microRNA作為靶點(diǎn)在藥物設(shè)計(jì)中應(yīng)用

1、microRNA作為靶點(diǎn)在藥物設(shè)計(jì)中的應(yīng)用摘要：微小RNA(microRNA)是一類(lèi)長(zhǎng)約22bp的非編碼單鏈RNA,由前體經(jīng)酶作用而得，它是細(xì)胞的內(nèi)源性物質(zhì)，普遍存在于動(dòng)植物中，高度保守，在生命體的生長(zhǎng)、發(fā)育、疾病發(fā)生進(jìn)展的進(jìn)程中起到了基因調(diào)控作用，它與重大疾病，如腫瘤、心臟疾病、神經(jīng)性疾病等都有著緊密的關(guān)聯(lián)，因此成為新藥開(kāi)發(fā)的一個(gè)重要新靶點(diǎn)，以它為靶點(diǎn)的藥物設(shè)計(jì)和藥物研發(fā)工作也在不斷探索中。本文就其作用機(jī)制、生物功能、與疾病的關(guān)系和以microRNA為靶點(diǎn)的藥物設(shè)計(jì)的研究情形進(jìn)行了綜述。關(guān)鍵詞：microRNA;靶點(diǎn)；藥物設(shè)計(jì)1993年Lee等在對(duì)秀麗隱桿線蟲(chóng)(Cacnorhabdilisc

2、lcgaiis)進(jìn)行遺傳分析時(shí)發(fā)覺(jué)了第一個(gè)microRNAlin-14,它的長(zhǎng)度為22bp,它是一個(gè)非編碼的單鏈RNA,能夠控制細(xì)胞的發(fā)育，通過(guò)反義的RNA-RNA反映在轉(zhuǎn)錄后水平下調(diào)lin-14蛋白的表達(dá)。2000年rcinhart等由發(fā)覺(jué)了第二個(gè)microRNAlet-7,它在線蟲(chóng)的發(fā)育進(jìn)程中能夠下調(diào)lin-28和lin-41的表達(dá)。2001年Lee等通過(guò)ePNA克隆和對(duì)生物資料的分析，在秀麗隱桿線蟲(chóng)中又發(fā)覺(jué)了15種新的microRNA,其中有3種在哺乳動(dòng)物和昆蟲(chóng)中有明顯的同系物。同年Lau等用也報(bào)導(dǎo)了55種之前在線蟲(chóng)中不明白的microRNA,其中一些在果蠅和人類(lèi)的基因組中也有發(fā)覺(jué)。La

3、gos-Quiniana等勺在2001年報(bào)導(dǎo)microRNAs存在于脊椎和無(wú)脊椎動(dòng)物中。microRNAs普遍存在，高度保守及其表達(dá)方式，都說(shuō)明它在動(dòng)物中具有普遍的調(diào)節(jié)功能。因此在隨后的研究中，許多的實(shí)驗(yàn)室接踵發(fā)覺(jué)了更多的microRNAs,這使得其家族迅速擴(kuò)增，到2003年就已經(jīng)有200多個(gè)成員了”幾到2010年,在人體內(nèi)確認(rèn)存在的microRNAs有800多個(gè)。有研究表明micrcRNA可能與疾病發(fā)生有緊密的關(guān)系，在不同類(lèi)型疾病的發(fā)生進(jìn)程中，microRNA的水平及其調(diào)節(jié)作用是不同的。鑒于microRNA的重要性,本文歸納了最近幾年來(lái)在該領(lǐng)域研究中的關(guān)鍵問(wèn)題，總結(jié)了microRNA的作用機(jī)

4、制及其作為小分子藥物作用靶點(diǎn)研究的主要進(jìn)展,其在疾病發(fā)生進(jìn)展進(jìn)程中的重要性及潛在應(yīng)用前景，以此為線索，對(duì)設(shè)計(jì)合成新一類(lèi)基因醫(yī)治藥物的研究前景進(jìn)行了展望。1 microRNA的作用機(jī)制及其生物學(xué)功能microRNA是一個(gè)長(zhǎng)度為1826個(gè)核甘酸的小分子單鏈非編碼RNA,是生物體內(nèi)源基因轉(zhuǎn)錄形成份子內(nèi)或分子間雙鏈結(jié)構(gòu)后，經(jīng)RNAsclI酶、DGCr/Pasha和Dicer酶作用產(chǎn)生。大多數(shù)microRNA由位于基因距離區(qū)的核甘酸序列編碼，轉(zhuǎn)錄方向與相鄰的基因往往相反。另一類(lèi)位于基因內(nèi)含于中的microRNA,隨著基因mRNA轉(zhuǎn)錄而包括在mRNA的前體中，轉(zhuǎn)錄方向與對(duì)應(yīng)的基因一致，此類(lèi)microRNA

5、的表達(dá)具有組織特異性microRNA普遍存在于生物中，它是一個(gè)重耍的基因調(diào)節(jié)亍。microRNA的功能遍及生命體的發(fā)生、生長(zhǎng)、發(fā)育、分化、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、疾病和死亡的各個(gè)階段。多種microRNAs在細(xì)胞內(nèi)的表達(dá),使得細(xì)胞處在一個(gè)受內(nèi)源性microRNA調(diào)節(jié)的環(huán)境中，維持著細(xì)胞內(nèi)mRNA的水平，從而使各類(lèi)蛋白質(zhì)的水平處于一個(gè)正常范圍。因此microRNA與許多疾病有著緊密的關(guān)系?？墒?，由于每一個(gè)microRNA具有調(diào)節(jié)數(shù)百乃至數(shù)千mRNA的能力，致使microRNA作用缺乏基因特異性，這在必然程度上阻礙了其作為基因診斷和醫(yī)治靶點(diǎn)的應(yīng)用。有趣的是，在心臟、腦、肝臟等不同的組織中，都有特異性microR

6、NA占主導(dǎo)地位，提示其在組織分化進(jìn)程中發(fā)揮重要作用久目前已有證據(jù)提示在包括癌癥在內(nèi)的一系列人類(lèi)疾病中microRNA可能是新的醫(yī)治靶點(diǎn)。2 microRNA與疾病的關(guān)系3 .1microRNA與腫瘤microRNA與多種腫瘤的形成、癌癥發(fā)生都有著緊密的關(guān)系。Calin等的發(fā)此刻慢性淋巴細(xì)胞白血病中mirl5和mirl6雙雙下調(diào)。Lu等口報(bào)導(dǎo)從microRNAs的表達(dá)譜能夠區(qū)分出低分化的腫瘤，這一現(xiàn)象也說(shuō)明microRNAs與腫瘤的分化有關(guān)聯(lián)。另外研究也證明microRNA與癌癥(如乳腺癌)的轉(zhuǎn)移也有關(guān)聯(lián)，在乳腺癌的惡化進(jìn)程中起到增進(jìn)或抑制作用。He等.指出microRNA能夠調(diào)節(jié)腫瘤的形成，而

7、且暗示mirl7-92簇是一個(gè)潛在的人類(lèi)致癌基因。另外Satz歹等同提出mir-15b與惡性黑色素瘤的憎殖和凋亡都是相關(guān)的。Nakan。等阿通過(guò)功能挑選取得了micr()RNA491,它在結(jié)腸直腸瘤細(xì)胞中以bcl-X(L)為靶點(diǎn)誘導(dǎo)細(xì)胞的凋亡。這些實(shí)驗(yàn)結(jié)杲都專門(mén)好證明了microRNA與腫瘤有著緊密的關(guān)系，它能夠作為一個(gè)檢測(cè)和醫(yī)治腫瘤的靶點(diǎn)。由于最近提出的原癌microRNA組學(xué)(Oncomirs)。"1這一嶄新概念，將調(diào)節(jié)microRNA的小分子物質(zhì)應(yīng)用于腫瘤細(xì)胞的研究具有專門(mén)大潛力，這一理論假設(shè)具有必然的事實(shí)基礎(chǔ)，因?yàn)閙icroRNA可調(diào)節(jié)很多與真核生物生存和增殖緊密相關(guān)的基因，

8、且microRNA是完全天然的內(nèi)源性反義調(diào)節(jié)因子。另外，Meng等口均第一次報(bào)導(dǎo)了應(yīng)用化療藥物作用于人類(lèi)癌細(xì)胞可影響microRNA的表達(dá)，該研究發(fā)覺(jué)給予空mcitabinc(2,2-二氟脫氧胞嗒咤核昔)可改變microRNA的表達(dá)，體外調(diào)節(jié)某些microRNA(例如上調(diào)miR-21)還可增加膽管癌細(xì)胞對(duì)該化療藥物的敏感性。以上結(jié)論為micrcRNA作為腫瘤醫(yī)治靶點(diǎn)提供了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。最近還有研究表明microRNA具有腫瘤抑制因子和原癌基因的功能。與應(yīng)用可編碼蛋白質(zhì)的基因作為癌癥分型方式相較，應(yīng)用micrcRNA加倍精準(zhǔn)，不同腫瘤細(xì)胞表達(dá)的某一特定microRNA,其不同的表現(xiàn)形式可能成為診斷和

9、醫(yī)治腫瘤的有利工具?；趍icroRNA的基因醫(yī)治可能成為抑制腫瘤惡化的有效途徑。例如Ht7,在肺癌附及結(jié)腸癌網(wǎng)細(xì)胞中其表達(dá)量降低，研究表明其可下調(diào)Ras和c-Myc蛋白表達(dá)，因此可轉(zhuǎn)染從而抑制上述兩種腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)；但在膽管癌細(xì)胞中，Meng等因通過(guò)轉(zhuǎn)染技術(shù)使白細(xì)胞介素-6(16)過(guò)表達(dá)，則7a表達(dá)水平也相應(yīng)升高，已知IL-6可增進(jìn)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)并抵抗化療藥物作用，該研究組發(fā)覺(jué)lc-t7a的靶基因是neurofibromatosis2,而該基因的表達(dá)產(chǎn)物可調(diào)節(jié)信號(hào)傳導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄活化因子-3(signaltransducersandactivatorsoftranscription,Sla-13)的

10、磷酸化進(jìn)程，即IL-6表達(dá)水平持續(xù)增高并維持腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的進(jìn)程中，1一7a抑制抑癌基因neurofibromatosis2的表達(dá),致使Sta-t3磷酸化作用增強(qiáng)并啟動(dòng)腫瘤細(xì)胞生存通路,因此，在這種腫瘤細(xì)胞中應(yīng)抑制1=7a的表達(dá)。而miR-15和miR-16對(duì)BCL-2具有負(fù)性調(diào)節(jié)作用并誘導(dǎo)白血病細(xì)胞凋亡口，它們都可能成為腫瘤醫(yī)治的候選分子。microRNA與心臟疾病2002年，Lagos-Quiniana等冏克隆了成年小鼠不同組織的microRNA,其中miR-1和miR-133在心肌組織表達(dá)量最為豐碩，且具有必然組織特異性，說(shuō)明二者在原始細(xì)胞向心肌細(xì)胞發(fā)育的進(jìn)程中發(fā)揮重要作用。Chen等附驗(yàn)

11、證了miR-1和miR-133在心肌和骨骼肌的表達(dá)，并研究了二者在肌細(xì)胞增殖和分化進(jìn)程中發(fā)揮的功能。miR-1和miR-133在小鼠2號(hào)染色體和18號(hào)染色體均成畿表達(dá)，且同時(shí)轉(zhuǎn)錄。研究人員檢測(cè)了胚胎鼠、新生鼠和成年鼠骨骼肌miRJ和miR-133的表達(dá)，發(fā)覺(jué)伴隨發(fā)育進(jìn)程，二者的表達(dá)量逐漸增多。進(jìn)一步研究發(fā)覺(jué)二者發(fā)揮的功能卻截然不同，miR-1增進(jìn)肌原細(xì)胞分化，而miRJ33可刺激肌原細(xì)胞增殖，說(shuō)明二者在骨骼肌和心肌表達(dá)的時(shí)向性和數(shù)量,對(duì)于骨骼肌和心肌的不同時(shí)期發(fā)育進(jìn)程具有重要作用。最近幾年來(lái)，對(duì)不同病理?xiàng)l件下心肌microRNA的研究逐漸增多。Zha。等因應(yīng)用基因敲除技術(shù)研究miR-1-2在小

12、鼠心臟發(fā)育進(jìn)程中的作用，發(fā)覺(jué)敲除miR-1-2基因的小鼠死于先本性室距離缺損的概率大大增加,可能與調(diào)節(jié)心臟發(fā)育的轉(zhuǎn)錄因子Hand2過(guò)表達(dá)有關(guān)；另一些存活的小鼠則由于誕生后心肌細(xì)胞持續(xù)割裂而致使心肌肥大并伴有心律失常，miR-1-2的靶基因lrx5表達(dá)異樣增高，而Irx5可抑制Kcnd2基因，使K+通道亞單位Kv412表達(dá)減少，心肌細(xì)胞復(fù)極異樣。心肌肥大是一種多基因遺傳病，但其發(fā)病機(jī)制尚不明了。VailRooij等因應(yīng)用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物和離體心肌細(xì)胞兩種心肌肥大模型，發(fā)覺(jué)并驗(yàn)證了7種上調(diào)的microRNA(miR-21、miR-23、miR-24、miR-125b.miR-195smiR-199Rmi

13、R-214)和4種下調(diào)的microRNA(miR-29c、miR-93、miR-150和miR-181b)。對(duì)于心肌肥大引發(fā)的心衰，上調(diào)的microRNA與心肌肥大相似，提示它們可能參與調(diào)控心肌組織的病理性重塑進(jìn)程。進(jìn)一步研究證明，過(guò)表達(dá)miR-195不但能夠使體外培育的心肌細(xì)胞肥大，還可使轉(zhuǎn)基因動(dòng)物產(chǎn)生心肌肥大，表現(xiàn)為左心室壁薄，左心室內(nèi)徑增大和心功能降低，并最終致使心衰。Sayed等.一樣研究了microRNA與容量負(fù)荷所致心肌肥大的關(guān)系。在眾多microRNA中，miR-1表達(dá)量下降。與在骨骼肌中的作用相似，miR-1受SRF調(diào)節(jié)，隨年齡增加，其表達(dá)增多，心臟再也不生長(zhǎng)，但當(dāng)其受多種因素

14、影響而下調(diào)時(shí)，則可致使心臟的肥大，推測(cè)其作用靶點(diǎn)可能是RasGTP酶-活化蛋白(RasGTPasc-activatingprotein,RasGAP)、周期素依賴性蛋白激酶9(cyclin-dcpcndcntkinase9,Cdk9)、腦內(nèi)Ras同系物(Rashomologenrichedinbrain,Rheb)和纖維結(jié)合蛋白(fibronectin)。伴隨心肌肥大進(jìn)程，miR-21上調(diào)，該microRNA具有抗凋亡活性，是腫瘤發(fā)生進(jìn)展進(jìn)程中的活躍分亍。心臟負(fù)荷過(guò)大可致使凋亡，初期，心臟可通過(guò)使心肌細(xì)胞變肥大和激活抗凋亡通路產(chǎn)生補(bǔ)償機(jī)制，miR-21的上調(diào)可產(chǎn)生壯大的抗凋亡作用，因?yàn)槠淇赏瑫r(shí)

15、調(diào)節(jié)多種凋亡基因，預(yù)測(cè)其作用位點(diǎn)為Fas配體(Fasligand)和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-B受體(transforminggrowthfactor-Brcccptor,TGF-Brcccptor)omicroRNA與神經(jīng)系統(tǒng)疾病microRNA參與調(diào)控神經(jīng)系統(tǒng)的生長(zhǎng)發(fā)育和生理功能。它與突觸生長(zhǎng)和可塑性障礙相關(guān)的疾病發(fā)生有關(guān)。Schratt等研究發(fā)覺(jué)mir-134參與調(diào)節(jié)樹(shù)突棘發(fā)育、成熟和可塑性固。哺乳動(dòng)物脆性X智力低下蛋白(FMrP)能夠與microRNA和與之相關(guān)的Piccr酶和AG01蛋白分子結(jié)合，通過(guò)microRNAs來(lái)調(diào)節(jié)神經(jīng)元的傳輸。不僅如此，目前研究較多的神經(jīng)退行性疾病也與microRNA

16、相關(guān)。在患有神經(jīng)退行性疾病的患者體內(nèi)，mir-9、mir-125b和mir-128都被發(fā)覺(jué)有下調(diào)的現(xiàn)象。mir-8的直接底物是阿托品，mir-8的突變體能夠提高阿托品的活性，結(jié)果致使果蠅腦內(nèi)神經(jīng)元的凋亡和行為的缺失附，表明microRNA-8與體內(nèi)的阿托品的調(diào)節(jié)是相關(guān)的。microRNA與其他的神經(jīng)疾病也緊密相關(guān)，如mir-383和mir-132別離和血管源性腦水腫相關(guān)的兩種蛋白AQP4,MMP9的表達(dá)轉(zhuǎn)變一致。3以microRNA為靶點(diǎn)的藥物設(shè)計(jì)microRNA作為藥物靶點(diǎn)因?yàn)閙icroRNA與許多重要的疾病有著緊密的關(guān)聯(lián)性，所以microRNA已經(jīng)成為人們關(guān)注的核心。它作為藥物研發(fā)的重要靶

17、點(diǎn)，可設(shè)計(jì)相應(yīng)的藥物，通過(guò)上調(diào)或下調(diào)micrcRNA或使基因沉默等來(lái)達(dá)到醫(yī)治目的。目前，基于microRNA的分子藥物設(shè)計(jì)尚處于起步階段，研究主要集中于模擬microRNA,增強(qiáng)其對(duì)靶基因的作用效能，或以microRNA為靶點(diǎn)設(shè)計(jì)小分子物質(zhì)拮抗microRNA的作用，如microRNA反義冥聚(脫氧)核昔酸(aiiti-microRNAoligonucleotides,AMOs)和microRNA拮抗分亍(aiilagomirs)等二"。AMOs是指與體內(nèi)RNA序列具有互補(bǔ)序列，并能通過(guò)堿基配對(duì)與互補(bǔ)鏈雜交，從而影響其翻譯進(jìn)程。AMOs既能夠與成熟的microRNA互補(bǔ)，也能夠與其前

18、體互補(bǔ)。最先的關(guān)于AMOs抑制microRNA的報(bào)導(dǎo)是靜脈注射DNA真核昔酸(其長(zhǎng)度和互補(bǔ)的目標(biāo)microRNA一致)到小鼠的胚胎中，可是未經(jīng)修飾的這段DNA真核昔酸在體內(nèi)會(huì)被酶降解，不能發(fā)揮作用。于是人們開(kāi)始對(duì)AMOs進(jìn)行化學(xué)修飾，以便提高其穩(wěn)固性和親和力。最為常見(jiàn)的修飾有以下幾種：1)2'-O-甲基修飾，該基團(tuán)是最先的、最簡(jiǎn)單的也是比較常常利用的修飾基團(tuán)，能夠避免核酸酶的作用，也能夠提高AMOs與microRNA的親和力。Hutvagner等報(bào)導(dǎo)了用31-merOMc-AMOs在Hcla細(xì)胞中成功抑制了let-7(一種microRNA)的功能；2)2-0-甲氧乙基修飾，該基團(tuán)比7-

19、0-甲基具有更高的親和力和特異性。Esau等用MOE-ASOs發(fā)覺(jué)microRNA143參與調(diào)節(jié)ErK5蛋白的表達(dá)；3)鎖核酸(lockednuclcicacid)(LNA)-AMOs,這種修飾是指通過(guò)一個(gè)亞甲基將Z-。-的氧基與甲位置相連形成一個(gè)剛性的環(huán)，嵌入糖基的C3位置。LNA-AMOs具有很高的選擇性和靈敏度陰，也是一個(gè)研究的熱點(diǎn)刈。另一種研究較多的microRNA拮抗物質(zhì)為antagomirs,它已經(jīng)成功地在培育的細(xì)胞中抑制microRNA的作用，但在動(dòng)物模型中還有待研究。Krutzfekh等但以2*)-甲基糖基的磷硫酰作為骨架，設(shè)計(jì)能在3,端與膽固醇共價(jià)結(jié)合、且與成熟的目標(biāo)micr

20、oRNA序列互補(bǔ)、被稱為antagomirs的長(zhǎng)度為2123個(gè)核昔酸的單鏈的RNA分亍，通過(guò)靜脈注射給藥，在肝臟、肺和骨髓等中成功地沉默了microRNA的表達(dá)，藥效維持了1周多。還有研究發(fā)覺(jué)用antagomirs沉默micr（）RNA122的表達(dá)后使小鼠體內(nèi)的血漿膽固醉水平下降、脂肪酸合成減少，表明抑制microRNA的表達(dá)能夠作為疾病醫(yī)治的一個(gè)新方式。隨后的深切研究結(jié)果表明，在設(shè)計(jì)真核昔酸藥物時(shí)，應(yīng)盡可能減少脫靶效應(yīng)，并發(fā)覺(jué)位于5,端或中間位置的核昔酸序列發(fā)生轉(zhuǎn)變并非影響目標(biāo)microRNA的表達(dá)；修飾用的磷硫酰的數(shù)量應(yīng)該適當(dāng)，只有適當(dāng)?shù)牧琢蝓２拍軌蛴行У靥岣咂湫?；而且antagomir

21、s的長(zhǎng)度最好大于19bp。他們還發(fā)覺(jué)通過(guò)靶向注射antagomirs,可有效地減少小鼠腦內(nèi)的microRNA16的水平。這些實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)一步說(shuō)明了antagomirs是研究microRNA功能的一個(gè)有力工具，也是超級(jí)有潛力的醫(yī)治與microRNA相關(guān)疾病的手腕?；趍icroRNA可直接調(diào)控某些致病基因的轉(zhuǎn)錄及翻譯，可按照特定靶基因的31端的非翻譯區(qū)（UTR）設(shè)計(jì)模擬microRNA（microRNAmimics）真核昔酸鏈,使其3,端和5,端別離有大約6個(gè)核昔酸與靶基因3,端的LTR序列互補(bǔ)。模擬microRNA的大小約為22bp,具有基因特異性，可對(duì)目的基因進(jìn)行封鎖；可模擬體內(nèi)microRN

22、A的作用，用于研究microRNA的功能；也能夠作為一個(gè)正確的基因序列，醫(yī)治由于基因缺失或功能受損而致使的一些疾病?；趍icroRNA的藥物研發(fā)2008年核酸藥物的歷史掀開(kāi)了新的一頁(yè)。丹麥制藥公司SantarisPharma宣布將實(shí)施世界首例以microRNA靶點(diǎn)藥物臨床實(shí)驗(yàn)。他們進(jìn)行了核酸藥物SPC3649的1期臨床實(shí)驗(yàn)，其適應(yīng)證為丙型肝炎醫(yī)治兇。2010年，該制藥公司又與冷泉港實(shí)驗(yàn)室合作研究，發(fā)覺(jué)設(shè)計(jì)的microRNA藥物不單單作用于特定的microRNA,而且也可作用于一個(gè)microRNA家族。寡核昔酸長(zhǎng)度在8-mcr為最佳,它的序列與microRNA家族的種子區(qū)域（不同的microR

23、NA在5端所共有的一段區(qū)域）互補(bǔ)就可以夠?qū)ｉT(mén)好地抑制microRNA的作用，使之沉默，在體內(nèi)藥效維持的時(shí)刻也比較長(zhǎng)久。很重要的一點(diǎn)是它沒(méi)有肝毒性，只需要連接一個(gè)磷酸骨架而不需要其他的修飾就可以夠抵達(dá)病灶。在小鼠的乳腺癌模型和肝臟中的實(shí)驗(yàn)都取得了成功，這為microRNA藥物的開(kāi)發(fā)提供了新的思路。小分子抑制劑也有望成為一個(gè)醫(yī)治與microRNA有關(guān)疾病的方式。最近Gumireddy等叫甬過(guò)基于細(xì)胞的高通量挑選發(fā)覺(jué)，小分子化合物偶氮苯2能特異性抑制mir-21（常在幾個(gè)腫瘤和心肌疾病中過(guò)表達(dá)）的表達(dá)。因此能夠通過(guò)對(duì)小分子藥物庫(kù)進(jìn)行高通量挑選，找到更多的microRNA小分子抑制劑，這也為咱們的mi

24、croRNA藥物研究提供了一個(gè)方向。microRNA在藥物研發(fā)中的其它應(yīng)用科學(xué)家們發(fā)覺(jué)，microRNA與功能基因結(jié)合的位點(diǎn)或周?chē)亩鄳B(tài)性，會(huì)影響microRNA功能的表達(dá)。Mishra等3發(fā)此刻人二氫葉酸還原酶基因3'UTR中臨近microRNA結(jié)合位點(diǎn)的SNP829位的C變成了T,這一遺傳變異歸因于mir-24結(jié)合功能的喪失，結(jié)果致使了二氫葉酸還原酶的過(guò)表達(dá)及對(duì)甲氨蝶吟醫(yī)治的抗性。microRNA基因、microRNA靶點(diǎn)或microRNA加工機(jī)械的功能變異可闡明這種所觀察到的藥物有害反映。為避免這些藥物有害反映的產(chǎn)生，業(yè)界呼吁醫(yī)生開(kāi)處方前先進(jìn)行強(qiáng)制性的基因測(cè)定，以提高藥物的有效性

25、和安全性?！耙粋€(gè)藥醫(yī)治所有人”的中心法則的終結(jié)即將到來(lái)，未來(lái)個(gè)體化藥物似乎是一個(gè)必需要面對(duì)的現(xiàn)實(shí)。在藥物載體方面，K（）va等的在小鼠肝癌模型頂用腺相關(guān)病毒（AAV）將mir-26a成功運(yùn)輸?shù)襟w內(nèi)，而AAV非但不會(huì)整合進(jìn)人體的基因組，還能夠?qū)ｉT(mén)好地定位于肝細(xì)胞，為肝癌的醫(yī)治提供了新的希望。4展望鑒于microRNA在疾病醫(yī)治和藥物開(kāi)發(fā)方面的前景趨于光明，有關(guān)的研發(fā)工作正在如火如荼地進(jìn)行著。尋覓micrcRNA的調(diào)控基因和靶基因，揭露其在疾病中的作用機(jī)制是一個(gè)重點(diǎn)和難點(diǎn)，需要人們繼續(xù)深切地研究，從而充分發(fā)揮其疾病醫(yī)治的作用。對(duì)于現(xiàn)存的拮抗劑，要想將microRNA藥物運(yùn)用于臨床，應(yīng)該考慮有效的載

26、體和化學(xué)修飾的問(wèn)題。另外為了打破以前藥物作用靶點(diǎn)單一的問(wèn)題，需要設(shè)計(jì)多靶點(diǎn)藥物，而基于microRNA的藥物可能是達(dá)到那個(gè)目標(biāo)的重要途徑之一，為此，找出它們共有的種子區(qū)域并據(jù)此開(kāi)發(fā)多靶點(diǎn)藥物是此后研究工作的一個(gè)重要方面。目前，在基于microRNA研發(fā)藥物方面所面臨的最大問(wèn)題是尋覓適合的給藥途徑和藥物的靶向化，還需進(jìn)一步的探索實(shí)踐。相信隨著新技術(shù)的出現(xiàn)和應(yīng)用，和對(duì)micrcRNA研究的不斷深切，必然會(huì)出現(xiàn)以其為靶點(diǎn)的新藥和醫(yī)治的新方式，為人類(lèi)的健康帶來(lái)新的希望和沖破。參考文獻(xiàn)：1 LeerC,FeinbaumrL,AmbrosV.TheC.eleganshctcrochronicgenelin

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