纖維蛋白課件

1、纖維蛋白（原）和纖維蛋白溶解(rngji)系統(tǒng)檢驗(yàn)科 白振宇 2016年5月16日第一頁，共十七頁。纖維蛋白 纖維蛋白原（fibrinogen, Fg），分子量34萬，由肝細(xì)胞合成和分泌，占血漿總蛋白的2%-3%，為機(jī)體止血生理中重要的凝血因子。 正常人血漿中Fg濃度為2.0-4.0g/L，半壽期約為3天，電泳分離顯示在2區(qū)帶。 Fg是一種急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，其增加往往是機(jī)體的一種非特異反應(yīng)，常見于毒血癥、肺炎、輕型肝炎(n yn)、膽囊炎、肺結(jié)核等感染及腎病綜合征、風(fēng)濕熱、惡性腫瘤、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、腦血栓、腦梗死、心肌梗死等無菌性炎癥；另外如外科手術(shù)、放射治療、月經(jīng)期及妊娠期也可見Fg輕度增高。

2、 Fg減少較少見，但當(dāng)其低于1.0g/L時(shí)，機(jī)體可出現(xiàn)出血征象。一種先天性纖維蛋白原缺乏癥是極為罕見的遺傳性疾病，通過常染色體隱性基因遺傳，此患者肝臟不能合成Fg；繼發(fā)性纖維蛋白原減少的原因是由于纖維蛋白溶解酶溶解纖維蛋白所致，如胎盤早期剝離，分娩時(shí)羊水進(jìn)入血管形成血栓，引起彌漫性血管內(nèi)凝血，激活纖維蛋白溶解酶原，使血中纖維蛋白溶解酶活力增加，溶解纖維蛋白，消耗體內(nèi)原有的Fg，使其含量減少；嚴(yán)重的肝實(shí)質(zhì)損害，如各種原因引起的肝壞死、慢性肝病晚期、肝硬化等都可出現(xiàn)Fg的減少；此外，嚴(yán)重的低纖維蛋白原血癥也可見于肺及前列腺手術(shù)中。第二頁，共十七頁。纖維蛋白纖維蛋白(xin wi dn bi)原結(jié)構(gòu)

3、 Fg是一種糖基化蛋白，它由兩條鏈、兩條鏈和兩條鏈組成，每三條肽鏈（、肽鏈）絞合成索狀，形成兩條索狀肽鏈，兩者的N-端通過二硫鍵相連，整個(gè)分子成纖維狀。 Fg的三條多肽鏈分別由不同的基因編碼(bin m)，其中鏈的翻譯和轉(zhuǎn)錄是Fg合成的限速性步驟。 第三頁，共十七頁。纖維蛋白纖維蛋白(xin wi dn bi)原與心腦血管疾病相關(guān)性研究 心腦血管疾病是現(xiàn)代人群中的常見病，其發(fā)生大都存在著Fg的異常增高，F(xiàn)g又是血漿黏度增高的主要因子，更是血栓病的主要基質(zhì)。 Fg能增強(qiáng)紅細(xì)胞和血小板聚集性，提高全血黏度，使血液處于高凝和高黏狀態(tài)，影響組織血液灌注，促使血栓形成。 Fg能誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞（EC）PAI

4、-1 mRNA及抗原呈劑量和時(shí)間依耐性增長，而t-PA mRNA表達(dá)和抗原含量則無明顯變化，最終導(dǎo)致EC表面纖溶活性降低，有利于血栓形成。 Fg水平升高與動(dòng)脈硬化血栓合并癥的發(fā)生和發(fā)展(fzhn)密切相關(guān)；腦梗死患者血漿Fg濃度會(huì)明顯增高；血漿Fg濃度增高是腦血管疾病發(fā)病的極危險(xiǎn)因素。 冠心?。–HD）患者存在凝血和纖溶失衡，主要表現(xiàn)凝血功能過強(qiáng)及纖溶系統(tǒng)活性降低，這必將促進(jìn)冠狀動(dòng)脈內(nèi)血栓形成；血漿Fg濃度升高與CHD發(fā)病密切相關(guān)，是CHD的重要危險(xiǎn)因素,亦可認(rèn)為Fg升高是CHD的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。 第四頁，共十七頁。纖維蛋白 Fg水平的增高與冠狀動(dòng)脈炎癥(ynzhng)反應(yīng)程度和組織損傷程度有關(guān)

5、，F(xiàn)g水平僅在心臟有急性炎癥反應(yīng)和組織損傷的CHD中才明顯增高，在組織損傷程度較輕的穩(wěn)定型心絞痛患者中增高不明顯。血漿Fg升高是心腦血管疾病的重要致病因素，降低Fg的含量是預(yù)防心腦血管疾病死亡及致殘的有效措施之一。 第五頁，共十七頁。纖維蛋白纖維蛋白原與惡性腫瘤( xng zhng li)相關(guān)性的研究u惡性腫瘤患者(hunzh)血漿Fg呈高濃度水平，且較一般疾病顯著增高，病情嚴(yán)重者Fg水平更高。Fg屬粘附蛋白家族，與惡性實(shí)體腫瘤的轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，其在腫瘤的轉(zhuǎn)移過程中可作為不同黏附分子的配體，即橋梁作用，增加白細(xì)胞、血小板及腫瘤細(xì)胞間的黏附結(jié)合，化療后已降低的Fg水平再次升高常見于發(fā)生轉(zhuǎn)移的患者，

6、且隨患者病情惡化程度增高而升高。 u化療藥物對(duì)肝臟細(xì)胞有一定的損傷，會(huì)影響Fg的合成及分泌，有些患者雖病情加重，但Fg并不升高，反而降低。uFg作為一個(gè)簡(jiǎn)便、敏感的指標(biāo)，從血凝學(xué)變化方面檢測(cè)腫瘤轉(zhuǎn)移、惡化及治療效果，具有一定的使用價(jià)值。 第六頁，共十七頁。纖維蛋白纖維蛋白原與腎病(shn bn)、糖尿病相關(guān)性的研究 腎病綜合征及慢性腎病患者（不論是否合并有慢性腎功能衰竭）均存在(cnzi)高凝狀態(tài)，F(xiàn)g含量增高為其重要特征，纖維蛋白在腎小球的沉積是腎病患者最常見的病理變化，35%的病例會(huì)發(fā)生血栓形成。 腎病綜合征患者因尿中大量丟失以白蛋白為主的小分子量蛋白質(zhì)，故易出現(xiàn)低蛋白血癥，繼而刺激肝臟代

7、償性合成蛋白質(zhì)增多，血漿Fg和凝血因子活性增高被認(rèn)為是肝臟合成蛋白質(zhì)增多的一種表現(xiàn)，這兩種高分子量的凝血前質(zhì)不能由尿丟失，它們?cè)谘獫{中的高濃度、高活性是腎病綜合征血栓形成的部分危險(xiǎn)因素。 糖尿病血漿黏度、Fg濃度均明顯高于正常。 改善體內(nèi)血漿黏度和Fg含量對(duì)控制和治療腎病糖尿病有著重要的意義。第七頁，共十七頁。纖維蛋白纖維蛋白(xin wi dn bi)原的測(cè)定方法 Fg定量測(cè)定是臨床上廣泛應(yīng)用的一項(xiàng)試驗(yàn)，有美國國家臨床檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)（NCCLS）推薦的Fg常規(guī)測(cè)定方法Von Cluass法及我國目前較常用的亞硫酸鈉鹽析法、熱濁度法、免疫濁度法和通過凝血儀測(cè)定凝血酶原時(shí)間（PT）而推算Fg含量

8、的PT-Der法等。 Von Cluass法屬于功能法測(cè)定，是建立在Fg經(jīng)凝血酶作用后形成纖維蛋白凝塊基礎(chǔ)上的，最能直接反應(yīng)Fg的凝血功能，這也是目前國外最常用的常規(guī)方法。 亞硫酸鈉鹽析法和熱濁度法屬于物理化學(xué)方法，是根據(jù)蛋白質(zhì)的理化特性而建立的，這種方法特異性差、血漿中的其它蛋白質(zhì)易影響其測(cè)定，所得結(jié)果往往偏高。 免疫濁度法屬于免疫學(xué)方法，目前多采用抗Fg多克隆抗體與Fg反應(yīng)，其所針對(duì)的抗原決定簇也存在于纖維蛋白單體、纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物和異常Fg中，故特異性也較差。 PT-Der法是當(dāng)PT測(cè)定完成時(shí)，全部纖維蛋白原均變成纖維蛋白，其形成的濁度和纖維蛋白的含量成正比，因此(ync)，不需另

9、加任何試劑即可由濁度直接推算出Fg的含量，該方法簡(jiǎn)便、快捷且精密度相當(dāng)高，但Fg在異常范圍時(shí)，PT-Der法所測(cè)結(jié)果往往偏高，建議使用Von Cluass法測(cè)定。第八頁，共十七頁。纖維蛋白纖維蛋白(xin wi dn bi)溶解系統(tǒng) 一、概念 血液凝固過程中形成的纖維蛋白被分解液化的過程，叫纖維蛋白溶解現(xiàn)象 fibrinolysis（簡(jiǎn)稱纖溶）。纖溶活性異常增強(qiáng),即纖溶亢進(jìn)。纖溶亢進(jìn)又分為原發(fā)性纖溶亢進(jìn)和繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)，可致出血(ch xi)。血纖維蛋白溶酶作用于纖維蛋白元或纖維蛋白，能將其多肽鏈的賴氨酸結(jié)合部位切斷使之溶解的現(xiàn)象。由此產(chǎn)生的分解產(chǎn)物為FDP。纖溶過程也稱血液凝固的第四相。 纖

10、溶的激活物（纖溶酶原和纖維蛋白溶解酶即纖溶酶）和抑制物以及纖溶的一系列酶促反應(yīng)，總稱為纖溶系統(tǒng)。 血漿中抑制纖維蛋白溶解的物質(zhì)統(tǒng)稱為纖溶抑制物。它們存在于血漿、組織及各種體液中。根據(jù)其作用可分為兩類：一類是抑制纖溶酶原激活，稱為抗活化素；另一類是抑制纖溶酶的作用，稱為抗纖溶酶。目前，臨床上已廣泛應(yīng)用的止血藥，如凝血酸、止血芳酸和6-氨基己酸等，就是抑制纖溶酶生成及其作用的藥物。第九頁，共十七頁。纖維蛋白 在正常情況下，血液中的抗纖溶酶的含量高于纖溶酶的含量，因而纖溶酶的作用不易發(fā)揮。但在血管受損發(fā)生血凝塊或血栓后，由于纖維蛋白能吸附纖溶酶原和激活物而不吸附抑制物，因而纖溶酶大量形成和發(fā)揮作用，

11、使血凝塊或血栓發(fā)生溶解液化。 二、纖溶系統(tǒng)組成及特性 （1）組織(zzh)型纖溶酶原激活物（t-PA）：t-PA是一種絲氨酸蛋白酶，由血管內(nèi)皮細(xì)胞合成。t-PA激活纖溶酶原，此過程主要在纖維蛋白上進(jìn)行。 （2）尿激酶型纖溶酶原激活物（U-PA）：u-PA由腎小管上皮細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生。U-PA可以直接激活纖溶酶原而不需要纖維蛋白作為輔因子。 （3）纖溶酶原（PLG）：PLG由肝臟合成，當(dāng)血液凝固時(shí)，PLG大量吸附在纖維蛋白網(wǎng)上，在t-PA或u-PA的作用下，被激活為纖溶酶，促使纖維蛋白溶解。纖溶酶原是一個(gè)單鏈的-球蛋白，分子量約為8000090000。它在肝、骨髓、嗜酸粒細(xì)胞和腎中合成，然

12、后進(jìn)入血液中。成年人含量為1020mg/100ml血漿。它在血流中的半衰期為22.5天。很容易被它的作用底物-纖維蛋白所吸附。第十頁，共十七頁。纖維蛋白 （4）纖溶酶（PL）：PL是一種絲氨酸蛋白酶，作用如下：降解(jin ji)纖維蛋白和纖維蛋白原；水解多種凝血因子、等；使纖溶酶原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w溶酶；水解補(bǔ)體等。 （5）纖溶抑制物：包括纖溶酶原激活抑制劑（PAI）和2抗纖溶酶（2-AP）。PAI能特異性與t-PA以1:1比例結(jié)合，從而使其失活，同時(shí)激活PLG.主要有PAI-1和PAI-2兩種形式。2-AP由肝臟合成，作用機(jī)制：與PL以1:1比例結(jié)合形成復(fù)合物，抑制PL活性；F使2-AP以共價(jià)鍵與纖

13、維蛋白結(jié)合，減弱了纖維蛋白對(duì)PL作用的敏感性。 （6）纖維蛋白原（Fg）：是參加止血、血栓形成的主要物質(zhì)，纖維蛋白凝塊又是血栓的主體。由于其分子量比較大，且易在血液中形成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，所以又與血漿粘度有密切關(guān)系。正常值為2-4g/L。Fg增高時(shí)血液粘度增大，產(chǎn)生血栓的可能性也加大，在動(dòng)脈壁受損和動(dòng)脈粥樣硬化(AS)時(shí)，F(xiàn)g可在其表在上沉積。Fg是血栓性疾病獨(dú)立的危險(xiǎn)因素。 三、纖維蛋白溶解機(jī)制 （1）纖溶酶原激活途徑：PLG可通過三條途徑被激活為PL，分別為內(nèi)激活途徑、外激活途徑和外源激活途徑。 （2）纖維蛋白（原）降解機(jī)制：PL不僅降解纖維蛋白，而且可以降解纖維蛋白原。PL降解纖維蛋白原產(chǎn)生X片

14、段、Y片段及D、E片段。降解纖維蛋白則產(chǎn)生x、Y、D-D、E片段。上述所有的片段統(tǒng)稱為纖維蛋白降解產(chǎn)物（FDP）。第十一頁，共十七頁。纖維蛋白四、纖溶過程 纖維蛋白溶解的基本過程可分為兩個(gè)階段：纖溶酶原的激活與纖維蛋白的降解。 1.纖溶酶原的激活 正常情況下，血漿中纖溶酶原無活性。只有在激活物的作用下，它才能轉(zhuǎn)變成具有催化活性的纖溶酶。纖溶酶原的激活物存在于血液、各種組織和組織液中，也可由微生物產(chǎn)生。主要有三類： (1)血管激活物 血管激活物在小血管的內(nèi)皮細(xì)胞中合成后，釋放入血。如血管內(nèi)出現(xiàn)血凝塊，它可使血管內(nèi)皮細(xì)胞釋放大量這種激活物，并被吸附于血纖凝塊上面。肌肉運(yùn)動(dòng)，靜脈阻塞，兒茶酚胺與組織

15、胺等也可使血管內(nèi)皮細(xì)胞合成與釋放這種激活物增加。 (2)組織激活物 組織激活物存在于很多種組織細(xì)胞中，以子宮、甲狀腺和淋巴結(jié)等組織中含量最高，肺和卵巢次之。正常時(shí)，組織激活物存在于細(xì)胞內(nèi)，當(dāng)組織受損時(shí)釋放入血，促使纖溶酶原變?yōu)槔w溶酶。如臨床病人，如實(shí)施某些器官手術(shù)后，常易發(fā)生滲血現(xiàn)象。又如婦女的月經(jīng)血也不凝固，都與這些組織內(nèi)，含有豐富的組織激活物有關(guān)。 (3)尿激活物 尿液中含有纖溶酶原激活物，稱尿激酶。它是腎臟及泌尿道上皮細(xì)胞釋放的。此外，在膽汁、唾液、乳汁、腦脊液、羊水、腹水、關(guān)節(jié)腔液中，均含有激活物原或激活物。這些激活物都具有防止纖維蛋白栓塞，保持管腔通暢的生理作用。 某些細(xì)菌也含有激活

16、纖溶酶原的物質(zhì)。如鏈球菌中含有鏈激酶，葡萄球菌(p to qi jn)中含有葡激酶，故機(jī)體感染這些細(xì)菌后，均可激活纖溶酶原成為纖溶酶。第十二頁，共十七頁。纖維蛋白 2.纖維蛋白的降解 纖溶酶是血漿中活性最強(qiáng)的蛋白酶，但其特異性較差。 它可以水解肽鏈上各個(gè)賴氨酸-精氨酸相連接的部位，從而逐步將整個(gè)纖維蛋白或纖維蛋白原的分子，分割成很多可溶性的小肽（蛋白質(zhì)碎片），這些小肽統(tǒng)稱為纖維蛋白降解產(chǎn)物。此降解產(chǎn)物一般不再凝固。 血管內(nèi)出現(xiàn)血栓時(shí)，纖溶作用主要局限于血栓發(fā)生處，而不擴(kuò)展到周圍血液。這可能是由于血漿中有大量抗纖溶物質(zhì)（即抑制物）和血栓中的纖維蛋白分子可吸附或結(jié)合大量纖溶酶激活物所致。 原發(fā)性纖

17、溶亢進(jìn)：是由于纖溶酶原激活劑(t-PA、u-PA)增多導(dǎo)致纖溶酶活性增強(qiáng)(zngqing)，后者降解血漿中纖維蛋白原和多種凝血因子，使它們的血漿水平和活性下降。臨床表現(xiàn)常見于t-PA、u-PA增多的疾病。原發(fā)性纖溶亢進(jìn)癥時(shí)，纖維蛋白原在沒有大量轉(zhuǎn)化成纖維蛋白之前即被降解，D-二聚體為陰性或不升高。 繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)癥，如血栓性疾病、DIC等，由于疾病前期凝血機(jī)制增強(qiáng)，纖維蛋白大量生成，繼而引起纖溶亢進(jìn)，因此D二聚體陽性或顯著升高。 血漿D-二聚體這是纖維蛋白降解后的特異性產(chǎn)物，測(cè)定血漿D-二聚體可以判斷纖維蛋白是否已經(jīng)生成，從而為鑒別原發(fā)性和繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)癥提供重要依據(jù)。第十三頁，共十七頁。纖維蛋白第十四頁，共十七頁。纖維蛋白第十五頁，共十七頁。纖維蛋白謝謝