自身免疫性肝病血清學(xué)檢測

1、自免肝血清學(xué)實驗室檢測技術(shù)與臨床意義自免肝血清學(xué)實驗室檢測技術(shù)與臨床意義 概述： 自身免疫性肝病是以肝臟為相對特異性免疫病理損傷器官的一類自身免疫性疾病，主要包括：自身免疫性肝炎(AIH)、原發(fā)性膽汁性肝硬化(PBS)和原發(fā)性硬化性膽管炎(PSC)以及這三種疾病中任何兩者之間的重疊綜合征，常同時合并肝外免疫性疾病。其診斷主要依據(jù)特異性生化異常，自身抗體及干組織特征。自身免疫性肝病自身免疫性肝病自身免疫性肝病發(fā)病情況（中國）自身免疫性肝病發(fā)病情況（中國）長期缺乏臨床流行病學(xué)研究長期缺乏臨床流行病學(xué)研究病毒性肝炎高發(fā)國家病毒性肝炎高發(fā)國家掩蓋自免肝真實患者掩蓋自免肝真實患者臨床對自免肝自身抗體檢測

2、臨床對自免肝自身抗體檢測臨床意義認識不足，開展不臨床意義認識不足，開展不普及，嚴重影響診斷、治療普及，嚴重影響診斷、治療臨床少見病臨床少見病錯誤認識錯誤認識AIH臨床分類及特異性自身抗體臨床分類及特異性自身抗體類型類型相關(guān)抗體相關(guān)抗體靶抗原靶抗原I型型抗平滑肌抗體（抗平滑肌抗體（ASMA）抗核抗體（抗核抗體（ANA）抗肝可溶性抗肝可溶性/肝胰抗原抗體（肝胰抗原抗體（SLA/LP)F-肌動蛋白肌動蛋白細胞核抗原細胞核抗原UGA-絲氨酰絲氨酰tRNA蛋白復(fù)蛋白復(fù)合物合物II型型抗肝腎微粒體抗肝腎微粒體1型抗體（型抗體（LKM-1）抗肝細胞溶質(zhì)抗原抗肝細胞溶質(zhì)抗原1型抗體（型抗體（LC-1)細胞色素

3、細胞色素P450 IID6亞胺甲基轉(zhuǎn)移酶和環(huán)化脫亞胺甲基轉(zhuǎn)移酶和環(huán)化脫氨酶氨酶PBC相關(guān)自身抗體及抗原相關(guān)自身抗體及抗原熒光表現(xiàn)熒光表現(xiàn)相關(guān)抗體相關(guān)抗體對應(yīng)靶抗原對應(yīng)靶抗原胞漿顆粒胞漿顆粒型型抗線粒體抗體（抗線粒體抗體（2型常見）型常見）（AMA-2）丙酮酸脫氫酶復(fù)合物丙酮酸脫氫酶復(fù)合物核點型核點型抗抗sp100抗體抗體sp100核膜型核膜型抗抗gp210抗體抗體抗抗Lamin蛋白及受體抗體蛋白及受體抗體核孔復(fù)合體糖蛋白核孔復(fù)合體糖蛋白Lamin蛋白及其受體蛋白及其受體l PBC主要為女性高發(fā)（男女比例為主要為女性高發(fā)（男女比例為1:9），且年齡在），且年齡在50歲左歲左右右l 90-95%患

4、者可檢測到患者可檢測到AMA，而且抗體早于臨床癥狀出現(xiàn)（，而且抗體早于臨床癥狀出現(xiàn)（50-60%患者通常無癥狀）患者通常無癥狀）l 2-4年后，年后，2/3患者開始出現(xiàn)明顯臨床表現(xiàn)患者開始出現(xiàn)明顯臨床表現(xiàn)l 應(yīng)用重組抗原檢測應(yīng)用重組抗原檢測AMA陽出現(xiàn)陽性時，事實上可以診斷為陽出現(xiàn)陽性時，事實上可以診斷為PBC或者至少可以提示該患者在或者至少可以提示該患者在5-10年內(nèi)具有年內(nèi)具有PBC發(fā)病的高發(fā)病的高風(fēng)險風(fēng)險AMA與與PBC診斷診斷N Engl J Med 2005;353:1261-73.IFAIFA：多個基質(zhì)組合：多個基質(zhì)組合大鼠肝大鼠腎大鼠胃腎實質(zhì)腎髓質(zhì)肝組織胃組織LIA：靶抗原確認實

5、驗：靶抗原確認實驗l 幾乎涵蓋所有自免肝相關(guān)抗體l 每膜條對應(yīng)一份樣本l 一次實驗完成多個指標檢測l 結(jié)果穩(wěn)定可靠l 可肉眼判讀，也借助軟件實現(xiàn)數(shù)字化判讀微孔板微孔板ELISA 間接免疫熒光法（IFA）： 是檢測自身免疫性肝病相關(guān)自身抗體的常規(guī)方法，結(jié)合多種不同組織基質(zhì)的熒光表現(xiàn)，可區(qū)分多種不同的自身抗體，但該方法要求實驗工作人員具有足夠的熒光結(jié)果判讀經(jīng)驗才能避免主觀性和隨意性，還有熒光設(shè)備的要求。實驗室方法學(xué)比較（一） 條帶酶免分析法(LIA)： 多個抗原同時包被在一個膜條上，一次血清溫育實現(xiàn)多個靶抗原的確認實驗； 幾乎涵蓋了所有常見的自免肝相關(guān)抗體； 操作簡單，易于判讀； 每一膜條檢測一份

6、樣本，最大限度降低試劑成本； 通過軟件實現(xiàn)結(jié)果的數(shù)字判讀和保存。實驗室方法學(xué)比較（二） 酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)： 可特異性的開展靶抗原確認實驗； 篩查產(chǎn)品在一個微孔中同時包被了6種抗原，一次實驗可完成6種最常見的抗體篩查檢測； 操作簡單，可實現(xiàn)定量結(jié)果； 實驗室方法學(xué)比較（三）姓名姓名性別性別年齡年齡科室科室采樣時間采樣時間檢測項目檢測項目樣本特點樣本特點病案號病案號申請醫(yī)生申請醫(yī)生送檢時間送檢時間項目編號項目編號項目名稱項目名稱結(jié)果結(jié)果參考值參考值單位標識單位標識 1AMA-2陽性陽性陰性陰性 2LKM-1陰性陰性陰性陰性 3LC-1陰性陰性陰性陰性 4SLA/LP陽性陽性陰性陰性 5

7、sp100陰性陰性陰性陰性 6gp210陽性陽性陰性陰性 7Ro52陰性陰性陰性陰性 8CENP陰性陰性陰性陰性正確解讀自免肝實驗報告單正確解讀自免肝實驗報告單抗核抗體（ANA）：是AIH最常見的自身抗體，主要出現(xiàn)在型AIH中（陽性率75%），并且常與抗平滑肌抗體ASMA同時出現(xiàn)（85-90%）；ANA對AIH不具有診斷特異性，可見于多種結(jié)締組織疾病和其它自身免疫性疾病。如果ANA與ASMA同時出現(xiàn)，則高度提示AIH?？蛊交】贵w（ASMA）：主要出現(xiàn)在型AIH中（陽性率40-90%），在AIH中，ASMA表現(xiàn)為高滴度（1:320），以IgG型為主，特異性靶抗原為F-肌動蛋白?？箍扇苄愿慰乖?

8、肝胰抗原（SLA/LP）抗體：是自身免疫性肝炎（AIH）最特異的診斷標志。雖然它的陽性率只有10-30%，但其陽性預(yù)告值幾乎為100%。如果出現(xiàn)相應(yīng)的臨床癥狀，每一個陽性結(jié)果基本上可診斷AIH?？垢文I微粒體（LKM-1）抗體：已知的抗LKM抗體的靶抗原有3型（LKM-1 、LKM-2、 LKM-3）.其中LKM-1抗體為型AIH的標志，陽性率為7%，在兒童中的陽性率略高。自免肝實驗室檢測意義（一）抗肝細胞溶質(zhì)抗原1型（LC-1）抗體：抗LC-1抗體為型AIH的另一個特異性標志，在型AIH中的陽性率為48%，特異性高達99%，抗LC-1抗體在型AIH中既可單獨出現(xiàn)（30-40%），也可與抗LKM

9、-1抗體等其它自身抗體一起出現(xiàn)（60-70%），抗LC-1抗體對AIH的特異性高于抗LKM-1抗體?？咕€粒體抗體M2：是診斷原發(fā)性膽汁性肝硬化（PBC）的高度特異性和敏感的指標，陽性率為94%。抗核點（sp100）抗體：通常間接免疫熒光法可在三分之一的PBC患者中檢測到ANA抗體，部分被確認為PBC患者特異性ANA靶抗原，包括核點型熒光表現(xiàn)的早幼粒細胞白血病蛋白（PML）和Sp100，以及與核膜型特異性相關(guān)的核孔復(fù)合體組分gp210.抗GP210抗體的檢測有助于PBC的早期診斷,并且與PBC的預(yù)后有關(guān),該抗體對PBC預(yù)后的影響與其持續(xù)的時間有關(guān)。自免肝實驗室檢測意義（二）抗SS-A（Ro52）抗體在自身免疫性疾病中是一個非特異性指標，與多種自身免疫性疾病都有相關(guān)性，在很多疾病處于穩(wěn)定期、控制好的情況下會顯示陰性；如果陽性會提示復(fù)發(fā)或者優(yōu)先于其它指標預(yù)警，起到預(yù)防提示作用。此指標合并其它指