抗抑郁藥理試驗方法

1、抗抑郁藥理實驗方法實驗方法和模型一、藥物之間相互作用模型許多早期模型涉及到抗抑郁藥與其它藥理學(xué)類型藥物之間的相互作用，這些模型曾不嚴(yán)格地被認(rèn)為模擬了抑郁，然而從抑郁模型的三方面標(biāo)準(zhǔn)一一表面上的相似性（facevalidity）、預(yù)測的有效性（predictivevalidity）及思路的合理性（constructvalidity）來考慮，這些早期模型實際上只起著篩選具有專一神經(jīng)化學(xué)作用的抗抑郁藥的作用，只能作為抗抑郁藥初篩的一種手段，從嚴(yán)格上說不應(yīng)稱為抑郁動物模型。（一）利J血平拮抗（reserpinereversal）1 .概述利血乎是一種囊泡再攝取抑制劑，它使遞質(zhì)留在囊泡外，易被單胺氧化酶

2、降解，從而使兒荼酚胺（NE、E、DA和5HT）耗竭，引起行為和生理上的變化。對利血平引起的行為和生理變化的拮抗是最早發(fā)展的抑郁動物模型。經(jīng)利血平處理的動物出現(xiàn)上眼臉下垂、體溫下降及強直癥狀，預(yù)先用三環(huán)抗抑郁藥及單胺氧化酶抑制別處理，能拮抗上眼瞼下垂及體溫下降的癥狀。然而此實驗不能檢測許多結(jié)構(gòu)上不同于三環(huán)抗抑郁藥及單胺氧化酶抑制劑的新抗郁藥.卻對于很大范圍的非抗抑郁藥有效，如興奮劑、多巴、。a一腎上腺素能激動劑、B腎上腺素能阻斷劑及抗組胺藥。事實上此實驗包含三方面獨立的生物學(xué)檢測，因為利血平引起的上眼臉下垂、體溫下降及強直分別被a一腎上腺素能或5-HT能激動劑、B腎上腺素能激動劑及DA激動劑所拮

3、抗。2 .實驗方法及觀測指標(biāo)選用1823g雄性小鼠1）上瞼下垂（ptosis）的觀測靜注2mg/kg利血平，同時腹腔注射或口服藥物或生理鹽水（對照），1hr后將動物放于支架上觀察15s,比較給藥組和對照組中限盼至少關(guān)閉一半的動物的個數(shù)。2）運動不能（akinesia）的觀察靜注2.5mg/kg利血平，同時口服藥物或生理鹽水（對照），lh后將動物放于直徑7.5cm的圓形白紙的中央觀察15s或更長時間，比較給藥組和對照組中仍然呆在圈內(nèi)的動物的個數(shù)。3）體溫下降（hypothermia）的觀察腹腔注射5mg/kg利血平，同時口服藥物或生理鹽水(對照),4h后將探頭插入動物肛門內(nèi)1.5至2cm處測量肛

4、溫，比較給藥組及對照組中肛溫的差異。3 .注意事項進(jìn)行動物體溫測量實驗時，環(huán)境溫度應(yīng)保持恒定，最好在20度左右。4 .應(yīng)用常用于具有一定藥理作用的抗抑郁藥的初篩。(二)高齊1J量阿撲嗎啡的拮抗(antagonismofhighdoseofapomorphine)1 .概述Schelkunov1968年首先提出將阿撲嗎啡引起小鼠體溫下降作為篩選抗抑郁藥的一種實驗方法。以后的研究表明，藥物對高劑量阿撲嗎啡(16mg/kg)引起小鼠體溫下降的拮抗是通過中樞去甲腎上腺素能機制，該實驗反映了藥物對去甲腎上腺素重攝取及/或去甲腎上腺素傳遞的作用，而不反映其抗抑郁性質(zhì)、多巴胺拮抗或其對5-HT受體的作用。2

5、 .實驗方法及觀測指標(biāo)環(huán)境溫度保持20-22Co體重2025g的雄性小鼠，測量肛溫后腹腔注射受試藥物或生理鹽水，30min后皮下注射阿撲嗎啡(16mg/kg),30min后再次測量肛溫。比較生理鹽水對照組和受試組肛溫變化的差異。3 .注意事項進(jìn)行動物體溫測量實驗時，環(huán)境溫度保持恒定。4,應(yīng)用用于篩選抑制NA重攝取或能激活a1和B一腎上腺京能受體的藥物。(三)5-HTP誘導(dǎo)的甩頭行為(5HTPinducedhead-twitches)1 .概述該模型最早由Corne等在1963年提出。5HT受體興奮引起的甩頭綜合征可能通過5HT2受體介導(dǎo)。小鼠中由5HTPB導(dǎo)的甩頭行為對于具有不同作用機制的抗抑

6、郁藥均比較敏感，如西猷普蘭、氟伏沙明等5-HT重攝抑制劑，去甲丙咪嗪、麥普替林、諾米芬辛等NA重攝抑制劑及混合作用于5-HT和NA系統(tǒng)的丙咪嗪。2 .方法步驟及指標(biāo)選用2024g雄性小鼠。首先在測試前3h腹腔注射100mg/kg帕吉林。之后腹腔注射受試藥或生理鹽水，30min后再注射5HTP(5mg/kg,ip).10min后開始觀察，記錄6min內(nèi)小鼠甩頭次數(shù)。比較實驗組和生理鹽水對照組甩頭次數(shù)的差異。3 .應(yīng)用常用于研究篩選作用于中樞5-HT或NA系統(tǒng)的抗抑郁藥。(四)小鼠育亨賓增強模型(yohimbinepotentiationmodelinmice)1 .概述Gershon及其同事觀察

7、到，臨床上有效的抗抑郁藥包括單胺氧化酶抑制劑、三環(huán)抗抑郁藥及非典型抗抑郁藥IprindoLe均能增強a2受體拮抗劑育亨賓在狗上的毒性?；谶@些發(fā)現(xiàn)，他們建立了狗育亨賓模型。盡管在有限的受檢藥物范圍內(nèi)該模型的臨床預(yù)測性比較好，但該模型耗時耗費，因而它的使用受到了限制。1963年,Quinton觀察到丙咪嗪及幾種其它類型的抗抑郁藥均能顯著增強育亨賓在小鼠中的毒性。與狗育亨賓增強模型相反，小鼠模型對于抗抑郁藥并不專一，其它藥物如抗精神分裂癥藥物，抗膽堿能藥物也能增強育亨賓在小鼠中的毒性，但由于該模型操作上簡便快速，出而得到廣泛使用。2 .實驗方法及觀測指標(biāo)選用1824g的雄性小鼠，口服受試藥物或生理

8、熱水，皮下注射育亨賓30mg/kg。觀察比較注射育亨賓18h后受試組相對照組中小鼠死亡率。3 .注意事項育亨賓的用量應(yīng)當(dāng)采用使對照組小鼠沒有致死作用時的最大劑量。4 .應(yīng)用觀察藥物對NE能神經(jīng)傳遞的作用。二、應(yīng)激模型(一)“行為絕望”及其衍生(behaviouraldespairandderivatives)1 .概述盡管70年代已出現(xiàn)了一些較好的抑郁動物模型，如獲得性無助模型、分離模型，僅由于花費或可行性問題，這些模型尚未用于常規(guī)的藥物韌篩。藥物初篩迫切需要一些簡單、快速、敏感的動物模型。在此背景下，Porsolt等977年分別發(fā)展了大鼠和小鼠強迫游泳模型。在強迫游泳模型中，大鼠和小鼠被迫在

9、一局限的空間游泳，它們首先掙扎試圖逃跑，隨后處于一種不動的狀態(tài)，這種狀您被彌為“行為絕望”。除了一些5-HT重攝取抑制劑之外，多數(shù)抗抑郁藥在此模型中均能減少動物的不動時間，且其藥效與臨床上藥效顯著相關(guān)。而在亞活性劑量鋰鹽輔助下，5-HT重攝取抑制劑類抗抑郁藥在此模型中也往往有效。繼強迫游泳模型之后，陸續(xù)衍生出了其它一些模型，在這些進(jìn)展中最突出的是小鼠懸尾模型。懸尾小鼠為克服不正常的體位而掙扎活動，但活動一定時間后，出現(xiàn)可斷性水動，顯示“失望”狀態(tài)。有效藥物包括三環(huán)抗抑郁藥、單胺氧化酶抑制劑及非典型抗抑郁藥（包括5-HT重攝抑制劑）。2 .大鼠強迫游泳實驗ratforcedswimmingtes

10、t）1）實驗方法選體重160180g雄性大鼠放人水深15cm的量筒（40cm高,18cm直徑），水溫25Co預(yù)試15min后在32c下烤干；24h后，動物重新放人上述環(huán)境中，測定給藥組和對照組在5min內(nèi)保持漂浮不功的時間。2）注意事項（1）實驗中水的深度是關(guān)鍵，應(yīng)使動物后爪剛可觸及水底，但又不能支撐身體。能增加活動性的藥物可能出“假”陽性結(jié)果，故在進(jìn)行強迫游泳實驗的同時還應(yīng)檢測該藥對活動性的影響。3 .小鼠強迫游泳實驗（mouseforcedswimmingtest）選20-24g雄性小鼠放入水深10cm的量筒（20cm高14cm直徑）,水溫25度，觀察6min,比較給藥組和對照組小鼠在后4

11、min內(nèi)不動的時間。4 .小鼠懸尾實驗（tailsuspensiontest）選體重2024g雄性小鼠，將其尾端2cm的部位貼在一水平木棍上，使動物成倒掛狀態(tài)，其頭部離臺面約5cm,懸掛兩側(cè)用板隔開動物視線。比較給藥組及對照組在6min內(nèi)的不動時間。5 .應(yīng)用常用于抗抑郁藥的初篩。（二）獲得件無助（learnedhelplessness）1 .概述“獲得性無助”現(xiàn)象最初是在1967年被Seligman和Maier用來描述狗的，隨后擴展到其它種屬（大鼠、貓、小鼠和人）。近些年來的大多數(shù)實驗多采用大鼠作為研究對象?！矮@得性無助”即當(dāng)機體受到無法逃避的應(yīng)激刺激如電擊時，將隨后產(chǎn)生操作欠缺，而在同等的

12、可以逃避的應(yīng)激刺激下則不產(chǎn)生操作欠缺。“獲得性無助”動物產(chǎn)生的操作欠缺可在亞長期（3-7d）使用各種抗抑郁藥包括三環(huán)抗抑郁藥、單胺氧化兩抑制劑、非典型抗抑郁藥及電驚厥電擊下所逆轉(zhuǎn),而長期使用興奮劑、鎮(zhèn)靜劑、抗焦慮藥及神經(jīng)松弛劑則無效?！盁o助”動物除了在令其厭惡的條件刺激下表現(xiàn)出操作欠缺外，還可出現(xiàn)其它一些行為變化，如活動性降低、攻擊性減少及食欲和體重下降。腦中NE5-HT、DA能、GABAfg神經(jīng)元活性下降及中樞膽堿能神經(jīng)元活性過高均與無可回避電擊后的行為抑制有關(guān)。很難確定具體哪類神經(jīng)遞質(zhì)系統(tǒng)與哪種行為變化相關(guān)聯(lián)，因為行為變化本身不是單一的。如穿梭箱逃避學(xué)習(xí)包含活動性、注意過程、協(xié)調(diào)過程、恐懼

13、、疼痛等，其中的任何一項變化均能改變逃避行為。因而各種神經(jīng)化學(xué)的變化均可反映在逃避行為上.無可回避的電擊后出現(xiàn)的行為欠缺的中樞機制與多種神經(jīng)遞質(zhì)系統(tǒng)有關(guān)。2 .操作方法及觀測指標(biāo)1）“無助”的誘發(fā)通過有蓋的20X10X10CR3籠子內(nèi)的不銹鋼柵（1.5cm間隔）傳送60次隨機的無法逃避的足部電擊（0.8mA,持續(xù)15s,每1min15s給一次電擊），對照大鼠（200220g雄性大鼠）放于相同籠中1h.但不給予電擊。“無助”的誘發(fā)可在第1天上午進(jìn)行。2）條件回避訓(xùn)練在無可逃避的電擊之后48h（第3d）開始進(jìn)行回避訓(xùn)練，以便于評價逃避和回避行為。實驗時，使用60X21X30CR3的穿梭箱，其底面由

14、不銹綱柵構(gòu)成（1.0cm問隔），穿梭箱被一塊帶有7X7cm2小門的不銹鋼板隔成兩個相同的箱子。將動物單個地放人穿棱箱的一端，使其適應(yīng)測試環(huán)境5min（只在第一期訓(xùn)練時進(jìn)行），然后進(jìn)行30次回避訓(xùn)練（每次之間間隔30s）o每次訓(xùn)練的最初3s出現(xiàn)一個光信號，允許動物在此期間到達(dá)另一端的箱中以回避電擊。若此間無回避反應(yīng)發(fā)生，則光信號再持續(xù)出現(xiàn)3R,同時還出現(xiàn)一個0.8mA勺足部電擊（持續(xù)3s）。若此間無逃避反應(yīng)發(fā)生，則電擊和光信號立即自動停止，同時將此記作一次逃避失敗。在第3、4、5d亡午均進(jìn)行一期回避訓(xùn)練，每只大鼠均記錄其逃避失敗次數(shù)。預(yù)先經(jīng)受了無可逃避電擊的大鼠.在第3、4、5d的測試中逃避失敗

15、次數(shù)均顯著高于預(yù)先未經(jīng)受無可逃避電擊的大鼠，而在連續(xù)使用抗抑郁藥之后，預(yù)先經(jīng)受了無可逃避電擊的大鼠在第3、4、5d的測試小逃避失敗次數(shù)顯著下降，尤其是在第4、5d中。3.應(yīng)用獲得性無助模型對抗抑郁藥高度敏感，不僅可用于這些藥物的次篩，也日益用于研究這些藥物的作用機制及抑郁病的神經(jīng)生物學(xué)(三)未預(yù)知的長期應(yīng)激刺激(chronicunpredictablestress)1 .概述此模型最初是在1981年由Roth和Katz描述的：大鼠長期受到各種應(yīng)激刺激后，其在敞箱測試中的急性白噪聲刺激下將顯示出活動性的減少。隨后又有研究者們觀察到慢性未預(yù)知的應(yīng)激刺激還能導(dǎo)致動物在強迫游泳實驗中活動時間縮短及在穿

16、梭箱實驗中逃避行為欠缺。在慢性應(yīng)激刺激朗間每日給予抗抑郁藥物治療，將明顯改善動物的行為欠缺。慢生應(yīng)激大鼠出現(xiàn)的行為欠缺可能與去甲腎素能系統(tǒng)的改變有關(guān)。2 .實驗方法和指標(biāo)選用280350g的大鼠，每籠4只，食水不限(除非持指)。1)敞箱買驗(1)慢性應(yīng)激刺激大鼠在21d中受到的應(yīng)激刺激包括：三次1h電擊(平均1mA只續(xù)ll0s,平均每min一次電擊)；兩次40h禁食，三次4c冷水中游泳5min,兩次40h禁水，兩次40c環(huán)境中5min,兩次高速水平方向搖晃30min,兩次晝夜循環(huán)顛倒。每2或3d給予一次刺激，以半隨機方式給予。(2)給藥方式每日一次，持續(xù)21do(3)活動性測試在最后一次慢性應(yīng)

17、激刺激的48-72h后，將大鼠置于95dB的白噪聲中達(dá)lh。然后立即將大鼠放入1.22m2x45cm高的敞箱(4X4方格)中測試6min。記錄大鼠在前3min內(nèi)方格間的穿行次數(shù)以及整個6min內(nèi)的排糞次數(shù)。2)穿按箱實驗1慢性應(yīng)激刺激大鼠在14d中受到的應(yīng)激刺激包括：兩次30加n足部電擊(1mA持續(xù)1s,平均每min一次)，一次24h禁食，兩次4c冷水中游泳5min,兩次24h禁水，兩次lh水平方向高速搖晃，兩次24h轉(zhuǎn)移至另一屋中的新籠中，一次1min夾尾，一次24h孤養(yǎng)。每日隨機給予一種刺激。(2)給藥方式每次應(yīng)激刺激前1h腹腔注射受試藥或生理鹽水一次，共持續(xù)14do(3)逃避行為測試第1

18、5d,將動物放入空梭箱的一端，使之先適應(yīng)測試環(huán)境3min。然后進(jìn)行30回避試驗：每次試驗的前4s均出現(xiàn)噪聲信號，若此期間無回避反應(yīng)發(fā)生，大鼠將受到0.8mA足部電擊；若此間無逃避反應(yīng)發(fā)生，則電擊和噪聲信號將終止。記錄動物在整個實驗中逃避失敗的次數(shù)，即電擊出現(xiàn)期間動物未到達(dá)另一端箱子的次數(shù)。3.應(yīng)用可用于抗抑郁藥物的篩選及抑郁癥病理生理機制的研究（四）未預(yù)知的長期溫和應(yīng)激刺激（chronicunpredictablemildstress）1 .概述未預(yù)知的長期溫和應(yīng)激刺激模型是Willner等受Katz等描述的未預(yù)知長期應(yīng)激刺激模型的啟發(fā)而在1987年提出的。Willner將其中的應(yīng)激刺激程度減

19、輕，利用長期的溫和應(yīng)激刺激，使之更現(xiàn)實地模擬了人們?nèi)粘Ｉ钪性庥龅摹袄щy”。在經(jīng)過長期溫和應(yīng)激刺激之后蔗糖水飲用量的減少反映了內(nèi)源性抑郁癥的中心癥狀即快感缺乏（anhedonia）。在新的模型中，抗抑郁藥治療的時間進(jìn)程及在正常非應(yīng)激動物中的無效，準(zhǔn)確地模擬了臨床治療的情形?？挂钟羲幵诼詰?yīng)激刺激模型中的作用可能通過增加突觸后DA受體敏感性來介導(dǎo)。DA受體拮杭劑Pimozide、SCH-23390和sulpiride急性給藥能拮抗三環(huán)抗抑郁藥在此模型中的療效，D2受體拮抗劑raclopride能選擇性地拮抗fluoxetine（氟西?。┖蚼aprotiline（麥普替林）在此模型中的療效。2 .

20、方法步驟選用體重300350g的雄性大白鼠，孤養(yǎng)。1）所有動物首先受訓(xùn)飲用1%的蔗糖水在開始的48h內(nèi)將蔗糖水故人籠中以代替自來水，接著禁食禁水20h,通過稱飲水瓶重量連續(xù)測量5次動物在lh內(nèi)蔗糖水的飲用量。此后每間隔一周均進(jìn)行一次20h禁食禁水及1h飲蔗糖水測試，此過程貫穿于整個實驗.2）根據(jù)最后的基線測試中大白鼠蔗糖水的飲用量，將動物均勻分成兩組。其中一組作為對照組，只在測試前禁食和禁水20h,其它時間食水不限。另一組接受長期應(yīng)激刺激，包括：兩次20h的禁食和水，其中一次在測試之前.另一次在禁食和水后給予2h進(jìn)食時間（將45g食物分散在籠內(nèi)）；16h禁水；兩次通宵照明；兩次（7和17h）4

21、5C傾斜籠子；一次17h的配對飼養(yǎng)；一次17h潮濕籠中飼養(yǎng)（將200m1水加到有鋸末的籠底）；兩次（3、5h）周期性的噪聲（85d;三次（7、9和17h）低強度的閃爍照明（每min閃300次）。兩組動物在互相隔離的環(huán)境飼養(yǎng)。3）在經(jīng)過4周的應(yīng)激刺激之后，根據(jù)測試結(jié)果，每組動物又可均勻分成受試藥組和生理鹽水組。在繼續(xù)進(jìn)行應(yīng)激刺激的同時，進(jìn)行長期給藥（如每日一次，共進(jìn)行5周用藥）。3 .指標(biāo)比較各組動物蔗糖水飲用量的差異。經(jīng)過長期溫和的應(yīng)激刺激之后，動物蔗糖水的飲用量將明顯減少，而給予抗抑郁藥治療的動物蔗糖水的飲用量將恢復(fù)正常。4 .應(yīng)用該模型對于研究抗抑郁藥的臨床作用機制及抑郁病的病理生理機制具

22、有一定價值。三、腦損傷模型嗅球切除模型（olfactorybulbectomymodel）（一）概述自從1971年Cairncross和King首次報道阿米替林能改善嗅球切除大鼠回避學(xué)習(xí)能力以來，陸續(xù)有許多文獻(xiàn)報道切嗅球大鼠的許多行為變化包括自主活動性增加和被動回避反應(yīng)能力欠缺等均能被抗抑郁藥逆轉(zhuǎn)。嗅球切除動物行為欠缺的神經(jīng)生化機制尚不十分清楚，人們認(rèn)為至少部分上嗅球切除后通過改變不同腦區(qū)5-HT能系統(tǒng)功能引起行為欠缺。例如，增加5-HT傳遞的藥物能改善切嗅球引起的被動回避欠缺，而將5HT拮抗劑metergoline全身給藥或注入內(nèi)側(cè)杏仁核，能阻斷抗抑郁藥在嗅球切除大鼠中的藥效；嗅球內(nèi)注射5,

23、7一雙羥色氨酸以破壞其中的5-HT末梢能產(chǎn)生與嗅球切除后相似的被動回避欠缺，而破壞兒茶酚胺能神經(jīng)元則不能。由于作為5-HT投射到邊緣及前腦區(qū)的起源點縫核背側(cè)具有投射到嗅球的纖維，因而切除嗅球后這些聯(lián)系遭到破壞可能導(dǎo)致縫核及與之聯(lián)系的其它腦區(qū)5-HT能傳遞改變。（二）手術(shù)方法1J.選取體重300350g雄性大鼠，經(jīng)過至少34d每日數(shù)次的撫摸之后，用三澳乙醇（250mg/kg,ip）或水合氯醛（375mg/kg,ip）等麻醉大鼠。5 .從大鼠前因前1cm至前兇后1cm正中線處縱切頭皮，暴露顱骨。6 .在距離前因前面8mm正中線兩側(cè)2mmy1分別鉆通顱骨，使出現(xiàn)兩個2mms徑的小孔。7 .用連在水泵

24、上的鈍的皮下注射針，借助負(fù)壓將嗅球吸出。8 .用止血海綿填充小孔，四環(huán)素粉末灑在傷口上，縫合皮膚9 .大鼠經(jīng)過14d左右的恢復(fù)期后可以進(jìn)行實驗。在恢復(fù)過活程中，每日仍需撫摸動物。假切除大鼠處理方式基本同上.只是嗅球不吸除。（三）測試方法1 .被動回避實驗1）跳臺（step-down）被動回避在電擊箱內(nèi)放一個木制平臺，平臺高出電擊箱底大約5cm左右。將大鼠先置于電擊箱（不予電擊）中使之熟悉環(huán)境1min。然后將大鼠放于平臺上，只要其4個爪全部接觸到電擊箱底部就給予一次2s0.6mA左右的電擊，直到它在平臺上連續(xù)呆上3min或遭受l0次電擊為止。記錄此時大鼠遭電擊的總次數(shù)。大鼠嗅球切除后遭受電擊次數(shù)

25、明顯增多，反映了嗅球切除能引起被動回避反應(yīng)欠缺。當(dāng)給予抗抑郁藥后，能減少遭電擊的次數(shù)。2）避暗（stepthrough）被動回避實驗箱由明暗兩室組成，隔板底部有一通道供大鼠出入。暗室網(wǎng)柵與電休克儀相聯(lián)。如大鼠進(jìn)入暗室，則遭電擊。將大鼠放人暗室，并給予一次電擊，人鼠將逃至明室，當(dāng)大鼠的4個爪又重新回到暗室時.將再次受到電擊，此時記數(shù)為l,直至大鼠連續(xù)在另一端呆上2min或遭受電擊達(dá)20次，記錄此時大鼠遭受電擊的總次數(shù)。3）舔水被動回避在連續(xù)4d的實驗中，大鼠每日禁水23.5ho第1、2d將大鼠放人受試籠中進(jìn)行l(wèi)0min的舔水訓(xùn)練，第3、4d進(jìn)行測試。測試時，每當(dāng)大鼠舔水20次自動給予一次電擊。記

26、錄大鼠舔水次數(shù)及遭電擊的次數(shù)。嗅球切除大鼠遭受電擊次數(shù)將明顯多于假切除大鼠，抗抑郁藥能明顯減少嗅球切除大鼠迢電擊次數(shù)。2 .主動回避實驗實驗箱內(nèi)沒有條件刺激裝置，即聲光刺激，底部為不銹鋼柵，與電擊裝置相連，給予非條件刺激（電擊刺激）。實驗箱兩長側(cè)壁的底部裝備有紅外光電管。實驗包括60個試行周期，每個周期分為條件刺激期、非條件刺激期及間歇期。如果大鼠在條件刺激期移動并切斷兩端的光束，則可避免電擊，記錄為“回避反應(yīng)（avoidanceresponse）。如在非條件刺激期切斷光束，則電擊立即中止，記錄為“逃避反應(yīng)”（escaperesponse）0如果切斷光束發(fā)生于間歇期，則記錄為“自發(fā)反應(yīng)”。大鼠

27、嗅球切除后，回避反應(yīng)次數(shù)明顯增多，逃避失敗次數(shù)顯著降低，表明嗅球切除后主動回避反應(yīng)能力增強。當(dāng)給予抗抑郁藥后，主動回避反應(yīng)能力遭破壞。3 .敞箱活動性實驗?zāi)局葡?00x100x50cm3地板用筆劃成25方格（20x20cm2）,將大鼠放于正中格中，其正上方45cm處放一白熾燈照明，觀察大鼠在3min內(nèi)的活動情況，包括方格間穿行次數(shù)（三爪以上跨入鄰格的次數(shù)）、豎起次數(shù)（兩前肢離地1cm以上的次數(shù)）、修飾次數(shù)及排糞次數(shù)。每次實驗后均需將動物的排泄物清除干凈。大鼠嗅球切除后方格間穿行次數(shù)明顯增多，而在慢性給抗抑郁藥后能使此行為恢復(fù)正常。（四）注意事項1 .術(shù)前術(shù)后的每日撫摸對于減少術(shù)后動物的易怒性及

28、測試時的行為差異很重要。2 .巴比妥類麻醉劑麻醉時間長，易揮發(fā)的麻醉刑具刺激效果而易導(dǎo)致并發(fā)癥，因而使用作用較短暫的不揮發(fā)的非巴比妥類麻醉劑較好，有利于術(shù)后恢復(fù)。3 .吸除嗅球時應(yīng)小心不損傷額葉皮層。測試結(jié)束時應(yīng)檢查動物手術(shù)是否正確。4 .術(shù)后應(yīng)將動物置于20c左右環(huán)境中，以避免動物體溫過低。（五）應(yīng)用常用于抗抑郁藥的次篩以及作用機制研究。四、72s低頻率差式強化程序（differentialreinforcementoflowrate72-sschedule）（一）概述在低頻率差式強化DRL）程序中，只有與上一次反應(yīng)間隔一定時間或一定時間以上發(fā)生的另一次反應(yīng)才被強化，否則不但沒有強化，而且間

29、隔又要重新開始。1980年McGuire和Seiden首先觀察比較了三環(huán)抗抑郁藥丙咪嗪對大鼠在DRL9-s和皿DRL72-s程序中操作行為的影響，結(jié)果表明，在DRL9-s中丙咪嗪對強化數(shù)和反應(yīng)數(shù)無明顯影響，而在DRL72-s中丙咪嗪急性給藥能顯著增加強化數(shù)同時減少反應(yīng)救，反應(yīng)問時間問隔（IRT）分布移向較長的IRT。隨后陸續(xù)又有報道表明，在DRL72-s中，其它的三環(huán)抗抑郁藥、單胺氧化酶抑制劑、電休克及一些非典型抗抑郁藥如麥安舍林、曲唾酮、氟西汀、齊美利定也具有與內(nèi)咪嗪相同的效應(yīng)，各類非抗抑郁藥如精神抑制劑、抗組胺藥、抗膽堿能藥、抗焦慮藥、精神運動興奮劑、酒精、麻醉止痛藥測試結(jié)果則不同于抗抑郁藥。因此DRL72-s成為抗抑郁藥篩選及研究的一個模型。由于損毀前腦5-HT通路可以阻斷抗抑郁藥在此模型中的應(yīng)用，非選擇性5-HT受體拮抗劑能部分阻斷三環(huán)抗抑