放射免疫技術(shù)課堂版

1、放射免疫技術(shù)目錄放射免疫技術(shù)1.原理及分類2.常用的放射性核素一 放射免疫分析二 免疫放射分析三 IRMA和RIA的比較放射免疫技術(shù)放射免疫技術(shù)（radiommunoassay technique） 是以放射核素為示蹤物的一種免疫標(biāo)記是以放射核素為示蹤物的一種免疫標(biāo)記測定技術(shù)測定技術(shù)優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)：靈敏度高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好，樣品靈敏度高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好，樣品及試劑用量少，操作簡便易于標(biāo)準(zhǔn)化等及試劑用量少，操作簡便易于標(biāo)準(zhǔn)化等缺點(diǎn)：缺點(diǎn)：放射性元素污染放射性元素污染1.原理及分類原理及分類放射免疫放射免疫（RIARIA）以標(biāo)記抗原與反以標(biāo)記抗原與反應(yīng)系統(tǒng)中未標(biāo)記應(yīng)系統(tǒng)中未標(biāo)記抗原競爭結(jié)合特抗

2、原競爭結(jié)合特異性抗體來測定異性抗體來測定待檢樣品中抗原待檢樣品中抗原量。量。 免疫放射免疫放射（IRMAIRMA）以過量標(biāo)記抗體以過量標(biāo)記抗體與抗原非競爭結(jié)與抗原非競爭結(jié)合，采用固相免合，采用固相免疫吸附載體分離疫吸附載體分離游離和結(jié)合標(biāo)記游離和結(jié)合標(biāo)記抗體?？贵w。常用的標(biāo)記核素常用的標(biāo)記核素2.常用的放射性核素常用的放射性核素（一）（一） 放射免疫分析放射免疫分析基本原理AbAb限量，限量，AgAg* *定量定量, ,AgAg* *和和AgAg的量大于的量大于AbAb結(jié)合位點(diǎn)，二者結(jié)合位點(diǎn)，二者通過競爭方式與通過競爭方式與AbAb結(jié)合；隨著結(jié)合；隨著AgAg增加，增加，AgAg* *與與Ab

3、Ab結(jié)合形成結(jié)合形成AgAg* *AbAb復(fù)合物的放復(fù)合物的放射量降低射量降低, ,二者變化二者變化成函數(shù)關(guān)系。成函數(shù)關(guān)系。 以未結(jié)合的以未結(jié)合的AgAg* *為為F F，AgAg* *AbAb復(fù)合物復(fù)合物為為B B，則，則B/FB/F或或B/(BB/(BF)F)與與AgAg的的量變存在著函數(shù)量變存在著函數(shù)關(guān)系劑量反應(yīng)關(guān)系劑量反應(yīng)曲線曲線 注：注：T即是即是B與與F的總和的總和（二）（二） 免疫放射分析免疫放射分析 Miles將放射性核素標(biāo)記胰島素將放射性核素標(biāo)記胰島素抗體，用雙抗體夾心檢測血清胰島抗體，用雙抗體夾心檢測血清胰島素，為區(qū)別放射免疫分析法，將之素，為區(qū)別放射免疫分析法，將之稱為免

4、疫放射分析。稱為免疫放射分析?；驹韱挝稽c(diǎn)單位點(diǎn) IRMAIRMA先用先用與與待測抗原進(jìn)行反應(yīng)，形成待測抗原進(jìn)行反應(yīng)，形成抗原抗體復(fù)合物；用抗原抗體復(fù)合物；用結(jié)合未結(jié)合標(biāo)記抗體結(jié)合未結(jié)合標(biāo)記抗體并將其分離并將其分離, , 測定測定的放射量的放射量 雙位點(diǎn)雙位點(diǎn) IRMAIRMA先用先用與抗原結(jié)與抗原結(jié)合，再用合，再用與抗原的另一決定與抗原的另一決定簇結(jié)合，形成簇結(jié)合，形成復(fù)合物，復(fù)合物，洗棄剩余標(biāo)記抗體，測固洗棄剩余標(biāo)記抗體，測固相上放射性。相上放射性。 2.IRMA和和RIA的比較的比較 放射免疫分析技術(shù)的應(yīng)用 放射免疫分析技術(shù)的靈敏度高，特放射免疫分析技術(shù)的靈敏度高，特異性強(qiáng)，精密度好，常用于各種激素，異性強(qiáng)，精密度好，常用于各種激素，微量蛋白質(zhì)，腫瘤標(biāo)記物和藥物學(xué)等微微量蛋白質(zhì)，腫瘤標(biāo)記物和藥物學(xué)等微量物質(zhì)的測定量物質(zhì)的測定 但由于放射污染和危害，常用核但由于放射