無菌藥品包裝容器的密封性驗(yàn)證方案

1、無菌藥品包裝容器的密封性驗(yàn)證方案 制定人審核人批準(zhǔn)人日 期日 期日 期生效日期修訂日期無菌藥品包裝容器的密封性驗(yàn)證方案1.概述：無菌藥品的容器應(yīng)能在整個(gè)有效期內(nèi)有完好的密封性，防止微生物的浸入。藥品包材的設(shè)計(jì)及選擇要考察相互的配合情況。無菌容器/密封件系統(tǒng)的完整性測(cè)試可以在培養(yǎng)基灌裝時(shí)進(jìn)行。2.目的：評(píng)估產(chǎn)品包裝的密封性，以充分保護(hù)產(chǎn)品在儲(chǔ)存期的無菌狀態(tài)。3.依據(jù)：藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范2010修訂版：附錄1：第九十五條 無菌藥品包裝容器的密封性應(yīng)經(jīng)過驗(yàn)證，以避免產(chǎn)品遭受污染。4.責(zé)任：質(zhì)量部、生產(chǎn)部對(duì)本驗(yàn)證負(fù)責(zé)。5.微生物浸入試驗(yàn)法驗(yàn)證密封完整性： 往產(chǎn)品容器內(nèi)灌入培養(yǎng)基并按照常規(guī)方式壓塞封蓋

2、，滅菌后冷卻備用。將冷卻后的容器倒置并將瓶口完全浸沒于高濃度（108CFU/ml）的運(yùn)動(dòng)性菌液中，4小時(shí)后，將容器外表面消毒并培養(yǎng)，看是否有挑戰(zhàn)性細(xì)菌在容器內(nèi)生長。 多準(zhǔn)備一些灌裝培養(yǎng)基的樣品，在與產(chǎn)品相同地的貯存條件下貯存。在貯存的一定時(shí)間間隔（12,24，36和48個(gè)月等），取出部分樣品，進(jìn)行微生物浸入試驗(yàn)，以確定密封系統(tǒng)在貯存期內(nèi)的有效性。6.范圍：西林瓶、膠塞及鋁蓋的密封性驗(yàn)證，共有10ml及2ml兩種規(guī)格。 7.用品：膽鹽乳糖培養(yǎng)基 銅綠假單胞菌（ATCC 9027） 乙酸 異丙醇 8.實(shí)施：8.1制備樣品： 取已經(jīng)按相應(yīng)清洗滅菌操作規(guī)程制備好的西林瓶、膠塞及鋁塑組合蓋150套，西林

3、瓶內(nèi)灌裝入已滅菌的膽鹽乳糖培養(yǎng)基，在正常生產(chǎn)線上抽真空、壓塞、軋蓋。將每一試樣品倒轉(zhuǎn)，使培養(yǎng)基與西林瓶內(nèi)表面及膠塞充分接觸，在3035豎立倒置培養(yǎng)14天，培養(yǎng)基應(yīng)澄清，無菌落生長。8.2制備微生物菌懸液：從銅綠假單胞菌（ATCC 9027）的新鮮斜面上取培養(yǎng)物，分別接入含6ml無菌膽鹽乳糖培養(yǎng)基的試管中，在3035下培養(yǎng)1824h；將每管的培養(yǎng)物分別轉(zhuǎn)入含600ml相同培養(yǎng)基的容器內(nèi)，于3035下培養(yǎng)（約24小時(shí)），在培養(yǎng)結(jié)束時(shí)，能明顯見容器內(nèi)培養(yǎng)基出現(xiàn)渾濁，計(jì)數(shù)，當(dāng)菌落數(shù)大于108CFU/ml時(shí)，停止培養(yǎng)，待用（在微生物侵入試驗(yàn)開始，所用菌懸液濃度（活菌數(shù)）必須達(dá)到1×108CFU

4、/ml。）。8.3營養(yǎng)試驗(yàn)：該實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖谴_認(rèn)膽鹽乳糖培養(yǎng)基對(duì)銅綠假單胞菌促菌生長能力。所有樣品培養(yǎng)14天均不長菌時(shí)，從上述8.1試驗(yàn)樣品中隨機(jī)取20個(gè)帶蓋試驗(yàn)樣品，每個(gè)試驗(yàn)樣品內(nèi)接種100CFU銅綠假單胞菌。在3035下培養(yǎng)7天，或培養(yǎng)至所有試樣品都呈陽性結(jié)果。結(jié)果判斷：若7天內(nèi)，所有接種銅綠假單胞菌的試驗(yàn)樣品中，微生物生長良好，則容器內(nèi)培養(yǎng)基的促菌生長能力可判為合格。使用革蘭染色鏡檢，置于紫外燈下，培養(yǎng)基呈藍(lán)綠色熒光，則確認(rèn)試驗(yàn)樣品容器內(nèi)生長的菌為接入的銅綠假單胞菌，即為陽性。 若7天內(nèi)，所有接種銅綠假單胞菌的試樣品中，微生物生長條件不好或經(jīng)鑒別后受其它菌種污染，則試驗(yàn)失敗，需重新作營養(yǎng)試驗(yàn)

5、。8.4微生物侵入試驗(yàn)：將銅綠假單胞菌（ATCC 9027）的菌懸液倒入適當(dāng)?shù)娜萜鲀?nèi)，從上述8.1樣品中取100只試驗(yàn)樣品倒置于菌懸液中,使試樣容器內(nèi)的培養(yǎng)基充分接觸封口內(nèi)表面，樣品的頸部及封口的外表面應(yīng)完全浸泡在菌懸液中（如圖1所示）。圖1微生物挑戰(zhàn)試驗(yàn)示意圖將試驗(yàn)樣品在菌懸液中持續(xù)浸泡約4h后，取出試驗(yàn)樣品，擦干容器外殘余的菌懸液，其外表用含0.5%過乙酸的70%異丙醇消毒五分鐘（注意不要破壞其密封口），放入塑料袋中，置3035下培養(yǎng)7天。檢查試驗(yàn)樣品內(nèi)微生物生長情況，有生長記作“”，無生長記作“”。陽性對(duì)照： 陽性對(duì)照試驗(yàn)樣品不經(jīng)菌懸液浸泡，其外表用含0.5%過乙酸的70%異丙醇消毒五分鐘后，接種10100CFU銅綠假單胞菌，進(jìn)行陽性對(duì)照試驗(yàn)。8.5結(jié)果評(píng)價(jià)要求:營養(yǎng)試驗(yàn)和陽性對(duì)照試驗(yàn)都合格，微生物侵入試驗(yàn)才有效。挑戰(zhàn)試驗(yàn)中如有長菌，需記錄長菌的瓶數(shù)并須按下述要求作進(jìn)一步調(diào)查。仔細(xì)去除微生物生長的容器的蓋和塞，檢查容器封口是否有缺損，造成微生物侵入。將觀察到試驗(yàn)樣品封口的缺陷，采用拍照或其他適當(dāng)方式詳細(xì)記錄。如果任何挑戰(zhàn)試驗(yàn)中長菌的試驗(yàn)樣品不是由于容器封口明顯的物理性缺損所致，容器密封性挑戰(zhàn)試驗(yàn)作失敗論。 9注意事項(xiàng)：微生物侵入試驗(yàn)用菌懸液經(jīng)滅菌后丟棄。在培養(yǎng)期內(nèi)，當(dāng)試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)任何帶蓋試樣品長菌時(shí)，則試驗(yàn)無效，須棄去全部試樣品，