實驗二環(huán)境中微生物的檢測

1、實驗二實驗二 環(huán)境中微生物的檢測環(huán)境中微生物的檢測一、目的要求一、目的要求1、了解環(huán)境中微生物的存在。、了解環(huán)境中微生物的存在。2、比較來自不同場所與不同條件下細(xì)菌的數(shù)量和類型。、比較來自不同場所與不同條件下細(xì)菌的數(shù)量和類型。3、觀察不同類型微生物的菌落形態(tài)特征。、觀察不同類型微生物的菌落形態(tài)特征。4、體會無菌操作的重要性，初步建立微生物工作者必須、體會無菌操作的重要性，初步建立微生物工作者必須具有的具有的“無菌無菌”概念。概念。二、基本原理二、基本原理微生個體微小，種類繁多且無處不在，但肉眼不可見。若用營微生個體微小，種類繁多且無處不在，但肉眼不可見。若用營養(yǎng)瓊脂平板法進(jìn)行檢測，可以看到其群

2、體結(jié)構(gòu)。養(yǎng)瓊脂平板法進(jìn)行檢測，可以看到其群體結(jié)構(gòu)。平板培養(yǎng)基含有細(xì)菌生長所需要的營養(yǎng)成分，當(dāng)取自不同來源平板培養(yǎng)基含有細(xì)菌生長所需要的營養(yǎng)成分，當(dāng)取自不同來源的樣品接種于培養(yǎng)基上，在適宜溫度下培養(yǎng)，的樣品接種于培養(yǎng)基上，在適宜溫度下培養(yǎng)，12 d內(nèi)每一菌內(nèi)每一菌體即能通過很多次細(xì)胞分裂而進(jìn)行繁殖，形成一個可見的細(xì)胞體即能通過很多次細(xì)胞分裂而進(jìn)行繁殖，形成一個可見的細(xì)胞群體的集落，稱為菌落。群體的集落，稱為菌落。每一種細(xì)菌所形成的菌落都有它自己的特點，例如菌落的大小、每一種細(xì)菌所形成的菌落都有它自己的特點，例如菌落的大小、表面干燥或濕潤、隆起或扁平、粗糙或光滑，邊緣整齊或不整表面干燥或濕潤、隆起

3、或扁平、粗糙或光滑，邊緣整齊或不整齊，菌落透明、半透明或不透明，顏色以及質(zhì)地疏松或緊密等。齊，菌落透明、半透明或不透明，顏色以及質(zhì)地疏松或緊密等。因此，可通過平板培養(yǎng)來檢測環(huán)境中細(xì)菌的數(shù)量和類型。因此，可通過平板培養(yǎng)來檢測環(huán)境中細(xì)菌的數(shù)量和類型。三、實驗器材三、實驗器材1、牛肉膏蛋白胨瓊脂平板、牛肉膏蛋白胨瓊脂平板2、儀器或其他用具、儀器或其他用具、記號筆等記號筆等四、實驗步驟四、實驗步驟 1、編號、編號任何一個實驗，在動手操作前均需首先將器皿用記任何一個實驗，在動手操作前均需首先將器皿用記號筆做上記號，寫上班級、姓名、日期，本次實驗號筆做上記號，寫上班級、姓名、日期，本次實驗還要注明處理號，

4、寫在皿底的一邊，不要寫在當(dāng)中，還要注明處理號，寫在皿底的一邊，不要寫在當(dāng)中，以免影響觀察結(jié)果。以免影響觀察結(jié)果。培養(yǎng)皿的記號一般寫在皿底上，如果寫在皿蓋上，培養(yǎng)皿的記號一般寫在皿底上，如果寫在皿蓋上，同時觀察兩個以上培養(yǎng)皿的結(jié)果，打開皿蓋時，容同時觀察兩個以上培養(yǎng)皿的結(jié)果，打開皿蓋時，容易混淆。易混淆。 2、環(huán)境中微生物的檢測、環(huán)境中微生物的檢測 （1）空氣）空氣 將一個牛肉膏蛋白胨平板放在桌面上，移去皿將一個牛肉膏蛋白胨平板放在桌面上，移去皿蓋，使其暴露在空氣中蓋，使其暴露在空氣中5-10min后蓋上皿蓋。后蓋上皿蓋。（2）手指）手指 移去皿蓋，用手指在瓊脂平板的表面輕輕地來移去皿蓋，用手指

5、在瓊脂平板的表面輕輕地來回劃線，蓋上皿蓋。回劃線，蓋上皿蓋。（3）頭發(fā)）頭發(fā) 取頭發(fā)一根，在平板表面任一方向劃線取頭發(fā)一根，在平板表面任一方向劃線35條，條，蓋上皿蓋。蓋上皿蓋。（4）咳嗽）咳嗽 將揭開皿蓋的瓊脂平板放在離口約將揭開皿蓋的瓊脂平板放在離口約68cm處，處，對著瓊脂表面用力咳嗽，然后蓋上皿蓋。對著瓊脂表面用力咳嗽，然后蓋上皿蓋。 3、將所有的瓊脂平板翻轉(zhuǎn)、將所有的瓊脂平板翻轉(zhuǎn)使皿底朝上，放使皿底朝上，放28培養(yǎng)箱，培養(yǎng)培養(yǎng)箱，培養(yǎng)23 d。（1）菌落計數(shù)）菌落計數(shù) 在劃線的平板上，如果菌落很多而在劃線的平板上，如果菌落很多而重疊，則數(shù)平板最后重疊，則數(shù)平板最后1/4面積內(nèi)的菌落數(shù)

6、。不是劃線面積內(nèi)的菌落數(shù)。不是劃線的平板，也一分為四，數(shù)的平板，也一分為四，數(shù)1/4面積的菌落數(shù)。面積的菌落數(shù)。（2）根據(jù)菌落大小、形態(tài)、高度、干濕等特征觀察）根據(jù)菌落大小、形態(tài)、高度、干濕等特征觀察不同的菌落特征。但要注意，如果細(xì)菌數(shù)量太多，不同的菌落特征。但要注意，如果細(xì)菌數(shù)量太多，會使很多菌落生長在一起，或者限制了菌落生長而會使很多菌落生長在一起，或者限制了菌落生長而變得很小，因而外觀不典型，故觀察菌落的特點時，變得很小，因而外觀不典型，故觀察菌落的特點時，要選擇分離的很開的單個菌落。要選擇分離的很開的單個菌落。五、實驗報告五、實驗報告將你自己的平板結(jié)果記錄于下表中將你自己的平板結(jié)果記錄

7、于下表中。皿號皿號菌落數(shù)菌落數(shù)(近似近似值值)特特 征征 描描 寫寫形狀形狀大小大小色澤色澤光澤光澤高度高度透明透明度度表面表面 邊緣邊緣1234CK菌落特征描寫方法如下：菌落特征描寫方法如下： 形狀：圓狀、絲狀、不規(guī)則狀、假根狀形狀：圓狀、絲狀、不規(guī)則狀、假根狀 。 大?。阂灾睆奖硎尽４笮。阂灾睆奖硎?。 表面：光滑、干燥、濕潤、皺褶。表面：光滑、干燥、濕潤、皺褶。 光澤：玻璃狀、蠟質(zhì)狀、油脂狀。光澤：玻璃狀、蠟質(zhì)狀、油脂狀。 高度：扁平、隆起、凹下。高度：扁平、隆起、凹下。 透明程度：透明、半通明、不透明。透明程度：透明、半通明、不透明。 邊緣：整齊、不整齊。邊緣：整齊、不整齊。1.比較各種來源的樣品，哪一種樣品的平板菌落比較各種來源的樣品