血清學(xué)檢驗(yàn)及其新技術(shù)--

1、血清學(xué)檢驗(yàn)及血清學(xué)檢驗(yàn)及其新技術(shù)其新技術(shù) 報(bào)告人 ： 王麗麗報(bào)告日期：2013-05-Company LogoContents概述概述1臨床生化檢查臨床生化檢查23臨床免疫學(xué)及血清學(xué)檢查臨床免疫學(xué)及血清學(xué)檢查血清學(xué)新技術(shù)血清學(xué)新技術(shù)Company Logo臨床生化檢查臨床生化檢查l1常用生化分析技術(shù)l2參考值、參考區(qū)間與醫(yī)學(xué)決定水平l3蛋白質(zhì)測(cè)定l4糖類(lèi)及其代謝產(chǎn)物的測(cè)定l5脂類(lèi)與脂蛋白測(cè)定l6電解質(zhì)測(cè)定l7非蛋白氮類(lèi)化合物測(cè)定l8酶活力測(cè)定l9激素及其代謝產(chǎn)物的測(cè)定l10血?dú)夥治鯟ompany Logo臨床免疫學(xué)及血清學(xué)檢查臨床免疫學(xué)及血清學(xué)檢查l1總補(bǔ)體和單個(gè)成分的測(cè)定l2免疫球蛋白測(cè)定l

2、3免疫復(fù)合物的測(cè)定l4自身抗體的檢測(cè)l5腫瘤免疫學(xué)檢查Company LogoHot TiplHow do I incorporate my logo to a slide that will apply to all the other slides? On the View menu, point to Master, and then click Slide Master or Notes Master. Change images to the one you like, then it will apply to all the other slides. 概述概述Company L

3、ogo概述概述Company Logo全血、血清和血漿全血、血清和血漿l一般的，臨床檢驗(yàn)采用的血液標(biāo)本分為：全血、血清和血漿l全血：血液經(jīng)抗凝處理后的全部血液。l血漿：離心除去血細(xì)胞后所得到的淡黃色液體。l血清：如血液不經(jīng)抗凝處理，讓他自行凝固，則在抽血后的一段時(shí)間內(nèi)，血液會(huì)自動(dòng)在一系列凝血因子的作用下發(fā)生凝集，血液首先凝固成一個(gè)整體，再經(jīng)過(guò)一段時(shí)間或用離心機(jī)離心，血液中凝固的部分會(huì)與一些清澈淡黃色的液體分離開(kāi)，這些液體稱(chēng)為血清。 概述概述Company Logo血漿、血清血漿、血清l血漿與血清的區(qū)別是血清中不含纖維蛋白原等凝血因子。 l全血-主要用于血細(xì)胞成分的檢查l血清和血漿，主要用于大部

4、分臨床化學(xué)檢查和免疫學(xué)檢查 血清-多用于血液生化、免疫等方面的測(cè)定； 血漿多用于凝血等方面的測(cè)定。 概述概述Company Logo血清的主要成分血清的主要成分l各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、激素、無(wú)機(jī)物等l這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或抑制生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的。對(duì)血清的成分和作用的研究雖有很大進(jìn)展，但血清的成份可能有幾百種之多，目前對(duì)其準(zhǔn)確的成份、含量及其作用機(jī)制仍不清楚，尤其是對(duì)其中一些多肽類(lèi)生長(zhǎng)因子、激素和脂類(lèi)等尚未充分認(rèn)識(shí) 概述概述Company Logo血清的主要作用血清的主要作用l提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)l提供激素和各種生長(zhǎng)因子l提供結(jié)合蛋白：結(jié)合蛋白作用是攜帶重要地低分子

5、量物質(zhì)，如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及激素等，轉(zhuǎn)鐵蛋白攜帶鐵。結(jié)合蛋白在細(xì)胞代謝過(guò)程中起重要作用l提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷l對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用概述概述Company LogoContents概述概述1臨床生化檢查臨床生化檢查2臨床免疫學(xué)及血清學(xué)檢查臨床免疫學(xué)及血清學(xué)檢查3血清學(xué)新技術(shù)血清學(xué)新技術(shù)Company Logo臨床生化檢查臨床生化檢查l1常用生化分析技術(shù)l2參考值、參考區(qū)間與醫(yī)學(xué)決定水平l3蛋白質(zhì)測(cè)定l4糖類(lèi)及其代謝產(chǎn)物的測(cè)定l5脂類(lèi)與脂蛋白測(cè)定l6電解質(zhì)測(cè)定l7非蛋白氮類(lèi)化合物測(cè)定l8酶活力測(cè)定l9激素及其代謝產(chǎn)物的測(cè)定l10血?dú)夥治雠R床生化檢驗(yàn)臨床生化

6、檢驗(yàn)Company Logo一、血常規(guī)一、血常規(guī)l血常規(guī)檢查一般取用血常規(guī)檢查一般取用末梢血檢查末梢血檢查，如指尖、耳，如指尖、耳垂部位的血。在經(jīng)過(guò)垂部位的血。在經(jīng)過(guò)血液細(xì)胞分析儀器血液細(xì)胞分析儀器，電腦，電腦報(bào)告結(jié)果，此項(xiàng)目已成為檢查病畜的一個(gè)慣例，報(bào)告結(jié)果，此項(xiàng)目已成為檢查病畜的一個(gè)慣例，所以稱(chēng)之為血常規(guī)。所以稱(chēng)之為血常規(guī)。l將采取的抗凝全血注入將采取的抗凝全血注入5ml5ml的真空采血管，搖勻的真空采血管，搖勻后去掉密封上蓋，將樣本放到采血針下吸樣，后去掉密封上蓋，將樣本放到采血針下吸樣，儀器顯示結(jié)果后打印。儀器顯示結(jié)果后打印。臨床生化檢驗(yàn)臨床生化檢驗(yàn)Company Logo一、血常一、

7、血常規(guī)規(guī)- -臨床臨床意義意義l血常規(guī)檢查在全身體檢中是基本的體檢項(xiàng)目，血常規(guī)檢查在全身體檢中是基本的體檢項(xiàng)目，它的意義在于可以發(fā)現(xiàn)許多全身性疾病的早期它的意義在于可以發(fā)現(xiàn)許多全身性疾病的早期跡象，診斷是否貧血，是否有血液系統(tǒng)疾病，跡象，診斷是否貧血，是否有血液系統(tǒng)疾病，反應(yīng)骨髓的造血功能等。反應(yīng)骨髓的造血功能等。l例如：通常感染性疾病會(huì)使白細(xì)胞的數(shù)值和分例如：通常感染性疾病會(huì)使白細(xì)胞的數(shù)值和分類(lèi)發(fā)生變化；貧血時(shí)血紅蛋白或紅細(xì)胞的檢驗(yàn)類(lèi)發(fā)生變化；貧血時(shí)血紅蛋白或紅細(xì)胞的檢驗(yàn)值會(huì)降低；而血小板的減少會(huì)導(dǎo)致容易出血或值會(huì)降低；而血小板的減少會(huì)導(dǎo)致容易出血或出血后不容易止住，而血小板增多會(huì)增多血栓出

8、血后不容易止住，而血小板增多會(huì)增多血栓發(fā)生的可能；另外，有些腫瘤、變化反映性疾發(fā)生的可能；另外，有些腫瘤、變化反映性疾病也可以引起血常規(guī)檢查部分?jǐn)?shù)值的變化。病也可以引起血常規(guī)檢查部分?jǐn)?shù)值的變化。臨床生化檢驗(yàn)臨床生化檢驗(yàn)Company Logo一、血常一、血常規(guī)規(guī)- -常規(guī)常規(guī)參數(shù)參數(shù)臨床生化檢驗(yàn)臨床生化檢驗(yàn)Company Logo一、一、血常規(guī)血常規(guī)- -常規(guī)參數(shù)的臨床意義常規(guī)參數(shù)的臨床意義l 血紅蛋白（Hb） 、 紅細(xì)胞（RBC）臨床生化檢驗(yàn)臨床生化檢驗(yàn)Company Logo一、血常一、血常規(guī)規(guī)- -常常規(guī)參數(shù)的臨床意義規(guī)參數(shù)的臨床意義l 白細(xì)胞（WBC） 、 中性粒細(xì)胞臨床生化檢驗(yàn)臨床生

9、化檢驗(yàn)Company Logo一、血常一、血常規(guī)規(guī)- -常常規(guī)參數(shù)的臨床意義規(guī)參數(shù)的臨床意義l嗜酸性粒細(xì)胞臨床生化檢驗(yàn)臨床生化檢驗(yàn)Company Logo一、血一、血常規(guī)常規(guī)- -常規(guī)常規(guī)參數(shù)的臨床意義參數(shù)的臨床意義l 淋巴細(xì)胞 、 單核細(xì)胞臨床生化檢驗(yàn)臨床生化檢驗(yàn)Company Logo一、血常規(guī)一、血常規(guī)- -常規(guī)參數(shù)的臨床意義常規(guī)參數(shù)的臨床意義l血小板（PLT）臨床生化檢驗(yàn)臨床生化檢驗(yàn)Company Logo一、血常規(guī)一、血常規(guī)- -常規(guī)參數(shù)的臨床意義常規(guī)參數(shù)的臨床意義l 血沉 、 網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)臨床生化檢驗(yàn)臨床生化檢驗(yàn)Company Logo二、血清生化檢驗(yàn)二、血清生化檢驗(yàn)- -血液化

10、學(xué)檢查血液化學(xué)檢查l血清電解質(zhì)和酸堿平衡檢測(cè)：血清鉀、鈉、氯、血清電解質(zhì)和酸堿平衡檢測(cè)：血清鉀、鈉、氯、鈣、無(wú)機(jī)磷，血?dú)馀c酸堿平衡，血液乳酸鈣、無(wú)機(jī)磷，血?dú)馀c酸堿平衡，血液乳酸l血清酶檢測(cè)：血清轉(zhuǎn)氨酶、血清堿性磷酸酶血血清酶檢測(cè)：血清轉(zhuǎn)氨酶、血清堿性磷酸酶血清清-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶、血清肌酸激酶血清乳酸脫谷氨酰轉(zhuǎn)移酶、血清肌酸激酶血清乳酸脫氫酶、血清淀粉酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘氫酶、血清淀粉酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶、血清銅氧化酶、血清膽堿酯酶肽過(guò)氧化物酶、血清銅氧化酶、血清膽堿酯酶 l血清其他生化指標(biāo)檢測(cè)：血糖、血清蛋白質(zhì)、血清其他生化指標(biāo)檢測(cè)：血糖、血清蛋白質(zhì)、血清膽紅素、血清膽固

11、醇、血清甘油三酯血清血清膽紅素、血清膽固醇、血清甘油三酯血清肌酐、血清尿素肌酐、血清尿素 、血清尿酸、維生素、血清尿酸、維生素（A/B/C.A/B/C.）臨床生化檢驗(yàn)臨床生化檢驗(yàn)Company Logo二、血清生化檢驗(yàn)二、血清生化檢驗(yàn)- -內(nèi)容內(nèi)容臨床生化檢驗(yàn)臨床生化檢驗(yàn)Company Logo二、血清生化檢驗(yàn)二、血清生化檢驗(yàn)- -輔助診斷輔助診斷l(xiāng)尿常規(guī)可以輔助診斷泌尿系統(tǒng)及其鄰尿常規(guī)可以輔助診斷泌尿系統(tǒng)及其鄰近器官疾病，查不出腎上腺，要查腎近器官疾病，查不出腎上腺，要查腎上腺功能，需要查腎上腺素、去甲腎上腺功能，需要查腎上腺素、去甲腎上腺素、多巴胺、促腎上腺皮質(zhì)激素上腺素、多巴胺、促腎上腺

12、皮質(zhì)激素等腎上腺分泌的激素等腎上腺分泌的激素臨床生化檢驗(yàn)臨床生化檢驗(yàn)Company Logo二、血清生化檢驗(yàn)二、血清生化檢驗(yàn)臨床生化檢驗(yàn)臨床生化檢驗(yàn)Company Logo二、血清生化檢驗(yàn)二、血清生化檢驗(yàn)l1.血糖 【臨床意義】對(duì)于胰島素，糖皮質(zhì)激素、腎上腺素等分泌不足或過(guò)多有鑒別意義，對(duì)于糖尿病的診斷和糖尿病的治療效果有一定意義。l2.二氧化碳結(jié)合力 【臨床意義】對(duì)于判斷代謝性或呼吸性酸中毒、堿中毒有一定意義。臨床生化檢驗(yàn)臨床生化檢驗(yàn)Company Logo二、血清生化檢驗(yàn)二、血清生化檢驗(yàn)l3.尿素氮（BUN） 【臨床意義】判定腎功能。增高可見(jiàn)于各種原因的腎功能損害；肝功能?chē)?yán)重?fù)p害時(shí)減低。l

13、4.肌酐 【臨床意義】對(duì)急、慢性腎炎的診斷和預(yù)后有重要意義l5.尿酸 【臨床意義】增高：臨床多見(jiàn)于痛風(fēng)、急性及慢性腎炎、白血病、多發(fā)性骨髓瘤等臨床生化檢驗(yàn)臨床生化檢驗(yàn)Company Logo二、血清生化檢驗(yàn)二、血清生化檢驗(yàn)l6.鉀、鈉、氯 【臨床意義】判定電解質(zhì)及酸堿平衡情況l7.鈣 【臨床意義】判定甲狀旁腺機(jī)能，維生素缺乏癥，骨腫瘤，多發(fā)骨髓瘤有意義。 l8.蛋白：總蛋白 、白蛋白 【臨床意義】可了解體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝的一般情況：對(duì)肝腎損害，多發(fā)性骨髓瘤等有一定診斷、鑒別診斷意義臨床生化檢驗(yàn)臨床生化檢驗(yàn)Company Logo二、血清生化檢驗(yàn)二、血清生化檢驗(yàn)l9.血清膽紅素：血清總膽紅素、血清直

14、接膽紅素 【臨床意義】診斷、鑒別診斷黃疸類(lèi)型有重要意義。心血管疾病、中毒時(shí)升高l10.谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT） 【臨床意義】對(duì)肝膽疾病的診斷及病情變的觀察有重要意義。l11.谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST） 【臨床意義】急性心肌梗塞時(shí)升高，肝病及其它臟器炎癥時(shí)也常增高臨床生化檢驗(yàn)臨床生化檢驗(yàn)Company Logo二、血清生化檢驗(yàn)二、血清生化檢驗(yàn)l12.r-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶或轉(zhuǎn)酞酶（r-GT） 【臨床意義】肝膽系統(tǒng)病變特別是肝癌時(shí)明顯增高。l13.肌酸磷酸激酶（CK） 【臨床意義】骨胳肌疾病、甲狀腺功能減退、急性心肌梗塞時(shí)顯著升高。l14.乳酸脫氫酶（LDH） 【臨床意義】心、肝、肺等組織急性損害時(shí)明顯增高 臨床

15、生化檢驗(yàn)臨床生化檢驗(yàn)Company Logo二、血清生化檢驗(yàn)二、血清生化檢驗(yàn)l15.堿性磷酸酶（AKP）l【臨床意義】阻塞性黃疸、肝炎、肝硬化、肺癌、骨肉瘤、腫瘤骨轉(zhuǎn)移等明顯升高。l16.膽堿酯酶（CHE）l【臨床意義】有機(jī)磷中毒，嚴(yán)重而廣泛的肝實(shí)質(zhì)性損害時(shí)減低。 l17. 淀粉酶（AMS） l【臨床意義】診斷胰腺炎、胰腺癌的主要指標(biāo)之一。流行性腮腺炎甲期，胰腺附近的胃穿孔，也常增高。臨床生化檢驗(yàn)臨床生化檢驗(yàn)Company Logo二、血清生化檢驗(yàn)二、血清生化檢驗(yàn)l18.總膽固醇、甘油三脂 【臨床意義】了解體內(nèi)脂代謝情況，對(duì)冠心病、動(dòng)脈粥樣硬化、高血壓、甲狀腺機(jī)能減退等診斷有意義。 臨床生化檢

16、驗(yàn)臨床生化檢驗(yàn)Company Logo三、血清蛋白檢驗(yàn)三、血清蛋白檢驗(yàn)l免疫化學(xué)法特異定量個(gè)別蛋白質(zhì) 常規(guī)：免疫濁度法、免疫擴(kuò)散法，免疫電泳 法， 微量：放射免疫測(cè)定（RIA），酶免疫測(cè)定法 （ELA/ELISA）l電泳測(cè)定：電泳 組成圖譜 半定量 定量l定量化學(xué)測(cè)定TPr，Alb 染料結(jié)合法，UV法，折光法等臨床生化檢驗(yàn)臨床生化檢驗(yàn)Company Logo三、血清蛋白檢驗(yàn)三、血清蛋白檢驗(yàn)- -總蛋白測(cè)定總蛋白測(cè)定l1.凱氏定氮法參考方法 l2.雙縮脲法(推薦) l3.酚試劑法 l4.散射比濁法l5.染料結(jié)合法l6. UV 法l7.折光測(cè)定法臨床生化檢驗(yàn)臨床生化檢驗(yàn)Company Logo三、

17、血清蛋白檢驗(yàn)三、血清蛋白檢驗(yàn)- -總蛋白測(cè)定總蛋白測(cè)定1.1.凱氏定氮法參考方法凱氏定氮法參考方法l優(yōu)點(diǎn)：準(zhǔn)確度高，精密度高，靈敏度高，是公認(rèn)的參考方法。l缺點(diǎn)：操作復(fù)雜，費(fèi)時(shí)，不適合常規(guī)檢測(cè)，血清各蛋白含氮量會(huì)有所變化尤其是疾病時(shí)。l應(yīng)用：標(biāo)準(zhǔn)蛋白的標(biāo)定及校正其它常規(guī)方法臨床生化檢驗(yàn)臨床生化檢驗(yàn)Company Logo三、血清蛋白檢驗(yàn)三、血清蛋白檢驗(yàn)- -總蛋白測(cè)定總蛋白測(cè)定2.雙縮脲法l優(yōu)點(diǎn)：簡(jiǎn)便，準(zhǔn)確，重復(fù)性好，10g-120g/L線(xiàn)性好，特異性與精密度好，批內(nèi)CV%2%，顯色穩(wěn)定。l缺點(diǎn)：靈敏度較差，對(duì)蛋白質(zhì)含量低的體液標(biāo)本不適合。l應(yīng)用：常規(guī)推薦方法。手工或上機(jī)使用。臨床生化檢驗(yàn)臨床

18、生化檢驗(yàn)Company Logo三、血清蛋白檢驗(yàn)三、血清蛋白檢驗(yàn)- -總蛋白測(cè)定總蛋白測(cè)定l3.酚試劑法(Folin試劑法）lLowry改良法：在酚試劑中加入Cu2+，提高了呈色的靈敏度，為雙縮脲法的100倍左右。吸收峰為745-750nm。l優(yōu)點(diǎn)：操作簡(jiǎn)單，改良法靈敏度高（10g-60g），適合測(cè)定蛋白含量少的標(biāo)本。l缺點(diǎn)：各種蛋白質(zhì)酪氨酸和色氨酸比例不同，只適合測(cè)定單一蛋白質(zhì)。受一些藥物干擾。臨床生化檢驗(yàn)臨床生化檢驗(yàn)Company Logo三、血清蛋白檢驗(yàn)三、血清蛋白檢驗(yàn)- -總蛋白測(cè)定總蛋白測(cè)定4.比濁法l優(yōu)點(diǎn)：簡(jiǎn)便不需特殊儀器。l缺點(diǎn)：濁度形成的干擾因素多（加試劑方法，反應(yīng)溫度，蛋白絮

19、狀沉淀等）5.染料結(jié)合法l優(yōu)點(diǎn)：操作簡(jiǎn)便，重復(fù)性好，靈敏度高，且干擾因素少。l缺點(diǎn)：特異性不高；不同蛋白質(zhì)和染料的結(jié)合力不一致，標(biāo)準(zhǔn)物不易確定。臨床生化檢驗(yàn)臨床生化檢驗(yàn)Company Logo三、血清蛋白檢驗(yàn)三、血清蛋白檢驗(yàn)- -總蛋白測(cè)定總蛋白測(cè)定6.紫外分光光度法l優(yōu)點(diǎn)：敏感而簡(jiǎn)便，可保留蛋白生物活性，常用與較純的酶和免疫球蛋白。需紫外分光光度計(jì)及石英比色皿。l缺點(diǎn)：各種蛋白質(zhì)中芳香族氨基酸含量和比例不同；在280nm測(cè)定易受游離色aa和酪aa以及尿酸和膽紅素的干擾；核酸在206nm有最大吸收，在280nm有較大吸收，導(dǎo)致準(zhǔn)確性和特異性受影響。l措施：在220-225nm波長(zhǎng)區(qū)域，用0.1

20、5mol/l的NaCl稀釋1000-2000倍可消除干擾。5.染料結(jié)合法臨床生化檢驗(yàn)臨床生化檢驗(yàn)Company Logo三、血清蛋白檢驗(yàn)三、血清蛋白檢驗(yàn)- -總蛋白測(cè)定總蛋白測(cè)定7.折光測(cè)定法l優(yōu)點(diǎn)：簡(jiǎn)便、快速，易掌握，重復(fù)性較好，適合臨床急診，體檢篩查和胸腹水蛋白質(zhì)測(cè)定。l缺點(diǎn)：準(zhǔn)確性較差，易受高血脂癥，高膽紅素血癥以及溶血等因素影響，會(huì)由于A/G比值變化而產(chǎn)生誤差。 臨床生化檢驗(yàn)臨床生化檢驗(yàn)Company Logo三、血清蛋白檢驗(yàn)三、血清蛋白檢驗(yàn)- -總蛋白測(cè)定總蛋白測(cè)定臨床意義：l總蛋白升高： 真性升高：MM、巨球蛋白血癥、自身免疫性疾病等 假性升高：機(jī)體明顯失水，總蛋白含量相對(duì)升高，A

21、/G幾乎不變l總蛋白降低：丟失過(guò)多 消耗增加 白蛋白合成減少 水腫臨床生化檢驗(yàn)臨床生化檢驗(yàn)Company Logo三、血清蛋白檢驗(yàn)三、血清蛋白檢驗(yàn)- -白蛋白測(cè)定白蛋白測(cè)定l1.染料結(jié)合法( 推薦) l2.鹽析法l3.電泳法l4.免疫化學(xué)法臨床生化檢驗(yàn)臨床生化檢驗(yàn)Company LogoContents概述概述1臨床生化檢查臨床生化檢查2臨床免疫學(xué)及血清學(xué)檢查臨床免疫學(xué)及血清學(xué)檢查3血清學(xué)新技術(shù)血清學(xué)新技術(shù)Company Logo免疫血清學(xué)技術(shù)免疫血清學(xué)技術(shù)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn) 用于檢測(cè)抗原或抗體的體外免疫反應(yīng)技術(shù)或稱(chēng)免疫檢測(cè)技術(shù)，這一類(lèi)技術(shù)因一般都需用血清進(jìn)行試驗(yàn)，通常稱(chēng)為免疫血清學(xué)

22、反應(yīng)或免疫血清學(xué)技術(shù) 。Company Logo免疫血清學(xué)實(shí)驗(yàn)免疫血清學(xué)實(shí)驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)一、凝聚性試驗(yàn)l凝集試驗(yàn)：由顆粒性抗原參與l沉淀試驗(yàn)：由可溶性抗原參與二、標(biāo)記抗體技術(shù) l熒光抗體標(biāo)記技術(shù) l酶標(biāo)抗體技術(shù)l同位素標(biāo)記技術(shù) 三、中和試驗(yàn) l終點(diǎn)法中和試驗(yàn)l空斑減少試驗(yàn)Company Logo免疫血清學(xué)實(shí)驗(yàn)免疫血清學(xué)實(shí)驗(yàn)- -凝集試驗(yàn)?zāi)囼?yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)l參與凝集試驗(yàn)的抗體主要為IgG、IgM。l凝集試驗(yàn)可用于檢測(cè)抗原或抗體。l凝集試驗(yàn)可根據(jù)抗原的性質(zhì)、反應(yīng)的方式分為直接凝集試驗(yàn)（簡(jiǎn)稱(chēng)凝集試驗(yàn)）和間接凝集試驗(yàn)。 Company Logo免疫血清學(xué)實(shí)驗(yàn)免疫血清學(xué)

23、實(shí)驗(yàn)- -凝集試驗(yàn)?zāi)囼?yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)直接凝集試驗(yàn) l顆粒性抗原與凝集素直接結(jié)合并出現(xiàn)凝集現(xiàn)象的試驗(yàn)稱(chēng)作直接凝集試驗(yàn)(direct agglutination test) l玻片法：定性試驗(yàn)，適用于新分離細(xì)菌的鑒定或分型 l試管法：定量試驗(yàn)，檢測(cè)待測(cè)血清中是否存在相應(yīng)抗體和測(cè)定抗體含量 Company Logo免疫血清學(xué)實(shí)驗(yàn)免疫血清學(xué)實(shí)驗(yàn)- -凝集試驗(yàn)?zāi)囼?yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)間接凝集試l將可溶性抗原(或抗體)先吸附于一種與免疫無(wú)關(guān)的，一定大小的不溶性顆粒(統(tǒng)稱(chēng)為載體顆粒)的表面，然后與相應(yīng)抗體(或抗原)作用，在有電解質(zhì)存在的適宜條件下，所出現(xiàn)的特異性凝集反應(yīng)稱(chēng)為間接

24、凝集反應(yīng)。l敏感性高，但特異性較差 Company Logo免疫血清學(xué)實(shí)驗(yàn)免疫血清學(xué)實(shí)驗(yàn)- -凝集試驗(yàn)?zāi)囼?yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)間接血凝試驗(yàn)l將抗原致敏于紅細(xì)胞表面，用以檢測(cè)相應(yīng)抗體，在與相應(yīng)抗體反應(yīng)時(shí)出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)凝集，稱(chēng)為間接血凝試驗(yàn)(passive heamagglutination assay, PHA) l將抗體致敏于紅細(xì)胞表面，用以檢測(cè)檢樣本中相應(yīng)抗原，致敏紅細(xì)胞在與相應(yīng)抗原反應(yīng)時(shí)發(fā)生凝集，稱(chēng)為反向間接血凝試驗(yàn)(reverse passive heamagglutination assay, RPHA)。Company Logo免疫血清學(xué)實(shí)驗(yàn)免疫血清學(xué)實(shí)驗(yàn)- -凝集試驗(yàn)?zāi)?/p>

25、試驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)乳膠凝集試驗(yàn)l聚苯乙烯乳膠是利用化工原料聚苯乙稀經(jīng)過(guò)乳液聚合得到的高分子乳膠液，乳膠微球直徑約0.8m。l對(duì)蛋白質(zhì)、核酸等高分子物質(zhì)具有良好的吸附性能。l利用聚苯乙烯乳膠的微球作載體，以吸附某些抗原(或抗體)，即能用以檢測(cè)相應(yīng)的抗體(或抗原)，稱(chēng)為乳膠凝集反應(yīng)。(latex agglutination test)Company Logo免疫血清學(xué)實(shí)驗(yàn)免疫血清學(xué)實(shí)驗(yàn)- -凝集試驗(yàn)?zāi)囼?yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)協(xié)同凝集試驗(yàn)l葡萄球菌A蛋白(staphylococal protein A，簡(jiǎn)稱(chēng)SPA)是大多數(shù)金黃色葡萄球菌的特異性表面抗原，能與多種哺乳動(dòng)物IgG

26、分子的Fc片結(jié)合。lSPA與IgG結(jié)合后，其Fab片暴露于外，并保持其抗體活性。l當(dāng)此被覆著特異性抗體的葡萄球菌與相應(yīng)的抗原結(jié)合時(shí)，就可互相連結(jié)引起協(xié)同凝集反應(yīng)，簡(jiǎn)稱(chēng)COAG。 Company Logo免疫血清學(xué)實(shí)驗(yàn)免疫血清學(xué)實(shí)驗(yàn)- -沉淀試驗(yàn)沉淀試驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn) 可溶性抗原(如細(xì)菌的外毒素、內(nèi)毒素、菌體裂解液，病毒的可溶性抗原、血清、組織浸出液等)與相應(yīng)抗體結(jié)合，在適量電解質(zhì)存在下，形成肉眼可見(jiàn)的白色沉淀，稱(chēng)為沉淀試驗(yàn)(precipitation test)。 Company Logo免疫血清學(xué)實(shí)驗(yàn)免疫血清學(xué)實(shí)驗(yàn)- -沉淀試驗(yàn)沉淀試驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)環(huán)狀沉淀試驗(yàn)l

27、在小口徑試管內(nèi)先加入已知抗血清，然后小心沿管壁加入待檢抗原于血清表面，使之成為分界清晰的兩層l數(shù)分鐘后，兩層液面交界處出現(xiàn)白色環(huán)狀沉淀，即為陽(yáng)性反應(yīng)。l本法主要用于抗原的定性試驗(yàn)，如炭疽病的診斷(Ascoli試驗(yàn))。試驗(yàn)時(shí)出現(xiàn)白色沉淀帶的最高抗原稀釋倍數(shù)，即為血清的沉淀價(jià)。 Company Logo免疫血清學(xué)實(shí)驗(yàn)免疫血清學(xué)實(shí)驗(yàn)- -沉淀試驗(yàn)沉淀試驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)瓊脂免疫擴(kuò)散試驗(yàn)l抗原抗體在瓊脂凝膠中擴(kuò)散，當(dāng)二者在比例適當(dāng)處相遇，即發(fā)生沉淀反應(yīng)，形成肉眼可見(jiàn)的沉淀帶，此種反應(yīng)稱(chēng)為瓊脂免疫擴(kuò)散，又簡(jiǎn)稱(chēng)瓊脂擴(kuò)散和免疫擴(kuò)散。l單向單擴(kuò)散 單向雙擴(kuò)散l雙向單擴(kuò)散 雙向雙擴(kuò)散Company

28、Logo免疫血清學(xué)實(shí)驗(yàn)免疫血清學(xué)實(shí)驗(yàn)- -酶標(biāo)抗體技術(shù)酶標(biāo)抗體技術(shù)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)l根據(jù)抗原抗體反應(yīng)的特異性和酶催化反應(yīng)的高敏感性而建立起來(lái)的免疫檢測(cè)技術(shù)。l基本程序：標(biāo)記抗原抗體復(fù)合物底物l根據(jù)底物溶液的顏色反應(yīng)來(lái)判定有無(wú)相應(yīng)的免疫反應(yīng)。顏色反應(yīng)的深淺與標(biāo)本中相應(yīng)抗體或抗原的量呈正比。 Company Logo免疫血清學(xué)實(shí)驗(yàn)免疫血清學(xué)實(shí)驗(yàn)- -酶標(biāo)抗體技術(shù)酶標(biāo)抗體技術(shù)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)lELISA是當(dāng)前應(yīng)用最廣、發(fā)展最快的一項(xiàng)新技術(shù)。其基本過(guò)程是將抗原(或抗體)吸附于固相載體，在載體上進(jìn)行免疫酶染色反應(yīng)，底物顯色后用肉眼或分光光度計(jì)判定結(jié)果

29、。 Company Logo免疫血清學(xué)實(shí)驗(yàn)免疫血清學(xué)實(shí)驗(yàn)- -酶標(biāo)抗體技術(shù)酶標(biāo)抗體技術(shù)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)免疫組化染色技術(shù)l標(biāo)本制備和處理：組織切片、壓片、涂片、細(xì)胞蓋片；消除內(nèi)源性過(guò)氧化酶l染色：間接法、直接法l顯色l觀察Company Logo免疫血清學(xué)實(shí)驗(yàn)免疫血清學(xué)實(shí)驗(yàn)- -放射免疫測(cè)定（放射免疫測(cè)定（RIARIA）臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)l將同位素測(cè)量的高度敏感性和抗原抗體反應(yīng)的高度特異性結(jié)合起來(lái)而建立的免疫分析技術(shù)l可定量分析，也可定性分析l特異性強(qiáng)、靈敏度高、準(zhǔn)確性和精密度好Company Logo免疫血清學(xué)實(shí)驗(yàn)免疫血清學(xué)實(shí)驗(yàn)- -中和試驗(yàn)中和試驗(yàn) 臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免

30、疫學(xué)檢驗(yàn)l抗體能否中和病毒的感染性而建立的免疫學(xué)試驗(yàn)稱(chēng)為中和試驗(yàn)。l主要用于病毒感染的血清學(xué)診斷、病毒分離株的鑒定、不同病毒株的抗原關(guān)系研究、疫苗免疫原性的評(píng)價(jià)、免疫血清的質(zhì)量評(píng)價(jià)和檢測(cè)動(dòng)物血清中的抗體等。 Company Logo免疫血清學(xué)實(shí)驗(yàn)免疫血清學(xué)實(shí)驗(yàn)- -中和試驗(yàn)中和試驗(yàn) 臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)終點(diǎn)法中和試驗(yàn)(endpoint neutralization test) l固定病毒稀釋血清法：測(cè)定病毒毒價(jià)；固定病毒稀釋血清接種細(xì)胞或動(dòng)物，計(jì)算中和價(jià) l固定血清稀釋病毒法：固定血清稀釋病毒接種細(xì)胞或動(dòng)物，計(jì)算LD50，然后計(jì)算中和指數(shù)（中和組LD50/對(duì)照組LD50） Compan

31、y Logo免疫血清學(xué)實(shí)驗(yàn)免疫血清學(xué)實(shí)驗(yàn)- -中和試驗(yàn)中和試驗(yàn) 臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)l空斑減少試驗(yàn)(plague reduction test)：空斑數(shù)減少50的血清量作為中和滴度l病毒稀釋成每一接種劑量含100PFU，加倍比稀釋的血清，37 1hl接種細(xì)胞l加入預(yù)溫的營(yíng)養(yǎng)瓊脂l計(jì)算空斑數(shù)Company Logo免疫血清學(xué)實(shí)驗(yàn)免疫血清學(xué)實(shí)驗(yàn)- -其他檢測(cè)技術(shù)其他檢測(cè)技術(shù) 臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)l免疫轉(zhuǎn)印技術(shù)（immunoblotting） l免疫沉淀（immunoprecipitation） l化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定（chemiluminescent immunoassay，CLIA）

32、 l膠體金免疫檢測(cè)技術(shù) Company Logo免疫血清學(xué)實(shí)驗(yàn)免疫血清學(xué)實(shí)驗(yàn)- -沉淀試驗(yàn)沉淀試驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)間接血凝試驗(yàn)l將抗原致敏于紅細(xì)胞表面，用以檢測(cè)相應(yīng)抗體，在與相應(yīng)抗體反應(yīng)時(shí)出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)凝集，稱(chēng)為間接血凝試驗(yàn)(passive heamagglutination assay, PHA) l將抗體致敏于紅細(xì)胞表面，用以檢測(cè)檢樣本中相應(yīng)抗原，致敏紅細(xì)胞在與相應(yīng)抗原反應(yīng)時(shí)發(fā)生凝集，稱(chēng)為反向間接血凝試驗(yàn)(reverse passive heamagglutination assay, RPHA)。Company Logo免疫血清學(xué)實(shí)驗(yàn)免疫血清學(xué)實(shí)驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)一

33、、凝聚性試驗(yàn)l凝集試驗(yàn)：由顆粒性抗原參與l沉淀試驗(yàn)：由可溶性抗原參與Company Logo免疫血清學(xué)實(shí)驗(yàn)免疫血清學(xué)實(shí)驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)一、凝聚性試驗(yàn)l凝集試驗(yàn)：由顆粒性抗原參與l沉淀試驗(yàn)：由可溶性抗原參與Company Logo免疫血清學(xué)實(shí)驗(yàn)免疫血清學(xué)實(shí)驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)一、凝聚性試驗(yàn)l凝集試驗(yàn)：由顆粒性抗原參與l沉淀試驗(yàn)：由可溶性抗原參與Company Logo1 1、總補(bǔ)體和單個(gè)成分的測(cè)定、總補(bǔ)體和單個(gè)成分的測(cè)定臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)血清總補(bǔ)體溶血活性（CH50）測(cè)定l50溶血法：50100Umll脂質(zhì)體法：2655 lUmll目視比色法 Company L

34、ogo1 1、總補(bǔ)體和單個(gè)成分的測(cè)定、總補(bǔ)體和單個(gè)成分的測(cè)定臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床意義 補(bǔ)體是機(jī)體免疫防御系統(tǒng)的重要組成部分，其主要功能是抗感染，同時(shí)也有引起炎癥的作用，參與變態(tài)反應(yīng)?？傃a(bǔ)體活性測(cè)定，主要是反映補(bǔ)體(C1C9)經(jīng)傳統(tǒng)途徑活化的活性。 等。Company Logo1 1、總補(bǔ)體和單個(gè)成分的測(cè)定、總補(bǔ)體和單個(gè)成分的測(cè)定臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)l總補(bǔ)體活性升高：見(jiàn)于各種急性炎癥、感染、組織損傷、惡性腫瘤等，一些傳染病，如風(fēng)濕熱、傷寒、結(jié)核、麻疹等也可見(jiàn)補(bǔ)體代償性升高l總補(bǔ)體活性降低，可能有以下幾種原因： (1)補(bǔ)體消耗增多：常見(jiàn)于血清病、急性腎小球腎炎、慢性腎炎、SLE

35、活動(dòng)期、惡性類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、自身免疫性溶血性貧血等。 (2)補(bǔ)體大量喪失：多見(jiàn)于腎病綜合征乃大面積烙傷等情況；。 (3)補(bǔ)體合成不足：主要見(jiàn)于各種肝病患者，如肝硬化、慢性活動(dòng)性肝炎及急性重癥肝炎Company Logo1 1、總補(bǔ)體和單個(gè)成分的測(cè)定、總補(bǔ)體和單個(gè)成分的測(cè)定臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)l常作為單個(gè)補(bǔ)體成分的檢測(cè)指標(biāo)：C3、C4、C1q、B因子和C1酯酶抑制物等。l測(cè)定方法： 免疫溶血法 （檢測(cè)單個(gè)補(bǔ)體成分的活性） 免疫化學(xué)法（檢測(cè)單個(gè)補(bǔ)體成分的含量） 自動(dòng)化免疫散射比濁法 Company Logo1 1、總補(bǔ)體和單個(gè)成分的測(cè)定、總補(bǔ)體和單個(gè)成分的測(cè)定臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)免

36、疫溶血法-以“C4活性測(cè)定”為例l該方法要用新鮮RBC、溶血素、豚鼠血清、影響因素多。l也可用平皿法： 用EAR4制備瓊脂板、打孔、加樣，以溶血環(huán)直徑大小判斷C4活性。l用免疫化學(xué)法檢測(cè)C4含量，簡(jiǎn)單、特異、重復(fù)性好，但不能反映其活性。l4.臨床意義：用于檢測(cè)先天性補(bǔ)體缺乏； 含量降低：遺傳性血管性水腫、原發(fā)性混合性冷球蛋白血癥。Company Logo1 1、總補(bǔ)體和單個(gè)成分的測(cè)定、總補(bǔ)體和單個(gè)成分的測(cè)定臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)免疫化學(xué)法分類(lèi)：1.單向免疫擴(kuò)散 2.火箭免疫電泳 3.透射比濁法 4.散射比濁法l前兩種方法：手工操作繁瑣、耗時(shí)長(zhǎng)、影響因素多、結(jié)果重復(fù)性差，已趨于淘汰。l后兩

37、種方法：通過(guò)儀器對(duì)補(bǔ)體的C3、C4、B因子等單個(gè)成分進(jìn)行自動(dòng)化測(cè)定 。Company Logo2 2、免疫球蛋白測(cè)定、免疫球蛋白測(cè)定臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)l免疫球蛋白G（IgG）l免疫球蛋白A（IgA）l免疫球蛋白M（IgM）l免疫球蛋白D（IgD）l免疫球蛋白E（IgE）l心肌肌鈣蛋白T（cTnT）l肌紅蛋白（Mb）l類(lèi)風(fēng)濕因子（RF）Company Logo2 2、免疫球蛋白測(cè)定、免疫球蛋白測(cè)定臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)l1.低Ig血癥（1）先天性低Ig血癥 （2）獲得性低Ig血癥l2.高Ig血癥（1）非特異型多克隆免疫球蛋白增高癥 （2）特異型單克隆免疫球蛋白增殖癥Company

38、 Logo2 2、免疫球蛋白測(cè)定、免疫球蛋白測(cè)定臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)l（一）血清蛋白區(qū)帶電泳 M區(qū)帶的出現(xiàn)l（二）免疫球蛋白定量 某一類(lèi)免疫球蛋白的顯著增高l（三）輕鏈片段定量測(cè)定 單向免疫擴(kuò)散法或ELISAl（四）免疫電泳或免疫固定電泳Company Logo2 2、免疫球蛋白測(cè)定、免疫球蛋白測(cè)定臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)免疫球蛋白G（IgG）l增高： IgG、IgA、IgM在機(jī)體的防御中發(fā)揮重要作用。若IgG、IgA、IgM幾種不同的免疫球蛋白均增高稱(chēng)之為多克隆性增高，常見(jiàn)于各種感染，特別是慢性感染、自身免疫性疾病如系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）、淋巴瘤、肺結(jié)核、肝臟疾病和寄生蟲(chóng)病等；

39、 單一的免疫球蛋白增高，又稱(chēng)單克隆性增高，主要見(jiàn)于免疫增殖性疾病，如多發(fā)性骨髓瘤等。lIgG降低： 可見(jiàn)于各種先天性或獲得性體液免疫缺陷病、聯(lián)合免疫缺陷病等。Company Logo2 2、免疫球蛋白測(cè)定、免疫球蛋白測(cè)定臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)免疫球蛋白A（IgA）l增高： 見(jiàn)于IgA型分泌型多發(fā)性骨髓瘤（MM）、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、肝硬化和腎臟疾病等。l降低： 多見(jiàn)于反復(fù)呼吸道感染、原發(fā)性和繼發(fā)性免疫缺陷病及自身免疫性疾病等。Company Logo2 2、免疫球蛋白測(cè)定、免疫球蛋白測(cè)定臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)免疫球蛋白M（IgM）l增高： 見(jiàn)于病毒性肝炎初期、系統(tǒng)性紅斑狼

40、瘡、類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、肝硬化等。l降低： 可見(jiàn)于IgA型多發(fā)性骨髓瘤、先天性免疫缺陷病、免疫抑制療法后、淋巴系統(tǒng)疾病和腎病綜合征等。Company Logo2 2、免疫球蛋白測(cè)定、免疫球蛋白測(cè)定臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)免疫球蛋白D（IgD）l升高：多發(fā)性高IgD血癥：慢性感染性疾病（結(jié)核、麻風(fēng)、骨髓炎、化膿性皮膚?。?、惡性營(yíng)養(yǎng)不良、特異反應(yīng)性疾病、部分原發(fā)性免疫缺陷癥（高IgM血癥、伴免疫球蛋白缺乏癥、IgA單獨(dú)缺乏癥）、周期性發(fā)熱（2-12年）等；單純性高IgD血癥：IgD骨髓瘤、良性單純性免疫球蛋白血癥很少、IgD型多發(fā)性骨髓瘤等。 l降低：IgD缺乏的家族（常染色體異常）、IgD、IgA

41、、IgM免疫球蛋白減少為原發(fā)性免疫功能缺陷癥（幼畜的一過(guò)性低-球蛋白血癥、重癥復(fù)合性免疫功能缺陷癥（SCID）、Good綜合征，IgD顯著減少甚至消失：類(lèi)肉瘤病、IgD單獨(dú)缺乏有易感的傾向等。 Company Logo2 2、免疫球蛋白測(cè)定、免疫球蛋白測(cè)定臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)免疫球蛋白E（IgE）l升高： 見(jiàn)于變態(tài)反應(yīng)性疾病、寄生蟲(chóng)感染、急慢性肝炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等。特別是IgE型多發(fā)性骨髓瘤病病畜，IgE增高可作為臨床確診依據(jù)。l降低： 多見(jiàn)于先天性或獲得性丙種球蛋白缺乏癥、惡性腫瘤、長(zhǎng)期使用免疫抑制劑等。Company Logo2 2、免疫球蛋白測(cè)定、免疫球蛋白測(cè)定

42、臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)心肌肌鈣蛋白T（cTnT）l肌鈣蛋白為近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的心肌蛋白標(biāo)志物，具有高度心肌特異性。主要用于診斷心肌缺血性損傷，包括心絞痛、可逆性心肌組織損傷、不穩(wěn)定性心絞痛、心肌梗死等。 Company Logo2 2、免疫球蛋白測(cè)定、免疫球蛋白測(cè)定臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)肌紅蛋白（Mb）l肌紅蛋白是一項(xiàng)出現(xiàn)早、敏感性高而非特異性的診斷指標(biāo)，對(duì)急性心肌梗死（AMI）早期診斷有一定價(jià)值。它存在于心肌和骨骼肌中，在急性心肌梗死時(shí)釋放入血，癥狀出現(xiàn)后13小時(shí)升高，412小時(shí)達(dá)到高峰，故在診斷急性心肌梗死和判斷急性心肌梗死病情方面具有主要一定的價(jià)值。l（1） 骨骼肌損傷： 急性肌肉

43、損傷和肌病。l（2） 休克。l（3） 急性或慢性腎衰竭。Company Logo3 3、免疫復(fù)合物的測(cè)定、免疫復(fù)合物的測(cè)定臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)免疫復(fù)合物：l抗原特異性循環(huán)免疫復(fù)合物l非抗原特異性循環(huán)免疫復(fù)合物Company Logo3 3、免疫復(fù)合物的測(cè)定、免疫復(fù)合物的測(cè)定臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)一、PEG 比濁法lPEG 用于沉淀蛋白質(zhì)，沉淀具有可選性，對(duì)蛋白質(zhì)生物活性無(wú)影響。在pH、離子強(qiáng)度等條件固定時(shí)，蛋白質(zhì)分子量越大，用以沉淀的 PEG 濃度越小。分離血清免疫復(fù)合物一般采用最終濃度為 34PEG(分子量 6000)，對(duì)蛋白質(zhì)沉淀具有良好的選擇性。其濁度與血清中免疫復(fù)合物含量

44、相關(guān)，用分光光度計(jì)測(cè)定其 A 值，以每批試驗(yàn)熱聚人 IgG(heat agglutionafionhuman IgG，HAHG)制備出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，可得免疫復(fù)合物相對(duì)含量。Company Logo3 3、免疫復(fù)合物的測(cè)定、免疫復(fù)合物的測(cè)定臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)二、C1q 固相法l利用循環(huán)免疫復(fù)合物具有與 C1q 結(jié)合的特性，包被 Clq 于微量反應(yīng)板，加入待測(cè)血清，免疫復(fù)合物與 C1q 結(jié)合，再用標(biāo)記抗人 IgG 檢測(cè)免疫復(fù)合物中 IgG，加底物顯色，根據(jù)顏色深淺判斷免疫復(fù)合物含量。反應(yīng)層次為C1q-免疫復(fù)合物一酶標(biāo)記抗人 IgG 底物。Company Logo3 3、免疫復(fù)合物的測(cè)定、免疫

45、復(fù)合物的測(cè)定臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)三、抗 C3 一 CICELISAl將抗 C3 抗體包被，循環(huán)免疫復(fù)合物在體內(nèi)已結(jié)合了 C3，通過(guò) C3 介導(dǎo)CIC 與固相抗 C3 連接，加酶標(biāo)記抗人 IgG 檢測(cè)復(fù)合物中 IgG，加底物顯色，根據(jù)顏色深淺判斷免疫復(fù)合物含量，反應(yīng)層次為抗 c3 抗體一免疫復(fù)合物一酶標(biāo)記抗人 IgG 抗體一底物。Company Logo3 3、免疫復(fù)合物的測(cè)定、免疫復(fù)合物的測(cè)定臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)Raji 細(xì)胞法：lRaji 細(xì)胞是由 Burkitt 淋巴瘤患者分離建立的 B 細(xì)胞株，可在體外長(zhǎng)期傳代。其表面有大量 C3b、C1q 和 C3d 受體，無(wú) mIg，

46、利用這些受體與結(jié)合補(bǔ)體的循環(huán)免疫復(fù)合物結(jié)合，加入同位素標(biāo)記的抗人 IgG，反應(yīng)層次為 Raji 細(xì)胞一循環(huán)免疫復(fù)合物一同位素標(biāo)記抗人 IgG 復(fù)合物。本方法敏感性較高，實(shí)用性強(qiáng)。但需培養(yǎng) Raji 細(xì)胞及同位素標(biāo)記抗 IgG，操作繁瑣，不易長(zhǎng)期保持實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定。Company Logo3 3、免疫復(fù)合物的測(cè)定、免疫復(fù)合物的測(cè)定臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)評(píng)價(jià)：高度敏感性；簡(jiǎn)便可作常規(guī)應(yīng)用；相對(duì)特異性，能檢出各種抗體類(lèi)型和分子大小的循環(huán)免疫復(fù)合物；重復(fù)性好；試驗(yàn)前不需對(duì)標(biāo)本進(jìn)行滅活或特殊處理。檢測(cè)循環(huán)免疫復(fù)合物的方法雖有幾十種，但仍沒(méi)有一種能具備上述所有特點(diǎn)。所以各種方法只能檢測(cè)某一類(lèi)或某個(gè)范

47、圍的免疫復(fù)合物；不同方法檢測(cè)循環(huán)免疫復(fù)合物原理各異。Company Logo4 4、自身抗體的檢測(cè)、自身抗體的檢測(cè)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)l（一）抗核抗體 （antinuclear antibody，ANAl（二）抗ENA抗體譜l（三）類(lèi)風(fēng)濕因子（rheumatoid factor，RF） l（四）其他自身抗體Company Logo4 4、自身抗體的檢測(cè)、自身抗體的檢測(cè)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)（一）ANA的檢測(cè)方法l間接免疫熒光法l用小鼠肝切片或印片作為細(xì)胞核基質(zhì)，還可用核質(zhì)豐富的培養(yǎng)細(xì)胞如Hep-2，作為抗原。l用熒光顯微鏡觀察ANA熒光著染強(qiáng)度和免疫熒光圖形。l稀釋待檢血清可檢測(cè)

48、ANA效價(jià)。Company Logo4 4、自身抗體的檢測(cè)、自身抗體的檢測(cè)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)（二）抗ENA抗體譜的檢測(cè)方法l雙向免疫擴(kuò)散l對(duì)流免疫電泳l斑點(diǎn)酶免疫技術(shù)l免疫印跡技術(shù)Company Logo4 4、自身抗體的檢測(cè)、自身抗體的檢測(cè)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)（三）類(lèi)風(fēng)濕因的檢測(cè)方法lRF的檢測(cè)最常用IgG致敏的膠乳顆粒凝集試驗(yàn)，或速度散射比濁法，但只能檢測(cè)IgM類(lèi)的RF。IgG類(lèi)，IgA類(lèi)和IgE類(lèi)RF需ELISA等方法檢測(cè)Company Logo5 5、腫瘤免疫學(xué)檢查、腫瘤免疫學(xué)檢查臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)?zāi)[瘤標(biāo)志物檢測(cè)l放射免疫測(cè)定法（RIA）l酶免疫測(cè)定法（EIA）l熒光免疫測(cè)定法 （FEIA）l時(shí)間分辨熒光分析法l化學(xué)發(fā)光