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1、光合細(xì)菌培養(yǎng)基配方光合細(xì)菌是兼性厭氧的,不同的光合細(xì)菌用的培養(yǎng)基不一樣我現(xiàn)在就在做關(guān)于光合細(xì)菌的問題,這幾中細(xì)菌都是常見的細(xì)菌,培養(yǎng)基在許多微生物上后面都有,光合細(xì)菌的富集培養(yǎng)基是:NH4Cl0.1gNaHCO30.1gKH2PO40.02gCH3COONa0.1-0.5gMgSO4.7HO20.02gNaCl0.05-0.2g三生長(zhǎng)因子1ml微量元素溶液1ml蒸播水97mlPH7.0生長(zhǎng)培養(yǎng)基加氮源(谷氨酸鈉)和碳源(乙酸.丙酸.丁酸鹽等)及可.其他菌的分離只要選擇不同的培養(yǎng)基就可以選擇分離啊光合細(xì)菌富集純化詳見網(wǎng)易網(wǎng)盤光合細(xì)菌培養(yǎng)基配方氯化氨1克,磷酸氫二鉀0.5克,氯化鎂0.2克,氯化鈉
2、2克,醉母膏0.1克,水900毫升。各成份溶解后15磅滅菌20分鐘,然后無菌的加入過濾的碳酸氫鈉5.0克/50毫升水;50毫升過濾的乙醇。用過濾的0.1N磷酸調(diào)PH=7.0即可。響應(yīng)面設(shè)計(jì)法優(yōu)化光合細(xì)菌培養(yǎng)基配方。培養(yǎng)基成分中醋酸鈉和蛋白月東對(duì)于光合細(xì)菌的生長(zhǎng)影響最為顯著,最優(yōu)培養(yǎng)基配方為:醋酸鈉1.145g/L、蛋白腺0.055g/L、碳酸氫鈉0.6g/L、硫代硫酸鈉0.4g/L、氯化鈉0.3g/L、硫酸鎂0.1g/L、磷酸二氫鉀0.05g/Lo在此條件下,光合細(xì)菌生長(zhǎng)最為良好,經(jīng)過5d培養(yǎng)以后,培養(yǎng)液OD600可以達(dá)到0.5以上光合細(xì)菌(含生產(chǎn)工藝)優(yōu)良的光合細(xì)菌菌種的外觀質(zhì)量是啥樣?一般
3、優(yōu)良的光合細(xì)菌菌種和產(chǎn)品的外觀質(zhì)量有以下幾點(diǎn):1、外觀上看比較均勻,基本無上下分層。相反,市場(chǎng)上有許多光合細(xì)菌是上下分層的,包括我中心初期的產(chǎn)品也是這樣,上層比較清淡,下層則比較深厚,上層顏色淺,下層顏色深,最底層可能還會(huì)有一層黑黑的沉淀。而優(yōu)秀的光合細(xì)菌菌種和產(chǎn)品,上下都是比較均勻的,沒有較明顯的分層,顏色比較均勻,外觀看起來也悅目。(當(dāng)然,除了培養(yǎng)基溶解時(shí),會(huì)與硬水中的重金屬離子反應(yīng)產(chǎn)生的絮裝沉淀除外)這種上下無分層,顏色均勻,不是靠加懸浮劑,或增稠劑而造成的,而是自然培養(yǎng)由來的,不加任何修飾而成的。少數(shù)地方,由于水質(zhì)的原因,可能會(huì)產(chǎn)生稍稍的差別。2、沒有粘壁現(xiàn)象。很多市場(chǎng)上的產(chǎn)品都有粘壁
4、現(xiàn)象,即在容器的壁上形成一層紅紫色的顏色層,就象是油漆一樣,洗不掉,抹不去。這主要是在培養(yǎng)過程中形成的,也有在保存過程中形成的。優(yōu)秀的光合細(xì)菌菌種和產(chǎn)品,應(yīng)該是沒有一絲一毫的粘壁現(xiàn)象。所以外觀上看起來質(zhì)量也更好。3、顏色的深度比較深。根據(jù)國(guó)家質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),可以用721分光光度計(jì),測(cè)量A660nm處的吸光值,如果大于1.5,則說明,濃度一般都在30億/毫升以上,好的光合細(xì)菌菌種和產(chǎn)品都在1.5以上。4、顏色鮮艷無雜色。優(yōu)秀的菌種和產(chǎn)品,不僅顏色深,而且,比較鮮艷,沒有雜色,比如是大紅色,血紅色,或是深紫色,看起來是很悅目的,沒有不良的雜色,或是暗暗的顏色。5、保存期限長(zhǎng)??梢员4嫦奶?月以上,冬天6
5、月以上。在期限內(nèi)外觀基本無變化。保持80額上的活力。6、培養(yǎng)周期短,接種量少。好的菌種,接種量在10-20%即可,我中心推崇20煩種量,培養(yǎng)條件好的,可只用10%妾種量,都可以在3-5天內(nèi)培養(yǎng)好(條件是用白熾燈培養(yǎng),溫度在30-37度),或在7天培養(yǎng)好(條件是用太陽光照培養(yǎng),陽光充足時(shí),僅是白天照射培養(yǎng),液體溫度在30-38度,晚上不培養(yǎng))。而市場(chǎng)上很多菌種要50額上接種量,當(dāng)然,在有條件情況下,用大接種量是有好處的,在有條件的情況下,我中心也推薦您用30%勺接種量,能更穩(wěn)妥,更快地培養(yǎng)成功。7、基本不存在雜菌污染在保證清潔培養(yǎng)的情況下,一般不存在雜菌污染的情況,當(dāng)然,這也與培養(yǎng)基配方技術(shù)有一
6、定關(guān)系。8、可以無限制地循環(huán)培養(yǎng)下去。不僅可以無限制地循環(huán)培養(yǎng)下去,而且,性能不變,質(zhì)量不減。當(dāng)然,這也與培養(yǎng)基配方技術(shù)有一定關(guān)系。小規(guī)模光合細(xì)菌燈光培養(yǎng)中用60-100瓦白熾燈較好在實(shí)驗(yàn)室用紙箱法培養(yǎng)光合細(xì)菌時(shí),要用到白熾燈(注意,不能用日光燈,日光燈的光波不適合培養(yǎng)光合細(xì)菌,所以日光燈是沒有用的),以前做的試驗(yàn)由于是用500*500*350mm的小紙箱,所以有40瓦的白熾燈就可以維持箱內(nèi)溫度在35c左右,甚至到40C,用40瓦的白熾燈培養(yǎng),一般需要5天以上才能長(zhǎng)得非常深紅色。后來用到了700*700mm的大紙箱,我們才改用60瓦的白熾燈,發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)的時(shí)間可以大大縮短了,而且進(jìn)入冬季后,紙箱中
7、的溫度只能維持到25C,我們發(fā)現(xiàn),即使是在25c的箱內(nèi)溫度下,也只要培養(yǎng)4天左右就長(zhǎng)得非常深紅色了,所以我們分析,可能是60瓦以上的白熾燈的光波更加適合于光合細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖,所以我們建議各位用戶,改用60瓦的白熾燈,可以大大提高培養(yǎng)的成功率,和大大縮短培養(yǎng)的時(shí)間。如果是夏天,若用60瓦的白熾燈太熱,可以在紙箱上戮大量孔洞,用于散熱,維持箱內(nèi)溫度在35度左右。光合細(xì)菌發(fā)生劑的用法(即光合細(xì)菌的生產(chǎn)工藝)一、光合細(xì)菌生長(zhǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)條件用“光合細(xì)菌發(fā)生劑”生產(chǎn)的終端產(chǎn)品:光合細(xì)菌液,PSB細(xì)胞濃度達(dá)到30-100億/毫升,生產(chǎn)成本只要0.30元/公斤,而使用價(jià)值可達(dá)到2元/公斤,投入產(chǎn)生比達(dá)到1:6
8、-12以上。做成的液體產(chǎn)品,密封保存在通氣干燥處,可保質(zhì)達(dá)1年以上。二、光合細(xì)菌生長(zhǎng)所需環(huán)境條件有了營(yíng)養(yǎng)全面的“光合細(xì)菌發(fā)生劑”,還必須有一個(gè)良好的培養(yǎng)環(huán)境條件,才能生產(chǎn)由優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品由來。PSB所需的環(huán)境條件有以下幾個(gè):1:培養(yǎng)介質(zhì),含雜菌較少的清潔淡水。地下水、河水、海水等,硬度低的水更好(如河水),選取水源時(shí),最好先做幾種水源的對(duì)比試驗(yàn),使用哪里的水源在培養(yǎng)試驗(yàn)中最先變成紅色(生長(zhǎng)良好),就選用哪里的水作為生產(chǎn)用水。自來水取自河水,硬度低,雜菌少,只要菌種能耐漂白粉殺菌劑,用自來水比其它水反而更好更快。您不妨做一次自來水的試驗(yàn)。2:酸堿度,PH值在88.5為最好,光合細(xì)菌的適應(yīng)PH范圍在61
9、0之間。3:溫度,以2836c為最適生長(zhǎng)溫度,具適應(yīng)的生長(zhǎng)溫度范圍為1541C。4:光照強(qiáng)度,以30004000勒克斯(LX)為最佳,即每25公斤菌液需要用相當(dāng)于60瓦左右的白熾燈作光源,而太陽光照為最好且不要成本。宜春專利中心提供光合細(xì)菌發(fā)生劑。三、光合細(xì)菌成品的生產(chǎn)1、培養(yǎng)液的配制將購得的我中心的光合細(xì)菌發(fā)生劑取一公斤,放入一個(gè)干凈的容器中,加入100公斤水,攪拌均勻,直到發(fā)生劑(培養(yǎng)基)溶化為止。若容器不夠大,則可以少配一點(diǎn)。注意事項(xiàng):水源一定要選擇好,含菌量較低的清潔淡水、海水或加粗食鹽的淡水。從經(jīng)濟(jì)、實(shí)用的角度考慮,地下水(井水)含菌量低,為最佳水源,另外,若當(dāng)?shù)刈詠硭容^低,也可
10、用,效果很好;清潔的地表水也可使用;含氯量較高的自來水應(yīng)敞口放置兩三天或調(diào)PH值至偏堿后使用;蒸儲(chǔ)水及純凈水固然很好,但成本太高,可用于提純菌種。選擇容器:少量生產(chǎn)可用透明度較高的白色或透明塑料桶、玻璃容器。大量生產(chǎn)可用水泥池、水泥船,也可臨時(shí)開挖土池,墊上雙層塑料膜防漏防渾濁,培養(yǎng)液的深度為30公分最佳。2、培養(yǎng)方式有以下三種:(1)做小試驗(yàn)培養(yǎng)的方法容器為:1.25升的飲料瓶,即小規(guī)模生產(chǎn)方法,由于飲料瓶的量小,瓶子透明度好,又密封,所以培養(yǎng)環(huán)境好,需要的接種量也少,比較簡(jiǎn)單。設(shè)備為:光照箱,用一個(gè)大的紙箱,放一個(gè)40瓦的白熾燈懸桂在箱子的空中(注意防火),紙箱內(nèi)壁四周,堆放著已裝好了培養(yǎng)
11、液并接了種的飲料瓶,這樣,既達(dá)到了保溫到2540度的效果,又達(dá)到了光照的效果。較大的箱子要用60瓦的白熾燈,一般一個(gè)箱子,可放這種飲料瓶8個(gè)以上,即一次可生產(chǎn)約10公斤/箱。燈泡與瓶子的距離不超過20厘米。夏天,可撤去紙箱,以防溫度過高,春秋秋天,也要在紙箱四周鉆孔以散熱。操作規(guī)程如下:配料:培養(yǎng)液為1%濃度的發(fā)生劑溶7接種量為20%注意水源必須一干凈衛(wèi)生,最好用地下水,自來水可以試用一下,第一次做試驗(yàn)時(shí),要多選擇幾種水源同時(shí)做,以確定哪種水源最好,最先轉(zhuǎn)成紅色的水源最好,可確定為今后的生產(chǎn)用水。培養(yǎng):在箱子內(nèi),打開白熾燈,照幾天即可,一般可達(dá)到溫度在35度,控制在30-40度之內(nèi),所以要密切
12、注意溫度不要過高,第一次培養(yǎng)可能需要5天以上,一定要注意,每天要搖晃兩次,這很重要,菌種適應(yīng)了貴地的水源后,一般只需要2天即可長(zhǎng)成深紅色。培養(yǎng)成熟標(biāo)準(zhǔn):以培養(yǎng)液長(zhǎng)成深紅色為準(zhǔn),這時(shí)一般成品的光合細(xì)菌濃度可達(dá)到30-100億/毫升。(2)用塑料桶進(jìn)行大規(guī)模生產(chǎn)或用培養(yǎng)蝦苗用的塑料袋來做效果更好。一袋20公斤的樣子。例如容器選用25公斤裝的大塑料桶,由于條件不如做小試驗(yàn)的培養(yǎng)方法好,所以接種量要達(dá)到至少20項(xiàng)上的量。即往大塑料桶中加入22.5公斤的配制好的培養(yǎng)液(即1%勺培養(yǎng)基溶液),再加入2.5公斤的菌種液,搖勻。利用太陽能培養(yǎng):把上述塑料桶放到太陽底下曬即可,只要注意:夏季氣溫過高,若用太陽作
13、為光照能源,則應(yīng)采取部分遮陽(用黑色的遮陽塑料網(wǎng)),通風(fēng)的降溫措施,以防光合細(xì)菌快速老化死亡;冬天則氣溫低,則要采取搭建一個(gè)塑料暖棚增溫的方法,把塑料桶放入暖棚內(nèi)曬太陽即可;春秋季則可直接放在太陽底下不用管即可??傊怪疁囟仍?5度-36度之間最好。過些日子它自然會(huì)長(zhǎng)成深紅色的成品。經(jīng)方法即是懶漢培養(yǎng)工藝法,利用白熾燈作為光能生產(chǎn):在一個(gè)容器內(nèi)懸桂一個(gè)白熾燈,容器內(nèi)裝的培養(yǎng)液深度不得大于30公分,燈泡與液面距離不得大于20公分。(3)用塑料膜做的池子來大規(guī)模生產(chǎn)您還可以這樣利用太陽能大規(guī)模培養(yǎng)(以培養(yǎng)2噸菌液為例):選擇陽光充足的地方,開挖一土池(長(zhǎng)5米、寬1.8米、深0.4米),有現(xiàn)成的水泥池更好。墊上塑料薄膜,然后再鋪上桶狀塑料薄膜,并將其一端密封,從另一端加入1.8噸配制好的培養(yǎng)液,和0.2噸的菌種,一共2噸,排盡薄膜中空氣后,再將該端密封。保持適當(dāng)?shù)臏囟?,冬天如果溫度過低,搭建透明塑料薄膜棚增溫。這樣,幾天后,菌液培養(yǎng)成熟。長(zhǎng)成深紅色。也可以在室外挖一個(gè)土坑,深40厘米,墊上一層塑料薄膜,再倒入培養(yǎng)液,液面上再蓋一層塑料薄膜,以免與大量空氣接觸,造成污染雜菌,再用太陽照射培養(yǎng)成熟,天
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