致病性病毒對(duì)食品污染

1、+開(kāi)始前一起看個(gè)視頻吧：n我不想說(shuō)我是一只雞nhttp:/ n2.諾瓦克病毒（Norwalk virus）n3.甲肝病毒（HAV）n4.禽流感病毒+瘋牛病的爆發(fā)：n20世紀(jì)80年代中期至90年代中期是瘋牛病暴發(fā)流行期，主要的發(fā)病國(guó)家如英國(guó)及其他歐洲國(guó)家有大量的?；疾〔⒈辉讱?，發(fā)生瘋牛病國(guó)家的牛肉及牛肉制品的出口受到了嚴(yán)格的限制。n英國(guó)是發(fā)生瘋牛病最多的國(guó)家，1999年統(tǒng)計(jì)占總發(fā)病數(shù)的99。到2000年7月，在英國(guó)有超過(guò)34000個(gè)牧場(chǎng)的17.6萬(wàn)多頭牛感染了此病，最高發(fā)病時(shí)間是在1993年1月，每月至少有1000頭牛發(fā)病。截至到2002年，英國(guó)共屠宰病牛1100多萬(wàn)頭，經(jīng)濟(jì)損失達(dá)數(shù)百億英鎊 。

2、+一、瘋牛病朊病毒n瘋牛病 (“mad cow” disease) 學(xué)名為“牛海綿狀病” ，簡(jiǎn)稱(chēng)BSE。n醫(yī)學(xué)家們發(fā)現(xiàn)BSE的病程一般為1490天，潛伏期長(zhǎng)達(dá)46年，多發(fā)生在4歲左右的成年牛身上n癥狀：煩躁不安，對(duì)聲音和觸摸，尤其是對(duì)頭部觸摸過(guò)分敏感，步態(tài)不穩(wěn)，經(jīng)常亂踢以至摔倒、抽搐、強(qiáng)直性痙攣，糞便堅(jiān)硬，兩耳對(duì)稱(chēng)性活動(dòng)困難，呼吸頻率增快，體重下降，極度消瘦以至死亡。+人類(lèi)瘋牛病 “克雅二氏病”n受瘋牛病危害的不僅是牛，人若食用了被污染了的牛肉、牛脊髓等，也有可能染上克羅伊茨費(fèi)爾德雅各布氏癥（克雅氏癥），簡(jiǎn)稱(chēng)CJD是一種罕見(jiàn)的致命性海綿狀腦病。n據(jù)專(zhuān)家們統(tǒng)計(jì)，每年在100萬(wàn)人中只有一個(gè)會(huì)得CJ

3、D?；颊咭阅贻p人為主，發(fā)病時(shí)間平均為14個(gè)月。n其典型臨床癥狀：出現(xiàn)癡呆或神經(jīng)錯(cuò)亂，視覺(jué)模糊，平衡障礙，肌肉收縮等。病人最終因精神錯(cuò)亂而死亡。截至截至20032003年底累計(jì)已有年底累計(jì)已有至少至少137137人人死于新型克雅氏癥，死于新型克雅氏癥，其中多數(shù)在英國(guó)其中多數(shù)在英國(guó)。+瘋牛病致病因及生物特性：n瘋牛病是1985年4月最早在英國(guó)出現(xiàn)的一種新病。1996年確診，1997年美國(guó)生物化學(xué)家斯坦利普魯辛納發(fā)現(xiàn)瘋牛病的致病因子是朊蛋朊病毒（Prion）。n特性：1.可濾過(guò)性，增殖非常緩慢； 2.與已知病毒特征明顯不同，不具有病毒結(jié)構(gòu)， 未檢出核酸； 3.對(duì)福爾馬林、蛋白酶、加熱、電離輻射、紫

4、外線抵抗力強(qiáng)。 4.朊毒體的復(fù)制傳播都較細(xì)菌、病毒更快+瘋牛病感染途徑：+預(yù)防和治療：n慕尼黑大學(xué)曾發(fā)布消息說(shuō)，該大學(xué)和波恩大學(xué)以及馬普研究所的研究人員合作，從被感染了Scrapie病毒的實(shí)驗(yàn)鼠腦蛋白分子中發(fā)現(xiàn)了一種物質(zhì)，這種物質(zhì)能明顯延長(zhǎng)被感染的實(shí)驗(yàn)鼠的生命，并可以制成疫苗用來(lái)預(yù)防和治療瘋牛病。Scrapie病毒是瘋牛病病毒和人類(lèi)克雅氏病毒的一種變種。n慕尼黑大學(xué)的研究人員稱(chēng)，利用這種物質(zhì)制成的疫苗，能有效地預(yù)防瘋牛病，但能否用于人類(lèi)預(yù)防和治療克雅氏病還需深入研究。+檢測(cè)技術(shù)1998年愛(ài)爾蘭報(bào)道了一種BSE免疫學(xué)檢測(cè)，2h可報(bào)告結(jié)果，1d可檢測(cè)1.4萬(wàn)頭牛。n1999年7月Moynagh等報(bào)

5、道了三種理想的方法： 1、單抗檢測(cè)PrPSC的免疫印跡法（Prionics) 2、多克隆抗體檢測(cè)PrPSC的化學(xué)發(fā)光ELISA（Enfer)法 3、在變性和濃縮后用兩種單抗檢測(cè)PrPSC的夾心免疫法（CEA）2022-5-10案例 2010廣州12月17日電，廣東省衛(wèi)生廳通報(bào)2010年11月全省突發(fā)公共衛(wèi)生事件信息顯示，廣州從化市報(bào)告1起諾如病毒感染事件，發(fā)病429人，無(wú)死亡病例。+二、諾瓦克病毒（Norwalk Viruses，NV）l1968年在美國(guó)諾瓦克市暴發(fā)的一次急性腹瀉的患者糞便中分離的病原。因此得名。l諾瓦科病毒是直徑27nm的圓形結(jié)構(gòu)的病毒，無(wú)包膜，尚不能在實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)。lNorw

6、alk病毒是是一種高致病、傳染性極強(qiáng)的腸胃病毒，能導(dǎo)致急性胃腸炎。+感染及表現(xiàn)：n諾瓦克病毒通常棲息于牡蠣等貝類(lèi)中，人若生食這些受污染的貝類(lèi)會(huì)被感染，患者的嘔吐物和排泄物也會(huì)傳播病毒。n諾瓦克病毒能引起腹瀉，主要臨床表現(xiàn)為腹痛、腹瀉、惡心、嘔吐。部分會(huì)有輕微發(fā)燒、頭痛、肌肉酸痛、倦怠、頸部僵硬、畏光、等現(xiàn)象n癥狀通常持續(xù)12天。普遍感到病情嚴(yán)重，一日多次劇烈嘔吐。癥狀一般攝入病毒后2448小時(shí)出現(xiàn)，但是暴露后12小時(shí)也可能出現(xiàn)癥狀。沒(méi)有證據(jù)表明感染者能成為長(zhǎng)期病毒攜帶者，但是從發(fā)病到康復(fù)后2周感染者的糞便和嘔吐物中可以檢出病毒。+傳染途徑：+預(yù)防：n1.病后23天后再上崗，期間避免食品加工工作

7、n2.諾瓦克病毒患者經(jīng)常無(wú)預(yù)兆劇烈嘔吐，嘔吐物有感染性。嘔吐物附近任何表面都應(yīng)該被迅速清理和用漂白劑消毒，然后沖洗干凈n3.諾如病毒污染的食物應(yīng)當(dāng)扔棄，食用生蔬菜前應(yīng)當(dāng)徹底清洗。n4.紡織品（包括衣服、毛巾、桌布和餐巾）沾染嘔吐物或糞便時(shí)，應(yīng)迅速高溫清洗n5.牡蠣等應(yīng)該從正當(dāng)途徑獲得和保留適當(dāng)?shù)淖C明材料n6.干燥后諾瓦克病毒會(huì)漂浮在空氣中，造成感染，因此必須注意消毒。除此之外要注意勤洗手+檢測(cè)技術(shù)n（1）免疫電鏡法（IEM） NV被發(fā)現(xiàn)后很長(zhǎng)一段時(shí)間內(nèi)，電鏡一直是檢測(cè)的主要手段，具有直接、可靠的優(yōu)點(diǎn)。電鏡觀察需要的樣品量為106107個(gè)病毒顆粒/mL排泄物。這個(gè)技術(shù)僅在發(fā)病早期適用。 免疫電鏡

8、能使電鏡的靈敏度提高10-100倍。在顯微鏡下包被康復(fù)病人的血清。血清抗體玉同源病毒相結(jié)合，因此提高了診斷效率。但I(xiàn)EM不適合大規(guī)模流行病學(xué)調(diào)查。+n（2）放射免疫和生物素親和素法（RIA法） 檢測(cè)抗原與IEM法相比在靈敏度上沒(méi)有明顯差異，但用RIA法能檢測(cè)出急性期和恢復(fù)期之間抗體升高 4倍以上，對(duì)流行病學(xué)調(diào)查更有意義。實(shí)驗(yàn)需6d，同時(shí)還需要放射性同位素標(biāo)記。n（3）酶鏈免疫法（ELISA) 此法特異性強(qiáng)，靈敏度高，診斷迅速，且較經(jīng)濟(jì)，是目前可廣泛應(yīng)用的檢測(cè)方法。這種技術(shù)的檢測(cè)樣品量要求104106病毒顆粒/mL排泄物。+n（4）雜交技術(shù)和逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR） RT-PCR方法是

9、檢測(cè)病人排泄物和環(huán)境中樣品的諾瓦科病毒基因的特異手段。這個(gè)方法的靈敏度為102104病毒顆粒/mL排泄物。高敏感的RT-PCR方法依賴(lài)于PCR引物的設(shè)計(jì)。依賴(lài)RNA的RNA聚合酶區(qū)域被認(rèn)為是諾瓦科病毒基因組的最保守的區(qū)域。盡管用于擴(kuò)增的RdRp區(qū)域基因的引物能擴(kuò)增大多數(shù)的諾瓦科病毒，但由于諾瓦科病毒遺傳多樣性使這些引物很難擴(kuò)增所有的諾瓦科病毒。+案例：1988年上海市甲肝大流行+三、甲肝病毒（HAV）n病毒性肝炎是當(dāng)前危害人類(lèi)健康的疾病之一。目前認(rèn)為病毒性肝炎病原體至少有五種，包括甲型肝炎病毒（HAV）、乙型肝炎病毒（HBV）、丙型肝炎病毒（HCV）、丁型肝炎病毒（HDV）、戌型肝炎病毒（HE

10、V），它們的特性、傳播途徑、臨床經(jīng)過(guò)均不完全相同，但它們均能引起肝炎病變。項(xiàng)目項(xiàng)目甲型肝炎甲型肝炎乙型肝炎乙型肝炎丙型肝炎丙型肝炎丁型肝炎丁型肝炎戌型肝炎戌型肝炎病毒病毒HAVHAVHBVHBVHCVHCVHDVHDVHEVHEV病毒分類(lèi)病毒分類(lèi)微小核糖核微小核糖核酸病毒酸病毒嗜肝脫氧核糖核嗜肝脫氧核糖核酸病毒酸病毒黃病毒黃病毒（缺陷病毒）（缺陷病毒）杯狀病毒杯狀病毒病毒大小病毒大小27nm 27nm 42nm 42nm 303060nm 60nm 40nm 40nm 272734nm 34nm 基因基因ss RNAss RNA（+ +）7.8kb 7.8kb dsDNAdsDNA3,2kb

11、3,2kb ssRNA(+)ssRNA(+)10.5kb 10.5kb ssRNA(-)ssRNA(-)1.7kb 1.7kb ssRNA(+)ssRNA(+)3.5kb 3.5kb 抗原抗原HAVAgHAVAg（VP1VP14 4） HBsAgHBsAgHBcAgHBcAgHBeAg HBeAg HCVAg HCVAg HDVAg HDVAg HEVAg HEVAg 傳播途徑傳播途徑腸道傳播腸道傳播腸道外及性傳播腸道外及性傳播多數(shù)腸道外多數(shù)腸道外傳播傳播多數(shù)和腸道多數(shù)和腸道外傳播外傳播腸道傳播腸道傳播潛伏期潛伏期（范圍）（范圍）2525天（天（15154545天）天）7575天（天（4040

12、120120天）天）5050天（天（15159090天）天）5050天（天（25257575天）天）4040天（天（20203030天）天）慢性化慢性化無(wú)無(wú) 3 310% 10% 404070% 70% 2 270% 70% 無(wú)無(wú) 暴發(fā)性肝暴發(fā)性肝炎炎0.2% 0.2% 0.2% 0.2% 0.2% 0.2% 2 220% 20% 0.20.210% 10% +甲型肝炎病毒的發(fā)現(xiàn)n1973年Feinslone 首先用免疫電鏡技術(shù)在急性期患者的糞便中發(fā)現(xiàn)甲型肝炎病毒 (Hepatitis A virus,HAV ) 。屬微小RNA病毒科，新型腸道病毒72型。+免疫電鏡中的甲肝病毒+甲肝的危害：

13、1.容易集體爆發(fā)：美國(guó)疾病控制和預(yù)防中心（CDC）和國(guó)家傳染病中心GregoryLArmstrong博士推測(cè)，每年甲肝感染者人數(shù)可能高達(dá)60，000-140，000人，是每年公布人數(shù)的二到五倍。一旦引起爆發(fā)后果很難得到控制。 2.導(dǎo)致肝細(xì)胞損傷：甲型肝炎致病機(jī)制是肝炎病毒在肝臟復(fù)制，造成肝細(xì)胞損害而引起的一系列癥狀：如發(fā)熱、厭油、厭食、腹痛、腹瀉、黃疸等。+ 3.甲肝對(duì)妊娠的影響：臨床經(jīng)過(guò)同一般甲肝?？砂l(fā)生于妊娠各期。早期者易致流產(chǎn)，晚期易致早產(chǎn)，產(chǎn)后較易出現(xiàn)陰道大出血。甲肝越是妊娠后期，影響越嚴(yán)重。分娩時(shí)易導(dǎo)致大出血，產(chǎn)后易繼發(fā)其他感染。演變?yōu)橹匕Y肝炎不但危及孕婦生命，胎兒也常突然死亡。因此

14、，妊娠時(shí)患了肝炎必須住院治療。+傳染源與傳播途徑：2022-5-10易感人群凡是未感染過(guò)甲型肝炎病毒的人，無(wú)論是兒童還是成人均是易感者。+預(yù)防：n1.養(yǎng)成良好的衛(wèi)生習(xí)慣，把住“病從口入”關(guān)。食品要高溫加熱，一般情況下，加熱100一分鐘就可使甲肝病毒失去活性。n2.對(duì)一些自身易攜帶致病菌的食物如螺螄、貝殼、螃蟹，尤其是能富集甲肝病毒的毛蚶等海、水產(chǎn)品，食用時(shí)一定要煮熟蒸透，杜絕生吃、半生吃以及腌制后直接食用等不良飲食習(xí)慣。n3.接種甲肝疫苗，可以提高人群免疫力，預(yù)防甲肝的發(fā)生和暴發(fā)流行。n4.對(duì)密切接觸者，包括當(dāng)傳染源已明確（如食物或水）的所有已暴露者，已流行甲肝的學(xué)校、醫(yī)院、家庭或其他單位中的

15、成員，可及時(shí)給予丙種球蛋白注射。注射時(shí)間越早越好，最遲不宜超過(guò)接觸感染后710天，免疫效果可以維持35天。對(duì)密切接觸者應(yīng)進(jìn)行醫(yī)學(xué)觀察45天。n5.食源性感染應(yīng)檢查廚師的抗HAVIgM，確診后應(yīng)隔離治療。n6.發(fā)現(xiàn)甲肝病人應(yīng)及時(shí)報(bào)告當(dāng)?shù)氐募膊☆A(yù)防控制中心采取有效措施隔離傳染源，切斷傳播途徑，保護(hù)易感人群，控制傳染病的流行，早期報(bào)告對(duì)控制疫情具有非常重要的意義。+檢測(cè)技術(shù)n（1）GB/T 22287 2008 貝類(lèi)中甲型肝炎病毒檢測(cè)方法 ：普通 RT PCR方法 和 實(shí)時(shí)熒光 RT PCR方法 實(shí)時(shí)熒光 RT PCR方法是在常規(guī)RT PCR的基礎(chǔ)上 ,加入一條特異性的熒光探針。該探針為一段寡核苷

16、酸 ,兩端分別標(biāo)記一個(gè)報(bào)告 熒光基團(tuán)和一個(gè)淬滅熒光基團(tuán)。探針完整時(shí) ,報(bào)告基團(tuán)發(fā) 射的熒光 信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收 ，PCR擴(kuò) 增 時(shí) ,Taq酶的5 3外切 酶活 性將探針酶切降解 ,便報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離 ,從而 熒光監(jiān)測(cè)統(tǒng)可以接收到熒光信號(hào) ,即每 擴(kuò)增一條 DNA鏈 ,就有一個(gè)熒光分子形成 ,實(shí)現(xiàn)了熒光信號(hào)的累積與PCR產(chǎn)物形成完全同步 。+n（2）免疫電鏡 敏感性高，標(biāo)本中含有104106顆粒/mL可被檢出。將標(biāo)本加入特異性抗體HAV血清，經(jīng)孵育后，HAV顆粒與抗血清發(fā)生凝集，再用超速離心加以濃縮，取其免疫復(fù)合物，用磷鎢酸鹽進(jìn)行染色，于電鏡下檢查HAV球形顆粒。n（3）固相放射

17、免疫測(cè)定法 將放射性同位素與免疫化學(xué)相結(jié)合的體外測(cè)定超微量物質(zhì)的實(shí)驗(yàn)方法，具有同位素技術(shù)的高靈敏性、準(zhǔn)確性的優(yōu)點(diǎn)，同時(shí)又兼有抗原抗體反應(yīng)的專(zhuān)一性。+n另外，檢查方法還有補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附和免疫黏附血凝試驗(yàn)等方法。n通過(guò)利用葡萄糖球菌A蛋白可吸附IgG的方法，在單份血清中可區(qū)別甲肝抗體為IgM和IgG，根據(jù)急性期病人血清抗體為IgM，而恢復(fù)期病人的血清抗體為主要是IgG，可對(duì)甲肝急性期病人進(jìn)行早期診斷。+四、禽流感病毒：+禽流感的爆發(fā)： 1878年，禽流感在意大利的首次暴發(fā)使人們開(kāi)始認(rèn)識(shí)這種極具殺傷力的傳染病。此后，禽流感病毒在近兩個(gè)世紀(jì)中，不斷地侵襲著整個(gè)世界。+四、禽流感病毒：流感病

18、毒屬于RNA病毒的正黏病毒科，分甲、乙、丙3個(gè)型禽流感病毒（AIV）屬甲型流感病毒，多發(fā)于禽類(lèi)，一些也可感染豬、馬、海豹和鯨等各種哺乳動(dòng)物及人類(lèi)乙型和丙型流感病毒則分別見(jiàn)于海豹和豬的感染+四、禽流感病毒：甲型流感病毒呈多形性，其中球形直徑80120nm，有囊膜?；蚪M為分節(jié)段單股負(fù)鏈RNA。依據(jù)其外膜血凝素（H）/和神經(jīng)氨酸酶（N）蛋白抗原性的不同，目前可分為16個(gè)H亞型（H1H16）和9個(gè)N亞型（N1N9）。感染人的禽流感病毒亞型主要為H5N1、H9N2、H7N7，其中感染H5N1的患者病情重，病死率高。+禽流感的特征：n致病能力 造成人感染發(fā)病的禽流感病毒可能是發(fā)生了變異的病毒。研究表明，原本為低致病性禽流感病毒株（H5N2、H7N7、H9N2），可經(jīng)69個(gè)月禽間流行的迅速變異而成為高致病性毒株（H5N1）n適應(yīng)能力 糞便：1周 水中：1個(gè)月 病毒對(duì)低抗溫抵力較強(qiáng)，在有甘油保護(hù)的情況下可保持活力1年以上。 +禽流感的傳染源與易患人群：n傳染源：主要為患禽流感或攜帶禽流感病毒的家禽，另外野禽或豬也可成為傳染源。據(jù)國(guó)外報(bào)道，已發(fā)現(xiàn)帶禽流感病毒的鳥(niǎo)類(lèi)達(dá)88種，而鼠類(lèi)不能自然感染流感病毒。n易患人群：任何年齡均具有易感性，但12歲以下兒童發(fā)病率較高，病情較重。+禽流感的傳播途徑：+預(yù)防：n1、減少到公共人群密集場(chǎng)所的機(jī)會(huì),對(duì)于那些表現(xiàn)出身體不適、出現(xiàn)發(fā)燒和咳嗽癥狀的人，要避免與