人教—必修1—4[1]3酵母細(xì)胞的固定化1

1、一、課題目標(biāo)一、課題目標(biāo) 2嘗試制備固定化酵母細(xì)胞，并利用固定化酵母細(xì)胞進(jìn)行酒精發(fā)酵。1說出固定化酶和固定化細(xì)胞的作用和原理?；A(chǔ)知識(shí) （一）固定化酶的應(yīng)用實(shí)例（一）固定化酶的應(yīng)用實(shí)例1.利用固定化酶技術(shù)生產(chǎn)高果糖漿的實(shí)例（1）高果糖漿的生產(chǎn)需要 酶葡萄糖異構(gòu)葡萄糖異構(gòu)（2）葡萄糖異構(gòu)酶的優(yōu)點(diǎn)穩(wěn)定性好、可以持續(xù)發(fā)揮作用穩(wěn)定性好、可以持續(xù)發(fā)揮作用（3）在生產(chǎn)中直接使用酶有什么缺點(diǎn)？酶溶解于葡萄糖溶液后，無法回收，酶溶解于葡萄糖溶液后，無法回收，造成浪費(fèi)造成浪費(fèi)2.固定化酶的反應(yīng)柱示意圖固定化酶的反應(yīng)柱示意圖3.3.固定化酶在生產(chǎn)實(shí)踐中的優(yōu)點(diǎn)固定化酶在生產(chǎn)實(shí)踐中的優(yōu)點(diǎn) 反應(yīng)柱能連續(xù)使用半年，大大降

2、低反應(yīng)柱能連續(xù)使用半年，大大降低了生產(chǎn)成本，提高了果糖的產(chǎn)量和質(zhì)量。了生產(chǎn)成本，提高了果糖的產(chǎn)量和質(zhì)量。（二）固定化細(xì)胞技術(shù)（二）固定化細(xì)胞技術(shù)1.1.將酶或細(xì)胞固定化的方法將酶或細(xì)胞固定化的方法將酶（或細(xì)胞）包埋在將酶（或細(xì)胞）包埋在細(xì)微網(wǎng)格里細(xì)微網(wǎng)格里將酶（或細(xì)胞）相將酶（或細(xì)胞）相互連接起來互連接起來將酶（或細(xì)胞）吸附在將酶（或細(xì)胞）吸附在載體表面上載體表面上包埋法包埋法化學(xué)結(jié)合法化學(xué)結(jié)合法吸附法吸附法2.2.固定化酶和固定化細(xì)胞的聯(lián)系與區(qū)別固定化酶和固定化細(xì)胞的聯(lián)系與區(qū)別聯(lián)系：應(yīng)用相同，都能催化某些反應(yīng)聯(lián)系：應(yīng)用相同，都能催化某些反應(yīng)區(qū)別區(qū)別1 1）固定化細(xì)胞技術(shù)操作容易，成）固定化細(xì)

3、胞技術(shù)操作容易，成本低，容易回收；本低，容易回收；2 2）固定化細(xì)胞技術(shù)對(duì)酶活性影響）固定化細(xì)胞技術(shù)對(duì)酶活性影響更小；更小；3 3）固定化細(xì)胞固定的一系列酶；）固定化細(xì)胞固定的一系列酶；4 4）由于大分子難以通過細(xì)胞膜，因）由于大分子難以通過細(xì)胞膜，因此固定化細(xì)胞的應(yīng)用有一定的限制；此固定化細(xì)胞的應(yīng)用有一定的限制；3.固定化酶和固定化細(xì)胞常用的載體材料固定化酶和固定化細(xì)胞常用的載體材料 明膠、瓊脂糖、海藻酸鈉、醋酸纖維素明膠、瓊脂糖、海藻酸鈉、醋酸纖維素和聚丙烯酰胺等，和聚丙烯酰胺等，其共同的特點(diǎn)是不溶于水的多孔性載體其共同的特點(diǎn)是不溶于水的多孔性載體（一）制備固定化酵母細(xì)胞（一）制備固定化酵

4、母細(xì)胞實(shí)驗(yàn)操作 1、酵母細(xì)胞的活化 2、配制物質(zhì)的量濃度為0.05mol/L 的CaCl23、配制海藻酸鈉的溶液4、海藻酸鈉溶液與酵母細(xì)胞混合5、固定化酵母細(xì)胞（二）用固定化酵母細(xì)胞發(fā)酵（二）用固定化酵母細(xì)胞發(fā)酵實(shí)驗(yàn)操作 1、將固定化的酵母細(xì)胞（凝膠珠）用蒸餾水沖洗2到3次。 2、將150ml質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的葡萄糖溶液轉(zhuǎn)移到200ml的錐形瓶中，再加入固定好的酵母細(xì)胞，置于25攝氏度下發(fā)酵24h。 在缺水的狀態(tài)下，微生物會(huì)處于休眠狀態(tài)。活化就是讓處于休眠狀態(tài)的微生物重新恢復(fù)正常的生活狀態(tài)。酵母細(xì)胞所需要的活化時(shí)間較短，一般需要0.51 h，教師需要提前做好準(zhǔn)備。此外，酵母細(xì)胞活化時(shí)體積會(huì)變大，因此活化前應(yīng)該選擇體積足夠大的容器，以避免酵母細(xì)胞的活化液溢出容器外。 （一）酵母細(xì)胞的活化（一）酵母細(xì)胞的活化實(shí)驗(yàn)操作過程中要注意的下列問題 （二）加熱使海藻酸鈉溶化是操作中最重要的一環(huán)，涉及到實(shí)驗(yàn)的成敗，教師一定要提醒學(xué)生按照教材的提示進(jìn)行操作。海藻酸鈉的濃度涉及到固定化細(xì)胞的質(zhì)量。如果海藻酸鈉濃度過高，將很難形成凝膠珠；如果濃度過低，形成的凝膠珠所包埋的酵母細(xì)胞的數(shù)目少，影響實(shí)驗(yàn)效果。 （三）剛形成的凝膠珠應(yīng)在CaCl2溶液中浸泡一段時(shí)間，以便形成穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)。檢驗(yàn)?zāi)z珠的質(zhì)量是否合格，可以使用下列方法。一是用鑷子夾起一個(gè)凝膠珠放在實(shí)驗(yàn)桌