實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)課件

1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)第七章第七章 人類(lèi)疾病的動(dòng)物模型人類(lèi)疾病的動(dòng)物模型 主要介紹了人類(lèi)疾病動(dòng)物模型概念、復(fù)制模型的意義和原則；常用疾病模型的復(fù)制方法和應(yīng)用；免疫缺陷動(dòng)物、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物定義及其在生命科學(xué)研究中的應(yīng)用。研究動(dòng)物模型目的在于揭示人類(lèi)疾病發(fā)病機(jī)理，尋找預(yù)防疾病的有效措施。 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)第一節(jié)第一節(jié) 動(dòng)物模型概述動(dòng)物模型概述 人類(lèi)疾病動(dòng)物模型人類(lèi)疾病動(dòng)物模型: :（Animal Model of Human Diseases） 是指醫(yī)學(xué)研究中建立的具有人類(lèi)疾病模擬表現(xiàn)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)對(duì)象和相關(guān)材料。動(dòng)物模型的研究，實(shí)質(zhì)上是有關(guān)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的應(yīng)用科學(xué)。動(dòng)物模型主要用于實(shí)驗(yàn)生理學(xué)、實(shí)驗(yàn)病理學(xué)和實(shí)驗(yàn)治療學(xué)（藥物篩選和

2、新疫苗開(kāi)發(fā)）。 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)一、人類(lèi)疾病動(dòng)物模型的意義一、人類(lèi)疾病動(dòng)物模型的意義 避免人體實(shí)驗(yàn)造成的危害 可復(fù)制不易見(jiàn)到的疾病 可復(fù)制發(fā)病率低、潛伏期和病程長(zhǎng)的疾病 嚴(yán)格控制試驗(yàn)條件，增加實(shí)驗(yàn)的可比性 樣品易得，實(shí)驗(yàn)操作簡(jiǎn)化 有助于全面認(rèn)識(shí)疾病本質(zhì) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)二、人類(lèi)疾病動(dòng)物模型的復(fù)制原則二、人類(lèi)疾病動(dòng)物模型的復(fù)制原則 相似性 重復(fù)性 可靠性 適用性和可控性 易行性和經(jīng)濟(jì)性 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)三、人類(lèi)疾病動(dòng)物模型的分類(lèi)三、人類(lèi)疾病動(dòng)物模型的分類(lèi) （一）按產(chǎn)生原因分類(lèi)（一）按產(chǎn)生原因分類(lèi) 1 1實(shí)驗(yàn)性動(dòng)物摸型實(shí)驗(yàn)性動(dòng)物摸型（Experimental Animal Model） 又稱(chēng)誘發(fā)性動(dòng)物模型 是指研究

3、者通過(guò)使用物理性、化學(xué)性、生物性和復(fù)物理性、化學(xué)性、生物性和復(fù)合性合性致病因素作用于動(dòng)物，造成動(dòng)物組織、器官或全身特定的損害，出現(xiàn)某些類(lèi)似人類(lèi)疾病時(shí)的功能、代謝或形態(tài)結(jié)構(gòu)方面的病變，即人為地誘發(fā)動(dòng)物產(chǎn)生類(lèi)似人類(lèi)疾病模型。 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)2 2自發(fā)性動(dòng)物模型自發(fā)性動(dòng)物模型（Spontaneous Animal Model） 是指實(shí)驗(yàn)動(dòng)物未經(jīng)任何人工處置，動(dòng)物自然發(fā)生的疾病，或由于基因突變，通過(guò)遺傳育種保留下來(lái)的動(dòng)物模型。主要包括突變系的遺傳疾病模型和近交系的腫瘤疾病模型。 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)3 3抗疾病型動(dòng)物模型抗疾病型動(dòng)物模型（Negative Animal Model） 是指特定的疾病不會(huì)在某種動(dòng)物身上

4、發(fā)生，從而可以用來(lái)探討為何這種動(dòng)物對(duì)該疾病有天然的抵抗力。 如哺乳動(dòng)物均易感染血吸蟲(chóng)病，而居于洞庭湖流域的東方田鼠卻不能復(fù)制血吸蟲(chóng)病。 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)4 4生物醫(yī)學(xué)動(dòng)物模型生物醫(yī)學(xué)動(dòng)物模型（Biomedical Animal Model） 是指利用健康動(dòng)物生物學(xué)特征來(lái)提供人類(lèi)疾病相似表現(xiàn)的疾病模型。 兔甲狀旁腺分布比較分散，位置不固定，有的附著在主動(dòng)脈弓附近，摘除甲狀腺不影響甲狀旁腺功能，是摘除甲狀腺實(shí)驗(yàn)較理想的動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)（二）按系統(tǒng)范圍分類(lèi)（二）按系統(tǒng)范圍分類(lèi) 1 1疾病的基本病理過(guò)程動(dòng)物模型疾病的基本病理過(guò)程動(dòng)物模型Animal Model of Fundamental Patholo

5、gic Processes of Disease 是指各種疾病共有的一些基本病理過(guò)程模型。2 2系統(tǒng)疾病動(dòng)物模型系統(tǒng)疾病動(dòng)物模型Animal Model of Different System Diseases 是指與人類(lèi)各系統(tǒng)疾病相應(yīng)的動(dòng)物模型，如消化、呼吸、泌尿、心血管、神經(jīng)等系統(tǒng)疾病相應(yīng)的動(dòng)物模型。 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)（三）按模型種類(lèi)分類(lèi)（三）按模型種類(lèi)分類(lèi) 疾病模型的種類(lèi)包括整體動(dòng)物、整體動(dòng)物、離體器官和組織、細(xì)胞株和數(shù)字模型離體器官和組織、細(xì)胞株和數(shù)字模型。 整體動(dòng)物模型是常用的疾病模型，也是研究人類(lèi)疾病常用的手段。 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)四、影響動(dòng)物模型質(zhì)量的因素四、影響動(dòng)物模型質(zhì)量的因素 致模因素

6、動(dòng)物因素 實(shí)驗(yàn)技術(shù)因素1實(shí)驗(yàn)季節(jié)2晝夜不同時(shí)間的影響 3麻醉深度的影響 4操作技術(shù)的5實(shí)驗(yàn)給藥的影響 6對(duì)照組對(duì)造模的影響 環(huán)境因素和營(yíng)養(yǎng)因素實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)第二節(jié)第二節(jié) 常用動(dòng)物模型的復(fù)制常用動(dòng)物模型的復(fù)制 一、腫瘤動(dòng)物模型一、腫瘤動(dòng)物模型 自發(fā)性動(dòng)物腫瘤模型 誘發(fā)性腫瘤動(dòng)物模型 1.1.肝癌肝癌 二乙基亞硝胺（DEN）誘發(fā)大鼠肝癌，雌雄不限。 亞胺基偶氮甲苯（OAAT）誘發(fā)小鼠肝癌 黃曲霉素誘發(fā)大鼠肝癌 2.2.胃癌胃癌 甲基芐基亞硝胺（MBNA）復(fù)制小鼠前胃癌 3.3.肺癌肺癌 二乙基亞硝胺（DEN）誘發(fā)小鼠肺癌 移植性腫瘤動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)二、消化系統(tǒng)疾病動(dòng)物模型二、消化系統(tǒng)疾病動(dòng)物模型 幽

7、門(mén)螺桿菌感染動(dòng)物模型 肝硬化動(dòng)物模型 胃腸漬瘍動(dòng)物模型 三、呼吸系統(tǒng)疾病動(dòng)物模型三、呼吸系統(tǒng)疾病動(dòng)物模型 慢性支氣管炎動(dòng)物模型 支氣管哮喘動(dòng)物模型急性呼吸窘迫綜合征動(dòng)物模型 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)四、心血管系統(tǒng)疾病動(dòng)物模型四、心血管系統(tǒng)疾病動(dòng)物模型 動(dòng)脈粥樣硬化 高血壓動(dòng)物模型五、內(nèi)分泌及營(yíng)養(yǎng)代謝性疾病動(dòng)物模型五、內(nèi)分泌及營(yíng)養(yǎng)代謝性疾病動(dòng)物模型 糖尿病動(dòng)物模型 營(yíng)養(yǎng)性肥胖動(dòng)物模型 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)六、傳染性疾病動(dòng)物摸型六、傳染性疾病動(dòng)物摸型 病毒性肝炎動(dòng)物模型 流行性出血熱動(dòng)物模型 七、生殖醫(yī)學(xué)動(dòng)物模型七、生殖醫(yī)學(xué)動(dòng)物模型 致畸試驗(yàn)動(dòng)物模型 前列腺增生癥病理實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)第三節(jié)第三節(jié) 免疫缺陷動(dòng)物免疫

8、缺陷動(dòng)物 免疫缺陷動(dòng)物免疫缺陷動(dòng)物 (immunodeficient animal) 是指由于先天性遺傳突變或用人工誘導(dǎo)的方法建立的一種或多種免疫系統(tǒng)組成成分缺陷的動(dòng)物。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)一、一、 免疫缺陷動(dòng)物的分類(lèi)免疫缺陷動(dòng)物的分類(lèi) 1 1 先天性免疫缺陷動(dòng)物：先天性免疫缺陷動(dòng)物： a. Ta. T淋巴細(xì)胞功能缺陷動(dòng)物：淋巴細(xì)胞功能缺陷動(dòng)物：裸小鼠裸小鼠，裸大鼠裸大鼠 b. Bb. B淋巴細(xì)胞功能缺陷動(dòng)物：淋巴細(xì)胞功能缺陷動(dòng)物：CBA/NCBA/N小鼠小鼠 c. NKc. NK細(xì)胞功能缺陷動(dòng)物：細(xì)胞功能缺陷動(dòng)物：BeigeBeige小鼠小鼠 d. d. 聯(lián)合免疫缺陷動(dòng)物：聯(lián)合免疫缺陷動(dòng)物：SCIDS

9、CID小鼠小鼠等等2 2 獲得性免疫缺陷動(dòng)物：獲得性免疫缺陷動(dòng)物：猴、小鼠、貓等猴、小鼠、貓等AIDSAIDS模型模型實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)二、免疫缺陷動(dòng)物的特征及其應(yīng)用二、免疫缺陷動(dòng)物的特征及其應(yīng)用 1 1裸小鼠裸小鼠 (nude mice)(1)發(fā)現(xiàn)與培育：裸鼠(nu/nu) 1962年由英國(guó)格拉斯哥醫(yī)院的Grist在非近交系小鼠培育中偶爾發(fā)現(xiàn)無(wú)毛小鼠。 1966年經(jīng)英國(guó)愛(ài)丁堡研究所的Flanagan證實(shí)，這種小鼠是由于11號(hào)染色體上的等位基因發(fā)生突變所致。 1968年P(guān)antelouris研究發(fā)現(xiàn)該無(wú)毛小鼠沒(méi)有胸腺。 1969年Rygaard首先將人結(jié)腸腺癌移植裸小鼠獲得成功實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)(2)裸小鼠的

10、主要缺陷特征：被毛生長(zhǎng)發(fā)育異常，表現(xiàn)為全身形似無(wú)毛，呈裸體狀；無(wú)胸腺，僅有胸腺殘跡或異常的上皮細(xì)胞，這種上皮細(xì)胞不能使T細(xì)胞正常的分化，因而免疫力低下；細(xì)胞正常，成年裸小鼠的NK細(xì)胞活性較高，但幼鼠的NK細(xì)胞活性相對(duì)低下。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)(3)裸小鼠在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用：在組織移植(人類(lèi)腫瘤)研究方面 在腫瘤藥物治療和腫瘤免疫研究方面 免疫和遺傳研究方面 病毒、細(xì)菌、寄生蟲(chóng)感染機(jī)制的研究方面 其他方面的研究 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)2 2裸大鼠裸大鼠 (nude rat) (1)裸大鼠的發(fā)現(xiàn)與培育： 1953年由英國(guó)的阿伯丁研究所發(fā)現(xiàn)，基因符號(hào)為rnu； 1975年又發(fā)現(xiàn)了純合子的裸大鼠(nunu)， 1977

11、年在英國(guó)的MRC實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心建立了裸大鼠種群。 此后逐步引入美國(guó)、日本等。 1983年引人中國(guó)。 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)(2)裸大鼠的一般特征：體毛稀少，裸大鼠并不像裸小鼠一樣完全無(wú)毛，而是體毛稀少，尾根往往多毛；發(fā)育遲緩與裸小鼠一樣發(fā)育相對(duì)較緩慢，體重為正常大鼠的70左右；繁育能力差，由于裸大鼠與裸小鼠一樣在妊娠期間乳腺發(fā)育缺損，故其繁殖方式同裸小鼠相同，即用純合子的雄鼠與雜合子的雌鼠交配方式進(jìn)行繁育；易患呼吸道疾病，由于其無(wú)胸腺，免疫力低下，因此易感各種疾病，特別是在環(huán)境較差時(shí)，易感潰瘍性氣管炎和化膿性支氣管炎等，生存時(shí)間約67個(gè)月。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)(3)裸大鼠的免疫缺陷特征：免疫器官的組織學(xué)與裸小鼠相似，

12、幼齡裸大鼠的解剖發(fā)現(xiàn)，有胸腺殘跡，內(nèi)有未分化的上皮細(xì)胞，但未見(jiàn)淋巴細(xì)胞；先天性無(wú)胸腺，無(wú)T細(xì)胞，T細(xì)胞功能缺失，但B細(xì)胞功能正常，NK細(xì)胞的活力較正常鼠高。 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)(4)裸大鼠在生物醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用： 主要用于人體腫瘤的移植研究。 進(jìn)行外科手術(shù)，為各部位腫瘤移植和腫瘤供血研究提供了方便。 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)（二）（二）B B淋巴細(xì)胞缺陷動(dòng)物淋巴細(xì)胞缺陷動(dòng)物又稱(chēng)為性連鎖免疫缺陷小鼠（X-Linked Immune Deficiency Mice，XID） 起源于CBAN品系，其B細(xì)胞功能缺陷，基因xid，位于X性染色體上。純合子雌鼠（xidxid）和雜合子雄鼠（xidY）對(duì)非胸腺依賴(lài)型抗原沒(méi)有體液免疫反

13、應(yīng)，血清中IgM和IgG含量降低，對(duì)B細(xì)胞分裂素缺乏反應(yīng)，B細(xì)胞數(shù)量減少，T細(xì)胞功能正常。其病理與人類(lèi)Bruton丙種球蛋白缺乏癥和Wziskott-Aidsch綜合征相似。 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)（三）（三）NKNK細(xì)胞缺陷細(xì)胞缺陷BeigeBeige小鼠小鼠（四）嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷小鼠（四）嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷小鼠 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)第四節(jié)第四節(jié) 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物轉(zhuǎn)基因動(dòng)物 一、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的概念一、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的概念 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物是指基因組中穩(wěn)定地整合有以實(shí)驗(yàn)方法所導(dǎo)入的外源基因或特定DNA片段的動(dòng)物。 嵌合體動(dòng)物（嵌合體動(dòng)物（chimeric animal）：）：只有部分組織細(xì)胞的基因組中整合有外源基因。 逆轉(zhuǎn)錄病毒感染法

14、、胚胎干細(xì)胞介導(dǎo)法制備的動(dòng)物第一代均為嵌合體。雄原核顯微注射法制備的動(dòng)物第一代中1-10%為嵌合體（延遲整合）。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)二、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的原理方法二、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的原理方法實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的制作方法轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的制作方法1 1、受精卵雄原核顯微注射法、受精卵雄原核顯微注射法2 2、胚胎干細(xì)胞（、胚胎干細(xì)胞（ESES細(xì)胞）法細(xì)胞）法3 3、逆轉(zhuǎn)錄病毒感染法、逆轉(zhuǎn)錄病毒感染法4 4、體細(xì)胞核移植法、體細(xì)胞核移植法5 5、精子載體法、精子載體法6 6、YACYAC法（法（YACYAC：酵母人工染色體）：酵母人工染色體）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)三、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的制備三、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的制備實(shí)驗(yàn)程序如下：（1）準(zhǔn)備假孕母鼠

15、（養(yǎng)母）（2）受精卵的準(zhǔn)備（3）基因?qū)耄?）胚胎移植（5）對(duì)幼鼠的鑒定實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué) 人類(lèi)已獲得轉(zhuǎn)基因魚(yú)、鼠、羊、豬、兔、牛人類(lèi)已獲得轉(zhuǎn)基因魚(yú)、鼠、羊、豬、兔、牛等等大小動(dòng)物。等等大小動(dòng)物。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)四、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的應(yīng)用四、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的應(yīng)用1 1、動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器、動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器 1987年，世界上第一只商業(yè)化轉(zhuǎn)基因綿羊在英國(guó)著名的羅斯林研究所誕生。這只轉(zhuǎn)基因母羊的乳汁中可以分泌-抗胰蛋白酶，含量高達(dá)30毫克/升。 “生物反應(yīng)器”的概念也由此產(chǎn)生。 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué) 目前已在下列動(dòng)物的乳汁中生產(chǎn)出一些人類(lèi)蛋白質(zhì)藥物： 牛：抗凝血酶、纖維蛋白原、人血清白蛋白、膠原蛋白、乳鐵蛋白、糖基轉(zhuǎn)移酶、蛋白C

16、等； 山羊：抗凝血酶原、抗胰蛋白酶、血清白蛋白、組織纖溶原激活因子、單克隆抗體等； 綿羊：抗胰蛋白酶、凝血因子、蛋白C； 豬：凝血因子、蛋白C、纖維蛋白原、血紅蛋白。 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)2 2、建立疾病模型，用于疾病研究和藥物篩選等、建立疾病模型，用于疾病研究和藥物篩選等 目前已建立的疾病模型有：癌癥、動(dòng)脈粥樣硬化、鐮狀細(xì)胞性貧血、囊狀纖維化、紅細(xì)胞增多癥、肝炎、免疫缺陷、自發(fā)性高血壓等。 3 3、用于育種，提高育種效率、用于育種，提高育種效率 轉(zhuǎn)基因技術(shù)用于育種，不僅可以加快改良遺傳性狀的進(jìn)程，使選擇的效率提高，改良的機(jī)會(huì)更多，而且不會(huì)受到有性繁殖的局限。 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué) 目前轉(zhuǎn)基因動(dòng)物研究領(lǐng)域尚存在：

17、1 1）制備的效率低）制備的效率低 制備一只轉(zhuǎn)基因小鼠，需40個(gè)注射過(guò)的受精卵，而綿羊、山羊、豬、牛分別為110、90、110和1600。而轉(zhuǎn)基因個(gè)體的后代中只有50%表達(dá)基因）2 2）轉(zhuǎn)入的基因不能表達(dá)或表達(dá)混亂）轉(zhuǎn)入的基因不能表達(dá)或表達(dá)混亂3 3）不能遺傳給后代等。）不能遺傳給后代等。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)第五節(jié)第五節(jié) 胚胎工程技術(shù)胚胎工程技術(shù) 胚胎工程技術(shù)主要是指從雌、雄生殖細(xì)胞至囊胚的體外操作技術(shù)，包括人工授精、同期發(fā)情、超數(shù)排卵、胚胎培養(yǎng)、胚胎保存、胚胎移植、胚胎分割、胚胎嵌合、體外授精、顯微授精、性別控制、基因轉(zhuǎn)移、胚胎干細(xì)胞、細(xì)胞核移植、卵母細(xì)胞激活與孤雌發(fā)育等等。 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)( (一一)

18、)胚胎分割胚胎分割 用顯微術(shù)將未著床的早期胚胎一分為二，四或更多，然后分別移植給受體，妊娠產(chǎn)仔。一枚胚胎可克隆出兩個(gè)或兩個(gè)以上的后代。 Mular等于1968年將兔的28細(xì)胞期胚胎一分為二，移植給受體獲得成功。70年代，利用胚胎分割先后得到小鼠、牛、山羊、馬和豬的同胚雙生后代。1986年，西北農(nóng)業(yè)大學(xué)張涌、竇忠英等分別獲得胚胎二分割的同胚雙鼠和半胚犢牛。1987年，譚麗玲等，奶牛，張涌等，山羊獲得同胎雙生后代。1988年，杜森等，獲得同胚雙生后代兔。1992年，徐寧等得同胚三鼠6組。1996年陶濤等得胚胎單細(xì)胞(分裂球)移植仔豬。目前，小鼠、家兔、山羊、綿羊、豬等實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均可用胚胎分割技術(shù)獲得

19、同卵孿生后代。 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)( (二二) )胚胎嵌合胚胎嵌合 將兩枚或多枚胚胎細(xì)胞聚合共同發(fā)育成一個(gè)胚胎，稱(chēng)為嵌合體(chimera)。 兩種以上不同基因型(如A和B)的變精卵，復(fù)合而發(fā)育成的個(gè)體也稱(chēng)為嵌合體，又稱(chēng)異表型體(allophenics)。 小鼠、大鼠、兔、牛、豬、山羊嵌合體以及大鼠小鼠、綿羊-山羊、馬-斑馬和牛-水牛等屬間嵌合體 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)嵌合體小鼠嵌合體小鼠實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)( (三三) )胚胎干細(xì)胞胚胎干細(xì)胞 胚胎干細(xì)胞(embryonic stem cell，ES) 來(lái)源于胚胎的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)(innercellmass，ICM)和原始生殖細(xì)胞(primordialgerm，PGC), 具有

20、發(fā)育全能性(具有分化發(fā)育成三個(gè)胚層細(xì)胞的潛力)的細(xì)胞,是動(dòng)物多種組織細(xì)胞的祖細(xì)胞。能分化出成體動(dòng)物的所有組織和器官，包括生殖細(xì)胞。 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)（四）細(xì)胞核移植（四）細(xì)胞核移植實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)（五）卵母細(xì)胞激活與孤雌發(fā)育（五）卵母細(xì)胞激活與孤雌發(fā)育實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)思考題：思考題：1、什么是疾病動(dòng)物模型？ 2、使用人類(lèi)疾病動(dòng)物模型的意義？ 3、免疫缺陷動(dòng)物？祼小鼠、裸大鼠的生物學(xué)特性？ 4、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物、原理、方法和應(yīng)用？5、胚胎工程技術(shù)包括哪些？ 6、什么是ES細(xì)胞？實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)第八章第八章 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)第一節(jié)第一節(jié) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇基本原則實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇基本原則 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇是動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研

21、究中首要考慮的問(wèn)題之一，不同實(shí)驗(yàn)的研究目的和要求不同，不同種類(lèi)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物也有其各自的生物學(xué)特點(diǎn)和解剖生理特征。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)選擇動(dòng)物應(yīng)遵循的原則是：選擇動(dòng)物應(yīng)遵循的原則是：一、相似性原則一、相似性原則 是指利用動(dòng)物與人類(lèi)某些機(jī)能、代謝、結(jié)構(gòu)及疾病特點(diǎn)的相似性選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。 組織結(jié)構(gòu)方面 系統(tǒng)機(jī)能方面 生理特性方面 繁殖特性方面 體液成分方面 解剖特性方面 1骨骼構(gòu)成 2臟器構(gòu)成 3臟器形態(tài) 疾病特點(diǎn)方面實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)二、特殊性原則二、特殊性原則 是指利用不同種系的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物機(jī)體存在的特殊構(gòu)造或某些特殊反應(yīng)選擇解剖、生理特點(diǎn)符合實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵蟮膭?dòng)物。 保證實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵 減少實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備方面的麻煩 降低操作難度

22、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)三、標(biāo)準(zhǔn)化原則三、標(biāo)準(zhǔn)化原則 是指動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中選擇和使用與研究?jī)?nèi)容相匹配的標(biāo)準(zhǔn)化的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。 遺傳學(xué) 微生物學(xué) 環(huán)境 營(yíng)養(yǎng)控制實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)四、規(guī)格化原則四、規(guī)格化原則 是指選擇與實(shí)驗(yàn)要求一致的動(dòng)物規(guī)格。 動(dòng)物的種類(lèi)及品系 動(dòng)物的年齡 體重 性別 生理及健康狀況等。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)1歲的犬對(duì)應(yīng)人的年齡約為15歲；2歲的犬對(duì)應(yīng)人的年齡約為24歲；5歲的犬對(duì)應(yīng)人的年齡約為36歲；8歲的犬對(duì)應(yīng)人的年齡約為48歲；10歲的犬對(duì)應(yīng)人的年齡約為56歲；12歲的犬對(duì)應(yīng)人的年齡約為64歲；14歲的犬對(duì)應(yīng)人的年齡約為72歲；16歲的犬對(duì)應(yīng)人的年齡約為80歲。 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)五、經(jīng)濟(jì)性原則五、經(jīng)濟(jì)性原則 是指盡量選用容

23、易獲得、價(jià)格便宜和飼養(yǎng)經(jīng)濟(jì)的動(dòng)物。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)在具體實(shí)際工作中：在具體實(shí)際工作中： 首先必須了解實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生物學(xué)特性方面的基本知識(shí)，為正確選擇合適的動(dòng)物打下基礎(chǔ)。 其次，還應(yīng)充分查閱相關(guān)文獻(xiàn)，利用前人的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)積累，選擇科研、檢驗(yàn)和生產(chǎn)傳統(tǒng)上應(yīng)用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。 同時(shí)，加強(qiáng)與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)工作者的交流，及時(shí)有效地利用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)的最新成果。則可用較少的人力、動(dòng)物和時(shí)間，以最小的代價(jià)最大限度地獲得科學(xué)性強(qiáng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)第二節(jié)第二節(jié) 常見(jiàn)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇常見(jiàn)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇 藥理學(xué)研究中的選擇 毒理研究中的選擇 心血管系統(tǒng) 免疫學(xué) 傳染病學(xué) 寄生蟲(chóng)病學(xué) 環(huán)境科學(xué) 畜牧獸醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)第

24、三節(jié)第三節(jié) 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備動(dòng)物實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備 準(zhǔn)備工作的內(nèi)容有： 飼養(yǎng)室和飼養(yǎng)器具的準(zhǔn)備 動(dòng)物數(shù)目的確定 動(dòng)物的購(gòu)入 動(dòng)物的稱(chēng)重 動(dòng)物的分組標(biāo)記及動(dòng)物的管理等。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)動(dòng)物的購(gòu)入時(shí)注意事項(xiàng)動(dòng)物的購(gòu)入時(shí)注意事項(xiàng) 1各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備工作是否已落實(shí)，如動(dòng)物籠具數(shù)量、清潔衛(wèi)生情況、動(dòng)物觀察室內(nèi)是否已消毒。2購(gòu)入動(dòng)物時(shí)應(yīng)向供應(yīng)部門(mén)索取動(dòng)物的遺傳背景資料、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有效的質(zhì)量合格證、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物控制的檢查資料以及動(dòng)物的年齡和健康等方面的資料。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)3如若是清潔級(jí)以上級(jí)別的動(dòng)物，其運(yùn)輸工具應(yīng)嚴(yán)格檢查密封狀況。購(gòu)入動(dòng)物回到實(shí)驗(yàn)室的時(shí)間不宜太長(zhǎng)。如若是長(zhǎng)途運(yùn)輸，還應(yīng)考慮到途中各種因素對(duì)動(dòng)物的影響，如運(yùn)輸環(huán)

25、境的溫度、濕度、飲食等等。尤其要注意動(dòng)物在途中不能被污染和引起窒息死亡。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)4動(dòng)物健康檢查：應(yīng)對(duì)購(gòu)入動(dòng)物的健康情況進(jìn)行詳細(xì)檢查，檢查包括：（1）外觀。一般常發(fā)生異常的部位及其外觀檢查內(nèi)容有： 皮毛：有無(wú)光澤和脫毛變化。 口腔：流涎、出血、粘膜湯瘍、口臭等。 鼻腔：鼻汁、出血、干燥（有些動(dòng)物鼻鏡干燥）。 眼：眼屎、流淚、白內(nèi)障、角膜損傷等。 耳：外傷、耳殼曲折、貧血、中耳炎等。 尾：彎曲、斷折等。 四肢：彎曲、脫臼、外傷、關(guān)節(jié)炎等。 肛門(mén)：下痢、血便、脫肛等。（2）營(yíng)養(yǎng)狀況。被毛逆立、精神倦怠、瘦弱或過(guò)肥等屬于營(yíng)養(yǎng)不良。（3）飼料、水?dāng)z入量。有無(wú)采食減少、食欲低下、過(guò)食等。（4）動(dòng)物狀態(tài)。

26、不活動(dòng)、轉(zhuǎn)圈運(yùn)動(dòng)、臥地不起、跛行、痙攣等屬不正常。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)動(dòng)物的標(biāo)記動(dòng)物的標(biāo)記 1染色法 染色法是用化學(xué)試劑在動(dòng)物身體明顯部位如被毛、四肢等處進(jìn)行涂染，或用不同顏色等來(lái)區(qū)別各組動(dòng)物，是實(shí)驗(yàn)室最常用、最容易掌握的方法。常用的標(biāo)記液有： 35苦味酸溶液（黃色）。 05中性紅或品紅浴液（紅色）。 2硝酸銀溶液（咖啡色，涂后需光照10分鐘）。 煤焦油酒精溶液（黑色）。標(biāo)記時(shí)用標(biāo)記筆蘸取上述溶液，在動(dòng)物體表不同部位涂上斑點(diǎn)，以示不同號(hào)碼。編號(hào)的原則是：先左后右，從前到后。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)2烙印法3掛牌法 4耳孔法 一般來(lái)說(shuō)，小型動(dòng)物適宜用耳孔法和染色法，中型動(dòng)物適用掛牌法和烙印法。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)動(dòng)物動(dòng)物體重（體

27、重（g） 日飼料量（日飼料量（g）日飲水量（日飲水量（ml）小鼠小鼠18253557大鼠大鼠12025015202025豚鼠豚鼠400600203030120兔兔1500250080100150200實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)第四節(jié)第四節(jié) 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中的基本操作動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中的基本操作一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的抓取和固定一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的抓取和固定1、小鼠2、大鼠3、豚鼠4、兔5、犬實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的麻醉三、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的給藥方法實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)四、體液的采集四、體液的采集（一）、血液采集（一）、血液采集1）、小鼠、大鼠的尾靜脈采血2）、小鼠、大鼠眼眶靜脈叢采血3）、豚鼠的心臟采血4）、兔耳緣靜脈采血5）、兔耳中央動(dòng)脈采血實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)（二）、消化液采集（二）、消化液采集1）胃液的采集2）膽汁的采集3）胰液的采集實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)（三）、尿液采集（三）、尿液采集1）代謝籠 2）壓迫膀猶（強(qiáng)制排尿）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)第五節(jié)第五節(jié) 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)后的有關(guān)問(wèn)題動(dòng)物實(shí)驗(yàn)后的有關(guān)問(wèn)題 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)后，受試動(dòng)