巴比妥及苯并二氮雜卓類鎮(zhèn)靜催眠藥物的分析

1、第十章第十章 巴比妥及苯并二氮雜卓巴比妥及苯并二氮雜卓類鎮(zhèn)靜催眠藥物的分析類鎮(zhèn)靜催眠藥物的分析第一節(jié)第一節(jié) 巴比妥類藥物的分析巴比妥類藥物的分析一、基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)一、基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)二、鑒別試驗(yàn)二、鑒別試驗(yàn)三、特殊雜質(zhì)檢查三、特殊雜質(zhì)檢查四、含量測定四、含量測定 巴比妥類藥物均為巴比妥酸衍生物，為環(huán)狀酰脲巴比妥類藥物均為巴比妥酸衍生物，為環(huán)狀酰脲類鎮(zhèn)靜催眠藥，基本結(jié)構(gòu)通式如下：由于類鎮(zhèn)靜催眠藥，基本結(jié)構(gòu)通式如下：由于1,5,51,5,5位取代位取代基不同形成不同種藥物基不同形成不同種藥物. .中國藥典收載有中國藥典收載有苯巴比妥及其苯巴比妥及其鈉鹽，異戊巴比妥及鈉鹽，司可巴比妥鈉及硫噴妥

2、鈉鈉鹽，異戊巴比妥及鈉鹽，司可巴比妥鈉及硫噴妥鈉。CCCONONC OR1R2R3543216HH一、一、基本結(jié)構(gòu)基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)與主要性質(zhì)5,5-取代的巴比妥類藥物 CCCONONC OH5C2H5C2HH巴比妥5BarbitalCCCONONC OH5C2HH苯巴比妥PhenylbarbitalCCCONONC ONaCH2CHCH2CHCH3C3H7H司可巴比妥鈉Secobarbital硫代巴比妥類藥物 硫噴妥鈉HCCCONONCSNaC2H5CH3CH2CH2CHCH3賦予各種巴比妥類藥物不同理化性質(zhì)，用于各種巴比妥藥物間相區(qū)別 環(huán)狀丙二酰脲決定巴比妥類藥物的共性，用于與其它藥物相區(qū)

3、別。 1. 環(huán)狀母核部分2. 取代基部分（一）物理性質(zhì) 1. 1. 白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉未，具有固白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉未，具有固定的熔點(diǎn)。定的熔點(diǎn)。 2. 2. 游離巴比妥類藥物微溶或極微溶游離巴比妥類藥物微溶或極微溶于水，易溶于乙醇及有機(jī)溶劑；其鈉于水，易溶于乙醇及有機(jī)溶劑；其鈉鹽則易溶于水，而不溶于有機(jī)溶劑。鹽則易溶于水，而不溶于有機(jī)溶劑。 一、基本結(jié)構(gòu)與一、基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)主要性質(zhì)（二） 理化性質(zhì) 巴比妥類藥物分子結(jié)構(gòu)中都有巴比妥類藥物分子結(jié)構(gòu)中都有1,3-1,3-二酰二酰亞胺基團(tuán)亞胺基團(tuán)，能發(fā)生，能發(fā)生酮式和烯醇式的互變異酮式和烯醇式的互變異構(gòu)，在水溶液中可以發(fā)生二級電離。因此，構(gòu)，在水

4、溶液中可以發(fā)生二級電離。因此，本類藥物的水溶液顯弱酸性（本類藥物的水溶液顯弱酸性（p pK Ka a為為7.37.3- -8.48.4），可與強(qiáng)堿形成水溶性的鹽類。），可與強(qiáng)堿形成水溶性的鹽類。 1. 弱酸性CCCONONC OHR1R2HCCCONONC OR1R2HHCCCONONC OR1R2HCCCONONC OR1R2+ H+ H+pK1=8+ H+ H+pK2=12與強(qiáng)堿的成鹽反應(yīng)：與強(qiáng)堿的成鹽反應(yīng)：CO NHCNCOOHR1R2+ NaOHCO NHCNCOONaR1R2+ H2O用有機(jī)溶劑可提取用有機(jī)溶劑可提取出來，這一性質(zhì)可出來，這一性質(zhì)可用于分離，鑒別，用于分離，鑒別，檢查

5、、測定。檢查、測定。加酸酸化可析出結(jié)晶性加酸酸化可析出結(jié)晶性游離巴比妥類藥物，游離巴比妥類藥物，2. 與重金屬離子反應(yīng) 巴比妥類藥物分子結(jié)構(gòu)中含丙二酰脲(-COHNCONHCO-)基團(tuán)，合適pH值溶液中，可與重金屬離子反應(yīng)呈色或產(chǎn)生有色沉淀。可用于鑒別與含量測定二銀鹽白色可溶性一銀鹽巴比妥類藥物3323AgNO CONa AgNO （1） 與銀鹽的反應(yīng)(碳酸鈉溶液中) CONCNCOCR1R2ONaAg+NaHCO3NaNO3+CONHCNCOCR1R2ONa+ AgNO3+ Na2CO3NaNO3+CONCNCOCR1R2OAgAgAgNO3+CONCNCOCR1R2ONaAg（2）與銅鹽的

6、反應(yīng) 巴比妥類藥物 +紫色或紫色 銅吡啶試液吡啶硫噴妥鈉 +綠色銅吡啶試液吡啶CR1R2COCONHNHCO水吡啶CR1R2COCONNHC OHCR1R2COCONNHCO-+H+部分離子化N+CuSO42NNCu2+SO42-CR1R2COCONNHC O-2+NNCu2+CR1R2COCONNHCOCR1R2COCONNHCOCuNN有色配位化合物有色配位化合物（3）與鈷鹽的反應(yīng)）與鈷鹽的反應(yīng)紫堇色配位化合物鈷鹽巴比妥類藥物堿性 無水無水; 所用試劑均應(yīng)不含水分（常用所用試劑均應(yīng)不含水分（常用溶劑為溶劑為無水甲醇或乙醇無水甲醇或乙醇）。）。鈷鹽為鈷鹽為硝酸鈷，醋酸鈷或氯化鈷硝酸鈷，醋酸鈷

7、或氯化鈷。反應(yīng)條件：反應(yīng)條件：堿性：有機(jī)堿為佳常用堿性：有機(jī)堿為佳常用異丙胺異丙胺CO NHCONHCOR1R22+Co2+4(CH3)2CHNH2+CoR2R1CONHCONCOR2R1NCONHCOCONHCH(CH3)2NHCH(CH3)2(CH3)2CHN+H32（4）與汞鹽的反應(yīng)）與汞鹽的反應(yīng)巴比妥類藥物巴比妥類藥物+汞鹽汞鹽白色白色 （可溶于氨試液）（可溶于氨試液）3. 水解反應(yīng) 巴比妥類藥物 + NaOHNH3CONHCNCOOHR1R2+ 5NaOH氨氣可以使石蕊試紙變藍(lán)，用于氨氣可以使石蕊試紙變藍(lán)，用于鑒別異戊巴比妥與巴比妥鑒別異戊巴比妥與巴比妥3322NHCO2NaCHCO

8、ONa1R2R4. 與香草醛（與香草醛（vanillin）的反應(yīng)）的反應(yīng) 物（縮合反應(yīng)）棕紅色產(chǎn)香草醛巴比妥類藥物濃硫酸放冷，加乙醇，先變紫后變藍(lán)。放冷，加乙醇，先變紫后變藍(lán)。 2戊巴比妥 + 香草醛 紫色 藍(lán)色藍(lán)色H2SO4放冷乙醇NNCHNNOOOOOOOCH3OH棕紅色棕紅色NNCHNNOOOOOCH3OHHOOHHH 巴比妥類藥物的紫外吸收光譜特征和其電離的程度有關(guān)。紫外吸收光譜隨電離級數(shù)不同，發(fā)生顯著的變化。 5. 紫外吸收光譜特征 5,5-取代的巴比妥類藥物取代的巴比妥類藥物 在酸性溶液中，因不電離，幾乎無明顯的紫外吸收。 在pH=10的堿性溶液中，發(fā)生一級電離，形成共軛體系結(jié)構(gòu)，

9、于240 nm處有最大吸收。 在pH=13的強(qiáng)堿性溶液中，發(fā)生二級電離，共軛體系延長，最大吸收紅移至255 nm處。 A. H2SO4溶液溶液(0.05mol/L)B. pH9.9緩沖溶緩沖溶液液C. NaOH溶液溶液(0.1mol/L) (pH 13)巴比妥類藥物的紫外吸收光譜巴比妥類藥物的紫外吸收光譜Anm 硫代巴比妥類藥物在酸性或堿性溶液中，均有較明顯的紫外吸收。 在鹽酸溶液(0.1mol/L)中，兩個吸收峰位287nm和238nm，在氫氧化鈉溶液(0.1mol/L)中 ，兩個吸收峰移至304nm和255nm，后者很弱，幾乎消失。硫噴妥的紫外吸收光譜硫噴妥的紫外吸收光譜HCl 溶液溶液

10、(0.1mol/L) NaOH 溶液溶液 (0.1mol/L) 6 薄層色譜行為特征薄層色譜行為特征 巴比妥藥物因其結(jié)構(gòu)不同，色譜行為巴比妥藥物因其結(jié)構(gòu)不同，色譜行為亦不同，因此常用色譜法進(jìn)行鑒別。亦不同，因此常用色譜法進(jìn)行鑒別。 (1). 比移值：用于比移值：用于TLC (2). 保留行為保留行為:用于用于HPLC，GC7、顯微結(jié)晶、顯微結(jié)晶 巴比妥：長方形結(jié)晶；巴比妥：長方形結(jié)晶； 苯巴比妥：球形苯巴比妥：球形花瓣?duì)罨ò隊(duì)?1)(1)藥物本身的晶形藥物本身的晶形 巴比妥巴比妥 銅吡啶試液銅吡啶試液 十字十字形紫色結(jié)晶形紫色結(jié)晶 苯巴比妥苯巴比妥 銅吡啶試液銅吡啶試液 細(xì)細(xì)小不規(guī)則或似菱形的

11、淺紫色結(jié)晶小不規(guī)則或似菱形的淺紫色結(jié)晶 (2)反應(yīng)產(chǎn)物的晶形反應(yīng)產(chǎn)物的晶形利用晶形可對不同品種進(jìn)行鑒別利用晶形可對不同品種進(jìn)行鑒別二二 鑒別試驗(yàn)鑒別試驗(yàn) 苯巴比妥 ChP（2005） 【鑒別】（1）本品顯丙二酰脲類的 鑒別反應(yīng)（附錄中一般鑒別實(shí)驗(yàn)） 有銀鹽反應(yīng)和銅鹽反應(yīng)(一)、丙二酰脲類鑒別反應(yīng) 取供試品約取供試品約0.1g0.1g，加碳酸鈉試液，加碳酸鈉試液1ml1ml與水與水10m110m1，振搖，振搖2min2min，濾過，濾，濾過，濾液中逐滴加入硝酸銀試液，即白色沉液中逐滴加入硝酸銀試液，即白色沉淀，振搖，沉淀即溶解；繼續(xù)滴加過淀，振搖，沉淀即溶解；繼續(xù)滴加過量的硝酸銀試液，沉淀不再溶

12、解。量的硝酸銀試液，沉淀不再溶解。 1. 與銀鹽的反應(yīng) 取供試品約取供試品約50mg50mg，加吡啶溶液，加吡啶溶液（110110）5m15m1，溶解后，加銅吡啶試，溶解后，加銅吡啶試液（硫酸銅液（硫酸銅4g4g，水，水90ml90ml溶解后，加吡溶解后，加吡啶啶30m130m1，即得），即得）1m11m1，即顯紫色或生，即顯紫色或生成紫色沉淀。成紫色沉淀。2. 與銅鹽的反應(yīng)(二)、熔點(diǎn)測定及衍生物熔點(diǎn)測定 熔點(diǎn)是一種物質(zhì)在規(guī)定方法下，熔點(diǎn)是一種物質(zhì)在規(guī)定方法下，由固態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)橐簯B(tài)的溫度純物質(zhì)的由固態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)橐簯B(tài)的溫度純物質(zhì)的熔點(diǎn)是一定的。作為一項(xiàng)物理常數(shù)可熔點(diǎn)是一定的。作為一項(xiàng)物理常數(shù)可用于藥物

13、的鑒別，巴比妥類藥物可直用于藥物的鑒別，巴比妥類藥物可直接用藥典方法測定熔點(diǎn)，其鈉鹽可利接用藥典方法測定熔點(diǎn)，其鈉鹽可利用它易溶于水，酸化后析出游歷巴比用它易溶于水，酸化后析出游歷巴比妥母體，過濾沉淀測定熔點(diǎn)妥母體，過濾沉淀測定熔點(diǎn) 1. 熔點(diǎn)測定 巴比妥類的鈉鹽酸 游離巴比妥類藥物 過濾 洗滌 干燥 測熔點(diǎn) 例：例：Ch.P(2005)對苯巴比妥鈉的鑒別對苯巴比妥鈉的鑒別 取本品取本品0.5g，加水，加水5ml溶解后，加溶解后，加稍過量的稀鹽酸，即析出白色結(jié)晶性沉稍過量的稀鹽酸，即析出白色結(jié)晶性沉淀，濾過；沉淀用水洗凈，在淀，濾過；沉淀用水洗凈，在105干干燥后，熔點(diǎn)為燥后，熔點(diǎn)為174 -

14、178 。 取巴比妥取巴比妥0.5克，加克，加mol/L碳酸鈉溶液毫碳酸鈉溶液毫升使溶解，加升使溶解，加4.5%(W/V)對硝基氯芐的乙醇溶液對硝基氯芐的乙醇溶液毫升，水浴加熱回流毫升，水浴加熱回流min，放置，放置h后，濾后，濾過，所得沉淀用乙醇進(jìn)行重結(jié)晶后，在過，所得沉淀用乙醇進(jìn)行重結(jié)晶后，在100105 干燥，測定衍生物的熔點(diǎn)，應(yīng)為干燥，測定衍生物的熔點(diǎn)，應(yīng)為150 左右左右2. 衍生物熔點(diǎn)測定鑒別衍生物熔點(diǎn)測定鑒別(三)、特殊取代基或元素的反應(yīng) 司可巴比妥鈉 因其丙烯基中不飽和鍵可與碘、溴或高錳酸鉀作用，發(fā)生加成或氧化反應(yīng)，而使碘、溴或高錳酸鉀退色。 方法：方法：取本品取本品0.1 g

15、，加水，加水10 ml溶解后，加碘溶解后，加碘試液試液2m1，所顯棕黃色在，所顯棕黃色在5 min內(nèi)消失。內(nèi)消失。 1. 不飽和烴取代基的反應(yīng) -不飽和取代基（烯丙基）反應(yīng)： 司可巴比妥鈉 + I2 （ Br2 ）碘（溴）褪色 或在堿性溶液中與高錳酸鉀反應(yīng)，使后者褪色 CCNCNCOOHCH2CHCH2C3H7CHCH3NaO+I2CCNCNCOOHCH2C3H7CHCH3NaOCHCH2II(Br)Br2 KMnO4（ Br ） 苯巴比妥 ChP（2005）（1）硝化反應(yīng)：取苯巴比妥或其鈉鹽，與硝酸鉀和硫酸共熱，可發(fā)生硝化反應(yīng)，生成黃色硝基化合物。2. 芳環(huán)取代基的反應(yīng)黃色苯巴比妥423SO

16、HKNO（2） 與NaNO2H2SO4反應(yīng) 苯巴比妥與甲醛H2SO4反應(yīng)生成玫瑰紅色產(chǎn)物產(chǎn)物 苯巴比妥與NaNO2H2SO4反應(yīng)生成橙黃色隨即變成橙紅色 對不含苯環(huán)的巴比妥類不顯色。（3）與甲醛H2SO4反應(yīng) 含硫的巴比妥類藥物如硫噴妥鈉，可將其硫元素轉(zhuǎn)變?yōu)闊o機(jī)硫離子，而顯硫化物的反應(yīng)。 方法：取本品約取本品約0.2g，加氫氧化鈉試液，加氫氧化鈉試液5 ml與醋酸與醋酸鉛試液鉛試液2 ml，生成白色沉淀；加熱后，沉淀變?yōu)楹?，生成白色沉淀；加熱后，沉淀變?yōu)楹谏?。色?3. 硫元素的鑒別反應(yīng) 通過紅外分光光度法（標(biāo)準(zhǔn)圖譜對通過紅外分光光度法（標(biāo)準(zhǔn)圖譜對照法）進(jìn)行鑒別是一種有效可靠的定性照法）進(jìn)行鑒

17、別是一種有效可靠的定性分析手段分析手段(四)、紅外分光光度法 CCCONONC OH5C2H5C2HH巴比妥CCCONONC OH5C2HH苯巴比妥CCCONONC ONaCH2CHCH2CHCH3C3H7H司可巴比妥鈉三三 特殊雜質(zhì)檢查特殊雜質(zhì)檢查 (The relative substance test)（一）苯巴比妥的特殊雜質(zhì)的檢查（一）苯巴比妥的特殊雜質(zhì)的檢查 1.1.酸度酸度: : 控制中間副產(chǎn)物控制中間副產(chǎn)物苯基丙二酰脲苯基丙二酰脲，苯基丙，苯基丙二酰脲的酸性比苯巴比妥強(qiáng)，甲基紅指示劑呈紅二酰脲的酸性比苯巴比妥強(qiáng)，甲基紅指示劑呈紅色。色。 2.2.澄清度：利用澄清度：利用巴比妥酸巴

18、比妥酸在乙醇中的溶解性比苯在乙醇中的溶解性比苯巴比妥小的特性進(jìn)行檢查。巴比妥小的特性進(jìn)行檢查。 3.3.中性或堿性物質(zhì)：利用中性或堿性物質(zhì)：利用副產(chǎn)物副產(chǎn)物和苯巴比妥在氫和苯巴比妥在氫氧化鈉試液和乙醚中溶解性的不同，氧化鈉試液和乙醚中溶解性的不同，副產(chǎn)物副產(chǎn)物不溶不溶于氫氧化鈉而溶于乙醚。采用測定重量法測定雜于氫氧化鈉而溶于乙醚。采用測定重量法測定雜質(zhì)含量。質(zhì)含量。（二）司可巴比妥納的特殊檢查（二）司可巴比妥納的特殊檢查 1.1.澄清度澄清度 ：司可巴比妥納易溶解，水溶液：司可巴比妥納易溶解，水溶液應(yīng)澄清，否則表明含水不溶性雜質(zhì)。水應(yīng)事應(yīng)澄清，否則表明含水不溶性雜質(zhì)。水應(yīng)事先煮沸除去二氧化碳。

19、先煮沸除去二氧化碳。 2.2.中性或堿性物質(zhì)：利用合成過程中的雜中性或堿性物質(zhì)：利用合成過程中的雜質(zhì)（如酰脲、酰胺）不溶于質(zhì)（如酰脲、酰胺）不溶于氫氧化鈉試液而溶氫氧化鈉試液而溶于乙醚進(jìn)行的檢查。樣品溶于氫氧化鈉，乙醚提取，于乙醚進(jìn)行的檢查。樣品溶于氫氧化鈉，乙醚提取，稱重，檢查限量。稱重，檢查限量。v銀量法原理：在碳酸鈉溶液中巴比妥類與硝酸銀首先生成可溶性一銀鹽，繼續(xù)滴定，稍過量的銀離子就和巴比妥類的一銀鹽形成難溶性二銀鹽沉淀，使溶液變渾濁而指示終點(diǎn)。四 含量測定COCCO NHR1R2CNONaAgNO3Na2CO3COCCO NR1R2AgCNONaNaNO3NaHCO3COCCO NR

20、1R2AgCNONaAgNO3COCCO NR1R2AgNAgCONaNO3 終點(diǎn)指示：電位法指示（Ag電極為指示電極，飽和甘汞電極為參比電極）;自身指示(結(jié)果偏高) 1.原 理 ：反應(yīng)摩爾比（11）溶劑系統(tǒng)：甲醇+3%無水碳酸鈉2. 注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)（1 1）無水碳酸鈉應(yīng)新鮮配制，否則吸）無水碳酸鈉應(yīng)新鮮配制，否則吸收空氣中二氧化碳，使含量降低收空氣中二氧化碳，使含量降低（2 2）銀電極使用前應(yīng)進(jìn)行處理，臨用）銀電極使用前應(yīng)進(jìn)行處理，臨用前需用硝酸浸洗前需用硝酸浸洗1-2min1-2min，再用水淋，再用水淋洗。洗。v溴量法 原理：司可巴比妥鈉含有不飽和雙鍵，可與溴定量發(fā)生加成反應(yīng)，中國藥典

21、采用剩余溴量法測定原料和其膠囊的含量。巴比妥類+Br2（定量過量） 加成物Br2 （剩余）+KI （過量） I2I2 +2Na2S2O3（標(biāo)準(zhǔn)液2）2NaI+Na2S4O6 同時做空白試驗(yàn)I22Na2S2O32NaINa2S4O6+Br2（定量過量）CO NHCNCOCHCH2CH2CH3(CH2)2CHCH3ONaCO NHCNCOCHCH2CH2CH3(CH2)2CHCH3ONaBrBrBr22KI2KBrI2v酸堿滴定法酸堿滴定法 醇醇-水混合溶劑水混合溶劑中，用中，用氫氧化鈉溶液氫氧化鈉溶液滴定，以麝香滴定，以麝香草酚酞為指示劑，終點(diǎn)為淡藍(lán)色，結(jié)果用空白試草酚酞為指示劑，終點(diǎn)為淡藍(lán)色，

22、結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。校正結(jié)果不滿意，可用電違法指示終點(diǎn)。驗(yàn)校正。校正結(jié)果不滿意，可用電違法指示終點(diǎn)。 （增加溶解度，防止滴定過程中產(chǎn)生的弱酸鹽水（增加溶解度，防止滴定過程中產(chǎn)生的弱酸鹽水解而影響終點(diǎn)觀察）解而影響終點(diǎn)觀察） 在膠束水溶液在膠束水溶液中，用中，用氫氧化鈉溶液氫氧化鈉溶液滴定，以麝香滴定，以麝香草酚酞為指示劑草酚酞為指示劑 （在表面活性劑的膠束水溶液中巴比妥類藥物酸（在表面活性劑的膠束水溶液中巴比妥類藥物酸性增強(qiáng)，使終點(diǎn)明顯）性增強(qiáng)，使終點(diǎn)明顯） 非水溶液滴定：非水溶液滴定：在非水溶劑在非水溶劑“二甲基甲酰胺、甲二甲基甲酰胺、甲醇、氯仿等醇、氯仿等”中，用中，用甲醇鈉甲醇鈉-甲醇溶

23、液甲醇溶液等滴定，指等滴定，指示劑麝香草酚藍(lán)（示劑麝香草酚藍(lán)（非水酸量法非水酸量法）v紫外分光光度法1. 1. 直接測定的紫外分光光度法（硫噴妥鈉）直接測定的紫外分光光度法（硫噴妥鈉） 根據(jù)溶液的根據(jù)溶液的pHpH值，在最大吸收波長處，直接值，在最大吸收波長處，直接測定對照品和供試品溶液的吸收度，再計(jì)算測定對照品和供試品溶液的吸收度，再計(jì)算藥物含量。藥物含量。 取樣量中硫噴妥鈉的取樣量中硫噴妥鈉的mgmg數(shù)（硫噴妥為對照品）數(shù)（硫噴妥為對照品） = = (A (A樣樣/A/A對對) )C C對對1.0911.091D D 1.091=1.091=硫噴妥鈉分子量硫噴妥鈉分子量/ /硫噴妥分子量硫

24、噴妥分子量 其他測定方法：吸光系數(shù)法，標(biāo)準(zhǔn)曲線法等其他測定方法：吸光系數(shù)法，標(biāo)準(zhǔn)曲線法等 2 .2 .提取分離后提取分離后紫外分光光度法（苯巴比妥鈉）紫外分光光度法（苯巴比妥鈉）酸化酸化：苯巴比妥鈉加水使溶解：苯巴比妥鈉加水使溶解 + HCl + HCl 析出沉淀析出沉淀提取提?。撼恋恚撼恋? + 氯仿氯仿苯巴比妥，水浴蒸發(fā)至近干苯巴比妥，水浴蒸發(fā)至近干 殘?jiān)鼩堅(jiān)鼔A化堿化：殘?jiān)簹堅(jiān)? +醇醇+ pH9.6+ pH9.6硼酸鹽緩沖液溶液硼酸鹽緩沖液溶液測定溶液測定溶液（發(fā)生一級電離）（發(fā)生一級電離）測定測定： 240nm240nm處測定吸收度，以苯巴比妥為對照。處測定吸收度，以苯巴比妥為對照。

25、苯巴比妥鈉苯巴比妥鈉(mg) =(mg) = (A (A樣樣/A/A對對) )C C對對1.0951.095DD 1.095= 1.095=苯巴比妥鈉分子量苯巴比妥鈉分子量/ /苯巴比妥分子量苯巴比妥分子量v高效液相色譜法 該法多用于制劑及體液中藥物的含量測定。該法多用于制劑及體液中藥物的含量測定。 測定方法：測定方法： 色譜條件色譜條件 包括色譜柱類型；流動相組成；檢測波包括色譜柱類型；流動相組成；檢測波長；流速大??；柱溫和進(jìn)樣量。長；流速大小；柱溫和進(jìn)樣量。 對照液及制備：溶劑為甲醇對照液及制備：溶劑為甲醇 樣品處理及測定：待測血清加內(nèi)標(biāo)處理進(jìn)樣分析樣品處理及測定：待測血清加內(nèi)標(biāo)處理進(jìn)樣分

26、析 線形范圍考察（標(biāo)準(zhǔn)曲線制備）：線形范圍考察（標(biāo)準(zhǔn)曲線制備）： 提取回收率考察：對照品血清，按樣品處理后測提取回收率考察：對照品血清，按樣品處理后測定峰面積；流動相配制的同濃度對照品測定，計(jì)定峰面積；流動相配制的同濃度對照品測定，計(jì)算回收率。算回收率。小結(jié)一、一、 巴比妥藥物的基本結(jié)構(gòu)巴比妥藥物的基本結(jié)構(gòu) 環(huán)狀的丙二酰脲母核部分環(huán)狀的丙二酰脲母核部分 取代基部分取代基部分二、主要性質(zhì)二、主要性質(zhì) （一）（一）. 物理性質(zhì)：物理性質(zhì)： 白色結(jié)晶或晶形粉末白色結(jié)晶或晶形粉末 易溶于有機(jī)溶劑，不溶于水；其鈉易溶于有機(jī)溶劑，不溶于水；其鈉 鹽相反。鹽相反。 （二）（二）. 化學(xué)性質(zhì)化學(xué)性質(zhì) 1. 弱

27、酸性弱酸性 母核結(jié)構(gòu)中母核結(jié)構(gòu)中1,3-二酰亞胺集團(tuán)發(fā)生酮式二酰亞胺集團(tuán)發(fā)生酮式-烯醇式結(jié)構(gòu)互變，在水溶液中發(fā)生二級烯醇式結(jié)構(gòu)互變，在水溶液中發(fā)生二級解離。解離。 2. 水解反應(yīng)水解反應(yīng) 二酰亞胺結(jié)構(gòu)與強(qiáng)堿公沸即水解，釋放二酰亞胺結(jié)構(gòu)與強(qiáng)堿公沸即水解，釋放出氨氣出氨氣3. 與重金屬的反應(yīng)與重金屬的反應(yīng) 在碳酸溶液中，與在碳酸溶液中，與銀鹽銀鹽的反應(yīng)，可的反應(yīng)，可溶性一銀鹽，不溶性的白色二銀鹽沉淀。溶性一銀鹽，不溶性的白色二銀鹽沉淀。 吡啶溶液中，與吡啶溶液中，與銅鹽銅鹽反應(yīng)，生成紫反應(yīng)，生成紫色或綠色的配位化合物色或綠色的配位化合物 異丙胺堿性溶液中，與異丙胺堿性溶液中，與鈷鹽鈷鹽反應(yīng)，反應(yīng)，

28、生成紫色的配位化合物生成紫色的配位化合物 與汞鹽反應(yīng)，生成白色沉淀，沉淀與汞鹽反應(yīng)，生成白色沉淀，沉淀 在氨水中溶解。在氨水中溶解。4. 與香草醛的反應(yīng)與香草醛的反應(yīng) 在濃硫酸存在下，與香草醛發(fā)生縮合在濃硫酸存在下，與香草醛發(fā)生縮合反應(yīng)，生成棕紅色產(chǎn)物。放冷，加乙醇，反應(yīng)，生成棕紅色產(chǎn)物。放冷，加乙醇，顯紫色并變?yōu)樗{(lán)色。顯紫色并變?yōu)樗{(lán)色。5. 紫外吸收光譜特征紫外吸收光譜特征 巴比妥類藥物巴比妥類藥物 （酸堿環(huán)境）（酸堿環(huán)境） 硫代巴比妥類藥物硫代巴比妥類藥物 （酸堿環(huán)境）（酸堿環(huán)境）6. 薄層色譜行為特征薄層色譜行為特征7. 顯微晶形顯微晶形 不同的巴比妥藥物不同晶形特征，或與不同的巴比妥藥

29、物不同晶形特征，或與某試劑反應(yīng)產(chǎn)物的具有不同晶形特征。某試劑反應(yīng)產(chǎn)物的具有不同晶形特征。二、鑒別實(shí)驗(yàn)二、鑒別實(shí)驗(yàn)（一）丙二酰脲類的鑒別實(shí)驗(yàn)（一）丙二酰脲類的鑒別實(shí)驗(yàn) 1. 銀鹽反應(yīng)銀鹽反應(yīng) 2. 銅鹽反應(yīng)銅鹽反應(yīng) （二）（二） 測定熔點(diǎn)測定熔點(diǎn) （三）（三） 利用特殊取代基或元素的鑒別試驗(yàn)利用特殊取代基或元素的鑒別試驗(yàn) 1. 利用不飽和取代基的鑒別試驗(yàn)利用不飽和取代基的鑒別試驗(yàn) 與碘試液的反應(yīng)與碘試液的反應(yīng) 與高錳酸鉀試液的反應(yīng)與高錳酸鉀試液的反應(yīng) 2. 利用芳環(huán)取代基的鑒別試驗(yàn)利用芳環(huán)取代基的鑒別試驗(yàn) 硝化反應(yīng)硝化反應(yīng) （黃色產(chǎn)物）（黃色產(chǎn)物） 與硫酸與硫酸-亞硝酸鈉的反應(yīng)（成黃色亞硝酸鈉的

30、反應(yīng)（成黃色 橙紅色）橙紅色） 與甲醛與甲醛-硫酸的反應(yīng)硫酸的反應(yīng) （玫瑰紅色產(chǎn)物）（玫瑰紅色產(chǎn)物）3. 硫元素的反應(yīng)硫元素的反應(yīng) 與鉛離子反應(yīng)，加熱生成黑色產(chǎn)物與鉛離子反應(yīng)，加熱生成黑色產(chǎn)物 三、雜質(zhì)檢查三、雜質(zhì)檢查（一）（一） 苯巴比妥的特殊雜質(zhì)檢查苯巴比妥的特殊雜質(zhì)檢查 1. 酸度檢查酸度檢查 主要控制酸性較強(qiáng)的副產(chǎn)物苯基丙二主要控制酸性較強(qiáng)的副產(chǎn)物苯基丙二酰脲。酰脲。 2. 乙醇溶液的澄清度乙醇溶液的澄清度 主要控制在乙醇溶液中溶解度較小雜主要控制在乙醇溶液中溶解度較小雜質(zhì)巴比妥酸。質(zhì)巴比妥酸。 3. 中性或堿性物質(zhì)的檢查中性或堿性物質(zhì)的檢查 利用中性或堿性的副產(chǎn)物不溶于氫氧利用中性或

31、堿性的副產(chǎn)物不溶于氫氧化鈉而溶于乙醚，對其加以控制?；c而溶于乙醚，對其加以控制。（二）（二） 司可巴比妥鈉特殊雜質(zhì)檢查司可巴比妥鈉特殊雜質(zhì)檢查 1. 溶液的澄清度溶液的澄清度 主要控制誰不溶性雜質(zhì)主要控制誰不溶性雜質(zhì) 2.中性或堿性物質(zhì)的檢查中性或堿性物質(zhì)的檢查 利用中性或堿性的副產(chǎn)物不溶于氫氧利用中性或堿性的副產(chǎn)物不溶于氫氧化鈉而溶于乙醚，通過乙醚提取對其加化鈉而溶于乙醚，通過乙醚提取對其加以控制。以控制。四、含量測定四、含量測定（一）（一） 銀量法銀量法（二）（二） 溴量法溴量法（三）（三） 酸堿滴定法酸堿滴定法 1. 水水-乙醇混合液中的滴定乙醇混合液中的滴定 指示終點(diǎn)的方法：麝香草酚

32、酞指示終點(diǎn)的方法：麝香草酚酞 電位法指示終點(diǎn)電位法指示終點(diǎn)2. 在膠束水溶液中的滴定在膠束水溶液中的滴定 該方法可以增加巴比妥藥物的酸性該方法可以增加巴比妥藥物的酸性 指示終點(diǎn)的方法：麝香草酚酞指示終點(diǎn)的方法：麝香草酚酞3. 非水溶液滴定法非水溶液滴定法 增加巴比妥藥物酸性，常用溶劑有二甲增加巴比妥藥物酸性，常用溶劑有二甲基甲酰胺、甲醇、丙酮、三氯甲烷等基甲酰胺、甲醇、丙酮、三氯甲烷等 指示終點(diǎn)的方法：麝香草酚藍(lán)指示終點(diǎn)的方法：麝香草酚藍(lán) 電位法指示終點(diǎn)電位法指示終點(diǎn)（四） 紫外分光光度法1. 1. 直接測定的紫外分光光度法（硫噴妥鈉）直接測定的紫外分光光度法（硫噴妥鈉） 根據(jù)溶液的根據(jù)溶液的

33、pHpH值，在最大吸收波長處，直值，在最大吸收波長處，直接測定對照品和供試品溶液的吸收度，再計(jì)接測定對照品和供試品溶液的吸收度，再計(jì)算藥物含量。算藥物含量。 取樣量中硫噴妥鈉的取樣量中硫噴妥鈉的mgmg數(shù)（硫噴妥為對照數(shù)（硫噴妥為對照品）品） = = (A (A樣樣/A/A對對) )C C對對1.0911.091D D 1.091=1.091=硫噴妥鈉分子量硫噴妥鈉分子量/ /硫噴妥分子量硫噴妥分子量 其他測定方法：吸光系數(shù)法，標(biāo)準(zhǔn)曲線法等其他測定方法：吸光系數(shù)法，標(biāo)準(zhǔn)曲線法等 2 .2 .提取分離后提取分離后紫外分光光度法（苯巴比妥鈉）紫外分光光度法（苯巴比妥鈉）酸化酸化：苯巴比妥鈉加水使溶

34、解：苯巴比妥鈉加水使溶解 + HCl + HCl 析出沉淀析出沉淀提取提取：沉淀：沉淀+ + 氯仿氯仿苯巴比妥，水浴蒸發(fā)至近干苯巴比妥，水浴蒸發(fā)至近干 殘?jiān)鼩堅(jiān)鼔A化堿化：殘?jiān)簹堅(jiān)? +醇醇+ pH9.6+ pH9.6硼酸鹽緩沖液溶液硼酸鹽緩沖液溶液測定溶液測定溶液（發(fā)生一級電離）（發(fā)生一級電離）測定測定： 240nm240nm處測定吸收度，以苯巴比妥為對照。處測定吸收度，以苯巴比妥為對照。苯巴比妥鈉苯巴比妥鈉(mg) =(mg) = (A (A樣樣/A/A對對) )C C對對1.0951.095DD 1.095= 1.095=苯巴比妥鈉分子量苯巴比妥鈉分子量/ /苯巴比妥分子量苯巴比妥分子量

35、(五)高效液相色譜法 該法多用于制劑及體液中藥物的含量測定。該法多用于制劑及體液中藥物的含量測定。 測定方法：測定方法： 色譜條件色譜條件 包括色譜柱類型；流動相組成；檢測波包括色譜柱類型；流動相組成；檢測波長；流速大小；柱溫和進(jìn)樣量。長；流速大小；柱溫和進(jìn)樣量。 對照液及制備：溶劑為甲醇對照液及制備：溶劑為甲醇 樣品處理及測定：待測血清加內(nèi)標(biāo)處理進(jìn)樣分析樣品處理及測定：待測血清加內(nèi)標(biāo)處理進(jìn)樣分析 線形范圍考察（標(biāo)準(zhǔn)曲線制備）：線形范圍考察（標(biāo)準(zhǔn)曲線制備）： 提取回收率考察：對照品血清，按樣品處理后測提取回收率考察：對照品血清，按樣品處理后測定峰面積；流動相配制的同濃度對照品測定，計(jì)定峰面積；

36、流動相配制的同濃度對照品測定，計(jì)算回收率。算回收率。練習(xí)題1. 巴比妥類藥物具有的特性為：A. 弱堿性B. 弱酸性C. 易與重金屬離子絡(luò)合D. 易水解E. 具有紫外特征吸收 2. 硫噴妥鈉與銅鹽的鑒別反應(yīng)生成物為:A. 紫色B. 綠色C. 藍(lán)色D. 黃色 E. 紫堇色 3巴比妥類藥物在吡啶溶液中與銅吡啶試液作用，生成配位化合物，顯綠色的藥物是:A. 苯巴比妥B. 異戊巴比妥C. 司可巴比妥D. 巴比妥E. 硫噴妥鈉 4. 用于鑒別反應(yīng)的藥物: A. 硫噴妥鈉 B. 苯巴比妥 C. A和B 均可 D. A和B 均不可(1) 與堿溶液共沸產(chǎn)生氨氣(2) 在堿性溶液中與硝酸銀試液反應(yīng)生成白色沉淀（C

37、）（C）(3) 在堿性溶液中與Pb2+離子反應(yīng)，加熱后有黑色沉淀(4) 與甲醛-硫酸反應(yīng)生成玫瑰紅色環(huán)（A）（B）5. 巴比妥類藥物的鑒別方法有: A. 與鋇鹽反應(yīng)生成白色化合物B. 與鎂鹽反應(yīng)生成紅色化合物C. 與銀鹽反應(yīng)生成白色沉淀D. 與銅鹽反應(yīng)生成有色產(chǎn)物E. 與氫氧化鈉反應(yīng)生成白色沉淀 6. 與NaNO2H2SO4反應(yīng)生成橙黃至橙紅色產(chǎn)物的藥物是:A. 苯巴比妥B. 司可巴比妥C. 巴比妥D. 硫噴妥鈉E. 硫酸奎寧 7. 銀量法測定苯巴比妥鈉含量時,若用自身指示法來判斷終點(diǎn),樣品消耗標(biāo)準(zhǔn)溶液的摩爾比應(yīng)為:A. 1:2 B. 2:1C. 1:1D. 1:4E. 以上都不對 8. 可用以下方法鑒別的藥物是： A. 苯巴比妥 B. 司可巴比妥 C. 硫噴妥鈉(1)在吡啶溶液中與銅吡啶試液作用，生成綠色配位化合物(2)與亞硝酸鈉硫酸反應(yīng)生成橙黃色，隨即轉(zhuǎn)為橙紅色(3)與甲醛硫酸反應(yīng)生成玫瑰紅色環(huán)(4)與碘試液發(fā)生加成反應(yīng)，使碘試液橙黃色消失(5)在氫氧化鈉液中可與鉛離子反應(yīng)生成白色沉淀，加熱后，沉淀變成黑色(C)(A)(A)(B)(C)第二節(jié)第二節(jié) 苯并二氮雜卓苯并二氮雜卓類藥物的分析類藥