啤酒中乙醇和還原糖含量的測定

1、啤酒中乙醇和還原糖含量的測定重鉻酸鉀氧化分光度法測定啤酒中乙醇的含量乙醇是酒重要的質(zhì)量指標(biāo)之一。本實(shí)驗(yàn)中，在硫酸介質(zhì)中，乙醇可定量被重鉻酸鉀氧化生成綠色的三價鉻。最大吸收波長為600nm，其吸光值與乙醇濃度成正，據(jù)此建立了測定乙醇的方法，應(yīng)用于酒量測定簡便,實(shí)用。實(shí)驗(yàn)原理3CH3CH2OH+2K2Cr2O7+8H2SO4=Cr2(SO4)3+3CH3COOH+11H2O材料與方法1 儀器與試劑 (1)722型分光光度計(jì) （2）電熱恒溫水浴鍋 （3）乙醇標(biāo)準(zhǔn)溶液：移取1.25ml優(yōu)級純無水乙醇于100ml容量瓶中，加水至刻度線，定容。此溶液每毫升相當(dāng)于10.00mg乙醇 （4）5%重鉻酸鉀溶液：

2、稱取5g重鉻酸鉀溶于50ml睡中，加10，ml濃硫酸，放冷，加水至10ml（5）試劑均為分析純，水為蒸餾水實(shí)驗(yàn)步驟1.吸收曲線的繪制：在分光光度計(jì)上，用1cm吸收池。以試劑空白溶液為參比，在520-680 nm之間，每隔10nm測定樣品溶液的吸光度，以波長為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制吸收曲線，從而選擇測定鐵的最大吸收波長。2.標(biāo)準(zhǔn).工作曲線的繪制：吸取0.00ml、1ml、2ml、3ml、4ml、5ml乙醇標(biāo)準(zhǔn)溶液分別置于10ml帶塞的比色管中，并分別加入2.0ml重鉻酸鉀溶液，加水至刻度線，在100水浴上加熱10min，稱取冷卻5min，用1cm比色皿與600nm處測定吸光度，以乙醇濃度與

3、對應(yīng)的吸光度A繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線3. 樣品的測定：吸取0.5ml，加入2.0ml重鉻酸鉀溶液，加水至刻度線，在100水浴上加熱10min，取出冷卻5min，用1cm比色皿于600nm處測定吸光度，與乙醇標(biāo)準(zhǔn)曲線對，求出啤酒中乙醇含量數(shù)據(jù)記錄與處理波長/nm520540560580600620640660680吸光度0.2800.3910.5820.7050.7980.7350.5790.3780.271乙醇濃度/mol/L0001.02.03.04.05.0X（樣品）吸光度00.2910.571 0.7920.8861.0080.620數(shù)據(jù)分析與總結(jié)由濃度與吸光度的圖中可得: 當(dāng)A=0.620時 X

4、=2.3mg/ml 啤酒中乙醇的含量=（2.3X10）/0.5 =46mg/ml參考文獻(xiàn)1.與配制酒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的分析方法.GB/T5009.48-2003.S.20032.生.彭榕妹.鄧湘衛(wèi).等 曙紅內(nèi)酯吸光度法測定酒中的乙醇含量J 李華檢驗(yàn)-化學(xué)分冊.1996.31啤酒中還原糖的測定（前言）實(shí)驗(yàn)原理將一定量的堿性酒石酸銅甲，乙液等量混合，立即生成藍(lán)色的氫氧化銅沉淀，.這種沉淀很快與酒石酸甲鈉反應(yīng)，生成深藍(lán)色的可溶性酒石酸鉀鈉銅絡(luò)合物。在加熱條件下，以次甲基藍(lán)作為指示劑，用樣品液滴定，樣品液中的還原糖與酒石酸鉀鈉銅反應(yīng)，生成紅色的氧化亞銅沉淀，待二價銅全部被還原后，稍微過量的還原糖立即把次甲基藍(lán)

5、還原，此時溶液由藍(lán)色變成無色，以次為滴定終點(diǎn)，根據(jù)含糖樣品溶液滴定的體積，就可以計(jì)算出樣品中還原糖的含量。樣品處理吸取100ML樣品，置于蒸發(fā)皿中，用（40gmol）氫氧化鈉溶液中和至中性，在水浴上蒸發(fā)至原體積的14后，移入250ML容量瓶中，加50ML水，搖勻后慢慢加入5ML乙酸鋅溶液及5ML10.6%亞鐵氰化鉀溶液，加水到刻度，搖勻后靜置30min，用干燥濾紙過濾，棄去初濾液，收集濾液備用。1儀器(1)50毫升堿式滴定管(2)250毫升三角瓶(3)容量瓶（100毫升，250毫升，1000毫升）(4)移液管（5毫升）(5)量筒(6)漏斗板，漏斗，濾紙(7)電爐(8)天平 2試劑(1)堿性酒石

6、酸銅甲液 稱取7.5克硫酸銅，及0.025克次甲基藍(lán)，溶于水中并稀釋到500毫升(2)堿性酒石酸銅乙液 稱取25克酒石酸甲鈉 35.5g氫氧化鈉，溶于水中，再加入2克氫氧化鉀，完全溶解后，用水稀釋至500毫升 儲存于橡皮塞玻璃瓶中。(3)乙酸鋅溶液 稱取21.9乙酸鋅，加3毫升冰醋酸，加水溶解并稀釋到100毫升(4)百分之10.6的亞鐵氰化鉀 稱取10.6克亞鐵氰化鉀，溶于水中并稀釋到100毫升(5)百分之0.1的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液 準(zhǔn)確稱取0.2500克，經(jīng)過98到100攝氏度烘干至恒重的無水葡萄糖，加水溶解后轉(zhuǎn)入250毫升容量瓶中，加入5毫升鹽酸，用水稀釋至250毫升3材料啤酒4驗(yàn)步驟（1）

7、堿性酒石酸銅溶液的標(biāo)定 準(zhǔn)確吸取堿性酒石酸銅甲液和乙液各5ML，置于250ML三角瓶中，加水10ML，加玻璃珠3粒。從滴定管滴加約9ML葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，加熱使其在2min內(nèi)沸騰，準(zhǔn)確沸騰30S,趁熱以每2S1滴的速度繼續(xù)滴加葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，直至溶液藍(lán)色剛好褪去為終點(diǎn)。記錄消耗葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的總體積。平行操作3次，取其平均值，按下式計(jì)算。M=pvM-10ML堿性酒石酸銅溶液相當(dāng)于葡萄糖的質(zhì)量，mgp-葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度，mg/MLV-標(biāo)定時消耗葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的總體積，ML。（3）樣品溶液的預(yù)測吸取堿性酒石酸銅甲液和乙液各5ML，置于250ML三角瓶中，加水10ML，加玻璃珠3粒。加熱使其在2m

8、in內(nèi)沸騰，準(zhǔn)備沸騰30S，趁熱以先快后慢的速度從滴定管中滴加樣品溶液，滴定時要始終保持溶液呈沸騰狀態(tài)。待溶液藍(lán)色變淺時，以每2S1滴的速度滴定，直至溶液藍(lán)色剛好褪去為終點(diǎn)。記錄樣品溶液消耗的總體積。（4）樣品溶液的測定吸取堿性酒石酸銅甲液和乙液各5ML，置于250ML三角瓶中，加水使其在2min內(nèi)沸騰，準(zhǔn)確沸騰30S，趁熱以每2S1滴的速度繼續(xù)滴加樣品溶液，直至溶液藍(lán)色剛好褪去為終點(diǎn)。記錄樣品溶液消耗的總體積。平行操作3次，取其平均值。（5）結(jié)果還原糖（以葡萄糖計(jì)）含量=M/(M1*V/250*1000)*100%M1-樣品質(zhì)量，gM-10ML堿性酒石酸銅溶液相當(dāng)于葡萄糖的質(zhì)量，mgV-測定時消耗樣品溶液體積，ML250-樣品溶液的總體積，ML5數(shù)據(jù)記錄及處理編號數(shù)據(jù)項(xiàng)目123V(葡萄糖/ml)13.2413.2513.27密度P(mg/ml)1.0000M=pv(mg)13.2413.2513.27樣品質(zhì)量M1(g)100V