不孕不育相關(guān)實驗室檢測PPT學習教案

1、會計學1不孕不育相關(guān)實驗室檢測不孕不育相關(guān)實驗室檢測免疫性不孕不育相關(guān)抗體先天因素引起的不孕不育第1頁/共33頁不孕癥不孕癥：婚后未避孕、有正常性生活、同居二年而未 曾受孕者。不育癥不育癥：指性功能正常、未采取避孕措施一年以上而 不能使女方懷孕者。第2頁/共33頁 不孕不育并不是一個單一疾病，而是150多種疾病的綜合臨床表現(xiàn)。很多因素都可以造成男女不孕不育，有40 %的男性出現(xiàn)問題會導致不孕不育，有50%的女性出現(xiàn)問題會導致不孕不育，另有10%為不明原因造成的不孕不育。WHO/HRD統(tǒng)計顯示，全球不孕不育夫婦已達60008000萬對。在中國不孕不育疾病也日漸高發(fā)，據(jù)統(tǒng)計每八對夫妻中就有一對不孕

2、不育夫婦。第3頁/共33頁 根據(jù)不孕的性質(zhì)可分為生理性不孕和病理性不孕。在 青春前期、哺乳期和絕經(jīng)期的不孕稱為生理性不孕。由于各種疾病引起的不孕稱為病理性不孕。 根據(jù)是否有過妊娠史可分為原發(fā)性不孕和繼發(fā)性不孕?；楹蠖陜?nèi)從未妊娠者稱為原發(fā)性不孕。曾有妊娠而后來有規(guī)律的性生活未采用避孕措施，連續(xù)二年不孕者稱繼發(fā)性不孕。 根據(jù)是否有懷孕的可能分為絕對不孕和相對不孕。夫婦雙方或雙方有先天或后天、解剖或生理方面有缺陷且無法糾正而不能妊娠稱為絕對不孕。夫婦一方或雙方因某些因素阻礙受孕，導致暫時不孕，一旦得到糾正仍能受孕者稱為相對不孕。 第4頁/共33頁4、根據(jù)引起女性不孕的病變器官的不同可分為卵巢性不孕

3、、輸卵管性不孕、子宮性不孕、子宮頸性不孕及外陰和異常性不孕。 5、先天性生殖系統(tǒng)發(fā)育性不孕。 6、免疫性不孕。免疫性不孕。 7、諸多降低生育能力因素導致的不孕。 8、醫(yī)源性不孕。 9、非特異性、特異性及性傳播性感染性不孕。 第5頁/共33頁按不育病史分類： 可分為原發(fā)性不育與繼發(fā)性不育。前者指婚后從未有過生育，后者指曾有一次或幾次生育，以后三年以上，沒有采用避孕措施，仍未再有生育者； 2. 按治療可能性分類：可分為絕對性不育和相對性不育。無治療成功希望的不育癥稱絕對性不育，有治療成功希望的不育癥稱相對性不育； 3. 按病因性質(zhì)分類：可分為性不育和病理性不育、品質(zhì)性不育和功能性不育、先開性不育和

4、后天性不育； 4. 按引起不育的病因分類：按可分為干擾不同的生殖環(huán)節(jié)性不育及精液檢驗的異常狀態(tài)性不育。 第6頁/共33頁女子十三關(guān)排查技術(shù)：女子十三關(guān)排查技術(shù)： 陰道檢查、宮頸檢查、子宮檢查、輸卵管檢查、卵巢檢查、盆腔檢查、內(nèi)分泌檢查、性激素檢查、免疫因素檢查、全身性因素檢查、精神因素及心理因素檢查、先天性因素檢查、排卵功能檢查、超聲波B超檢查,四項檢查 第7頁/共33頁男子十四關(guān)排查技術(shù)：男子十四關(guān)排查技術(shù)： 尿道檢查、前列腺檢查、精囊輸精管檢查、附睪檢查、睪丸檢查、性激素檢查、性功能檢查、射精功能檢查、免疫因素檢查、內(nèi)分泌檢查、精索靜脈曲張檢查、創(chuàng)傷檢查、放射因素檢查、精子質(zhì)量檢查 、先天

5、性因素檢查。第8頁/共33頁免疫性不孕癥診斷標準：免疫性不孕癥診斷標準：1、不孕期超過3年。2、排除不孕的其他原因。3、可靠的檢測方法證實體內(nèi)存在不孕不育抗體。4、體外實驗證實抗生育免疫干擾精卵結(jié)合。滿足前3項可做出診斷，同時滿足4項可確診?？梢?，檢測不孕不育抗體是免疫性不孕癥的重要診斷依據(jù)。第9頁/共33頁定義定義：精子、精漿、透明帶和卵巢等生殖系統(tǒng)抗原在特定情況下均可產(chǎn)生自身免疫或同種免疫，引發(fā)機體產(chǎn)生相應的抗體，阻礙精子與卵子的結(jié)合或受精卵著床導致不孕；或影響胎盤發(fā)育導致不育。第10頁/共33頁臨床意義臨床意義：不孕不育抗體對于原發(fā)性與繼發(fā)性不孕癥、反復自然流產(chǎn)、葡萄胎、宮外孕、子宮內(nèi)膜

6、異位癥、月經(jīng)紊亂、繼發(fā)性閉經(jīng)、卵巢功能早衰等疾病的診斷治療、預后判斷均具有很高價值。第11頁/共33頁抗精子抗體抗子宮內(nèi)膜抗體抗心磷脂抗體抗滋養(yǎng)層細胞膜抗體抗HCG抗體抗卵巢抗體抗透明帶抗體第12頁/共33頁ASAb既可在男性體內(nèi)又可在女性體內(nèi)產(chǎn)生。ASAb的陽性率占不孕不育患者的24.4%，而且陽性率女性略大于男性，這可能與女性生殖道更易感染損傷引起炎癥，使女性生殖道屏障受到破壞的因素有關(guān)。 第13頁/共33頁(1)抗精子頭部的抗體可干擾精子獲能及頭粒反應。 (2)細胞毒抗體在補體參與下使精子細胞膜損傷，精子死亡，抗精子尾干的抗體抑制精子活動。 (3)抗精子抗體的Fc段與宮頸粘液糖蛋白結(jié)合，

7、干擾精子穿過排卵期宮頸粘液。 (4)抗精子抗體的調(diào)理作用增強生殖道局部吞噬細胞對精子的吞噬作用。 (5)抗精子頭部的抗體能阻止精子與透明帶及卵細胞膜結(jié)合，抑制受精。抗精子抗體干擾生育的環(huán)節(jié)抗精子抗體干擾生育的環(huán)節(jié)第14頁/共33頁 當女性子宮內(nèi)膜有炎癥時，可轉(zhuǎn)化成抗原或半抗原，刺激機體 自身產(chǎn)生相應的抗體。 人工流產(chǎn)刮宮時，胚囊也可能作為抗原刺激機體產(chǎn)生抗體。便會導致不孕、停孕或流產(chǎn)。 不少女性因在初次妊娠時作了人工流產(chǎn)，而繼發(fā)不孕，這種繼發(fā)不孕患者多數(shù)是因體內(nèi)產(chǎn)生抗子宮內(nèi)膜抗體所致不孕。 抗子宮內(nèi)膜抗體的靶抗原是子宮內(nèi)膜腺上皮激素依賴蛋白，EMAb與靶抗原結(jié)合后可干擾受精卵植入，導致不育。第

8、15頁/共33頁ACL抗體確切的致病機制不清楚。ACL抗體陽性者發(fā)生反復自然流產(chǎn)的多于ACL抗體陰性者在ACL抗體陽性的孕婦中，發(fā)生胎兒生長遲緩的幾率約為 %左右，而在ACL抗體陰性孕婦中，胎兒生長遲緩的發(fā) 生率僅為1.7%左右。第16頁/共33頁在合體滋養(yǎng)層漿膜上有可被母體識別的抗原系統(tǒng)，它們的存在影響著孕婦與胎兒之間的免疫平衡。研究表明在不明原因流產(chǎn)的婦女血清中，抗滋養(yǎng)層細胞膜抗體比正常孕婦明顯增高?？棺甜B(yǎng)層細胞抗體的檢測，主要作為反復流產(chǎn)患者的輔助診斷指標。如果是曾經(jīng)有流產(chǎn)史的女性結(jié)果屬于陽性，應該在轉(zhuǎn)陰之后考慮懷孕。第17頁/共33頁HCG是由合體滋養(yǎng)細胞層分泌的妊娠期特有的激素，其

9、主要功能是維持妊娠黃體。此外，hCG還可防止胎 兒滋養(yǎng)細胞被母體血液中的抗體及免疫活性細胞識 別而被排斥，故對胎兒有免疫保護作用。母體淋巴 細胞的排斥反應主要是通過抑制hCG抗體來實現(xiàn)的 ,若這種抑制被減弱，導致抗體含量增加，則這種保 護作用將受到破壞，從而引起不育。第18頁/共33頁它是由自身免疫系統(tǒng)將患者卵巢組織作為抗原而引起的自身免疫反應。AoAb可多方面影響卵巢功能:(1)包裹卵細胞,影響其排出或阻止精子穿入;(2)AoAb在補體作用下產(chǎn)生細胞毒作用,破壞卵巢細胞,還能干擾孕卵破殼而妨礙著床;(3)影響卵巢內(nèi)分泌功能;(4)使T淋巴細胞浸潤導致卵巢局部類促性腺樣物質(zhì)增多,引起下丘腦-垂

10、體-卵巢軸功能紊亂,間接影響卵泡發(fā)育第19頁/共33頁抗透明帶抗體通過下述途徑干擾生育：封閉精子受體，妨礙精子與透明帶結(jié)合;使透明帶變硬，有時即使受精，也因透明帶不能自受精卵表面脫落而干擾著床?？捎糜诓辉邪Y、卵巢功能早衰的輔助診斷。第20頁/共33頁1、染色體核型分析2、Y染色體微缺失第21頁/共33頁染色體異常染色體異常 從11個出版物的資料庫統(tǒng)計男性不育患者9766人，染色體異常的發(fā)病率為5.8%，其中性染色體異常4.2%，常染色體異常1.5% 。 少精或者無精者， 常見的病情為染色體結(jié)構(gòu)或數(shù)目異常，其中有KIinefelter綜合征、四倍體8%、染色體畸變率6%、微核率5、 核型雖為46

11、XY，但Y染色體17號染色體、核型47XY+ESC1等。第22頁/共33頁外周血染色體核型分析 400條帶 標本要求：全血5ml，肝素抗凝。 第23頁/共33頁第24頁/共33頁 染色體是最短的近端著絲粒染色體 ,是男性特有的染色體。1976年 ,研究發(fā)現(xiàn) Y染色體長臂上存在與精子發(fā)生相關(guān)的基因 ,人們把這一區(qū)域稱作無精子因子 ,亦稱 AZF區(qū) ；1996年將 AZF區(qū)劃分為 3個區(qū):AZFa、AZFb、AZFc1999 年研究發(fā)現(xiàn)在 AZFb 和 AZFc 間存在AZFd。研究 發(fā)現(xiàn) ,在 Y染色體 AZFa、 AZFb、 AZFc3個區(qū)至少發(fā)現(xiàn) 15個與精子發(fā)生相關(guān)的基因，AZFd區(qū)尚未發(fā)

12、現(xiàn)相關(guān)基因。第25頁/共33頁二 、Y染色體微缺失與精液質(zhì)量無精子基因（AZFa AZFb AZFC)AZFa缺失患者 33%為嚴重少精子,67%表現(xiàn)為無精子；AZFb缺失患者 9%輕度少精子, 23%嚴重少精子 , 68%無精子；AZFc缺失患者 46%嚴重少精子 , 54%無精子；第26頁/共33頁臨床檢測應用及結(jié)果釋疑：對無精子癥或嚴重少精子癥患者進行AZF檢測1、AZFa大片段缺失病理表現(xiàn)為唯支持細胞綜合癥（SCOS），無精原細胞出現(xiàn),無精子生成。 2、AZFb缺失通常表現(xiàn)為精子生成受阻,與無精子或嚴重少精子相關(guān)。 3、AZFc缺失表現(xiàn)為一些精原細胞出現(xiàn) ,并有有限的精子生成或精子生成很少。 第27頁/共33頁臨床意義有兩點： 第一：通過檢查可以使這些原因不明的無精子癥或嚴重少 精子癥患者明確病因，減少一些無謂“治療”；第二：如果上述這些病人希望通過輔助生育技術(shù)達到生育目的者，是一項必須檢測的項目，AZF缺失可以垂直傳遞給男性后代,其后代也存在不育的可能。盡量選擇女嬰， 切斷遺傳途徑。第28頁/共33頁歐洲男科協(xié)會( E A A ) 和歐洲分子遺傳實驗質(zhì)控網(wǎng)(EMQN) 在1999、2004年先后頒布了第 1版和第 2版 Y染色體 微缺失分子診斷指南，規(guī)范了檢測微缺失時的Y染色體序列標簽點( s e q u e n c e t a r