徒手切片的基本要求_第1頁(yè)
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1、、目的與要求1、學(xué)習(xí)并掌握臨時(shí)裝片的制作方法和步驟。2、學(xué)習(xí)徒手切片技術(shù)。3、了解細(xì)胞基本結(jié)構(gòu)和厚角組織的特點(diǎn)。二、材料和用品1、自備材料:解剖器(鑷子 、解剖針、單面刀片或雙面刀片);洋蔥鱗莖、青紅椒、芹菜葉柄、女貞葉片或其它植物的葉片、胡蘿卜塊等。2、其它材料和用品:顯微鏡、蓋玻片、載玻片、紗布、蒸餾水、吸水紙、10%甘油水溶液、50%甘油水溶液、純甘油、碘碘化鉀稀溶液、培養(yǎng)皿、吸管。三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容    1、臨時(shí)裝片的制作方法    2、徒手切片方法四、實(shí)驗(yàn)方法 要觀察、研究植物細(xì)胞、組織和器官的微細(xì)結(jié)構(gòu),以及一些很微小的藻、菌植

2、物等,這些用肉眼是無(wú)法看到的,必須借助于顯微鏡來(lái)觀察,要用顯微鏡觀察,首先必須制成各種制片,放在顯微鏡下才能觀察。制片的方法很多,這里著重介紹臨時(shí)裝片法和徒手切片的方法技術(shù)。1、臨時(shí)裝片的制作方法臨時(shí)裝片法是用少量的新鮮植物材料,如單個(gè)細(xì)胞、薄的表皮或切成的薄片以及其它小的或扁平的材料(如絲狀或葉狀的藻類、菌類、蕨類的原葉體和孢子囊、纖細(xì)的苔蘚植物等等),把這些材料放在載玻片的水滴中,再蓋上蓋玻片做成玻片標(biāo)本的方法。這種方法制成的標(biāo)本,可以保持材料的生活狀態(tài)和天然的色彩。此法一般多做為臨時(shí)觀察使用,也可根據(jù)需要選擇適宜的染料染色,制成永久制片或用某些化學(xué)試劑作組織化學(xué)反應(yīng)。 

3、0;  臨時(shí)裝片的制作方法和步驟如下:(1)清潔玻片:將蓋玻片和載玻片用清水洗凈,再用紗布擦干,擦玻片時(shí)用左手食指和拇指夾住玻片的兩邊,右手食指和拇指包住紗布,同時(shí)擦到的玻片的兩面,用力要均勻。注意:由于蓋玻片很薄,所以擦蓋玻片時(shí)要特別小心,用力要輕,右手食指和拇指要輕輕捻動(dòng),以免把蓋玻片捏破。(2)放置材料:先將載玻片平放在桌面上,于載玻片中央滴一滴蒸餾水或稀甘油,然后用鑷子鑷取或吸管吸取少量要觀察的材料(如洋蔥鱗葉表皮或水綿),放在載玻片中央的水滴或甘油中,再用鑷子和解剖針將材料展平或分散開(kāi),勿使材料折疊或干燥。(3)加蓋玻片及其它處理:為了避免產(chǎn)生氣泡 ,蓋蓋玻片時(shí),應(yīng)該以大拇

4、指和食指拿著蓋玻片的兩個(gè)角或用鑷子夾住其一端,使蓋玻片的一邊先與載玻片上的水滴邊緣接觸 ,而后徐徐放下另一邊,當(dāng)蓋玻片被夾持的一邊將貼近載玻片時(shí),則可放手或抽出鑷子,使其自然輕輕復(fù)蓋,這樣可以使蓋玻片下的空氣擠出,免生氣泡。注意載玻片中央的液滴要適中,既要使其充滿蓋玻片,又要不會(huì)使蓋玻片浮動(dòng)或使液滴從蓋片下外溢,假如水不夠,可用吸管小心地從蓋玻片的邊上再滴入一小滴水,使它和蓋玻片下面的水相接觸;如果水太多,溢出蓋玻片,則可用吸水紙吸去,蓋玻片的上面,一定不能被水浸濕,如果發(fā)生這種情況,應(yīng)該小心地取下蓋 玻片,擦干以后,再按上述方法重新蓋上。這樣做好的裝片,便可在顯微鏡下進(jìn)行觀察。根據(jù)需要,臨時(shí)

5、水裝片做好后還可以進(jìn)行簡(jiǎn)單的染色(例如用碘碘化鉀或番紅等來(lái)染色),其方法是直接在蓋玻片的一側(cè)加一滴染液,用吸水紙條在蓋玻片的另一側(cè)吸水,引入染液,以使蓋片下的材料染上色。注意:臨時(shí)裝片根據(jù)需要可以水封片或以甘油封片,凡用以臨時(shí)觀察,不欲久留的裝片均可用水封片,制成水裝片;需要提前半天或一天就備出的裝片或者觀察后須保留一定時(shí)間的裝片,為防止水分蒸發(fā),出現(xiàn)材料收縮現(xiàn)象,則適宜用甘油封片,制成甘油封片,用甘油封片時(shí),保留時(shí)間短者,可用10%甘油水溶液,保留時(shí)間長(zhǎng)者則須從10%甘油中再轉(zhuǎn)入50%甘油水溶液中或在此液中浸一小時(shí)后再轉(zhuǎn)入純甘油中封片。用甘油做臨時(shí)裝片的優(yōu)點(diǎn)是不僅封片保留時(shí)間長(zhǎng),且有加強(qiáng)材料

6、透明的作用。本實(shí)驗(yàn)以洋蔥(或大蔥)鱗莖內(nèi)表皮為材料,通過(guò)撕皮法做臨時(shí)裝片,用碘碘化鉀做染色劑,在觀察做片效果時(shí)同時(shí)了解細(xì)胞的基本結(jié)構(gòu),如細(xì)胞壁、細(xì)胞質(zhì)、液泡、細(xì)胞核等。2、徒手切片法 徒手切片法簡(jiǎn)稱手切片法,即手拿刀片將材料切成能在顯微鏡下觀察其內(nèi)部結(jié)構(gòu)的薄片的方法。是植物形態(tài)解剖學(xué)實(shí)驗(yàn)及研究中最簡(jiǎn)單和最常用的方法,也是最重要的基本技能之一。徒手切片的材料一般是新鮮的,有時(shí)也可用預(yù)先固定好的。這種切片方法雖然有其缺點(diǎn),如:不易做到將整個(gè)切面切得薄而完整,往往切出的片子厚薄不一;過(guò)軟過(guò)硬的材料比較難切。但其優(yōu)點(diǎn)很多,如:工具簡(jiǎn)單,只要有一把鋒利的剃刀或雙面刀片就夠了;方法簡(jiǎn)便,容易學(xué)會(huì);節(jié)省時(shí)間

7、,只要有現(xiàn)成材料,可以立刻用刀片切成薄片,當(dāng)即觀察,即便要染色,時(shí)間也不長(zhǎng);還有一個(gè)獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn)就是可以看到組織細(xì)胞內(nèi)的自然結(jié)構(gòu)和天然顏色。   徒手切片的方法見(jiàn)圖22。一般材料的徒手切片方法(1)將材料切成長(zhǎng)約23厘米的小段,削平切面。(2)左手大拇指和食指的第一關(guān)節(jié)指彎夾住材料,使之固定不動(dòng)搖。為防止刀傷,拇指應(yīng)略低于食指,并使材料上端超出手指23毫米,不可高出過(guò)多,否則切片時(shí)材料容易動(dòng)搖,也不容易切薄。(3)右手大拇指和食指捏住刀片的右下角(刀片要非常鋒利,雙面刀片必須是新用的),刀口向內(nèi),并與材料切面平行,切片前先將材料和刀口上蘸些水,使之切時(shí)滑潤(rùn)。(4)切的方法,以

8、刀口自外側(cè)左前方向內(nèi)側(cè)右后方拉切,這樣可以邊切邊看清切片的進(jìn)展情況,同時(shí)切起來(lái)也比較順手。切片時(shí)只用臂力而不要用腕力及握刀指關(guān)節(jié)的力量,左手保持不動(dòng),不要兩手同時(shí)拉動(dòng),兩手不要緊靠身體或壓在桌子上,并且動(dòng)作要敏捷,材料要一次切下,切忌中途停頓或推前拖后作“拉鋸”式切割。關(guān)鍵是要切得薄而平。如此連續(xù)切片,切下數(shù)片后,用濕毛筆將切片輕輕移入培養(yǎng)皿的清水中備用。(5)在切片過(guò)程中刀口和材料要不斷蘸水,以保持刀口鋒利和避免材料失水變形。所切的材料和刀片一定要保持水平方向,不要切斜,如果切斜,即使很薄,但由于細(xì)胞切面偏斜,同樣影響觀察。(6)切下足夠多的切片后,挑選薄而平的切片做成臨時(shí)裝片供鏡檢,必要時(shí)

9、也可以制成永久裝片。挑選切片時(shí),不一定要材料切得很完整,只要切得很薄就行,有時(shí)只要有一小部分就可以看清其結(jié)構(gòu)了,如玉米莖橫切片,只要有四分之一或者更少的小片,就可以看出內(nèi)外維管束的大小、多少及每個(gè)維管束的構(gòu)造。因此切下的切片不是每一片都適用,也不是只有全面切得薄的才能用,要根據(jù)需要進(jìn)行選擇,一次可多選幾片置于載玻片上,制成臨時(shí)裝片,通過(guò)鏡檢再進(jìn)一步選擇理想的材料用以觀察。    柔軟和堅(jiān)硬材料的徒手切片方法過(guò)于柔軟的材料,如植物的葉片或其他薄而微小的材料,難以直接執(zhí)握手切,則須夾入堅(jiān)固而易切的夾持物中切。常用的夾持物有胡蘿卜根(用胡蘿卜時(shí)可將中間硬心即木質(zhì)部切去用

10、其余部分)、土豆塊莖、接骨木的髓部及通草髓等。但須要注意的是通草髓遇水既變軟,可將其保存在酒精中備用。切前先將夾持物切成長(zhǎng)方小體,上端與縱軸垂直面削平,若被切材料屬葉狀體一類的薄片,將夾持物從上至下縱切一縫,材料夾于其中即可,如不是葉狀體,即將材料夾于其中,或根據(jù)材料不同在縫里挖一個(gè)和材料形狀相似、大小相同的凹陷,把材料夾在凹陷里。然后用手握住夾持物,采用上述方法將夾持物和其中的材料一齊切成薄片,除去夾持物的薄片,便得到材料的薄片。堅(jiān)硬的材料要經(jīng)軟化處理后再切。軟化的方法:一種是對(duì)于比較硬的材料,先把材料切成小塊,后進(jìn)行煮沸,經(jīng)34小時(shí)煮沸后,再浸入軟化劑(50%酒精甘油11)中數(shù)天至更長(zhǎng)些時(shí)

11、間,而后再切。另一種,對(duì)于已干或含有礦物質(zhì),比較更硬的材料,要先在15%氫氟酸的水溶液中浸漬數(shù)周,充分浸洗后,再置入甘油里軟化后再切。本實(shí)驗(yàn)主要以青紅椒、芹菜葉柄為材料做徒手切片練習(xí)。并通過(guò)青紅椒切片結(jié)果裝鏡觀察來(lái)了解細(xì)胞基本結(jié)構(gòu)中葉綠體和有色體;(提示:青椒切片細(xì)胞內(nèi)綠色的小顆粒為葉綠體,紅椒切片細(xì)胞內(nèi)紅色的小顆粒為有色體。)通過(guò)芹菜葉柄切片結(jié)果裝鏡觀察來(lái)了解厚角組織的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。(提示:芹菜切片在顯微鏡下觀察,在棱角處稍靠?jī)?nèi)方有一團(tuán)具有珠光色彩的組織即為厚角組織。在高倍鏡下觀察,可見(jiàn)其細(xì)胞壁厚為角隅處,其細(xì)胞壁的性質(zhì)是初生壁性質(zhì),主要成分為纖維素,有強(qiáng)烈的吸水性,故顯微鏡下有珠光色彩。)五、

12、綜合分析1、臨時(shí)裝片和徒手切片的特點(diǎn)和適用范圍各是什么?2、做臨時(shí)裝片蓋蓋玻片時(shí)應(yīng)注意什么?3、徒手切片法切取柔軟和堅(jiān)硬材料時(shí)應(yīng)怎樣進(jìn)行?六、實(shí)驗(yàn)報(bào)告       自選材料制做幾種不同材料的臨時(shí)裝片和徒手切片,寫出你所做裝片的步驟和要點(diǎn)。學(xué)案六實(shí)驗(yàn)一可溶性還原糖脂肪蛋白質(zhì)的鑒定一、 解讀兩綱1.識(shí)記鑒定實(shí)驗(yàn)所用的材料,懂得選材的要求。2.掌握實(shí)驗(yàn)原理、步驟,理解實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、方法?.學(xué)會(huì)制備生物組織樣液,正確選用鑒定試劑,并能按規(guī)范的要求操作,獨(dú)立完成鑒定工作。4.明確觀察對(duì)象,正確說(shuō)出鑒定過(guò)程中樣液的顏色變化,并能用準(zhǔn)確的語(yǔ)言解釋實(shí)驗(yàn)

13、現(xiàn)象,作出實(shí)驗(yàn)結(jié)論。5.能熟練制作徒手切片,臨時(shí)裝片和使用低倍顯微鏡,了解高倍顯微鏡的使用方法。6.具備驗(yàn)證相關(guān)生物學(xué)事實(shí)的能力,并能對(duì)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象和結(jié)果進(jìn)行解釋、分析和處理;能對(duì)一些生物學(xué)問(wèn)題進(jìn)行初步的探究性研究。二、 高考熱線1.題型以選擇題為主,也可能以簡(jiǎn)答題出現(xiàn),重點(diǎn)是以對(duì)比的方式考查相關(guān)實(shí)驗(yàn)的異同點(diǎn)。2.以教材實(shí)驗(yàn)為依據(jù),設(shè)置實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)題是今后考查的重點(diǎn),如“設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)證明淀粉酶是蛋白質(zhì)”,就是依據(jù)教材中的實(shí)驗(yàn)3的原理和步驟。三、 學(xué)法指點(diǎn)1.運(yùn)用對(duì)比的方法認(rèn)識(shí)三種物質(zhì)的鑒定原理、過(guò)程及注意事項(xiàng)。2.對(duì)比三種物質(zhì)鑒定過(guò)程中的相同點(diǎn)和不同點(diǎn),重點(diǎn)掌握試劑使用上的區(qū)別。3.根據(jù)所學(xué)的原理鑒定類似

14、物質(zhì),設(shè)計(jì)相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)程序。四、 教材梳理(一)實(shí)驗(yàn)原理生物組織中含有可溶性還原糖(如_、_、_)、脂肪、蛋白質(zhì)等化學(xué)成分,可分別與某些化學(xué)試劑作用產(chǎn)生特定的_。(1)可溶性還原糖+_試劑磚紅色沉淀 可溶性還原糖+班氏糖定性試劑_(2)脂肪+_染液染成橘黃色 脂肪+蘇丹染液染成_(3)蛋白質(zhì)+_試劑溶液呈紫色(二) 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.初步掌握鑒定可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的基本方法。(三) 實(shí)驗(yàn)材料(四)方法步驟1. 可溶性還原糖的鑒定 (1) 制備組織樣液:蘋果切塊、研磨、_。(2) 鑒定組織樣液:1 支試管+2mL_+2mL_,振蕩試管,(溶液_色?),_2min左右,觀察溶液顏色變化。(_色棕色

15、_色)。2.脂肪的鑒定(1)切片制作:用花生子葉作徒手切片。(2)染色:1塊載玻片+切片+ 3滴_染液,3min后吸去染液+ 2滴50%_溶液去浮色,吸去后+ 2滴_,蓋蓋玻片。(3)鏡檢鑒定:先用低倍鏡觀察,找到子葉最薄處,再用高倍鏡觀察。(圓形的脂肪顆粒為_(kāi)色)。3. 蛋白質(zhì)的鑒定(1) 制備樣液:大豆切片、_、_。(2) 鑒定:1 支試管+2mL黃豆組織樣液+2mL_,振蕩試管(溶液_色),+4滴_,_試管,觀察溶液顏色變化。(_色_色_色)。(五)結(jié)論與討論1.結(jié)論:從斐林試劑與蘋果樣液作用、蘇丹III染液與花生種子作用、雙縮脲試劑與大豆樣液作用的顏色變化可以得出:_。自我校對(duì) 原理:

16、葡萄糖 果糖 麥芽糖 顏色反應(yīng) 斐林 磚紅色沉淀 蘇丹III 紅色 雙縮脲 步驟:過(guò)濾 蘋果組織樣液 剛配制的斐林試劑 淡藍(lán) 水浴加熱 淡藍(lán) 磚紅 蘇丹III 酒精 蒸餾水 橘黃 過(guò)濾 雙縮脲試劑A 乳白 雙縮脲試劑B 乳白 紫色 結(jié)論與討論:蘋果、花生種子和大豆中分別含有可溶還原糖、脂肪和蛋白質(zhì) 化合物 固有顏色 磚紅 紫色 脂肪 蛋白質(zhì)2. 討論鑒定依據(jù)。因?yàn)槟承┗瘜W(xué)試劑與生物組織中的有關(guān)_發(fā)生一定的化學(xué)反應(yīng),產(chǎn)生有固定顏色的新化合物。故可根據(jù)待檢物與某些化學(xué)試劑反應(yīng)的_,如橘黃色、_色、_色等,鑒定生物組織中含有_、可溶還原糖和_。五、疑難精析1生物組織中的還原糖是指分子結(jié)構(gòu)中含有還原性

17、基團(tuán)(如游離醛基或酮基)的糖,如葡萄糖、麥芽糖、果糖,淀粉、蔗糖不具有還原性,斐林試劑只能檢驗(yàn)可溶性還原糖的存在,而不能鑒定可溶性非還原糖或不溶性糖。2可溶性還原糖鑒定實(shí)驗(yàn)的選材原則。選用可溶性還原糖含量較高的生物組織,而且組織的顏色較淺,或近于白色。常用的植物組織是:蘋果、梨、白色甘藍(lán)葉、白蘿卜。雙子葉植物光合作用的主要產(chǎn)物為淀粉,其葉不理想。有些單子葉植物,如韭菜、鳶尾等,其葉內(nèi)含有大量的可溶性單糖,但由于葉片中葉綠素顏色較深,影響鑒定時(shí)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象的觀察,也不宜作實(shí)驗(yàn)材料。3可溶性還原糖鑒定實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵性的步驟在于斐林試劑現(xiàn)用現(xiàn)配及用量。很不穩(wěn)定,故應(yīng)將組成斐林試劑的甲液(0.1gmL的NaO

18、H溶液)和乙液(0.05gmL的CuS04溶液)分別配制、儲(chǔ)存;使用時(shí),再臨時(shí)配制,將45滴乙液滴入2mL甲液中,配完混合均勻后得到淡藍(lán)色的Cu(OH)2沉淀的懸濁液立即使用。如果過(guò)早混合會(huì)產(chǎn)生Cu(OH)2沉淀,加入到組織樣液中并加熱時(shí)會(huì)產(chǎn)生黑色CuO沉淀。而臨時(shí)混合所得斐林試劑立即用于實(shí)驗(yàn),即可使新制的Cu(OH)2作氧化劑與可溶性還原糖發(fā)生氧化-還原反應(yīng),生成磚紅色的Cu2O沉淀。溶液的變化過(guò)程:淡藍(lán)色棕色磚紅色沉淀。4在可溶性還原糖的鑒定中,在對(duì)盛有組織樣液與斐林試劑混合物的試管直接用酒精燈加熱易破,因?yàn)樵嚬苁軣岵痪鶆?,若要避免此現(xiàn)象產(chǎn)生應(yīng)改用水浴加熱。此時(shí)試管底部不要觸及燒杯底部,試

19、管口不要朝向?qū)嶒?yàn)者,以免溶液沸騰時(shí)沖出試管造成燙傷。5雙縮脲試劑并不是雙縮脲分子。所謂雙縮脲是由兩分子尿素經(jīng)脫氨縮合而成的化合物。該化合物在堿性溶液中能與CuSO4反應(yīng)產(chǎn)生紫色絡(luò)合物,此反應(yīng)稱雙縮脲反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子中含有許多與雙縮脲結(jié)構(gòu)相似的肽鍵,因此也能起雙縮脲反應(yīng)。特別要提醒學(xué)生的是實(shí)驗(yàn)桌上兩瓶不同濃度的CuS04溶液,避免拿錯(cuò)。6蛋白質(zhì)鑒定實(shí)驗(yàn)中,最好選用富含蛋白質(zhì)的生物組織,植物材料常用的是大豆,動(dòng)物材料常用的是雞蛋。其關(guān)鍵性步驟在于先加雙縮脲試劑A (0.1g/mLNaOH溶液)再加雙縮脲試劑B(0.01g/mLCuSO4溶液)。如果用雞蛋白稀釋液,則濃度不宜過(guò)大,以免實(shí)驗(yàn)后粘住試管

20、壁,不易洗凈。7. 脂肪的鑒定實(shí)驗(yàn)中,實(shí)驗(yàn)材料最好選用富含脂肪的種子,其關(guān)鍵性步驟在于子葉要削成理想薄片。為了作好徒手切片,種子浸泡的時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)。也可改成刮取種子子葉泥制作臨時(shí)裝片,易做,效果又好。8. 填表比較實(shí)驗(yàn)1和3:比較項(xiàng)目試劑及成分原理溶液濃度方法加熱與否結(jié)果可溶還原糖的鑒定斐林試劑NaOH和CuSO4新配制的Cu(OH)2溶液NaOH濃度為0.1g/mL,CuS04的濃度為0.05gmL先把NaOH溶液和CuSO4溶液混合,而后立即使用。水浴加熱磚紅色沉淀蛋白質(zhì)的鑒定雙縮脲試劑NaOH和CuSO4在堿性環(huán)境下的Cu2+NaOH的濃度為0.1gmL,CuS04的濃度為O.01gmL

21、先加入Na0H溶液,然后再加CuS04溶液。(不能過(guò)量)不需要溶液呈紫色9.本實(shí)驗(yàn)為驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn),也用注意對(duì)照。如在鑒定可溶性還原糖和蛋白質(zhì)時(shí),鑒定之前需留一部分樣液,以便與鑒定后樣液顏色變化作對(duì)比。例1 用下列實(shí)驗(yàn)材料做特定實(shí)驗(yàn),從理論上講能否成功?說(shuō)明依據(jù)的道理。 (1)用韭菜葉片做可溶性還原糖的鑒定實(shí)驗(yàn); (2)用蓖麻種子做脂肪鑒定實(shí)驗(yàn); (3)用卵白做蛋白質(zhì)鑒定實(shí)驗(yàn)。解析 此題是要求根據(jù)課本實(shí)驗(yàn)原理進(jìn)行拓展和應(yīng)用,這也是近幾年高考的一個(gè)趨勢(shì)。韭菜在進(jìn)行光合作用時(shí)并不能將光合作用的產(chǎn)物葡萄糖轉(zhuǎn)變成淀粉,因此葉內(nèi)含有大量的可溶性還原糖,但是,由于葉片中葉綠素含量較多,綠色較深,對(duì)于鑒定時(shí)的顏

22、色反應(yīng)起著掩蓋作用,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象不明顯,因此不宜用這些單子葉植物作此實(shí)驗(yàn)材料;后兩個(gè)實(shí)驗(yàn)材料從理論上說(shuō)是可行的。答案:(1)用韭菜葉片做還原糖實(shí)驗(yàn)不能成功,因?yàn)槿~片內(nèi)雖然含有大量可溶性還原糖,但葉片中葉綠素含量較多,顏色較深,對(duì)鑒定時(shí)的顏色反應(yīng)起著遮蓋作用;(2)若用蓖麻種子做脂肪鑒定實(shí)驗(yàn),從理論上說(shuō)可以成功,因?yàn)樵摲N子含較多的脂肪,種子也比較大,便于進(jìn)行徒手切片;(3)由于卵白中含有大量的蛋白質(zhì),從理論上講做蛋白質(zhì)鑒定實(shí)驗(yàn)是會(huì)成功的。六、趁熱打鐵(一)選擇題1將面團(tuán)包在紗布中在清水中搓洗,鑒定黏留在紗布上的黏稠物質(zhì)和洗出的白漿用的試劑分別是( ) A. 碘液、蘇丹溶液 B雙縮脲試劑、碘液 C

23、. 亞甲基藍(lán)溶液、蘇丹 D碘液、斐林試劑2蛋白質(zhì)的鑒定時(shí),事先留出一些黃豆組織樣液的目的是 ( ) A. 與反應(yīng)后混合液的顏色做對(duì)比 B失敗后重做一遍 C. 鑒定可溶性還原糖用 D. 留下次實(shí)驗(yàn)用3用斐林試劑鑒定可溶性還原糖時(shí),溶液的顏色變化過(guò)程為 ( ) A. 淺藍(lán)色棕色磚紅色 B無(wú)色淺藍(lán)色棕色 C. 磚紅色淺藍(lán)色棕色 D. 棕色綠色無(wú)色4在鑒定可溶性糖的實(shí)驗(yàn)中,對(duì)試管中的溶液進(jìn)行加熱時(shí),操作不正確的是( ) A. 將這支試管放進(jìn)盛開(kāi)水的大燒杯中 B試管底部不要觸及燒杯底部 C. 試管口不要朝向?qū)嶒?yàn)者 D. 試管底部緊貼燒杯底部5現(xiàn)有如下實(shí)驗(yàn)材料:西瓜汁 菜籽 豆?jié){草莓果實(shí) 花生仁 雞蛋清,

24、它們與斐林試劑作用呈磚紅色、與蘇丹試劑作用呈橘黃色、與雙縮脲試劑作用呈紫色的實(shí)驗(yàn)材料分別為( ) A. 、 B、 C. 、 D、6.青蘋果汁遇碘液顯蘭色,熟蘋果汁能與斐林試劑作用產(chǎn)生磚紅色沉淀,這說(shuō)明( ) A. 青蘋果汁含有淀粉,不含有糖類 B熟蘋果汁含有糖類,不含有淀粉 C蘋果成熟時(shí),淀粉水解成單糖 D. 蘋果成熟時(shí),單糖合成淀粉7.下列關(guān)于生物組織中三大有機(jī)物的鑒定操作步驟,正確的是 ( ) A. 用于鑒定可溶性還原糖的斐林試劑,可直接用于蛋白質(zhì)的鑒定 B脂肪的鑒定需要用顯微鏡才能看到被染成橘黃色脂肪滴 C. 鑒定可溶性還原糖時(shí),要加入斐林試劑甲液搖均后再加入乙液 D. 用于鑒定蛋白質(zhì)的

25、雙縮脲試劑A液與B液要混合均勻后,再加入含樣品的試管中,且必須現(xiàn)配現(xiàn)用8某同學(xué)在顯微鏡下觀察被蘇丹染液染色后的花生種子子葉切片,當(dāng)轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋調(diào)焦距時(shí),有一部分細(xì)胞看得很清楚,另一部分細(xì)胞較模糊,這是由于 ( )A. 反光鏡沒(méi)調(diào)好 B標(biāo)本切得厚薄不均勻C. 顯微鏡物鏡損壞 D細(xì)準(zhǔn)焦螺旋未調(diào)好9可溶性還原糖的鑒定中,制備生物組織樣液時(shí)加入少許石英砂,其目的是( ) A.研磨充分 B. 防止糖被破壞 C防止反應(yīng) D.無(wú)作用10.在過(guò)氧化氫酶溶液中加入雙縮脲試劑,其結(jié)果應(yīng)是 ( ) A.產(chǎn)生氣泡 B.溶液呈紫色 C. 溶液呈藍(lán)色 D. 產(chǎn)生磚紅色沉淀11. 雙縮脲試劑可以鑒定蛋白質(zhì)是因?yàn)?( )A

26、.蛋白質(zhì)都有肽鍵 B. 蛋白質(zhì)都有氨基酸C. 蛋白質(zhì)都有羧基 D. 蛋白質(zhì)都有氨基12.(多選)下列物質(zhì)用斐林試劑檢測(cè)時(shí)可能出現(xiàn)磚紅色沉淀的是 ( ) A.葡萄糖 B果糖 C麥芽糖 D淀粉13.(多選)下列各組中前項(xiàng)為所鑒定的物質(zhì),中項(xiàng)為所使用試劑,后項(xiàng)為所產(chǎn)生的顏色。正確的是( ) A.葡萄糖、斐林試劑、橘黃色 B.脂肪、蘇丹染液、磚紅色 C.蛋白質(zhì)、雙縮脲試劑、紫色 D.淀粉、碘液、藍(lán)色二、非選擇題14做“生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定”實(shí)驗(yàn)時(shí),需根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇不同的實(shí)驗(yàn)材料。請(qǐng)根據(jù)下表所列各種材料回答問(wèn)題:各種可供實(shí)驗(yàn)的材料梨黃桃胡蘿卜黃豆種子花生種子小麥種子(1)其中適合

27、于鑒定糖的是_,理由是_。(2)小麥種子不如花生種子更適合用來(lái)鑒定脂肪,這是因?yàn)開(kāi)。但小麥種子中糖類化合物_含量很高,卻不適合用來(lái)鑒定_,這是因?yàn)開(kāi)。15在做“可溶性還原糖的鑒定”實(shí)驗(yàn)時(shí): (1)所用斐林試劑甲液的質(zhì)量濃度為_(kāi)gmL,乙液的質(zhì)量濃度為_(kāi)g/mL,如何用這兩種溶液配制斐林試劑(簡(jiǎn)要步驟)_。(2)斐林試劑甲液與乙液混合后產(chǎn)生_色沉淀,它與葡萄糖在加熱條件下發(fā)生化學(xué)反應(yīng),產(chǎn)生_色沉淀。(3)請(qǐng)解釋為什么斐林試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用,不能放置太久_。(4)做此實(shí)驗(yàn)時(shí),試管直接用酒精燈加熱易破,其原因是_,若要避免此現(xiàn)象產(chǎn)生應(yīng)改用_。16用蘋果和黃豆做實(shí)驗(yàn)材料時(shí),都需將其研磨碎,在研磨時(shí)加入少量

28、石英砂的作用是_;在研磨后二者都需要對(duì)研磨液進(jìn)行過(guò)濾,過(guò)濾的目的是除去_,在過(guò)濾中為什么只用一層紗布,不用濾紙?_。17(設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn),論證結(jié)論)請(qǐng)根據(jù)下列材料和實(shí)驗(yàn)原理,設(shè)計(jì)一個(gè)證明淀粉酶是蛋白質(zhì)的實(shí)驗(yàn)。(1) 實(shí)驗(yàn)器材:雞蛋、人的唾液、清水、0.1g/mLNaOH溶液、0.01g/mLCuSO4溶液、小燒杯、玻璃棒、試管和滴瓶。(2) 實(shí)驗(yàn)原理:雞蛋的蛋清主要成分是蛋白質(zhì),在堿性條件下,蛋白質(zhì)與CuSO4反應(yīng)產(chǎn)生紫色物質(zhì),即雙縮脲反應(yīng)。如通過(guò)實(shí)驗(yàn)再證明淀粉酶能發(fā)生雙縮脲反應(yīng),即可證明淀粉酶是蛋白質(zhì)。(3) 實(shí)驗(yàn)步驟: 第一步:制備蛋清液。取雞蛋一個(gè),打破蛋殼(不破壞蛋黃),取少許蛋清注入小燒杯

29、中,加入30mL清水,用玻璃棒攪拌均勻備用。第二步:_。第三步:_。(4) 實(shí)驗(yàn)結(jié)果:_。(5) 結(jié)果分析:_。還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定一、實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵及注意事項(xiàng)1.實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵在于實(shí)驗(yàn)材料的選擇。(1)可溶性還原糖的鑒定實(shí)驗(yàn)中,最理想的實(shí)驗(yàn)材料是含糖量較高的生物組織(或器官),而且組織的顏色較淺,或近于白色的。經(jīng)試驗(yàn)比較,顏色反應(yīng)的明顯程度依次為蘋果、梨、白色甘藍(lán)葉、白蘿卜。(2)脂肪的鑒定實(shí)驗(yàn)中,實(shí)驗(yàn)材料最好選用富含脂肪的種子,且徒手切片要成功。(3)蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn),最好選用富含蛋白質(zhì)的生物組織,植物材料常用的是大豆,動(dòng)物材料常用的是雞蛋。2.注意事項(xiàng):(1)斐林試劑很不穩(wěn)定,故應(yīng)

30、將組成斐林試劑的甲液(0.1g/mL的NaOH溶液)和乙液(0.05g/mL的CuSO溶液)分別配制、儲(chǔ)存,使用時(shí),再臨時(shí)配制,將45滴乙液滴入2mL甲液中,配完后立即使用。(2)雙縮脲試劑的使用,應(yīng)先加試劑A(0.1g/mL的NaOH溶液),造成堿性的反應(yīng)環(huán)境,再加試劑B(0.01g/mL的CuSO溶液)。(3)在鑒定可溶性糖的實(shí)驗(yàn)中,對(duì)試管中的溶液進(jìn)行加熱時(shí),試管底部不要觸及燒杯底部,另外,試管口不要朝向?qū)嶒?yàn)者,以免沸騰的溶液沖出試管,造成燙傷。(4)在蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn)中,若用蛋白質(zhì)作實(shí)驗(yàn)材料,必須稀釋,以免實(shí)驗(yàn)后粘住試管,不易洗刷。(5)在鑒定脂肪的實(shí)驗(yàn)中,若用花生種子作實(shí)驗(yàn)材料,必須提前浸泡34小時(shí),浸泡時(shí)間短了,不容易切片,浸泡時(shí)間過(guò)長(zhǎng)

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