大鼠一般操作技術(shù)

1、大鼠常規(guī)操作技術(shù)孫 泉首都醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物辦公室）1 11.了解動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的目的和意義2.了解實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇和染毒途徑。3.掌握大鼠實(shí)驗(yàn)的基本操作技術(shù)。一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模? 23 31. 1. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇 2. 2. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的抓取和固定實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的抓取和固定 3. 3. 性別鑒定性別鑒定4. 4. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物編號(hào)標(biāo)記實(shí)驗(yàn)動(dòng)物編號(hào)標(biāo)記 5. 5. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物給藥途徑和方法實(shí)驗(yàn)動(dòng)物給藥途徑和方法（灌胃、腹腔、皮下注射、尾靜脈注射）6. 6. 生物標(biāo)本的采集生物標(biāo)本的采集 （鼠尾取血、心臟采血、眼眶取血）7. 7. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的處死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的處死二. 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：4 4實(shí)驗(yàn)流程5 5

2、動(dòng)物物種選擇基本原則： 動(dòng)物的選擇6 6健康動(dòng)物首先看外觀： 體形豐滿，被毛濃密有光澤、緊貼體表，眼睛明亮，反應(yīng)行動(dòng)靈活。 有無明顯疾病癥狀 體重、年齡 外觀觀察7 7動(dòng)物的抓取和固定單手固定雙手固定固定器固定板注意抓取動(dòng)物的手法抓取固定時(shí)力量大小適宜8 8未成熟鼠生殖器發(fā)育不明顯，肛門與生殖器之間的距離來區(qū)分。遠(yuǎn)、近。成年鼠：雄性臥位可見睪丸，雌性可見腹部有12個(gè)乳頭。性別鑒定9 9常用標(biāo)記，兩種染料（苦味酸和中性紅或品紅）先左后右，先上后下動(dòng)物的編號(hào)標(biāo)記1010穿耳孔法左耳代表十位，右耳代表個(gè)位應(yīng)注意防止孔口愈合，多使用消毒滑石粉涂抹在打孔局部11原則： 同一實(shí)驗(yàn)中，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的年齡盡可能一

3、致，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重大致相近； 同組、同性別動(dòng)物體重差異應(yīng)小于平均體重的10%；不同組間同性別動(dòng)物體重均值差異小于5%；動(dòng)物各半，且實(shí)驗(yàn)結(jié)果分開統(tǒng)計(jì)、分析。稱重編號(hào)隨機(jī)分組 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的分組1212經(jīng)口染毒（喂飼、灌胃、吞咽膠囊等）經(jīng)呼吸道染毒（靜式、動(dòng)式和氣管內(nèi)注入）經(jīng)皮膚染毒注射染毒（皮下、皮內(nèi)、肌內(nèi)、腹腔和鼠尾靜脈注射等）其它（直腸內(nèi)、鼻腔等）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物染毒途徑和方法1313灌胃灌胃p抓取老鼠時(shí)應(yīng)是鼠 成豎直線p灌胃成功時(shí)，所遇阻力較小p灌胃時(shí)注意胃容量p0.1ml/10g-0.3ml/10g ，1mL1414腹下1/3外側(cè)，避免損傷實(shí)質(zhì)器官30-45角刺入扎入時(shí)有“落空感”，回抽無尿液或血液腹

4、腔注射1515酒精擦拭尾部左手食指，拇指配合按住尾端右手持注射器，針尖輕輕抬起與血管平行刺入血管由紅變白，按壓止血尾靜脈注射1616俯臥固定，左手拇指和食指捏住頸背部皮膚提起，右手持針沿縱軸方向刺入皮下，進(jìn)針時(shí)感覺有阻力，繼續(xù)刺入，突然阻力消失，活動(dòng)針頭，確認(rèn)刺入皮下即可注射藥液。皮下注射皮下注射17俯臥保定，與皮膚平行刺入捏住的皮膚，注射部位局部形成皮丘。為避免藥液流出，停留片刻，再將針頭撥出皮內(nèi)注射皮內(nèi)注射18血液采集（斷尾采血、眼眶采血、心臟采血等）尿液采集糞便采集生物標(biāo)本的采集 1919固定用手輕揉鼠尾靜脈充血后剪尾尖（1-2mm）用手從尾根向尾尖推擠采血干棉止血。每次0.1mL尾尖靜

5、脈采血法20左手固定動(dòng)物滴少量10%可卡因于動(dòng)物眼內(nèi)右手持消毒過毛細(xì)吸管以抗凝劑濕潤內(nèi)壁眼瞼和眼球間旋轉(zhuǎn)刺入采血后消毒紗布止血30秒。每次0.2-0.3mL眼眶后靜脈叢采血2121動(dòng)物仰臥固定器固定剪左側(cè)心區(qū)毛皮膚消毒小號(hào)針頭注射器在3-4肋間刺入?？蛇_(dá)0.5mL心臟采血法22脊椎脫臼法：用左手按住動(dòng)物的頭部于實(shí)驗(yàn)臺(tái)脊椎脫臼法：用左手按住動(dòng)物的頭部于實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，右手抓住尾根部，快速、不間斷地向后、上，右手抓住尾根部，快速、不間斷地向后、略向上使勁拉，使動(dòng)物的頸椎以致脊椎脫臼死略向上使勁拉，使動(dòng)物的頸椎以致脊椎脫臼死亡。亡。過量麻醉法過量麻醉法動(dòng)物的處死2323將動(dòng)物固定于解剖臺(tái)上，從恥骨聯(lián)合至下頜沿正中線切開皮膚，再從恥骨聯(lián)合至肋骨下緣沿腹正中線切開腹壁肌肉（不要用力過猛，以免切破腹腔臟器，特別是膀胱）。從肋骨下端向脊柱方向，將兩側(cè)腹壁剪開，以便觀察腹腔內(nèi)臟器。應(yīng)注意不可將腹腔內(nèi)臟器翻亂，應(yīng)有次序地檢查。臟器標(biāo)本的采集臟器標(biāo)本的采集2425262728抓抓取取稱稱重重給給藥藥采采血血麻麻醉醉解解剖剖1. 抓取與操作動(dòng)物時(shí)小心不要被咬傷，如果被咬傷需立即用清水沖洗并用碘酒消毒。2. 抓取動(dòng)物時(shí)用力要恰當(dāng),