結(jié)核白喉?xiàng)U菌

1、會(huì)計(jì)學(xué)1結(jié)核白喉?xiàng)U菌結(jié)核白喉?xiàng)U菌結(jié)核分枝桿菌生長(zhǎng)慢, 人型、牛型非結(jié)核分枝桿菌I組生長(zhǎng)慢,堪薩斯非結(jié)核分枝桿菌II組生長(zhǎng)慢，癗癘非結(jié)核分枝桿菌III組生長(zhǎng)慢,鳥(niǎo)胞內(nèi)分枝桿菌非結(jié)核分枝桿菌IV組生長(zhǎng)快速，龜分枝麻風(fēng)分枝桿菌不生長(zhǎng)流行病學(xué)簡(jiǎn)況流行病學(xué)簡(jiǎn)況: 世界：世界： 1/3人口感染，人口感染，70%在亞洲在亞洲 結(jié)核病人結(jié)核病人2000萬(wàn)，每年新增結(jié)核病患者萬(wàn)，每年新增結(jié)核病患者900萬(wàn)，萬(wàn)， 每年死于結(jié)核病的達(dá)每年死于結(jié)核病的達(dá)300萬(wàn)。萬(wàn)。 中國(guó)：中國(guó)： 有有5.5億人感染，結(jié)核病人約億人感染，結(jié)核病人約600萬(wàn)，每年死萬(wàn)，每年死 于結(jié)核病的為于結(jié)核病的為25萬(wàn)。萬(wàn)。 居法定報(bào)告?zhèn)魅静∈孜?/p>

2、居法定報(bào)告?zhèn)魅静∈孜? 一、生物學(xué)性狀一、生物學(xué)性狀 1、形態(tài)染色：、形態(tài)染色：細(xì)長(zhǎng)微彎的桿菌，經(jīng)抗酸染色，菌體細(xì)長(zhǎng)微彎的桿菌，經(jīng)抗酸染色，菌體 呈紅色，其它呈藍(lán)色。血培養(yǎng)中可形成莢膜。呈紅色，其它呈藍(lán)色。血培養(yǎng)中可形成莢膜。 臨床標(biāo)本中常有臨床標(biāo)本中常有L型變異出現(xiàn)型變異出現(xiàn)(Much、莫赫顆粒莫赫顆粒)。2、培養(yǎng)特性：培養(yǎng)特性：專性需氧，營(yíng)養(yǎng)要求高，最適專性需氧，營(yíng)養(yǎng)要求高，最適pH值低，值低， 生長(zhǎng)緩慢，生長(zhǎng)緩慢，2-4w見(jiàn)菌落。見(jiàn)菌落。 * *羅氏羅氏(Lowenstein)培養(yǎng)基：培養(yǎng)基： 菌落呈乳白或米黃顆菌落呈乳白或米黃顆 粒狀，干燥不透明，久則融合呈菜花狀。粒狀，干燥不透明，久

3、則融合呈菜花狀。 * *液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基 ：易形成有皺褶的菌膜（：易形成有皺褶的菌膜（1-2w）。）。 Result of acid-fast staining: red bacilli in blue background結(jié)核桿菌菜花狀菌落結(jié)核桿菌菜花狀菌落分子生物學(xué)：分子生物學(xué)：1998年，英、法、美、丹麥聯(lián)合破譯年，英、法、美、丹麥聯(lián)合破譯 其群基因序列，其群基因序列，4411kb，約，約4000個(gè)基因個(gè)基因3、生化反應(yīng)：、生化反應(yīng)：熱觸酶試驗(yàn)熱觸酶試驗(yàn)有助于區(qū)別結(jié)核有助于區(qū)別結(jié)核(-)和非和非 結(jié)核分支桿菌結(jié)核分支桿菌(+)。4、抵抗力：、抵抗力：含大量脂質(zhì)，抵抗力強(qiáng)，含大量脂質(zhì)，

4、抵抗力強(qiáng)， 耐酸堿耐酸堿; 但對(duì)濕熱及紫外線敏感。但對(duì)濕熱及紫外線敏感。 5、變異性：、變異性：結(jié)核桿菌易發(fā)生菌落、形態(tài)（結(jié)核桿菌易發(fā)生菌落、形態(tài)（L型）、型）、 毒力（毒力（BCG）、免疫原性和）、免疫原性和耐藥性變異耐藥性變異。 二、致病性二、致病性（一）致病物質(zhì)：（一）致病物質(zhì)：結(jié)核桿菌的致病性與細(xì)菌大結(jié)核桿菌的致病性與細(xì)菌大 量繁殖引起的炎癥、菌體成分及代謝產(chǎn)物的毒量繁殖引起的炎癥、菌體成分及代謝產(chǎn)物的毒 性和機(jī)體對(duì)細(xì)菌的免疫損傷有關(guān)。性和機(jī)體對(duì)細(xì)菌的免疫損傷有關(guān)。 1、脂質(zhì)（、脂質(zhì)（lipid）：）： 索狀因子索狀因子(cord factor)： 能破壞線粒體膜，影響細(xì)胞呼吸，能破壞

5、線粒體膜，影響細(xì)胞呼吸， 抑制白細(xì)胞游走，引起慢性肉芽腫；抑制白細(xì)胞游走，引起慢性肉芽腫； Cord formation in liquid media(cord factor) 磷脂磷脂(phosphatide)：能促使單核細(xì)胞增生，引能促使單核細(xì)胞增生，引 起起結(jié)核結(jié)節(jié)結(jié)核結(jié)節(jié)和和 干酪樣壞死；干酪樣壞死； 蠟質(zhì)蠟質(zhì)D(wax-D)：能激發(fā)機(jī)體的能激發(fā)機(jī)體的IV型超敏反應(yīng)；型超敏反應(yīng)； 硫酸腦苷脂硫酸腦苷脂(sulfatide)：能抑制吞噬體與溶酶體能抑制吞噬體與溶酶體 的結(jié)合。的結(jié)合。 2、蛋白質(zhì)：、蛋白質(zhì)：其主要成分結(jié)核菌素本身無(wú)毒，其主要成分結(jié)核菌素本身無(wú)毒， 但與蠟質(zhì)但與蠟質(zhì)D結(jié)合

6、注入機(jī)體能誘發(fā)超敏反應(yīng)，結(jié)合注入機(jī)體能誘發(fā)超敏反應(yīng)， 結(jié)核結(jié)節(jié)形成和抗體。結(jié)核結(jié)節(jié)形成和抗體。3、多糖、多糖(polysaccharide)：中粒細(xì)胞浸潤(rùn)中粒細(xì)胞浸潤(rùn)結(jié)核結(jié)節(jié)結(jié)核結(jié)節(jié) (tubercle)4、核酸：、核酸： rRNA激活細(xì)胞免疫激活細(xì)胞免疫5、莢膜：、莢膜： 保護(hù)菌體（有助于侵入巨噬細(xì)胞、保護(hù)菌體（有助于侵入巨噬細(xì)胞、 抵抗有害物質(zhì)等）抵抗有害物質(zhì)等） （二）所致疾?。海ǘ┧录膊。褐饕榻B肺部感染主要介紹肺部感染 1、原發(fā)感染（、原發(fā)感染（primary infection）：）： 首次感染結(jié)核桿菌，多見(jiàn)于兒童。首次感染結(jié)核桿菌，多見(jiàn)于兒童。 常有肺門淋巴結(jié)大、干酪樣壞死和

7、結(jié)核結(jié)節(jié)常有肺門淋巴結(jié)大、干酪樣壞死和結(jié)核結(jié)節(jié) 的形成，也可經(jīng)血到達(dá)多個(gè)臟器引起相應(yīng)結(jié)的形成，也可經(jīng)血到達(dá)多個(gè)臟器引起相應(yīng)結(jié) 核病，核病，90%的原發(fā)感染可纖維化或鈣化，但的原發(fā)感染可纖維化或鈣化，但 病灶中潛伏的菌可成為日后的感染源病灶中潛伏的菌可成為日后的感染源 2、原發(fā)后感染（、原發(fā)后感染（secondary infection）：）： 多見(jiàn)于成人或較大的兒童多見(jiàn)于成人或較大的兒童原發(fā)綜合征原發(fā)綜合征原發(fā)病灶原發(fā)病灶淋巴管炎淋巴管炎肺門淋巴結(jié)結(jié)核肺門淋巴結(jié)結(jié)核原發(fā)綜合征原發(fā)綜合征 三、免疫性、免疫性1、免疫機(jī)理：免疫機(jī)理：傳染性免疫，以細(xì)胞免疫為主。傳染性免疫，以細(xì)胞免疫為主。2、免疫與

8、超敏反應(yīng)：免疫與超敏反應(yīng)： 機(jī)體對(duì)結(jié)核桿菌產(chǎn)生免疫保護(hù)時(shí)也產(chǎn)生了超機(jī)體對(duì)結(jié)核桿菌產(chǎn)生免疫保護(hù)時(shí)也產(chǎn)生了超敏反應(yīng)，二者均為敏反應(yīng)，二者均為T細(xì)胞介導(dǎo)。細(xì)胞介導(dǎo)。試驗(yàn)依據(jù)：試驗(yàn)依據(jù)： 結(jié)核菌素蛋白與蠟質(zhì)結(jié)核菌素蛋白與蠟質(zhì)D同時(shí)注入機(jī)體，可活同時(shí)注入機(jī)體，可活化化T細(xì)胞引起超敏反應(yīng)；細(xì)胞引起超敏反應(yīng)； 結(jié)核桿菌核蛋白體結(jié)核桿菌核蛋白體RNA注入機(jī)體，則獲得注入機(jī)體，則獲得免疫力。免疫力。* * 結(jié)核菌素試驗(yàn)（結(jié)核菌素試驗(yàn)（OT）：）：（1）原理：原理： IV型超敏反應(yīng)型超敏反應(yīng)（2）方法：方法：是用是用OT(old tuerculin )或或PPD(purified Protein derivati

9、ve )所做的皮內(nèi)試驗(yàn)，所做的皮內(nèi)試驗(yàn)， 48-72小小 時(shí)后觀察。時(shí)后觀察。（3）結(jié)果：結(jié)果： 陽(yáng)性陽(yáng)性 紅腫硬結(jié)直徑紅腫硬結(jié)直徑5mm 強(qiáng)陽(yáng)性強(qiáng)陽(yáng)性 紅腫硬結(jié)直徑紅腫硬結(jié)直徑 15 mm 陰性陰性 紅腫硬結(jié)直徑紅腫硬結(jié)直徑 5mm結(jié)核菌素試驗(yàn)結(jié)核菌素試驗(yàn) PPDPPD皮下注射皮下注射 (4) 意義：意義： 陽(yáng)性陽(yáng)性 表示已感染過(guò)結(jié)核桿菌，但不一定有結(jié)表示已感染過(guò)結(jié)核桿菌，但不一定有結(jié) 核病；核?。?強(qiáng)陽(yáng)性強(qiáng)陽(yáng)性 表示可能有活動(dòng)性結(jié)核?。槐硎究赡苡谢顒?dòng)性結(jié)核??； 陰性陰性 表示未感染過(guò)結(jié)核桿菌，但應(yīng)排除感染表示未感染過(guò)結(jié)核桿菌，但應(yīng)排除感染 初期或免疫力低下。初期或免疫力低下。 四、微生物學(xué)

10、檢查四、微生物學(xué)檢查 1、標(biāo)本：痰液、尿液、糞便、腦脊液等、標(biāo)本：痰液、尿液、糞便、腦脊液等 2、直接涂片鏡檢：、直接涂片鏡檢： 3、濃縮集菌：、濃縮集菌： 4、分離培養(yǎng)：、分離培養(yǎng)： 5、動(dòng)物試驗(yàn)：、動(dòng)物試驗(yàn)： 6、快速診斷：包括核酸和抗體、快速診斷：包括核酸和抗體五、防治原則五、防治原則1. 接種接種BCG：新生兒：新生兒-7y-12y2. 治療：聯(lián)合用藥，分一線和二線藥物治療：聯(lián)合用藥，分一線和二線藥物棒狀桿菌屬棒狀桿菌屬Corynebactreium p. 147 該屬菌多為條件致病菌，引起人類疾該屬菌多為條件致病菌，引起人類疾病的主要是白喉棒狀桿菌，可引起白喉。病的主要是白喉棒狀桿菌

11、，可引起白喉。 白喉棒狀桿菌屬（白喉棒狀桿菌屬（C. diphtheriae）一、生物學(xué)性狀一、生物學(xué)性狀 1、形態(tài)染色：、形態(tài)染色：菌體細(xì)長(zhǎng)微彎，一端或兩端膨大菌體細(xì)長(zhǎng)微彎，一端或兩端膨大 呈棒狀；排列不規(guī)則，多呈呈棒狀；排列不規(guī)則，多呈X型、型、Y型或柵欄狀；型或柵欄狀； G+，但染色不均勻，用，但染色不均勻，用Albert法染色后，有法染色后，有異染異染 顆粒顆粒出現(xiàn)，具有鑒別意義；出現(xiàn)，具有鑒別意義； 無(wú)莢膜和鞭毛，也不產(chǎn)生芽胞。無(wú)莢膜和鞭毛，也不產(chǎn)生芽胞。 Model figure of Albert stainingResult of Albert staining: body i

12、n blue metachromatic granules in black 2、培養(yǎng)特性：、培養(yǎng)特性：需氧或兼性厭氧，需氧或兼性厭氧， （1）呂氏血清培養(yǎng)基呂氏血清培養(yǎng)基（Loffler）: 形態(tài)典型，異染顆粒明顯，菌落細(xì)小、濕形態(tài)典型，異染顆粒明顯，菌落細(xì)小、濕 潤(rùn)、呈灰白色、圓形突起；潤(rùn)、呈灰白色、圓形突起；（2）亞碲酸鉀亞碲酸鉀(potassium tellurite)培養(yǎng)基：培養(yǎng)基： 重型重型 大大 灰色灰色 能分解淀粉能分解淀粉 不溶血不溶血 中間型中間型 中心黑邊緣灰中心黑邊緣灰 不分解淀粉不分解淀粉 不溶血不溶血 輕型輕型 小小 黑色黑色 不分解淀粉不分解淀粉 能溶血能溶血 我

13、國(guó)以我國(guó)以輕型輕型多見(jiàn)多見(jiàn)3、抵抗力：、抵抗力： 較弱，對(duì)濕熱敏感，對(duì)干燥、寒較弱，對(duì)濕熱敏感，對(duì)干燥、寒 冷、日冷、日光光 的抵抗力較強(qiáng)。的抵抗力較強(qiáng)。 二、致病性二、致病性（一）致病物質(zhì)：（一）致病物質(zhì)： 1、白喉毒素白喉毒素(diphtherotoxin, DT)： 只有攜帶只有攜帶-棒狀桿菌噬菌體的菌株才能產(chǎn)生。棒狀桿菌噬菌體的菌株才能產(chǎn)生。 毒素的性質(zhì)與作用機(jī)理：毒素的性質(zhì)與作用機(jī)理： 完整的毒素分子是酶原，須經(jīng)胰酶分解為完整的毒素分子是酶原，須經(jīng)胰酶分解為A、B 兩個(gè)片段后才發(fā)揮毒性作用。兩個(gè)片段后才發(fā)揮毒性作用。 A鏈：鏈：193aa，具酶活性，穩(wěn)定；，具酶活性，穩(wěn)定； B鏈：鏈

14、：342aa，不穩(wěn)定。含穿膜區(qū)（，不穩(wěn)定。含穿膜區(qū)（173aa）和）和 受體結(jié)合區(qū)（受體結(jié)合區(qū)（149aa）。）。Structure of Diphtheria toxin Fragment B: 37 kD, binding Fragment A: 21kD, toxicity作用機(jī)制：作用機(jī)制： 白喉毒素經(jīng)受損的粘膜細(xì)胞入血或淋巴循白喉毒素經(jīng)受損的粘膜細(xì)胞入血或淋巴循環(huán)，環(huán)， 吸附于多個(gè)臟器的組織細(xì)胞表面后裂解，吸附于多個(gè)臟器的組織細(xì)胞表面后裂解，B片段與細(xì)胞膜表面的受體結(jié)合，片段與細(xì)胞膜表面的受體結(jié)合，A片段進(jìn)入細(xì)胞片段進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，使細(xì)胞內(nèi)延伸因子內(nèi)，使細(xì)胞內(nèi)延伸因子2（elongati

15、on factor 2, EF-2）滅活，影響蛋白質(zhì)的合成。）滅活，影響蛋白質(zhì)的合成。 白喉毒素有劇毒，但人和鼠的正常細(xì)胞對(duì)白喉毒素有劇毒，但人和鼠的正常細(xì)胞對(duì)該毒素有一定的耐受性，而腫瘤細(xì)胞則高度敏該毒素有一定的耐受性，而腫瘤細(xì)胞則高度敏感，據(jù)此有人提出感，據(jù)此有人提出生物導(dǎo)彈生物導(dǎo)彈法治療腫瘤。法治療腫瘤。2. 索狀因子索狀因子(cord factor)和和K抗原等抗原等（二）所致疾病所致疾病 病人病人 健康帶菌者健康帶菌者 飛沫飛沫 侵入易感機(jī)體侵入易感機(jī)體 吸附吸附 恢復(fù)期帶菌者恢復(fù)期帶菌者 鼻咽部粘膜，生長(zhǎng)繁殖鼻咽部粘膜，生長(zhǎng)繁殖 產(chǎn)生產(chǎn)生 侵襲物質(zhì)侵襲物質(zhì) 局部局部 上皮細(xì)胞壞死上

16、皮細(xì)胞壞死 形成灰白色形成灰白色“假膜假膜” 毒素毒素 全身全身 心肌炎、腎上腺出血、心肌炎、腎上腺出血、 外周神經(jīng)麻痹等外周神經(jīng)麻痹等三、免疫性三、免疫性 病后獲牢固免疫，以體液免疫為主。病后獲牢固免疫，以體液免疫為主。 錫克實(shí)驗(yàn)（錫克實(shí)驗(yàn)（Schich test）: 原理原理: 毒素抗毒素中和反應(yīng)毒素抗毒素中和反應(yīng) (in vivo)四、微生物學(xué)檢查四、微生物學(xué)檢查 直接涂片，分離培養(yǎng)，毒力鑒定（直接涂片，分離培養(yǎng)，毒力鑒定（Elek平平 板，豚鼠試驗(yàn)）板，豚鼠試驗(yàn)） Results of Schick testHappened time (day)experimentcontroltyp

17、einterpretation_+Pseudo+mixtureimmunityHypersen-sitivityResults of Elek plate五、防治原則五、防治原則 1. 預(yù)防：兒童常注射白百破三聯(lián)疫苗進(jìn)行人工預(yù)防：兒童常注射白百破三聯(lián)疫苗進(jìn)行人工 主動(dòng)免疫。主動(dòng)免疫。 2. 治療：應(yīng)及早注射足量的抗毒素，但注射前治療：應(yīng)及早注射足量的抗毒素，但注射前 應(yīng)作敏試。應(yīng)作敏試。 其次是使用其次是使用PNC等抗生素。等抗生素。 二、致病性二、致病性（一）致病物質(zhì)：（一）致病物質(zhì)：結(jié)核桿菌的致病性與細(xì)菌大結(jié)核桿菌的致病性與細(xì)菌大 量繁殖引起的炎癥、菌體成分及代謝產(chǎn)物的毒量繁殖引起的炎癥、菌體成分及代謝產(chǎn)物的毒 性和機(jī)體對(duì)細(xì)菌的免疫損傷有關(guān)。性和機(jī)體對(duì)細(xì)菌的免疫損傷有關(guān)。 1、脂質(zhì)