微生物知識(shí)和環(huán)境控制要求

1、微生物知識(shí)微生物知識(shí) &環(huán)境控制要求環(huán)境控制要求孫青2014.10.21 第一部分第一部分微生物知識(shí)微生物知識(shí) 什么是微生物？什么是微生物？l定義：微生物是定義：微生物是一切肉眼一切肉眼看不見(jiàn)看不見(jiàn)或或看不清楚的看不清楚的微小微小生物的總稱。生物的總稱。l必須借助必須借助光學(xué)顯微鏡光學(xué)顯微鏡或或電電子顯微鏡子顯微鏡放大數(shù)百倍、數(shù)放大數(shù)百倍、數(shù)千倍，甚至數(shù)萬(wàn)倍才能觀千倍，甚至數(shù)萬(wàn)倍才能觀察到的微小生物。察到的微小生物。微微生生物物的的分分類類具有細(xì)胞結(jié)具有細(xì)胞結(jié)構(gòu)構(gòu)的微生物的微生物沒(méi)有細(xì)胞結(jié)構(gòu)沒(méi)有細(xì)胞結(jié)構(gòu)的的微生物：病毒微生物：病毒 原核生物原核生物（由原核細(xì)胞構(gòu)成的）（由原核細(xì)胞構(gòu)成的） 真核

2、生物真核生物（由真核細(xì)胞構(gòu)成的）（由真核細(xì)胞構(gòu)成的）真菌真菌顯微藻類顯微藻類原生動(dòng)物原生動(dòng)物細(xì)菌細(xì)菌放線菌放線菌 細(xì)菌細(xì)菌：肺炎球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌：肺炎球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌真菌真菌：蘑菇、霉菌、酵母菌、念珠菌（濕疹）：蘑菇、霉菌、酵母菌、念珠菌（濕疹）放線菌放線菌：從放線菌中發(fā)現(xiàn)鏈霉素、土霉素從放線菌中發(fā)現(xiàn)鏈霉素、土霉素支原體支原體：肺炎支原體：肺炎支原體衣原體衣原體：沙眼：沙眼立克次體立克次體：斑疹傷寒：斑疹傷寒螺旋體螺旋體：梅毒：梅毒病毒病毒：甲、乙肝病毒，麻疹病毒，流感病毒。：甲、乙肝病毒，麻疹病毒，流感病毒。微生物微生物種類種類八大類八大類 細(xì)菌細(xì)菌：是一類：是一類細(xì)胞細(xì)而短

3、、直徑一般為細(xì)胞細(xì)而短、直徑一般為0.55.0mm，結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、細(xì)胞壁堅(jiān)韌，以結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、細(xì)胞壁堅(jiān)韌，以二分裂二分裂方式無(wú)性繁殖的原核微生方式無(wú)性繁殖的原核微生物，分布廣泛。生長(zhǎng)最適溫度為物，分布廣泛。生長(zhǎng)最適溫度為3035，主要去除方法有，主要去除方法有紫外殺菌法、濾膜過(guò)濾法及高溫殺滅法等。紫外殺菌法、濾膜過(guò)濾法及高溫殺滅法等。個(gè)別細(xì)菌如：個(gè)別細(xì)菌如：嗜熱脂肪芽孢桿菌嗜熱脂肪芽孢桿菌，能在，能在121條件，可耐受條件，可耐受45min。滅菌柜驗(yàn)證中作為生物指示劑滅菌柜驗(yàn)證中作為生物指示劑最適合生長(zhǎng)條件為最適合生長(zhǎng)條件為5560微生物微生物種類種類 真菌真菌：包包括單細(xì)胞與多細(xì)胞兩類括單細(xì)胞與多細(xì)

4、胞兩類，單，單細(xì)胞真菌呈圓細(xì)胞真菌呈圓形形或或卵圓形卵圓形稱為稱為酵母菌酵母菌；多細(xì)胞真菌由菌；多細(xì)胞真菌由菌絲和絲和孢子組成，孢子組成，稱稱為為絲絲狀菌或狀菌或霉菌霉菌。 真真菌生長(zhǎng)的最適的溫度菌生長(zhǎng)的最適的溫度為為2328，一般，一般加熱加熱6070 1小時(shí)小時(shí)即被殺死即被殺死，用一定濃，用一定濃度的度的酒精及甲醛也可殺死。酒精及甲醛也可殺死。 病毒病毒：屬非細(xì)胞型微生物，在自然界分布非常廣泛，：屬非細(xì)胞型微生物，在自然界分布非常廣泛，可在人、動(dòng)物、植物、真菌和細(xì)菌中寄居并引起感染。病毒可在人、動(dòng)物、植物、真菌和細(xì)菌中寄居并引起感染。病毒是是體積最小、結(jié)構(gòu)最簡(jiǎn)單體積最小、結(jié)構(gòu)最簡(jiǎn)單的微生物

5、，它僅有一種核酸（的微生物，它僅有一種核酸（DNA或或RNA）作其遺傳物質(zhì)。）作其遺傳物質(zhì)。微生物微生物種類種類 微生物微生物體積小、面積大體積小、面積大適應(yīng)強(qiáng)、變異頻適應(yīng)強(qiáng)、變異頻生長(zhǎng)旺、繁殖快生長(zhǎng)旺、繁殖快吸收多、轉(zhuǎn)化快吸收多、轉(zhuǎn)化快分布廣、種類多分布廣、種類多微生物五大共性微生物五大共性個(gè)體極其微小，必須借助顯微鏡放大幾倍、幾百倍、上千倍，乃至數(shù)萬(wàn)倍才能看清。食譜廣泛，凡是動(dòng)植物能利用的營(yíng)養(yǎng)，微生物都能利用，大量的動(dòng)植物不能利用的物質(zhì)，甚至劇毒的物質(zhì)，微生物照樣可以視為美味佳肴。二分裂是細(xì)菌最普遍、最主要的繁殖方式。能耐0196的低溫，可在250300的高溫條件下正常生長(zhǎng)。耐藥性產(chǎn)生的原

6、耐藥性產(chǎn)生的原因。因。微生物幾乎無(wú)處不有，無(wú)孔不入，地球上有200萬(wàn)生物，其中微生物有20萬(wàn)種之多。微生物的營(yíng)養(yǎng)微生物的營(yíng)養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)元素元素碳源是構(gòu)成碳源是構(gòu)成細(xì)胞的重要細(xì)胞的重要物質(zhì)。物質(zhì)。氮是組成氮是組成蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)和核酸的重核酸的重要元素。要元素。細(xì)菌所需無(wú)機(jī)鹽細(xì)菌所需無(wú)機(jī)鹽包括磷、硫、鎂、包括磷、硫、鎂、鐵、鉀、鈉、鈣、鐵、鉀、鈉、鈣、氯、錳、鋅、鈷、氯、錳、鋅、鈷、銅等。銅等。生長(zhǎng)因子是某些微生長(zhǎng)因子是某些微生物生長(zhǎng)發(fā)育所必生物生長(zhǎng)發(fā)育所必需，而其自身又不需，而其自身又不能合成的一類營(yíng)養(yǎng)能合成的一類營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。包括維生素、物質(zhì)。包括維生素、嘌呤和嘧啶。嘌呤和嘧啶。水占細(xì)胞漿的水占細(xì)胞

7、漿的70%70%90%90%，是，是細(xì)胞的重要組細(xì)胞的重要組成成分。成成分。培養(yǎng)基：培養(yǎng)基：人們提供微生物生長(zhǎng)繁殖和生物合成各人們提供微生物生長(zhǎng)繁殖和生物合成各 種代謝產(chǎn)物所需要的按一定比例配制的種代謝產(chǎn)物所需要的按一定比例配制的 多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的混合體多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的混合體。培養(yǎng)基中主要包含了微生物生長(zhǎng)所需要的培養(yǎng)基中主要包含了微生物生長(zhǎng)所需要的碳源、氮碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽及微量元素源、無(wú)機(jī)鹽及微量元素。 影響微生物生長(zhǎng)繁殖的因素影響微生物生長(zhǎng)繁殖的因素因素因素營(yíng)養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)溫度溫度pH滲透壓滲透壓其他其他水份水份微生物存在微生物存在l水l空氣l衣服l地面l廢水l排水口l洗手池l嘴l頭發(fā)l皮膚l鼻子l腸

8、道l食物l昆蟲l動(dòng)物l等等桿菌桿菌(大腸桿菌大腸桿菌)大腸桿菌大腸桿菌(帶鞭毛帶鞭毛)微生物的主要類群微生物的主要類群桿菌桿菌(碳疽碳疽)沙門氏菌沙門氏菌葡萄球菌葡萄球菌微生物的主要類群微生物的主要類群鏈球菌鏈球菌弧狀菌弧狀菌四疊球菌四疊球菌黑曲霉菌黑曲霉菌微生物的主要類群微生物的主要類群絲狀真菌絲狀真菌真菌的繁殖：分生孢子真菌的繁殖：分生孢子微生物數(shù)量 時(shí)間衰亡期衰亡期穩(wěn)定期穩(wěn)定期對(duì)對(duì)數(shù)數(shù)生生長(zhǎng)長(zhǎng)期期延緩期延緩期細(xì)菌能否無(wú)限繁殖下去？微生物的生長(zhǎng)規(guī)律微生物的生長(zhǎng)規(guī)律延滯期延滯期：細(xì)胞變大，細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞變大，細(xì)胞內(nèi)RNA含量增高，含量增高，培養(yǎng)基不豐富培養(yǎng)基不豐富 時(shí)延滯期較長(zhǎng)。時(shí)延滯期較長(zhǎng)。對(duì)

9、數(shù)期對(duì)數(shù)期：細(xì)胞分裂最快，代謝旺盛，生長(zhǎng)速率由營(yíng)養(yǎng)成分決定。：細(xì)胞分裂最快，代謝旺盛，生長(zhǎng)速率由營(yíng)養(yǎng)成分決定。穩(wěn)定期穩(wěn)定期：總體數(shù)量保持不變，開(kāi)始產(chǎn)生代謝產(chǎn)物或開(kāi)始形成芽孢。：總體數(shù)量保持不變，開(kāi)始產(chǎn)生代謝產(chǎn)物或開(kāi)始形成芽孢。衰亡期衰亡期：由于代謝毒素的積累，死亡數(shù)超過(guò)新生數(shù)。：由于代謝毒素的積累，死亡數(shù)超過(guò)新生數(shù)。微生物的益處微生物的益處l啤酒，葡萄酒的生產(chǎn)l面包酵母的生產(chǎn)l奶酪的生產(chǎn)l醋的生產(chǎn)l酸奶的生產(chǎn)l維生素的生產(chǎn)l類固醇的生產(chǎn)l抗菌素、干擾素的生產(chǎn)l分解廢物，循環(huán)利用l幫助腸道中的食物消化l除蟲& 微生物的害處微生物的害處l導(dǎo)致傷口感染l導(dǎo)致胃腸不適l引起感冒，咳嗽l尿道感染l敗血癥

10、l癌癥l腦脊膜炎l破傷風(fēng)l艾滋病許多細(xì)菌、病毒和真菌（如酵母菌）都能產(chǎn)生熱原。許多細(xì)菌、病毒和真菌（如酵母菌）都能產(chǎn)生熱原。熱原熱原：是微量即可引起恒溫動(dòng)物體溫異常升高的物質(zhì)的總稱：是微量即可引起恒溫動(dòng)物體溫異常升高的物質(zhì)的總稱 主要物質(zhì)為細(xì)菌內(nèi)毒素、胞壁酰二肽及其他抗原抗主要物質(zhì)為細(xì)菌內(nèi)毒素、胞壁酰二肽及其他抗原抗 體復(fù)合物等。（體復(fù)合物等。（家兔法進(jìn)行檢查家兔法進(jìn)行檢查）細(xì)菌內(nèi)毒素細(xì)菌內(nèi)毒素：一般指革蘭陰性細(xì)菌細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)成分，主要一般指革蘭陰性細(xì)菌細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)成分，主要 是脂多糖。（是脂多糖。（鱟試劑法進(jìn)行檢查鱟試劑法進(jìn)行檢查） 耐熱性：耐熱性：250加熱加熱30min，才可徹底破壞；，

11、才可徹底破壞； 濾過(guò)性：其體積小，約在濾過(guò)性：其體積小，約在15nm之間；之間； 具有水溶性及不揮發(fā)性，可被活性碳吸附；具有水溶性及不揮發(fā)性，可被活性碳吸附； 能被強(qiáng)酸、強(qiáng)堿及氧化劑破壞。能被強(qiáng)酸、強(qiáng)堿及氧化劑破壞。消毒、滅菌概念消毒、滅菌概念概念概念殺死所有微生物包括芽孢和繁殖體殺死病原微生物阻止或抑制微 生物生長(zhǎng)繁殖無(wú)活的微生物1.滅菌滅菌2.消毒消毒3.防腐防腐4.無(wú)菌無(wú)菌消毒和滅菌前提條件：消毒和滅菌前提條件： 清洗干凈清洗干凈!滅菌（消毒）類型滅菌（消毒）類型溫度與時(shí)間溫度與時(shí)間殺菌范圍殺菌范圍滅菌物品滅菌物品干干熱熱滅滅菌菌火焰滅菌火焰滅菌火焰灼燒火焰灼燒 全部全部微生物微生物耐熱

12、物品、接種環(huán)、耐熱物品、接種環(huán)、試管口等試管口等熱空氣滅菌熱空氣滅菌160 2 h160 2 h玻璃器皿、金屬用具、玻璃器皿、金屬用具、等耐熱物品等耐熱物品濕濕熱熱滅滅菌菌高壓高壓蒸汽蒸汽滅菌滅菌法法121 15-30min121 15-30min培養(yǎng)基、生理鹽水、培養(yǎng)基、生理鹽水、玻璃器皿等玻璃器皿等115 15-20min115 15-20min濕熱滅菌濕熱滅菌比干熱效比干熱效果好果好水蒸汽穿透力強(qiáng)蒸汽凝結(jié)成水，放出潛熱，提高物體溫度菌體蛋白質(zhì)吸收水分易凝固熱力滅菌熱力滅菌化學(xué)消毒化學(xué)消毒類別類別名稱名稱常用濃度常用濃度應(yīng)用范圍應(yīng)用范圍作用機(jī)理作用機(jī)理醇類醇類乙醇乙醇70-7570-75皮

13、膚、體溫計(jì)、器械消毒皮膚、體溫計(jì)、器械消毒脫水、蛋白質(zhì)變性脫水、蛋白質(zhì)變性表面活表面活性劑性劑新潔爾滅新潔爾滅0.05-10.05-1皮膚、器械消毒皮膚、器械消毒破壞細(xì)胞膜、改變破壞細(xì)胞膜、改變通透性通透性酸類酸類乳酸乳酸0.33-1mol/L0.33-1mol/L空氣消毒空氣消毒 / /氧化劑氧化劑過(guò)氧乙酸過(guò)氧乙酸0.2-0.5%0.2-0.5%（需嚴(yán)格控（需嚴(yán)格控制濃度）制濃度）塑料、玻璃、紡織原料及人造塑料、玻璃、紡織原料及人造纖維制品；也適用于食品表面纖維制品；也適用于食品表面消毒（水果、蔬菜、蛋類）和消毒（水果、蔬菜、蛋類）和環(huán)境地面消毒環(huán)境地面消毒與蛋白質(zhì)活性基團(tuán)與蛋白質(zhì)活性基團(tuán)反

14、應(yīng)，酶失活反應(yīng)，酶失活氯制劑氯制劑漂白粉漂白粉（次氯酸（次氯酸鈣）鈣）0.5-1.2%0.5-1.2%飲用水、廠房和用具，飲用水、廠房和用具，澄清溶液可用水果和蔬菜消毒澄清溶液可用水果和蔬菜消毒殺死細(xì)菌芽孢殺死細(xì)菌芽孢鹵素鹵素氯氣氯氣0.2-1ppm0.2-1ppm飲用水消毒飲用水消毒同上同上酚類酚類來(lái)蘇爾來(lái)蘇爾1-21-2手、皮膚消毒手、皮膚消毒同上同上3-53-5器械、地面消毒器械、地面消毒 第二部分第二部分環(huán)境控制要求環(huán)境控制要求藥品生產(chǎn)中微生物控制藥品生產(chǎn)中微生物控制l 為什么要對(duì)藥品生產(chǎn)進(jìn)行微生為什么要對(duì)藥品生產(chǎn)進(jìn)行微生物控制？物控制？ 微生物可以致病微生物可以致病甚至致命甚至致命。

15、特別是注。特別是注射劑的危害射劑的危害（乙肝疫苗，刺五加）（乙肝疫苗，刺五加）。l如果細(xì)菌得到了如果細(xì)菌得到了必要的養(yǎng)料、一定量必要的養(yǎng)料、一定量的水份和合適的溫度，的水份和合適的溫度，它們就能迅速它們就能迅速繁殖，它們繁殖的速度快得驚人。通繁殖，它們繁殖的速度快得驚人。通常一個(gè)細(xì)菌在僅僅常一個(gè)細(xì)菌在僅僅24小時(shí)后可產(chǎn)生出小時(shí)后可產(chǎn)生出281兆兆(百萬(wàn)百萬(wàn))個(gè)個(gè)的細(xì)菌。的細(xì)菌。 主要的微生物污染源主要的微生物污染源l人員l 設(shè)備l 原輔料l 法l環(huán)人員是潔凈室中的最大污染源。人員是潔凈室中的最大污染源。人在代謝過(guò)程中會(huì)釋放和分泌污染物，人體表面、衣服能沾人在代謝過(guò)程中會(huì)釋放和分泌污染物，人體表

16、面、衣服能沾染、攜帶污染物，在潔凈室內(nèi)的各種動(dòng)作也會(huì)產(chǎn)生微粒和微染、攜帶污染物，在潔凈室內(nèi)的各種動(dòng)作也會(huì)產(chǎn)生微粒和微生物。生物。GMPGMP對(duì)人員有著嚴(yán)格的要求。對(duì)人員有著嚴(yán)格的要求。防范措施：防范措施：1.建立個(gè)人健康檔案建立個(gè)人健康檔案 新員工入廠全面體檢，直接接觸藥品的生產(chǎn)人員每年至少體檢一次，新員工入廠全面體檢，直接接觸藥品的生產(chǎn)人員每年至少體檢一次， 如發(fā)現(xiàn)有傳染疾病應(yīng)立即隔離。如發(fā)現(xiàn)有傳染疾病應(yīng)立即隔離。2.清潔的個(gè)人衛(wèi)生清潔的個(gè)人衛(wèi)生 勤洗澡、理發(fā)、剪指甲勤洗澡、理發(fā)、剪指甲 正確的洗手、更衣流程及防護(hù)方式正確的洗手、更衣流程及防護(hù)方式3.潔凈區(qū)內(nèi)的自我約束潔凈區(qū)內(nèi)的自我約束 不

17、佩帶首飾，不化妝不佩帶首飾，不化妝 進(jìn)出次數(shù)應(yīng)可能地少，在操作過(guò)程中應(yīng)減小動(dòng)作幅度進(jìn)出次數(shù)應(yīng)可能地少，在操作過(guò)程中應(yīng)減小動(dòng)作幅度 規(guī)范各類操作及避免違規(guī)行為規(guī)范各類操作及避免違規(guī)行為人員需要規(guī)范或注意的部分人員需要規(guī)范或注意的部分凈化工作服穿戴凈化工作服穿戴一次更鞋一次更鞋：阻斷外界粘在鞋底的垃圾、顆粒及微生物。相對(duì)而言，阻斷外界粘在鞋底的垃圾、顆粒及微生物。相對(duì)而言， 腳底是最臟的部分。腳底是最臟的部分。脫去外套脫去外套：阻斷外界沉降在外套上的顆粒和微生物。阻斷外界沉降在外套上的顆粒和微生物。一更洗手一更洗手：規(guī)范的洗手能消除手部皮膚的污垢和大部分的微生物。洗規(guī)范的洗手能消除手部皮膚的污垢和

18、大部分的微生物。洗 手一定要用洗手液和充足的流水。手一定要用洗手液和充足的流水。二更二更帶口罩帶口罩：阻斷鼻腔、呼吸道的微生物發(fā)散，潔凈區(qū)內(nèi)不能脫下口罩。阻斷鼻腔、呼吸道的微生物發(fā)散，潔凈區(qū)內(nèi)不能脫下口罩。帶發(fā)套帶發(fā)套：阻斷頭發(fā)、頭皮表面的微生物發(fā)散。保證發(fā)套完整的包裹頭發(fā)。阻斷頭發(fā)、頭皮表面的微生物發(fā)散。保證發(fā)套完整的包裹頭發(fā)。穿連體服穿連體服：阻斷體表皮膚的微生物發(fā)散。潔凈區(qū)內(nèi)不能解開(kāi)連體服。阻斷體表皮膚的微生物發(fā)散。潔凈區(qū)內(nèi)不能解開(kāi)連體服。手消毒手消毒：再次消除手部的細(xì)菌和微生物。再次消除手部的細(xì)菌和微生物。75%75%的酒精能殺滅手部的酒精能殺滅手部95%95%以上的以上的 微生物。微

19、生物。人員進(jìn)入潔凈區(qū)的程序人員進(jìn)入潔凈區(qū)的程序 NoYes大家來(lái)找茬大家來(lái)找茬-1頭發(fā)應(yīng)完全包在帽子內(nèi)36大家來(lái)找茬大家來(lái)找茬-2不能配戴手表、首飾大家來(lái)找茬大家來(lái)找茬-3定時(shí)或在任何關(guān)鍵操作前，應(yīng)消毒手套填寫批記錄后，手套應(yīng)消毒2022-5-3039手的衛(wèi)生手的衛(wèi)生l每只手可攜帶40萬(wàn)個(gè)細(xì)菌；剛洗過(guò)的手，每平方厘米也可檢驗(yàn)出3200個(gè)細(xì)菌 。l110萬(wàn)個(gè)細(xì)菌/1cm2皮膚表面!l用流水（如自來(lái)水）洗手，能使手上的致病微生物減少80%；l用皂液充分洗手，再用自來(lái)水沖洗能使致病微生物減少95%。l洗手后正確使用消毒劑能使致病微生物減少到99%。洗手的重要性洗手的重要性:洗手的正確方法洗手的正確方

20、法1.用清水潤(rùn)濕雙手及手腕以用清水潤(rùn)濕雙手及手腕以上上10厘米厘米2.均勻涂上均勻涂上 洗手液洗手液 3.掌心相對(duì)，掌心相對(duì)， 手指并攏手指并攏 相互摩擦相互摩擦 4.手心對(duì)手背沿指縫相手心對(duì)手背沿指縫相 互摩擦交換進(jìn)行互摩擦交換進(jìn)行 5.掌心相對(duì)，雙手交叉，掌心相對(duì)，雙手交叉， 沿指縫相互摩擦沿指縫相互摩擦 6.彎曲各手指關(guān)節(jié)，彎曲各手指關(guān)節(jié)，在另一手掌旋轉(zhuǎn)搓在另一手掌旋轉(zhuǎn)搓擦，交換進(jìn)行擦，交換進(jìn)行 7.一手握另一手大拇指旋一手握另一手大拇指旋轉(zhuǎn)搓擦，交換進(jìn)行轉(zhuǎn)搓擦，交換進(jìn)行8.搓洗手腕，交換搓洗手腕，交換 進(jìn)行。進(jìn)行。 9.將手及手腕用水沖洗將手及手腕用水沖洗干凈，最后才可以用干干凈，最后

21、才可以用干凈的手將干凈的水龍頭凈的手將干凈的水龍頭關(guān)掉。關(guān)掉。10.然后在烘手然后在烘手器下吹干器下吹干洗手手的細(xì)菌對(duì)照實(shí)驗(yàn)洗手手的細(xì)菌對(duì)照實(shí)驗(yàn) 未洗的手未洗的手 漂洗的手漂洗的手 ( (只用清水只用清水) ) 洗凈的手洗凈的手 洗凈的手洗凈的手( (用皂液用皂液) () (用消毒劑用消毒劑) ) 設(shè)備的衛(wèi)生應(yīng)從設(shè)備的設(shè)計(jì)開(kāi)始，要求設(shè)備的衛(wèi)生應(yīng)從設(shè)備的設(shè)計(jì)開(kāi)始，要求產(chǎn)塵少、脫落粒產(chǎn)塵少、脫落粒子少、易清洗、消毒和滅菌子少、易清洗、消毒和滅菌。設(shè)備與物料的接觸面不得與物。設(shè)備與物料的接觸面不得與物料反應(yīng)，不得吸附物料，設(shè)備的內(nèi)表面材質(zhì)要料反應(yīng)，不得吸附物料，設(shè)備的內(nèi)表面材質(zhì)要平整、光滑平整、光滑

22、，凹凸不平的區(qū)域不僅不易清洗，而且易存留殘液等，它將成凹凸不平的區(qū)域不僅不易清洗，而且易存留殘液等，它將成為微生物繁殖滋生的場(chǎng)所。管道的安裝要避免批與批之間的為微生物繁殖滋生的場(chǎng)所。管道的安裝要避免批與批之間的交叉污染交叉污染，管道要能定期清洗消毒。，管道要能定期清洗消毒。防范措施：防范措施：建立相應(yīng)的設(shè)備清潔保養(yǎng)制度及規(guī)程建立相應(yīng)的設(shè)備清潔保養(yǎng)制度及規(guī)程保持一貫的清潔狀態(tài)，發(fā)現(xiàn)污漬、污水、殘余物等應(yīng)立即清除保持一貫的清潔狀態(tài)，發(fā)現(xiàn)污漬、污水、殘余物等應(yīng)立即清除機(jī)修人員在線維修設(shè)備時(shí)，應(yīng)注意操作盡量減少對(duì)藥品產(chǎn)生污染機(jī)修人員在線維修設(shè)備時(shí)，應(yīng)注意操作盡量減少對(duì)藥品產(chǎn)生污染對(duì)直接接觸藥品的設(shè)備進(jìn)

23、行清潔驗(yàn)證對(duì)直接接觸藥品的設(shè)備進(jìn)行清潔驗(yàn)證 對(duì)于物料衛(wèi)生的問(wèn)題，從對(duì)于物料衛(wèi)生的問(wèn)題，從供應(yīng)商的審計(jì)、物料進(jìn)廠后的檢供應(yīng)商的審計(jì)、物料進(jìn)廠后的檢驗(yàn)、使用全過(guò)程驗(yàn)、使用全過(guò)程，均要嚴(yán)格按照，均要嚴(yán)格按照GMP規(guī)定的衛(wèi)生要求進(jìn)行。規(guī)定的衛(wèi)生要求進(jìn)行。我公司物料主要包括：原輔料、接口、蓋子及工藝用水。我公司物料主要包括：原輔料、接口、蓋子及工藝用水。防范措施：防范措施：正確的原輔料的正確的原輔料的脫包、消毒、運(yùn)送脫包、消毒、運(yùn)送(容器容器)及投加操作及投加操作。正確的膠塞清洗流程。正確的膠塞清洗流程。對(duì)精洗殘余水、膠塞清洗水及工藝用水的定期監(jiān)測(cè)。對(duì)精洗殘余水、膠塞清洗水及工藝用水的定期監(jiān)測(cè)。原輔料使

24、用前的抽檢。原輔料使用前的抽檢。 潔凈區(qū)人員的操作是否規(guī)范，潔凈區(qū)人員的操作是否規(guī)范，影響藥品滅菌前的微生物影響藥品滅菌前的微生物負(fù)荷，最終將影響產(chǎn)品的無(wú)菌保證值負(fù)荷，最終將影響產(chǎn)品的無(wú)菌保證值(SAL)。F06D121+D121lgN0 F0 :標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間; N0：產(chǎn)品滅菌前的帶菌量；：產(chǎn)品滅菌前的帶菌量；D121：在：在121下殺滅下殺滅90%微生物所需時(shí)間。微生物所需時(shí)間。 防范措施：防范措施：制定日常操作的規(guī)范并嚴(yán)格執(zhí)行。制定日常操作的規(guī)范并嚴(yán)格執(zhí)行。直接與藥品有接觸的操作應(yīng)帶無(wú)菌手套并頻繁沖洗，操作過(guò)程中動(dòng)作不宜過(guò)大。直接與藥品有接觸的操作應(yīng)帶無(wú)菌手套并頻繁沖洗，操作過(guò)

25、程中動(dòng)作不宜過(guò)大。加強(qiáng)對(duì)微生物知識(shí)的了解，增強(qiáng)無(wú)菌操作意識(shí)。加強(qiáng)對(duì)微生物知識(shí)的了解，增強(qiáng)無(wú)菌操作意識(shí)。 環(huán)境中的微生物種類繁多環(huán)境中的微生物種類繁多，主要有附著于塵埃上的從地面飛起的，主要有附著于塵埃上的從地面飛起的球菌屬（包括八疊球菌屬在內(nèi)的好氧菌）；形成孢子的好氧性桿菌球菌屬（包括八疊球菌屬在內(nèi)的好氧菌）；形成孢子的好氧性桿菌（如枯草芽孢桿菌）；青霉等霉菌的孢子等。微生物的存在嚴(yán)重影響（如枯草芽孢桿菌）；青霉等霉菌的孢子等。微生物的存在嚴(yán)重影響著藥品生產(chǎn)的安全，依次必須加以嚴(yán)格控制。著藥品生產(chǎn)的安全，依次必須加以嚴(yán)格控制。 防范措施：防范措施：1.合理的廠房布局及高效的空氣過(guò)濾系統(tǒng)合理的廠

26、房布局及高效的空氣過(guò)濾系統(tǒng)2.完善的潔凈區(qū)日常衛(wèi)生管理完善的潔凈區(qū)日常衛(wèi)生管理3.每周進(jìn)行空氣消毒每周進(jìn)行空氣消毒(臭氧熏蒸臭氧熏蒸)4.定期對(duì)潔凈環(huán)境進(jìn)行監(jiān)測(cè)定期對(duì)潔凈環(huán)境進(jìn)行監(jiān)測(cè)潔凈度測(cè)定包括： 微生物 - 浮游菌 懸浮粒子 - 沉降菌 新版新版GMP對(duì)潔凈區(qū)微生物的動(dòng)態(tài)要求對(duì)潔凈區(qū)微生物的動(dòng)態(tài)要求潔凈潔凈級(jí)別級(jí)別懸浮粒子最大允許數(shù)懸浮粒子最大允許數(shù)/米米3 At rest / 靜態(tài)靜態(tài)In operation / 動(dòng)態(tài)動(dòng)態(tài)Grade 0.5m 5.0m 0.5m 5.0mA3 520203 52020B3 52029 352 0002 900 C352 0002 9003 520 000

27、29 000D3520 00029 000不作規(guī)定不作規(guī)定Not defined我國(guó)我國(guó)-WHO潔凈級(jí)別標(biāo)準(zhǔn)潔凈級(jí)別標(biāo)準(zhǔn)級(jí)級(jí)別別b浮游菌浮游菌CFU/m3沉降碟沉降碟（ 90mm）CFU/4小時(shí)小時(shí)c接觸碟接觸碟（ 55mm）CFU/碟碟5指手套指手套CFU/手套手套A 1 1 1 1B10555C1005025D20010050無(wú)菌產(chǎn)品潔凈級(jí)別的確定無(wú)菌產(chǎn)品潔凈級(jí)別的確定lA A級(jí)級(jí)：高風(fēng)險(xiǎn)操作區(qū)，如：無(wú)菌灌裝區(qū)，滅菌后的內(nèi)包裝容器暴露的高風(fēng)險(xiǎn)操作區(qū)，如：無(wú)菌灌裝區(qū)，滅菌后的內(nèi)包裝容器暴露的區(qū)域及無(wú)菌裝配區(qū)域及無(wú)菌裝配/ /連接操作的區(qū)域。連接操作的區(qū)域。 通常用層流操作來(lái)維護(hù)該區(qū)的環(huán)境狀態(tài)

28、。層流系統(tǒng)在其工作區(qū)域必須通常用層流操作來(lái)維護(hù)該區(qū)的環(huán)境狀態(tài)。層流系統(tǒng)在其工作區(qū)域必須均勻送風(fēng)，風(fēng)速為均勻送風(fēng)，風(fēng)速為0.36-0.54m/s0.36-0.54m/s（指導(dǎo)值）。（指導(dǎo)值）。lB B級(jí)級(jí)：指指A A 級(jí)區(qū)所處的背景區(qū)域。級(jí)區(qū)所處的背景區(qū)域。lC C級(jí)和級(jí)和D D級(jí)級(jí)：指生產(chǎn)無(wú)菌產(chǎn)品過(guò)程中重要程度較次的輔助操作區(qū)，除指生產(chǎn)無(wú)菌產(chǎn)品過(guò)程中重要程度較次的輔助操作區(qū)，除菌前藥液的配制，容器具處理、包裝材料清洗等區(qū)域。菌前藥液的配制，容器具處理、包裝材料清洗等區(qū)域。懸浮粒子的要求：附錄懸浮粒子的要求：附錄11 第九、十條第九、十條1、A級(jí)區(qū)確認(rèn)時(shí)的采樣量不少于1m32、潔凈區(qū)的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)懸

29、浮粒子的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)關(guān)鍵操作的全過(guò)程，對(duì)A級(jí)區(qū)進(jìn)行粒子監(jiān)測(cè)A級(jí)區(qū)的監(jiān)測(cè)頻率、取樣量，及時(shí)發(fā)現(xiàn)人為干預(yù)、偶發(fā)事件及任何系統(tǒng)的破壞B級(jí)區(qū)：類似于A級(jí)區(qū)，采樣頻率、采樣量可以調(diào)整C級(jí)區(qū)：質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)管理原則確定D級(jí)區(qū)：一般不作要求，（法規(guī)：必要時(shí)）（法規(guī)：必要時(shí)）對(duì)于C/D級(jí)區(qū)的自凈時(shí)間應(yīng)達(dá)到規(guī)定要求控制微生物污染途徑控制微生物污染途徑環(huán)境控制環(huán)境控制控制微生物污染途徑控制微生物污染途徑環(huán)境控制環(huán)境控制微生物的要求：附錄1 第十一條監(jiān)測(cè)方法有：1.空氣浮游菌監(jiān)測(cè)沉降菌法-被動(dòng)法定量空氣浮游菌采樣法-主動(dòng)法2.環(huán)境表面監(jiān)測(cè)表面取樣法（如棉簽擦拭法和接觸碟法）3.人員監(jiān)測(cè)表面取樣法（接觸碟法）1.空氣浮游菌監(jiān)測(cè)

30、空氣浮游菌監(jiān)測(cè)沉降菌法沉降菌法-被動(dòng)法被動(dòng)法l沉降碟在空氣中的暴露時(shí)間沉降碟在空氣中的暴露時(shí)間 4小時(shí)小時(shí)l監(jiān)控整個(gè)灌裝過(guò)程監(jiān)控整個(gè)灌裝過(guò)程l只能給出定性和半定量的數(shù)據(jù)只能給出定性和半定量的數(shù)據(jù)l應(yīng)結(jié)合空氣浮游菌的數(shù)據(jù)，對(duì)沉降碟的結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)應(yīng)結(jié)合空氣浮游菌的數(shù)據(jù)，對(duì)沉降碟的結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)定量空氣浮游菌采樣法定量空氣浮游菌采樣法-主動(dòng)法主動(dòng)法l撞擊式，離心式和膜過(guò)濾（明膠）取樣儀撞擊式，離心式和膜過(guò)濾（明膠）取樣儀l應(yīng)取一定體積的空氣（取樣體積應(yīng)有代表性）應(yīng)取一定體積的空氣（取樣體積應(yīng)有代表性）l儀器應(yīng)經(jīng)過(guò)校驗(yàn)儀器應(yīng)經(jīng)過(guò)校驗(yàn)522，潔凈區(qū)的驗(yàn)證和監(jiān)測(cè)2.環(huán)境表面監(jiān)測(cè)：環(huán)境表面監(jiān)測(cè)：表面取樣法表面

31、取樣法應(yīng)對(duì)接觸產(chǎn)品表面、設(shè)備、地面、墻面等定期監(jiān)測(cè)接觸蝶法：適用于平整表面l取樣面積25cm2 l培養(yǎng)基略有凸起，高于碟子邊緣，便于取樣 l培養(yǎng)基中應(yīng)含有中和劑/保護(hù)劑棉簽擦拭法：適用于不規(guī)則表面l取樣面積25cm2 l定性或定量表面樣應(yīng)在無(wú)菌操作結(jié)束時(shí)取l以最大限度地降低無(wú)菌制造過(guò)程中關(guān)鍵表面污染的風(fēng)險(xiǎn)532，潔凈區(qū)的驗(yàn)證和監(jiān)測(cè)3.人員監(jiān)測(cè)人員監(jiān)測(cè)表面取樣法（接觸碟法），取樣時(shí)間一般為：l工作結(jié)束，離開(kāi)潔凈區(qū)前取樣l處理異常情況后（取樣后重新更衣或更換手套）l生產(chǎn)過(guò)程中隨時(shí)監(jiān)測(cè)特別注意：特別注意：l不得在剛消毒過(guò)后取樣不得在剛消毒過(guò)后取樣54每個(gè)手套(5只手指) 胸口處衣帽結(jié)合處帽兜額頭處靴

32、子與工作褲接口處 前臂55無(wú)菌區(qū)人員更衣無(wú)菌區(qū)人員更衣確認(rèn)和監(jiān)測(cè)確認(rèn)和監(jiān)測(cè)-手和操作服手和操作服環(huán)境監(jiān)控整體要求環(huán)境監(jiān)控整體要求潔潔凈凈區(qū)區(qū)監(jiān)監(jiān)測(cè)測(cè)年度潔凈級(jí)別確認(rèn)年度潔凈級(jí)別確認(rèn)日常環(huán)境監(jiān)測(cè)日常環(huán)境監(jiān)測(cè)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)靜態(tài)監(jiān)測(cè)靜態(tài)監(jiān)測(cè)無(wú)菌生產(chǎn)區(qū)無(wú)菌生產(chǎn)區(qū)A/B最終滅菌最終滅菌C級(jí)的級(jí)的主要功能間主要功能間C級(jí)區(qū)域級(jí)區(qū)域D級(jí)區(qū)域級(jí)區(qū)域潔潔凈凈區(qū)年度級(jí)別確認(rèn)區(qū)年度級(jí)別確認(rèn)測(cè)試測(cè)試項(xiàng)目項(xiàng)目空氣潔凈度測(cè)試空氣潔凈度測(cè)試靜壓差測(cè)試靜壓差測(cè)試風(fēng)速或風(fēng)量測(cè)試風(fēng)速或風(fēng)量測(cè)試換氣次數(shù)換氣次數(shù)溫度溫度相對(duì)濕度相對(duì)濕度照度照度噪聲噪聲日常環(huán)境監(jiān)測(cè)頻次日常環(huán)境監(jiān)測(cè)頻次測(cè)試項(xiàng)目測(cè)試項(xiàng)目環(huán)境級(jí)別環(huán)境級(jí)別測(cè)試頻次測(cè)試頻次

33、A級(jí)兩周一次沉降菌/浮游菌C級(jí)一個(gè)月一次D級(jí)兩個(gè)月A級(jí)/B級(jí)兩周一次懸浮粒子C級(jí)一個(gè)月一次D級(jí)兩個(gè)月A/C級(jí)每班生產(chǎn)結(jié)束手和操作服C級(jí)一個(gè)月一次D級(jí)三個(gè)月潔凈區(qū)監(jiān)測(cè)的位置潔凈區(qū)監(jiān)測(cè)的位置取樣位置選擇時(shí)考慮因素：l哪些部位的微生物污染最可能對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量造成不良影響？哪些部位的微生物污染最可能對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量造成不良影響？l在生產(chǎn)過(guò)程中，什么地點(diǎn)最容易長(zhǎng)菌？在生產(chǎn)過(guò)程中，什么地點(diǎn)最容易長(zhǎng)菌？l哪些地方是清潔、消毒或滅菌時(shí)最難覆蓋哪些地方是清潔、消毒或滅菌時(shí)最難覆蓋/接觸或最難奏接觸或最難奏效的部位？效的部位？l什么活動(dòng)會(huì)導(dǎo)致污染的擴(kuò)散？什么活動(dòng)會(huì)導(dǎo)致污染的擴(kuò)散？l在某一部位的取樣操作，足以導(dǎo)致測(cè)試數(shù)據(jù)的差錯(cuò)或污染在某一部位的取樣操作，足以導(dǎo)致測(cè)試數(shù)據(jù)的差錯(cuò)或污染產(chǎn)品？取樣只應(yīng)在生產(chǎn)結(jié)尾換班時(shí)進(jìn)行嗎？產(chǎn)品？取樣只應(yīng)在生產(chǎn)結(jié)尾換班時(shí)進(jìn)行嗎？應(yīng)符合“GB16292-2010” “GB16294-2010”的要求基于風(fēng)險(xiǎn)的設(shè)計(jì)監(jiān)測(cè)點(diǎn)設(shè)置在潛在風(fēng)險(xiǎn)最大的位置