分子生物學(xué)RNA的生物合成(轉(zhuǎn)錄)

1、1第 十 一 章RNA的生物合成（轉(zhuǎn)錄）的生物合成（轉(zhuǎn)錄）RNA Biosynthesis （Transcription）2轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄 (transcription)u生物體以生物體以DNA為模板合成為模板合成RNA的過程的過程 。 u此過程把此過程把DNA的堿基序列轉(zhuǎn)抄成的堿基序列轉(zhuǎn)抄成RNA 。 3A-U，T-A，G-CA-T，G-C配配對對mRNA，tRNA，rRNA子子代代雙雙鏈鏈DNA（半半保保留留復(fù)復(fù)制制）產(chǎn)產(chǎn)物物RNA聚聚合合酶酶（RNA-pol）DNA聚聚合合酶酶酶酶NTPdNTP原原料料模模板板鏈鏈轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)錄錄（不不對對稱稱轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)錄錄）兩兩股股鏈鏈均均復(fù)復(fù)制制模模板板轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)錄錄復(fù)復(fù)制制

2、A-U，T-A，G-CA-T，G-C配配對對mRNA，tRNA，rRNA子子代代雙雙鏈鏈DNA（半半保保留留復(fù)復(fù)制制）產(chǎn)產(chǎn)物物RNA聚聚合合酶酶（RNA-pol）DNA聚聚合合酶酶酶酶NTPdNTP原原料料模模板板鏈鏈轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)錄錄（不不對對稱稱轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)錄錄）兩兩股股鏈鏈均均復(fù)復(fù)制制模模板板轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)錄錄復(fù)復(fù)制制4參與轉(zhuǎn)錄的物質(zhì)參與轉(zhuǎn)錄的物質(zhì)原料原料: NTP 模板模板: DNA酶酶: RNA聚合酶聚合酶RNA polymerase, RNA-pol其他蛋白質(zhì)因子其他蛋白質(zhì)因子5第一節(jié)第一節(jié)模板和酶模板和酶Templates and Enzymes6一、轉(zhuǎn)錄模板一、轉(zhuǎn)錄模板 DNA分子上能轉(zhuǎn)錄出分子上能轉(zhuǎn)錄出

3、RNA的區(qū)段，稱為的區(qū)段，稱為結(jié)構(gòu)基因結(jié)構(gòu)基因(structural gene)。 DNA雙鏈中按堿基配對規(guī)律能指引轉(zhuǎn)錄生成雙鏈中按堿基配對規(guī)律能指引轉(zhuǎn)錄生成RNA的一股單鏈，稱為的一股單鏈，稱為模板鏈模板鏈(template strand)，也稱，也稱作作信息鏈、轉(zhuǎn)錄鏈、信息鏈、轉(zhuǎn)錄鏈、有意義鏈有意義鏈或或Watson鏈鏈。相對的另一股單鏈是相對的另一股單鏈是編碼鏈編碼鏈(coding strand)，也稱，也稱為為非轉(zhuǎn)錄鏈、反義鏈非轉(zhuǎn)錄鏈、反義鏈或或Crick鏈鏈。 7不對稱轉(zhuǎn)錄不對稱轉(zhuǎn)錄(asymmetric transcription) 轉(zhuǎn)錄對轉(zhuǎn)錄對DNA鏈的選擇鏈的選擇性稱為不對稱轉(zhuǎn)

4、錄。性稱為不對稱轉(zhuǎn)錄。 有兩方面的含義：有兩方面的含義： 在在DNA分子雙鏈上某一分子雙鏈上某一區(qū)段，一股鏈用作模板區(qū)段，一股鏈用作模板指引轉(zhuǎn)錄，另一股鏈不指引轉(zhuǎn)錄，另一股鏈不轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄 ； 模板鏈并非永遠在同一模板鏈并非永遠在同一條單鏈上。條單鏈上。8二、二、RNA聚合酶聚合酶（一）原核生物的（一）原核生物的RNARNA聚合酶聚合酶目前研究比較透徹的是目前研究比較透徹的是E.coliE.coli的的RNARNA聚合酶。聚合酶。其它原核生物的其它原核生物的RNARNA聚合酶在聚合酶在結(jié)構(gòu)、組成、功能上都與結(jié)構(gòu)、組成、功能上都與E.coliE.coli的的RNARNA聚合酶相似。聚合酶相似。所有原

5、核生物所有原核生物RNARNA聚合酶都受聚合酶都受利福平或利福霉素抑制。利福平或利福霉素抑制。910（二）真核生物的（二）真核生物的RNA聚合酶聚合酶 已發(fā)現(xiàn)三種RNA聚合酶分別稱為RNA聚合酶、，專一性地轉(zhuǎn)錄不同的基因，生成不同的產(chǎn)物i。 鵝膏蕈堿是真核生物RNA聚合酶的特異性抑制劑，但敏感性不同。11三、模板上酶的辨認、結(jié)合三、模板上酶的辨認、結(jié)合 原核生物一個轉(zhuǎn)錄區(qū)段可視為一個轉(zhuǎn)錄單原核生物一個轉(zhuǎn)錄區(qū)段可視為一個轉(zhuǎn)錄單位，稱為位，稱為操縱子操縱子(operon)，包括若干個，包括若干個結(jié)結(jié)構(gòu)基因構(gòu)基因及其上游及其上游(upstream)的的調(diào)控序列調(diào)控序列。結(jié)構(gòu)基因調(diào)控序列 操縱子：轉(zhuǎn)錄

6、單位或轉(zhuǎn)錄區(qū)段操縱子：轉(zhuǎn)錄單位或轉(zhuǎn)錄區(qū)段啟動子RNA-Pol RNA聚合酶結(jié)合模板聚合酶結(jié)合模板DNA的部位，稱為的部位，稱為啟啟動子動子(promoter)。12對啟動子的研究方法對啟動子的研究方法RNA-Pol保護法保護法 1）分離某段基因并與純）分離某段基因并與純RNA-pol混合；混合； 2）加入核酸外切酶（胰）加入核酸外切酶（胰DNA酶）水解酶）水解DNA； 3）分離被）分離被RNA聚合酶結(jié)合而未被水解的聚合酶結(jié)合而未被水解的基因片段；基因片段； 4）測定并分析保護區(qū)（）測定并分析保護區(qū)（40-60bp）的堿）的堿基序列；基序列；13RNA-pol的移動的移動14真核生物啟動子保守序

7、列真核生物啟動子保守序列15第二節(jié)第二節(jié)轉(zhuǎn)錄過程轉(zhuǎn)錄過程The Process of Transcription16一、原核生物的轉(zhuǎn)錄過程一、原核生物的轉(zhuǎn)錄過程（一）轉(zhuǎn)錄起始（一）轉(zhuǎn)錄起始就是就是RNA-Pol結(jié)合到結(jié)合到DNA模模板上的起始區(qū)域，板上的起始區(qū)域，DNA雙鏈雙鏈局部解開，一條鏈作模板面局部解開，一條鏈作模板面加入第一個、第二個加入第一個、第二個NTP，RNA-Pol催化形成第一個磷催化形成第一個磷酸二酯鍵。酸二酯鍵。轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物形成。轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物形成。RNApol ( 2) - DNA - pppGpN- OH 3 17（二）轉(zhuǎn)錄延長（二）轉(zhuǎn)錄延長 亞基脫落，亞基脫落，RN

8、Apol聚合酶核心酶變構(gòu)，聚合酶核心酶變構(gòu)，與模板結(jié)合松弛，沿著與模板結(jié)合松弛，沿著DNA模板前移；模板前移；在在核心酶核心酶作用下，作用下，NTP不斷聚合，不斷聚合，RNA鏈不鏈不斷延長。斷延長。(NMP) n + NTP (NMP) n+1 + PPi181、 轉(zhuǎn)錄空泡轉(zhuǎn)錄空泡 RNA-Pol（核心酶）-DNA-RNA形成的轉(zhuǎn)錄復(fù)合物 RNA聚合酶可以覆蓋40bp以上長度的DNA 轉(zhuǎn)錄解鏈范圍小于20bp 雜化雙鏈長度約12bp pNMP逐個加入遇到模板為A時加入的是U不是TpRNA-Pol向下游移動時RNA 分子的5pppG的結(jié)構(gòu)仍然保留192、原核生物轉(zhuǎn)錄過程中的羽毛狀現(xiàn)象、原核生物轉(zhuǎn)

9、錄過程中的羽毛狀現(xiàn)象20（三）轉(zhuǎn)錄終止（三）轉(zhuǎn)錄終止 指指RNA聚合酶在聚合酶在DNA模板上停頓下來不再前進，模板上停頓下來不再前進，轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物RNA鏈從轉(zhuǎn)錄復(fù)合物上脫落下來。鏈從轉(zhuǎn)錄復(fù)合物上脫落下來。分類分類1、依賴、依賴Rho ()因因子的轉(zhuǎn)錄終止子的轉(zhuǎn)錄終止2、非依賴、非依賴Rho因子因子的轉(zhuǎn)錄終止的轉(zhuǎn)錄終止212. 非依賴非依賴 Rho因子的轉(zhuǎn)錄終止因子的轉(zhuǎn)錄終止 DNA模板上靠近終止處，有模板上靠近終止處，有些特殊的堿基序列，轉(zhuǎn)錄出些特殊的堿基序列，轉(zhuǎn)錄出RNA后，后，RNA產(chǎn)物形成特殊產(chǎn)物形成特殊的結(jié)構(gòu)來終止轉(zhuǎn)錄。的結(jié)構(gòu)來終止轉(zhuǎn)錄。 莖環(huán)莖環(huán)(stem-loop)/發(fā)夾發(fā)夾(

10、hairpin)結(jié)構(gòu)。結(jié)構(gòu)。 舉例：舉例： 大腸桿菌核蛋白體蛋白基因大腸桿菌核蛋白體蛋白基因 大腸桿菌色氨酸操縱子大腸桿菌色氨酸操縱子22二、真核生物的轉(zhuǎn)錄起始二、真核生物的轉(zhuǎn)錄起始（一）轉(zhuǎn)錄起始（一）轉(zhuǎn)錄起始 真核生物的轉(zhuǎn)錄起始上游真核生物的轉(zhuǎn)錄起始上游區(qū)段比原核生物多樣化。區(qū)段比原核生物多樣化。 轉(zhuǎn)錄起始時，轉(zhuǎn)錄起始時，RNA-pol不不直接結(jié)合模板，其起始過直接結(jié)合模板，其起始過程比原核生物復(fù)雜。程比原核生物復(fù)雜。233. 轉(zhuǎn)錄起始前復(fù)合物轉(zhuǎn)錄起始前復(fù)合物(pre-initiation complex, PIC) 真核生物真核生物RNA-pol不與不與DNA分子直接結(jié)合，而分子直接結(jié)合，

11、而需依靠眾多的轉(zhuǎn)錄因子。需依靠眾多的轉(zhuǎn)錄因子。244. 模板理論模板理論(piecing theory) 一個真核生物基因的轉(zhuǎn)錄需要一個真核生物基因的轉(zhuǎn)錄需要3至至5個轉(zhuǎn)錄個轉(zhuǎn)錄因子。因子。 轉(zhuǎn)錄因子之間互相結(jié)合，生成有活性，有轉(zhuǎn)錄因子之間互相結(jié)合，生成有活性，有專一性的復(fù)合物，專一性的復(fù)合物， 再與再與RNA聚合酶搭配而有針對性地結(jié)合、聚合酶搭配而有針對性地結(jié)合、轉(zhuǎn)錄相應(yīng)的基因。轉(zhuǎn)錄相應(yīng)的基因。25（二）轉(zhuǎn)錄延長（二）轉(zhuǎn)錄延長 RNA-pol前移處處都遇上前移處處都遇上核小體，二者大小差別不核小體，二者大小差別不大。大。 轉(zhuǎn)錄延長過程中可以觀察轉(zhuǎn)錄延長過程中可以觀察到核小體移位（僅見于試到核

12、小體移位（僅見于試管內(nèi)轉(zhuǎn)錄）和解聚現(xiàn)象。管內(nèi)轉(zhuǎn)錄）和解聚現(xiàn)象。真核生物轉(zhuǎn)錄延長過程與原核生物大致相真核生物轉(zhuǎn)錄延長過程與原核生物大致相似，但因有核膜相隔，沒有轉(zhuǎn)錄與翻譯同似，但因有核膜相隔，沒有轉(zhuǎn)錄與翻譯同步的現(xiàn)象。步的現(xiàn)象。26（三）真核生物的轉(zhuǎn)錄終止（三）真核生物的轉(zhuǎn)錄終止 真核生物轉(zhuǎn)錄終止和轉(zhuǎn)錄后修飾密切相關(guān)。真核生物轉(zhuǎn)錄終止和轉(zhuǎn)錄后修飾密切相關(guān)。 1真核生物DNA上有轉(zhuǎn)錄終止的信號，稱為轉(zhuǎn)錄終止的修飾點。 已知真核生物DNA讀碼框架的3端均含富含AT的序列（如AATAAA或ATTAAA等）； 相隔0-30bp后又出現(xiàn)TTTT順序（通常是3-5個T）； 該結(jié)構(gòu)可能與轉(zhuǎn)錄終止及3端加pol

13、yA有關(guān)。 2轉(zhuǎn)錄越過轉(zhuǎn)錄修飾點后的RNA在修飾點被切斷，隨即“加尾”、“戴帽”。 余下RNA繼續(xù)轉(zhuǎn)錄，但產(chǎn)物很快被酶水解。27真核生物的轉(zhuǎn)錄終止及加尾修飾真核生物的轉(zhuǎn)錄終止及加尾修飾28第三節(jié)第三節(jié)真核生物的轉(zhuǎn)錄后修飾真核生物的轉(zhuǎn)錄后修飾Post-transcriptional Modification29幾種主要的修飾方式幾種主要的修飾方式1. 剪接剪接(splicing)2. 剪切剪切(cleavage)3. 修飾修飾(modification)4. 添加添加(addition)30一、真核生物一、真核生物mRNA的轉(zhuǎn)錄后加工的轉(zhuǎn)錄后加工 （一）首、尾的修飾（一）首、尾的修飾 5 端形成

14、端形成 帽子結(jié)構(gòu)帽子結(jié)構(gòu)(m7GpppGp )3 端加上端加上多聚腺苷酸尾巴多聚腺苷酸尾巴(poly A tail)31PolyA的形成的形成mRNA 5m7GpppG AAUAAA 3H2O核苷酸片段核苷酸片段核酸內(nèi)切酶核酸內(nèi)切酶nATPnPPiPoly(A)聚合酶聚合酶mRNA 5m7GpppG AAUAAA OH 3mRNA 5m7GpppG AAUAAA AAA(A)nOH 332（二）（二）mRNA的剪接的剪接 1. hnRNA 和和 snRNA 核內(nèi)的初級核內(nèi)的初級mRNA稱為稱為雜化核雜化核RNA (hetero-nuclear RNA, hnRNA) mRNA來自來自hnRNA

15、（去掉中間片段）（去掉中間片段） snRNA (small nuclear RNA)核內(nèi)的蛋白質(zhì)核內(nèi)的蛋白質(zhì)小分子核糖核酸蛋白體小分子核糖核酸蛋白體（并接體（并接體, , splicesome）snRNA33mRNA來自來自hnRNA 核酸序列分析證明： mRNA是去掉大部分中間片段的hnRNA。 核酸雜交實驗證明： hnRNA與DNA模板鏈可以完全配對； 而mRNA與DNA模板鏈雜交則出現(xiàn)部分配對的局部雙鏈區(qū)域和中間相當多的鼓泡狀突出的單鏈區(qū)段。 因此提出真核生物基因的斷裂性的概念。34核酸雜交實驗核酸雜交實驗35模板模板DNAhnRNA35全長互補全長互補35模板模板DNA成熟成熟mRNA

16、35局部互補局部互補鼓泡狀突出鼓泡狀突出35核酸雜交實驗核酸雜交實驗雞卵清蛋白成熟雞卵清蛋白成熟mRNA（虛線部分）與基因（虛線部分）與基因DNA（實線部分）（實線部分）分子雜交后電鏡所見。分子雜交后電鏡所見。7個內(nèi)含子（鼓泡狀突出部分）將個內(nèi)含子（鼓泡狀突出部分）將8個外顯子分開。個外顯子分開。成熟成熟mRNA模板模板DNA36斷裂基因斷裂基因(splite gene) 真核生物結(jié)構(gòu)基因，由若干個編碼區(qū)和非真核生物結(jié)構(gòu)基因，由若干個編碼區(qū)和非編碼區(qū)互相間隔開但又連續(xù)鑲嵌而成，去編碼區(qū)互相間隔開但又連續(xù)鑲嵌而成，去除非編碼區(qū)再連接后，可翻譯出由連續(xù)氨除非編碼區(qū)再連接后，可翻譯出由連續(xù)氨基酸組成

17、的完整蛋白質(zhì)，這些基因稱為基酸組成的完整蛋白質(zhì)，這些基因稱為斷斷裂基因裂基因。372. 外顯子外顯子(exon)和內(nèi)含子和內(nèi)含子(intron) 外顯子外顯子 在斷裂基因及其初級轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物上出現(xiàn)，并表達在斷裂基因及其初級轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物上出現(xiàn)，并表達為成熟為成熟RNA的核酸序列。的核酸序列。 內(nèi)含子內(nèi)含子 隔斷基因的線性表達而在剪接過程中被除去的隔斷基因的線性表達而在剪接過程中被除去的核酸序列。核酸序列。 38胰島素基因、轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物、翻譯產(chǎn)物胰島素基因、轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物、翻譯產(chǎn)物39斷裂基因及其轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)錄后修飾斷裂基因及其轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)錄后修飾注：涂黑處為前導(dǎo)順序（注：涂黑處為前導(dǎo)順序（L）和外顯子（）和外顯子（1、2

18、、3、4、5、6、7）7.7kb卵清蛋白基因卵清蛋白基因hnRNAGpppGAAAAAA首尾修飾的首尾修飾的hnRNAGpppGAAAAAA剪接中的套索剪接中的套索RNAL1276543GpppGAAAAAA胞漿胞漿mRNA403. 內(nèi)含子的分類內(nèi)含子的分類 根據(jù)基因的類型和剪接的方式，通常把內(nèi)根據(jù)基因的類型和剪接的方式，通常把內(nèi)含子分為含子分為4類。類。 I：主要存在于線粒體、葉綠體及某些低等真核主要存在于線粒體、葉綠體及某些低等真核生物的生物的 rRNA基因；基因； II：也發(fā)現(xiàn)于線粒體、葉綠體，轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物是也發(fā)現(xiàn)于線粒體、葉綠體，轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物是mRNA； III：是常見的形成套索結(jié)構(gòu)后剪接，大

19、多數(shù)是常見的形成套索結(jié)構(gòu)后剪接，大多數(shù)mRNA基因有此類內(nèi)含子；基因有此類內(nèi)含子； IV：是是tRNA基因及其初級轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物中的內(nèi)含子，基因及其初級轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物中的內(nèi)含子，剪接過程需酶及剪接過程需酶及ATP。414. mRNA的剪接的剪接 除去除去hnRNA中的內(nèi)含子，將外顯子連接為成熟的中的內(nèi)含子，將外顯子連接為成熟的RNA的過程稱為剪接。的過程稱為剪接。 剪接的模式：剪接的模式： 內(nèi)含子區(qū)段彎曲，使相鄰的兩個外顯子互相靠近而利內(nèi)含子區(qū)段彎曲，使相鄰的兩個外顯子互相靠近而利于剪接，稱為套索于剪接，稱為套索RNA（lariat RNA） 內(nèi)含子結(jié)構(gòu)特點：內(nèi)含子結(jié)構(gòu)特點： 大多數(shù)內(nèi)含子都以5-GU開始

20、，而其末端則為AG-OH-3。 5-GUAG-OH-3稱為剪接接口（splicing junction）或邊界序列。 剪接后，GU或AG不一定被剪除。42snRNA（small nuclear RNA） 核內(nèi)小核內(nèi)小RNA 由百余個至由百余個至300個核苷酸組成，分子中以個核苷酸組成，分子中以U含量最豐富，故以含量最豐富，故以U作分作分類命名。類命名。 現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)有現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)有snRNA U1、U2、U3、U4、U5、U6等類別。等類別。 小分子核糖核蛋白體（小分子核糖核蛋白體（ small nuclear ribonucleoprotein，snRNP）： 由由snRNA和核內(nèi)蛋白質(zhì)組成，作為和

21、核內(nèi)蛋白質(zhì)組成，作為RNA剪接的場所。剪接的場所。 剪接體或并接體（剪接體或并接體（splicesome）：）： 由由snRNP與與hnRNA結(jié)合形成套索并拉近上、下游外顯子距離的復(fù)合結(jié)合形成套索并拉近上、下游外顯子距離的復(fù)合體。體。 剪接體本身有剪接酶活性。 剪接體可以結(jié)合在hnRNA內(nèi)含子區(qū)段并使內(nèi)含子彎曲、兩斷接近，利于剪接。43剪接過程（剪接過程（A.Klessig模式）模式） （1）首先snRNP與hnRNA結(jié)合： snRNP上的U1-snRNA和U2-snRNA分別靠堿基互補關(guān)系去辨認、結(jié)合hnRNA上內(nèi)含子的5- GU和 AG-OH -3末端。 U4、U5、U6加入形成完整的剪接

22、體。 2個外顯子之間的內(nèi)含子因為與剪接體的結(jié)合而彎曲，使兩個末端互相靠近形成套索，上下游的外顯子互相靠近，有利于進行轉(zhuǎn)酯反應(yīng)。 內(nèi)含子靠近3端有一個甲基化的嘌呤核苷酸： 如3mG，是形成套索的關(guān)鍵所在。44snRNP與與hnRNA的結(jié)合的結(jié)合45UACUACA - AGUGU4U5U6E1E2U1U2UACUACA - AGUGU6E1E2U1、U4、U546（2）mRNA的剪接過程的剪接過程 除掉內(nèi)含子、連接外顯子： 兩次轉(zhuǎn)酯反應(yīng)（transesterification）UpAGpUU-OH（pppG、ppG）pG-OH（輔酶）（輔酶） pAGpUUpU pAG-OH轉(zhuǎn)酯反應(yīng)轉(zhuǎn)酯反應(yīng)1（親電

23、子攻擊）（親電子攻擊）轉(zhuǎn)酯反應(yīng)轉(zhuǎn)酯反應(yīng)2pGpG外顯子外顯子1外顯子外顯子2內(nèi)含子內(nèi)含子475. mRNA的編輯的編輯(mRNA editing) RNA編輯作用說明，基因的編碼序列經(jīng)過轉(zhuǎn)錄編輯作用說明，基因的編碼序列經(jīng)過轉(zhuǎn)錄后加工，是可有多用途分化的，因此也稱為分后加工，是可有多用途分化的，因此也稱為分化加工化加工(differential RNA processing)。48二、二、tRNA前體的后加工前體的后加工 （一）tRNA前體的后加工的內(nèi)容1切除多余的順序 （1）含單個tRNA的tRNA前體：在5端和3端各有一段多余順序； （2）含二個tRNA的tRNA前體：5端和3端有長短不一的

24、多余順序，在兩個tRNA之間還有數(shù)目不等的核苷酸隔開。 （3）有的真核tRNA前體的反密碼子環(huán)區(qū)含有一個居間順序。49RNA-pol轉(zhuǎn)錄的基因及其初級產(chǎn)物轉(zhuǎn)錄的基因及其初級產(chǎn)物T loopDHU-loopCAC虛線部分要在轉(zhuǎn)錄后加工剪除虛線部分要在轉(zhuǎn)錄后加工剪除同時在同時在3末端加上末端加上“CCA”50二、二、tRNA的轉(zhuǎn)錄后加工的轉(zhuǎn)錄后加工TGGCNNAGTGCGGTTCGANNCCDNAtRNA前體前體RNA pol 51tRNA的剪接是酶促反應(yīng)切除的剪接是酶促反應(yīng)切除 以下實驗可以推論和證實tRNA的剪接是需要酶的： 成熟的tRNA能競爭性地抑制tRNA的剪接，這是酶促反應(yīng)的特征之一。

25、 tRNA的成熟過程對溫度敏感。內(nèi)含子的核酸內(nèi)切酶由內(nèi)含子的核酸內(nèi)切酶由tRNA基因內(nèi)含子編碼基因內(nèi)含子編碼反應(yīng)需要反應(yīng)需要ATP供能供能RNaseP及內(nèi)切酶及內(nèi)切酶tRNA核苷酸轉(zhuǎn)移酶核苷酸轉(zhuǎn)移酶及連接酶及連接酶ATP522各種稀有堿基的生成各種稀有堿基的生成 （1）甲基化：如tRNA甲基轉(zhuǎn)移酶催化的反應(yīng)：嘌呤甲基嘌呤。 （2）還原反應(yīng)：UDHU。 （3）核苷內(nèi)轉(zhuǎn)位反應(yīng)：尿嘧啶核苷假尿嘧啶核苷（：psai）。 （4）脫氨基反應(yīng)：AI。 3在3-末端出去個別堿基后，再加上-CCA-OH末端，完成柄部結(jié)構(gòu)。 此反應(yīng)由核苷酸轉(zhuǎn)移酶催化。53堿基修飾堿基修飾（2）還原反應(yīng)）還原反應(yīng) 如：如：U DHU （3）核苷內(nèi)的轉(zhuǎn)