 方法幾乎與小鼠相同

20、方法幾乎與小鼠相同 。動物給藥方式四動物給藥方式四 - 腹腔注射方法腹腔注射方法v 小鼠的靜脈注射（多用尾靜脈注射）小鼠的靜脈注射（多用尾靜脈注射） 將小鼠固定在一鐵絲籠或特制筒內(nèi)，使小鼠尾露在外面。用將小鼠固定在一鐵絲籠或特制筒內(nèi)，使小鼠尾露在外面。用75%乙醇乙醇溶液涂擦尾巴或在溶液涂擦尾巴或在45左右溫水中侵泡左右溫水中侵泡30s，使尾靜脈充血。注射時，左，使尾靜脈充血。注射時，左手拇指和食指捏持鼠尾，右手持注射器，選擇尾巴兩側(cè)靜脈，使針頭與鼠手拇指和食指捏持鼠尾，右手持注射器，選擇尾巴兩側(cè)靜脈，使針頭與鼠尾成尾成3 5（幾乎平行），進(jìn)行靜脈穿刺。如推注藥液無阻力，局部皮（幾乎平行），進(jìn)

21、行靜脈穿刺。如推注藥液無阻力，局部皮膚發(fā)白則表明針頭未刺入血管，退出針頭重新穿刺，注意靜脈穿刺時應(yīng)從膚發(fā)白則表明針頭未刺入血管，退出針頭重新穿刺，注意靜脈穿刺時應(yīng)從遠(yuǎn)端（近尾尖）開始，不僅容易穿刺，而且還可向近端多次穿刺。注射完遠(yuǎn)端（近尾尖）開始，不僅容易穿刺，而且還可向近端多次穿刺。注射完畢，用棉球按壓穿刺口止血。畢，用棉球按壓穿刺口止血。v 家兔的靜脈注射（多用耳緣靜脈）家兔的靜脈注射（多用耳緣靜脈） 注射部位去毛并用酒精棉球涂擦。用左手拇指和中指捏住兔耳尖部，注射部位去毛并用酒精棉球涂擦。用左手拇指和中指捏住兔耳尖部，以食指墊于耳下，右手持注射器，從靜脈遠(yuǎn)端將針頭刺入血管，將藥液推以食指

22、墊于耳下，右手持注射器，從靜脈遠(yuǎn)端將針頭刺入血管，將藥液推入。如推注時有阻力，局部出現(xiàn)腫脹，表明針頭不在血管內(nèi)，應(yīng)立即拔針入。如推注時有阻力，局部出現(xiàn)腫脹，表明針頭不在血管內(nèi)，應(yīng)立即拔針重新穿刺。注畢要用棉球壓迫針眼幾分鐘止血。重新穿刺。注畢要用棉球壓迫針眼幾分鐘止血。動物給藥方式五動物給藥方式五 - 靜脈注射方法靜脈注射方法v 小鼠剪尾采血小鼠剪尾采血 將小鼠固定在鐵絲籠或特別筒內(nèi)，使鼠尾露在外面。剪掉鼠尾將小鼠固定在鐵絲籠或特別筒內(nèi)，使鼠尾露在外面。剪掉鼠尾1mm2mm，用拇指和食指由尾根向尾尖按捏，血液即從尾尖流出，小，用拇指和食指由尾根向尾尖按捏，血液即從尾尖流出，小鼠每次可采血鼠每次

23、可采血0.1ml。注意：只剪去尾尖，如剪去過多組織，反而流血。注意：只剪去尾尖，如剪去過多組織，反而流血少。下次采血時，只需將尾尖血痂少。下次采血時，只需將尾尖血痂jia剪掉就可以了。剪掉就可以了。v 家兔心臟采血家兔心臟采血 將家兔被部固定，剪去左側(cè)胸部相當(dāng)于心臟部位的被毛，用碘酒和將家兔被部固定，剪去左側(cè)胸部相當(dāng)于心臟部位的被毛，用碘酒和酒精消毒皮膚，選擇心臟跳動最明顯處穿刺。一般由胸骨左緣外酒精消毒皮膚，選擇心臟跳動最明顯處穿刺。一般由胸骨左緣外3mm處處刺入兔的第三肋間隙。穿刺時，最好用左手觸診心臟，以作配合。當(dāng)針刺入兔的第三肋間隙。穿刺時，最好用左手觸診心臟，以作配合。當(dāng)針頭接近心臟

24、時，就會感到心臟的跳動。這是需將針頭再向里穿刺，便可頭接近心臟時，就會感到心臟的跳動。這是需將針頭再向里穿刺，便可進(jìn)入心室。由于心臟的搏動，血液會自然進(jìn)入注射器。如認(rèn)為針頭已經(jīng)進(jìn)入心室。由于心臟的搏動，血液會自然進(jìn)入注射器。如認(rèn)為針頭已經(jīng)進(jìn)入心臟，但抽不出血液，可將針頭稍微退出或進(jìn)入一點。進(jìn)入心臟，但抽不出血液，可將針頭稍微退出或進(jìn)入一點。 一般來講，一般來講，心臟采血經(jīng)心臟采血經(jīng)67天后，可以重復(fù)進(jìn)行。采血量大約天后，可以重復(fù)進(jìn)行。采血量大約20ml30ml。五五 動物的取血方法動物的取血方法（限小鼠和家兔（限小鼠和家兔）v 家兔耳緣靜脈采血家兔耳緣靜脈采血 拔去耳緣被毛，用燈泡照射加熱耳朵

25、或拔去耳緣被毛，用燈泡照射加熱耳朵或75%酒精涂擦局部，使靜酒精涂擦局部，使靜脈擴張，再用石蠟油涂擦耳緣，防止血液凝固。耳受熱之后用小血管脈擴張，再用石蠟油涂擦耳緣，防止血液凝固。耳受熱之后用小血管夾夾緊耳根部，用粗號針頭逆靜脈回流方向刺破靜脈或用刀片切開靜夾夾緊耳根部，用粗號針頭逆靜脈回流方向刺破靜脈或用刀片切開靜脈，血液可自動流出，一般可采血脈，血液可自動流出，一般可采血2ml3ml。取血后棉球壓迫止血。取血后棉球壓迫止血。v 家兔耳中央動脈采血家兔耳中央動脈采血 將兔子置于兔固定箱內(nèi)，用酒精棉球擦揉兔耳片刻，使其充血。將兔子置于兔固定箱內(nèi)，用酒精棉球擦揉兔耳片刻，使其充血。在兔耳中央有一

26、條縱行、較粗、顏色鮮紅的中央動脈。左手固定兔耳，在兔耳中央有一條縱行、較粗、顏色鮮紅的中央動脈。左手固定兔耳，右手持注射器（一般用右手持注射器（一般用6號針筒，不可太細(xì)），在中央動脈的末端，沿號針筒，不可太細(xì)），在中央動脈的末端，沿動脈平行地向心方向刺入動脈，慢慢回抽針筒，動脈血立即進(jìn)入針筒，動脈平行地向心方向刺入動脈，慢慢回抽針筒，動脈血立即進(jìn)入針筒，一次可取血一次可取血15ml。因耳中央動脈容易發(fā)生痙攣收縮（容易導(dǎo)致采血無。因耳中央動脈容易發(fā)生痙攣收縮（容易導(dǎo)致采血無法進(jìn)行），因此必須要先讓兔耳充分充血，并在痙攣前迅速完成抽血，法進(jìn)行），因此必須要先讓兔耳充分充血，并在痙攣前迅速完成抽血，

27、抽血后棉球壓迫止血。抽血后棉球壓迫止血。 五五 動物的取血方法動物的取血方法（限小鼠和家兔（限小鼠和家兔）六六 動物的處死方法動物的處死方法（限小鼠和家兔（限小鼠和家兔）v 小鼠的處死（常采用頸椎脫臼法）小鼠的處死（常采用頸椎脫臼法） 用左手拇指和食指將其頭部緊緊按在硬的物體用左手拇指和食指將其頭部緊緊按在硬的物體上，右手捏住鼠尾，用力向后上方牽拉，使頸椎脫上，右手捏住鼠尾，用力向后上方牽拉，使頸椎脫位，小鼠可瞬間死亡。位，小鼠可瞬間死亡。v 家兔的處死（常采用空氣栓注法）家兔的處死（常采用空氣栓注法） 用用50ml100ml的注射器，往家兔的耳緣靜脈內(nèi)的注射器，往家兔的耳緣靜脈內(nèi)注射注射20

28、ml40ml的空氣量，使之發(fā)生栓塞而死亡。的空氣量，使之發(fā)生栓塞而死亡。 一一 均數(shù)均數(shù)二二 標(biāo)準(zhǔn)差（標(biāo)準(zhǔn)差（SD）三三 標(biāo)準(zhǔn)誤和標(biāo)準(zhǔn)誤和t檢驗檢驗實驗數(shù)據(jù)的統(tǒng)計的意義實驗數(shù)據(jù)的統(tǒng)計的意義 藥理學(xué)實驗所得的數(shù)據(jù)一般都需要經(jīng)過統(tǒng)計學(xué)處理，藥理學(xué)實驗所得的數(shù)據(jù)一般都需要經(jīng)過統(tǒng)計學(xué)處理，以便通過分析樣本，推斷總體，透過偶然，找出規(guī)律。以便通過分析樣本，推斷總體，透過偶然，找出規(guī)律。 統(tǒng)計處理數(shù)據(jù)資料的系統(tǒng)知識比較豐富，這里僅僅統(tǒng)計處理數(shù)據(jù)資料的系統(tǒng)知識比較豐富，這里僅僅對處理藥理學(xué)實驗結(jié)果的需要，對實驗結(jié)果的均數(shù)、標(biāo)對處理藥理學(xué)實驗結(jié)果的需要，對實驗結(jié)果的均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差、標(biāo)準(zhǔn)誤以及計量資料的顯著性測定

29、做一個簡單的準(zhǔn)差、標(biāo)準(zhǔn)誤以及計量資料的顯著性測定做一個簡單的介紹，以供學(xué)生對實驗結(jié)果作出正確的判斷。介紹，以供學(xué)生對實驗結(jié)果作出正確的判斷。 一一 均數(shù)（）均數(shù)（） x 均數(shù)也就是算術(shù)平均值，統(tǒng)計學(xué)上用均數(shù)也就是算術(shù)平均值，統(tǒng)計學(xué)上用 表示。均數(shù)是分析計量數(shù)據(jù)表示。均數(shù)是分析計量數(shù)據(jù)最基本的指標(biāo)。它表示一套變量值的集中趨勢（平均水平），不僅可最基本的指標(biāo)。它表示一套變量值的集中趨勢（平均水平），不僅可以給人一個簡明概括的印象，并可用來作事物間的比較。均數(shù)的計算以給人一個簡明概括的印象，并可用來作事物間的比較。均數(shù)的計算公式為：公式為：其中其中 為總和；為總和；x1、x2、xn等為各次的測定值（

30、變量）；等為各次的測定值（變量）；n為變量的個為變量的個數(shù)，即樣本容量；而數(shù)，即樣本容量；而 為各變量的總和。為各變量的總和。x(1)nxxxxnxxn321x二二 標(biāo)準(zhǔn)差（標(biāo)準(zhǔn)差（SD） 均數(shù)只是集中趨勢的指標(biāo)，不能反映一組數(shù)據(jù)與均數(shù)的離散均數(shù)只是集中趨勢的指標(biāo)，不能反映一組數(shù)據(jù)與均數(shù)的離散程度。特別是數(shù)據(jù)不符常態(tài)分布時，更是如此。而標(biāo)準(zhǔn)差是最程度。特別是數(shù)據(jù)不符常態(tài)分布時，更是如此。而標(biāo)準(zhǔn)差是最為常用的、最能完整地反映全套變量值離散程度的統(tǒng)計指標(biāo)，為常用的、最能完整地反映全套變量值離散程度的統(tǒng)計指標(biāo)，一般用一般用SD表示。而計算表示。而計算SD的公式為：的公式為：)2(11222nnxxn

31、xxSD 式子中式子中x為每一個變量值；為均數(shù)；為每一個變量值；為均數(shù)；n為變量的個數(shù)；為變量的個數(shù)；x例例1 根據(jù)某年級根據(jù)某年級12名女學(xué)生收縮壓的數(shù)據(jù)（見下表），求名女學(xué)生收縮壓的數(shù)據(jù)（見下表），求其均數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)差？其均數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)差？ 表一表一 12名女學(xué)生收縮壓數(shù)據(jù)名女學(xué)生收縮壓數(shù)據(jù) 解：將有關(guān)數(shù)據(jù)帶入公式（解：將有關(guān)數(shù)據(jù)帶入公式（1）求出均數(shù)）求出均數(shù) 代入公式（代入公式（2）求出標(biāo)準(zhǔn)差）求出標(biāo)準(zhǔn)差所以可以得到：所以可以得到： 從上面的例子也可以看出：標(biāo)準(zhǔn)差反映了各變量離開均數(shù)的分從上面的例子也可以看出：標(biāo)準(zhǔn)差反映了各變量離開均數(shù)的分布情況。在均數(shù)與單位相同的情況下，標(biāo)準(zhǔn)差越大，則表示各

32、變量離布情況。在均數(shù)與單位相同的情況下，標(biāo)準(zhǔn)差越大，則表示各變量離開均數(shù)越遠(yuǎn)，諸變量離散程度也越高；反之，標(biāo)準(zhǔn)差越小，則表示離開均數(shù)越遠(yuǎn)，諸變量離散程度也越高；反之，標(biāo)準(zhǔn)差越小，則表示離均數(shù)越近，離散程度越低，偏差小，精密度高。均數(shù)越近，離散程度越低，偏差小，精密度高。)(5 .113121362mmgnxx)(27.131761121213621565241222mmgnnxxSD)(27.135 .113mmgsx三三 標(biāo)準(zhǔn)誤（標(biāo)準(zhǔn)誤（SE）和）和t檢驗檢驗 標(biāo)準(zhǔn)誤和標(biāo)準(zhǔn)差不同，它表示的是多次測定的均數(shù)與總體均數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)誤和標(biāo)準(zhǔn)差不同，它表示的是多次測定的均數(shù)與總體均數(shù)的離散程度，也就是總體中各樣本的均數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)差。計算公式如下：離散程度，也就是總體中各樣本的均數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)差。計算公式如下： 其中：其中：S