淋巴細(xì)胞標(biāo)志檢測(cè)

1、會(huì)計(jì)學(xué)1淋巴細(xì)胞標(biāo)志檢測(cè)淋巴細(xì)胞標(biāo)志檢測(cè)人外周血人外周血(peripheral blood )(peripheral blood )白細(xì)胞分離白細(xì)胞分離人外周血單個(gè)核細(xì)胞人外周血單個(gè)核細(xì)胞（peripheral blood peripheral blood mononuclear cellsmononuclear cells，PBMCPBMC）的分離的分離加入對(duì)倍稀釋的血液樣本加入對(duì)倍稀釋的血液樣本 水平式離心水平式離心20min時(shí)結(jié)果時(shí)結(jié)果(1.0770.001g/L)l 分離人外周血淋巴細(xì)胞以密度為分離人外周血淋巴細(xì)胞以密度為1.0770.001/g/LPercollPercoll混懸液混

2、懸液( (處理過(guò)的硅膠顆粒處理過(guò)的硅膠顆粒) )原液密度原液密度(density)(density)為為1.135g/L+1.135g/L+等量等量PBS, PBS, 高速離心高速離心 (centrifugation)(centrifugation)由下而上的逐減的連續(xù)密度梯度由下而上的逐減的連續(xù)密度梯度(density gradient)(density gradient)淋巴細(xì)胞純度淋巴細(xì)胞純度98%, 98%, 單核細(xì)胞純度單核細(xì)胞純度78%78%流程長(zhǎng)流程長(zhǎng), , 步驟繁步驟繁, , 成本高成本高人外周血淋巴細(xì)胞人外周血淋巴細(xì)胞(亞群亞群)的分純的分純(purificcation)(p

3、urificcation)磁性微珠磁性微珠磁性微珠是以金屬離子為核心，外層均勻包磁性微珠是以金屬離子為核心，外層均勻包裹高分子聚合體的固相顆粒。裹高分子聚合體的固相顆粒。磁性微珠上既可標(biāo)記針對(duì)某種細(xì)胞表面抗原磁性微珠上既可標(biāo)記針對(duì)某種細(xì)胞表面抗原的特異性抗體（直接法）的特異性抗體（直接法）; 也可標(biāo)記羊抗也可標(biāo)記羊抗鼠鼠IgG抗體抗體(間接法），使分離細(xì)胞的范圍間接法），使分離細(xì)胞的范圍大大擴(kuò)大大大擴(kuò)大熒光激活細(xì)胞分離儀原理熒光激活細(xì)胞分離儀原理(principle)(principle)（fluorescence activated cell sorterfluorescence activ

4、ated cell sorter，F(xiàn)ACSFACS）Intradermal injectionIntradermal injectionImmediate Immediate (within 20 (within 20 min)min)Late Late (at 4-12 (at 4-12 hours)hours)Delayed Delayed (24-48 (24-48 hours)hours)Chemotactic index Chemotactic index (CI) = (CI) = 趨化移動(dòng)距離趨化移動(dòng)距離(A)/(A)/自發(fā)移動(dòng)距離自發(fā)移動(dòng)距離(B)(B)趨化指數(shù)與細(xì)胞的定趨化指數(shù)與細(xì)胞的定向移動(dòng)能力呈正相關(guān)向移動(dòng)能力呈正相關(guān) (瓊脂糖凝膠平板法瓊