病毒學(xué)總論25

1、 第一節(jié)第一節(jié) 病毒的基本特性病毒的基本特性病毒（病毒（virus）：）：最微小的、結(jié)構(gòu)最簡(jiǎn)單的非細(xì)胞型微生物。最微小的、結(jié)構(gòu)最簡(jiǎn)單的非細(xì)胞型微生物。特征特征 1 體積微??；體積微??； 2 非細(xì)胞結(jié)構(gòu)，非細(xì)胞結(jié)構(gòu)， 結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單“一包基因一包基因”而且僅一種核酸；而且僅一種核酸； 3 嚴(yán)格的胞內(nèi)寄生（分子水平寄生；）嚴(yán)格的胞內(nèi)寄生（分子水平寄生；） 4 以復(fù)制方式繁殖；以復(fù)制方式繁殖； 5 抵抗力特殊；抵抗力特殊； 6 在醫(yī)學(xué)微生物中占重要地位在醫(yī)學(xué)微生物中占重要地位 病毒感染占病毒感染占75%轟動(dòng)效應(yīng)傳染性強(qiáng)，傳播快，流行轟動(dòng)效應(yīng)傳染性強(qiáng)，傳播快，流行廣，診治困難，病死率高，后遺癥嚴(yán)重與

2、腫瘤相關(guān)分子生物廣，診治困難，病死率高，后遺癥嚴(yán)重與腫瘤相關(guān)分子生物學(xué)研究的重要工具。學(xué)研究的重要工具。（二）病毒的結(jié)構(gòu)與化學(xué)組成（二）病毒的結(jié)構(gòu)與化學(xué)組成病毒的結(jié)構(gòu)病毒的結(jié)構(gòu) 基本結(jié)構(gòu)基本結(jié)構(gòu)核衣殼（核衣殼（nucleocapsid）（病毒體）（病毒體）病毒病毒核心（核心（core）衣殼（衣殼（capsid）輔助結(jié)構(gòu)輔助結(jié)構(gòu)包膜（包膜（envelope）病毒核心（病毒核心（viral core） 是病毒的中心結(jié)構(gòu)，其內(nèi)充滿是病毒的中心結(jié)構(gòu)，其內(nèi)充滿DNA或或RNA一種核酸，構(gòu)一種核酸，構(gòu)成病毒的基因組。成病毒的基因組。2. 病毒衣殼：包繞在核酸外面的蛋白質(zhì)外殼病毒衣殼：包繞在核酸外面的蛋白質(zhì)

3、外殼 衣殼由衣殼由殼粒（殼粒（capsomere）組成組成形態(tài)亞單位形態(tài)亞單位殼粒由多肽分子組成殼粒由多肽分子組成結(jié)構(gòu)亞單位結(jié)構(gòu)亞單位 根據(jù)殼粒排列方式不同，病毒有三種對(duì)稱型根據(jù)殼粒排列方式不同，病毒有三種對(duì)稱型 螺旋對(duì)稱螺旋對(duì)稱 二十面體立體對(duì)稱二十面體立體對(duì)稱 復(fù)合對(duì)稱復(fù)合對(duì)稱核衣殼核衣殼病毒體病毒體基本功能單位基本功能單位感染單位感染單位3. 輔助結(jié)構(gòu)輔助結(jié)構(gòu) 某些病毒在核衣殼外包被有包膜，是病毒以出芽方某些病毒在核衣殼外包被有包膜，是病毒以出芽方式從細(xì)胞內(nèi)釋放時(shí)穿過(guò)核膜、胞質(zhì)膜、空泡膜等，在核式從細(xì)胞內(nèi)釋放時(shí)穿過(guò)核膜、胞質(zhì)膜、空泡膜等，在核衣殼外獲得了宿主細(xì)胞的膜成分。衣殼外獲得了宿主

4、細(xì)胞的膜成分。 包膜有無(wú)：裸病毒（包膜有無(wú)：裸病毒（naked virus） 包膜病毒（包膜病毒（ enveloped virus） 有的包膜上有刺突有的包膜上有刺突(spike)或包膜子粒或包膜子粒包膜表面表達(dá)病毒基因編碼的病毒特異抗原包膜表面表達(dá)病毒基因編碼的病毒特異抗原因包膜的基質(zhì)是脂類，故對(duì)脂溶劑敏感，乙醚因能因包膜的基質(zhì)是脂類，故對(duì)脂溶劑敏感，乙醚因能破壞包膜而滅活病毒，故常用來(lái)鑒定病毒有無(wú)包膜。破壞包膜而滅活病毒，故常用來(lái)鑒定病毒有無(wú)包膜。 核酸（核酸（DNA/RNA) 蛋白質(zhì)蛋白質(zhì) 保護(hù)核酸保護(hù)核酸 結(jié)構(gòu)蛋白：結(jié)構(gòu)蛋白： 參與感染參與感染 具有抗原性具有抗原性 非結(jié)構(gòu)蛋白：病毒酶

5、類（病毒復(fù)制，非結(jié)構(gòu)蛋白：病毒酶類（病毒復(fù)制， 抑制宿主相應(yīng)功能）抑制宿主相應(yīng)功能）脂類和糖：脂類和糖：主要存在于包膜中主要存在于包膜中維護(hù)病毒體結(jié)構(gòu)完整性維護(hù)病毒體結(jié)構(gòu)完整性與宿主細(xì)胞有親和及融合的性能與宿主細(xì)胞有親和及融合的性能表現(xiàn)病毒種、型抗原性表現(xiàn)病毒種、型抗原性與病毒引起機(jī)體中毒癥狀有關(guān)與病毒引起機(jī)體中毒癥狀有關(guān)二、病毒的增殖二、病毒的增殖2.穿入（穿入（penetration）吸附后進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)吸附后進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)3.脫殼（脫殼（uncoating）脫去衣殼、核酸裸露脫去衣殼、核酸裸露 穿入穿入脫殼脫殼病毒病毒RNA逆轉(zhuǎn)逆轉(zhuǎn)錄酶錄酶RNA：DNA雜交中間體雜交中間體RNA酶酶H水解水解負(fù)

6、單鏈負(fù)單鏈DNADNA聚合酶聚合酶雙鏈雙鏈DNA整合酶整合酶整合到細(xì)胞染色體上（前病毒）整合到細(xì)胞染色體上（前病毒）轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄子代子代RNAmRNA翻譯翻譯結(jié)構(gòu)蛋白結(jié)構(gòu)蛋白子代病毒子代病毒釋放釋放（3）逆轉(zhuǎn)錄病毒（）逆轉(zhuǎn)錄病毒（retrovirus）非結(jié)構(gòu)蛋白非結(jié)構(gòu)蛋白裝配裝配5. 組裝（組裝（assembly）與釋放（與釋放（release） （1 1）破胞釋放：無(wú)包膜病毒在宿主細(xì)胞內(nèi)經(jīng)復(fù)制周破胞釋放：無(wú)包膜病毒在宿主細(xì)胞內(nèi)經(jīng)復(fù)制周期可增殖數(shù)百至數(shù)千個(gè)子代病毒，致使細(xì)胞破裂而一期可增殖數(shù)百至數(shù)千個(gè)子代病毒，致使細(xì)胞破裂而一次性將病毒全部釋放至細(xì)胞外。次性將病毒全部釋放至細(xì)胞外。（2 2）芽生釋

7、放：包膜病毒在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制時(shí)，胞）芽生釋放：包膜病毒在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制時(shí)，胞質(zhì)膜上會(huì)出現(xiàn)病毒基因編碼的抗原物質(zhì)，這些部位也質(zhì)膜上會(huì)出現(xiàn)病毒基因編碼的抗原物質(zhì)，這些部位也是核衣殼出芽的位置。是核衣殼出芽的位置。 （二）病毒的生長(zhǎng)曲線（二）病毒的生長(zhǎng)曲線一步法生長(zhǎng)曲線或單峰實(shí)驗(yàn)分析：一步法生長(zhǎng)曲線或單峰實(shí)驗(yàn)分析： 隱蔽期：也稱黑暗期，當(dāng)接種病毒后數(shù)小時(shí)內(nèi)找不到隱蔽期：也稱黑暗期，當(dāng)接種病毒后數(shù)小時(shí)內(nèi)找不到任何病毒顆粒任何病毒顆粒 潛伏期潛伏期( (latent period)latent period)：是病毒成熟階段，為細(xì)胞：是病毒成熟階段，為細(xì)胞外新的病毒第一次出現(xiàn)之前的時(shí)間；外新的病毒第一次

8、出現(xiàn)之前的時(shí)間； 對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期( (logarithmic period)logarithmic period)：病毒數(shù)量的對(duì)數(shù)：病毒數(shù)量的對(duì)數(shù)與時(shí)間成比例增加，產(chǎn)生大量子代病毒，釋放到細(xì)胞外的與時(shí)間成比例增加，產(chǎn)生大量子代病毒，釋放到細(xì)胞外的病毒出現(xiàn)波峰病毒出現(xiàn)波峰( (burst)burst)。（二）遺傳物質(zhì)變異的類型（二）遺傳物質(zhì)變異的類型1. 基因突變基因突變突變株突變株指病毒基因堿基序列改變，導(dǎo)致表型性狀改變的毒株指病毒基因堿基序列改變，導(dǎo)致表型性狀改變的毒株條件致死性突變株條件致死性突變株（conditional-lethal mutant） 溫度敏感突變株溫度敏感突變株（

9、temperature sensitive mutant,ts株株 ） 為條件致死性突變株中應(yīng)用最廣泛的為條件致死性突變株中應(yīng)用最廣泛的缺陷型干擾突變株缺陷型干擾突變株（defective inhibition mutant，DIM）宿主范圍突變株宿主范圍突變株（host range mutant,hr突變株）突變株）耐藥突變株耐藥突變株（drug-resistant mutant）活病毒與滅活病毒之間（交叉復(fù)活）活病毒與滅活病毒之間（交叉復(fù)活）A3株（流行株）株（流行株）新新A3抗原抗原雞胚中增殖不良雞胚中增殖不良A1株（非流行株）株（非流行株）舊舊A1抗原抗原雞胚中生長(zhǎng)良好雞胚中生長(zhǎng)良好雞

10、胚中共同培養(yǎng)雞胚中共同培養(yǎng)重組體（理想疫苗）重組體（理想疫苗）有有A3抗原抗原雞胚中生長(zhǎng)良好雞胚中生長(zhǎng)良好UV滅活滅活 互補(bǔ)互補(bǔ)：一種病毒為另一種病毒提供本身不能合成，但又是必需的：一種病毒為另一種病毒提供本身不能合成，但又是必需的 基因產(chǎn)物，而使其在混合感染的細(xì)胞內(nèi)得以繁殖?；虍a(chǎn)物，而使其在混合感染的細(xì)胞內(nèi)得以繁殖。 輔助病毒與缺陷病毒之間輔助病毒與缺陷病毒之間 活病毒與死病毒之間活病毒與死病毒之間 兩個(gè)不同的缺陷病毒之間兩個(gè)不同的缺陷病毒之間（三）病毒非遺傳物質(zhì)變異的類型（三）病毒非遺傳物質(zhì)變異的類型加強(qiáng)：加強(qiáng)：一種病毒與另一種非殺細(xì)胞病毒同時(shí)感染細(xì)胞，后者能增一種病毒與另一種非殺細(xì)胞病

11、毒同時(shí)感染細(xì)胞，后者能增 加前一種病毒復(fù)制產(chǎn)量的現(xiàn)象（極個(gè)別病毒之間）加前一種病毒復(fù)制產(chǎn)量的現(xiàn)象（極個(gè)別病毒之間） 如：如：I型副流感病毒為水泡性口炎病毒的加強(qiáng)病毒。型副流感病毒為水泡性口炎病毒的加強(qiáng)病毒。表型混合表型混合鑲嵌包膜或衣殼鑲嵌包膜或衣殼表型交換表型交換衣殼誤配衣殼誤配遺傳物質(zhì)不改變，而只有遺傳物質(zhì)不改變，而只有基因產(chǎn)物的交換，傳代后基因產(chǎn)物的交換，傳代后恢復(fù)親代表型。恢復(fù)親代表型。+ 分類分類 可將病毒分為科、亞科和屬可將病毒分為科、亞科和屬 常用核酸類型分類常用核酸類型分類 1 DNA virus (DNA病毒中有病毒中有9科科 ) 2 RNA virus ( ssRNA 7

12、科科. ssRNA 7 科科. dsRNA 2科科 ) 3 反轉(zhuǎn)錄病毒反轉(zhuǎn)錄病毒 (DNA和和RNA反轉(zhuǎn)錄病毒中有反轉(zhuǎn)錄病毒中有2科科) 依傳播方式和感染部位分類依傳播方式和感染部位分類 1 蟲(chóng)媒病毒蟲(chóng)媒病毒 2 腸道病毒腸道病毒 3 呼吸道病毒呼吸道病毒 4 肝炎病毒肝炎病毒 5 性傳播病毒性傳播病毒（二）非尋常病毒的分類（二）非尋常病毒的分類 1 衛(wèi)星病毒（衛(wèi)星病毒（satellites） 2 類病毒（類病毒（viroids） 3 朊粒（朊粒（prion）分離培養(yǎng)鑒定分離培養(yǎng)鑒定( (污染標(biāo)本用抗生素處理過(guò)夜污染標(biāo)本用抗生素處理過(guò)夜) )快速診斷快速診斷雞胚雞胚紅細(xì)胞凝紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)集試驗(yàn)紅細(xì)胞凝紅細(xì)胞凝集抑制試集抑制試驗(yàn)驗(yàn)細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)CPECPE電鏡檢測(cè)電鏡檢測(cè)中和試驗(yàn)中和試驗(yàn)TCID50TCID50pfupfu測(cè)定測(cè)定MOIMOI測(cè)定測(cè)定動(dòng)物接種動(dòng)物接種觀 察 發(fā) 病觀 察 發(fā) 病情況情況中和試驗(yàn)中和試驗(yàn)免 疫 學(xué) 檢免 疫 學(xué) 檢測(cè)測(cè)ID50ID50測(cè)定測(cè)定LD50LD50測(cè)定測(cè)定形態(tài)學(xué)形態(tài)學(xué)電鏡觀察電鏡觀察病毒顆粒病毒顆粒（大小、（大小、形態(tài)）形態(tài)）光學(xué)顯微鏡光學(xué)顯微鏡觀察觀察包涵體包涵體抗原抗原檢測(cè)檢測(cè)ELISAELISAIFIFRIARIAWBWB核酸檢測(cè)核酸